Name: development of a uterosacral ligament suspension rat model
Uploaded: 2022-08-17T14:30:00
Duration: 8 min 58 s
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Nous remercions le professeur Silvia Blemker pour l’utilisation de son Instron et le professeur George Christ pour l’utilisation de son espace chirurgical ainsi que du support et de la poignée imprimés en 3D. Ce travail a été soutenu par le partenariat de recherche translationnelle UVA-Coulter et le DoD (W81XWH-19-1-0157).

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le protocole se distingue par plusieurs avantages. À notre connaissance, il s’agit de la première description publiée de l’USLS dans le modèle du rat et fournira aux futurs chercheurs des étapes reproductibles pour effectuer cette procédure dans le cadre de la recherche. Deuxièmement, nous incluons un nouveau protocole pour les essais de traction de l’interface native et chirurgicale de l’USL. Le protocole d’essai de traction pourrait être utilisé dans des études similaires qui étudient de nouvelles approches d’ingénierie tissulaire pour augmenter les réparations tissulaires natives telles que USLS. De plus, le modèle de rat lui-même est utile pour l’étude des troubles du plancher pelvien en raison de la facilité de manipulation / embarquement, de la courte durée de vie et de la rentabilité par rapport aux modèles animaux plus grands. Les limites du protocole comprennent l’incapacité d’évaluer l’une des principales complications de l’USLS, le pliage urétéral. Malgré cela, nous n’avons eu aucun cas de lésion urétérale présumée dans cette étude. Une autre considération est que l’orientation horizontale du bassin, le petit rapport tête-canal natal fœtal et l’absence de prolapsus spontané dans le modèle de rat limitent une certaine applicabilité des résultats aux humains. Cependant, l’utilisation de rats multipares est une force de cette étude car elle représente le principal facteur de risque dans le développement du POP3.
L’établissement d’un protocole efficace pour l’hystérectomie et l’USLS chez le rat de Lewis sera un outil utile pour les futurs chercheurs qui étudieront les composants chirurgicaux des POP, tout en minimisant la variabilité dans les tests du comportement mécanique de l’USL. Les modèles chirurgicaux animaux sont bénéfiques en ce sens qu’ils permettent aux chercheurs de concevoir des expériences cliniquement pertinentes qui tiennent compte de la parité, de la masse corporelle, de la maladie et de la nutrition34 tout en atténuant le risque éthique de l’étude initiale chez l’homme. De plus, les modèles normalisés pour les POP permettent aux chercheurs de contourner les limites de la collecte de tissus humains. En particulier, les méthodes d’essai de traction décrites dans ce protocole permettront une cohérence entre les études. Des modèles de rongeurs précédents ont testé les propriétés mécaniques de toute la région pelvienne, qui comprend le col de l’utérus, le vagin et les multiples ligaments de soutien pelvien29,42. Les méthodes décrites ici permettent de mesurer la LSU d’une manière qui maintient les attaches vertébrales et cervicales natives. Il convient de noter que les méthodes d’essai de traction n’évaluent pas la LSU seule, mais plutôt la LSU en combinaison avec son insertion au niveau du sacrum et du col de l’utérus. C’est une force de l’étude car elle reflète les forces in situ habituelles auxquelles le ligament est soumis. Nous reconnaissons que le comportement mécanique du ligament isolé serait différent s’il était testé ex vivo sans ses attaches natives. Cela est d’autant plus vrai que les structures des rats sont petites et limitent la faisabilité du prélèvement d’un échantillon adapté aux tests ex vivo. Les LSU font l’expérience du chargement dans plusieurs directions in situ, de sorte que la nature uniaxiale de l’essai est une limitation, mais l’utilisation de cette méthode permet des comparaisons significatives entre les études antérieures sur la mécanique des LSU chez le rat29,42. Bien qu’il n’existe actuellement aucun protocole d’essai mécanique standard largement accepté, ce modèle sera un outil utile pour les futures études d’ingénierie tissulaire sur le terrain.
Plusieurs étapes décrites dans ce protocole sont essentielles à la santé et au bien-être des animaux ainsi qu’à la reproductibilité de la chirurgie USLS et des essais de traction ultérieurs. Tout d’abord, il est essentiel d’obtenir à la fois l’analgésique et les anti-inflammatoires décrits car l’analgésique seul s’est avéré inadéquat pour la gestion de la douleur. L’antibiotique prophylactique diminue le risque d’infection du site opératoire et constitue la norme de soins en chirurgie humaine. En ce qui concerne la procédure chirurgicale USLS, éviter les dommages aux ovaires et minimiser la perte de sang sont essentiels pour une chirurgie réussie. Les étapes 1.3.3 et 1.3.4 décrivent la séparation du sommet de la corne utérine de l’ovaire adjacent; Des précautions doivent être prises pour maintenir cette dissection sur le côté de la corne utérine afin d’éviter la perturbation des vaisseaux délicats autour de l’ovaire, ce qui peut entraîner des saignements excessifs. Il est à noter que d’autres chercheurs ont montré que la fonction ovarienne est préservée après l’ablation des cornes utérines43. De plus, si les ovaires sont perturbés ou enlevés, l’architecture globale des fibrilles de collagène sera perturbée, altérant les propriétés mécaniques de ses tissus44,45. Une fois que la corne utérine est séparée en toute sécurité de l’ovaire, il y a un plan de dissection clair permettant d’isoler la corne utérine des coussinets graisseux environnants et du système vasculaire. Malgré le plan de dissection clair, les pédicules le long de la corne utérine doivent être fixés avec une pince avant la transsection avec des micro-ciseaux. Contrairement à la pratique chirurgicale chez l’homme, nous avons constaté que la ligature des pédicules d’hystérectomie n’est pas nécessaire, car le serrage du pédicule avant la transsection assure une hémostase adéquate. L’étape 1.3.6 du protocole décrit ce processus minutieux pour minimiser les pertes de sang. Au cours de l’hystérectomie, il faut prendre grand soin d’identifier les uretères comme mentionné aux étapes 1.3.6 et 1.3.8. Il est essentiel de comprendre la proximité anatomique de l’uretère, car l’une des complications les plus courantes associées aux LSU chez les humains est la lésion urétérale46.
En conclusion, nous présentons un nouveau protocole pour effectuer une hystérectomie, une suspension ligamentaire utéro-sacrée et des tests de traction de la LSU dans un modèle de rat. Nous prévoyons que nos résultats aideront les futurs chercheurs en sciences fondamentales en fournissant une description claire et reproductible de ces procédures et permettront ainsi de faire progresser la recherche sur le prolapsus des organes pelviens.

Le prolapsus des organes pelviens (POP) est un trouble courant du plancher pelvien qui touche des millions de femmes dans le monde et qui peut avoir un impact significatif sur de nombreux aspects de la vie d’une femme, en particulier à l’âge de1 an. Notamment, environ 13% des femmes aux États-Unis subiront une intervention chirurgicale pour prolapsus ou incontinence urinaire2. Affection plus fréquente après la grossesse et l’accouchement, le prolapsus se caractérise par la descente des organes pelviens, principalement les différents compartiments du vagin et/ou de l’utérus, au-delà de leur position normale dans la cavité péritonéale. Cela entraîne des symptômes gênants de renflement ou de pression vaginale, d’intestin, de vessie et de dysfonction sexuelle, ainsi qu’une qualité de vie globalement réduite. Les autres facteurs de risque de POP comprennent l’obésité, le tabagisme, la toux chronique et la constipation3.
Chez les femmes en bonne santé, les organes du plancher pelvien sont soutenus par les muscles releveurs ani, les ligaments utéro-sacrés (LSU), les ligaments cardinaux, les attaches du tissu conjonctif à la paroi latérale pelvienne et les structures distales du corps périnéal 4,5. Les LSU sont parmi les structures de soutien apicales les plus importantes pour l’utérus et le vagin apical, et sont donc souvent utilisées dans la correction chirurgicale des POP (Figure 1). Le soutien structurel de l’USL provient du tissu conjonctif collagène dense dans la région sacrée qui se transforme en muscle lisse serré. En raison de ce gradient de composition, l’USL s’imbrique avec la musculature utérine et vaginale pour fournir un soutien solide aux organes pelviens 6,7. Dans la suspension du ligament utéros-sacré (USLS), les USL sont fixées à la voûte vaginale après une hystérectomie, restaurant le vagin et les structures environnantes à leur position anatomique dans le compartiment abdominal. Cependant, indépendamment d’une voie transvaginale ou laparoscopique, la procédure USLS est en proie à un taux d’échec relativement élevé allant jusqu’à 40% dans certaines études 8,9. Le taux de récurrence des symptômes de renflement vaginal gênants 5 ans après la réparation pour le prolapsus du compartiment apical, comme les LSU, était d’environ 40 % dans un vaste essai contrôlé randomisémulticentrique 9. Dans le même essai, le retraitement pour prolapsus récurrent à 5 ans était d’environ 10 %. Le mécanisme de ce taux d’échec élevé n’a pas été étudié, mais la restauration du vagin et des structures environnantes à leur position anatomique nécessite le placement de suture dans la région collagène dense de l’USL10,11 plutôt que dans la région musculaire lisse. Par conséquent, le taux d’échec élevé pourrait être dû à l’inadéquation mécanique et compositionnelle de l’interface vagin-USL formée chirurgicalement par rapport à l’intégration complète observée dans l’attachement col de l’utérus natif.
L’impact économique du traitement de ces troubles est également notable, avec environ 300 millions de dollars dépensés chaque année aux États-Unis pour les soins ambulatoires12, et plus de 1 milliard de dollars dépensés chaque année en coûts directs pour les interventions chirurgicales13. Malgré les vastes ressources économiques consacrées au traitement de ces affections, les complications découlant de nombreuses chirurgies de prolapsus restent décourageantes. Par exemple, les réparations du prolapsus apical à base de mailles de polypropylène, telles que la sacrocolpopexie, offrent des taux de réussite plus élevés que les réparations tissulaires natives14, mais au prix de complications potentielles telles que l’exposition aux mailles ou l’érosion. La FDA a reçu près de 3 000 plaintes liées à des complications de maillage entre 2008 et 2010 seulement. Cela a abouti à une ordonnance de la FDA d’arrêter la fabrication et la vente de tous les produits de mailles transvaginales pour POP en avril 201915. Par conséquent, il existe un fort besoin clinique de matériaux autres que le polypropylène et de modèles avec lesquels les tester, qui peuvent augmenter les réparations du prolapsus tissulaire natif et augmenter les taux de réussite par rapport aux techniques traditionnelles avec suture seule.
Depuis l’annonce de la FDA en 2019, la plupart des chirurgiens pelviens ont cessé d’utiliser des mailles placées par voie transvaginale pour les réparations du prolapsus, ce qui a incité les chercheurs à rechercher de nouvelles approches d’ingénierie tissulaire pour augmenter les réparations tissulaires natives16,17,18, comme avec les cellules stromales mésenchymateuses (CSM)9,20 . Avec ce changement d’orientation, il est urgent d’affiner les modèles animaux qui peuvent aider au développement de nouveaux matériaux; Le défi dans ce processus est d’équilibrer la pertinence clinique et le coût. À cette fin, les chercheurs en sciences fondamentales et cliniques qui étudient le prolapsus des organes pelviens ont tiré parti de plusieurs modèles animaux jusqu’à présent, notamment des rats, des souris, des lapins, des moutons, des porcs et des primates non humains19. Le processus d’identification d’un modèle animal optimal est difficile, car les humains sont bipèdes, n’ont pas de queue et ont un processus de naissance traumatisant par rapport aux autres espèces de mammifères20. Les porcs21 ont été utilisés pour simuler la sacrocolpopexie robotique, tandis que les moutons ont été utilisés pour simuler les réparations du prolapsus vaginal22. Ces modèles animaux, bien que cliniquement pertinents, sont limités en faisabilité par le coût et l’entretien. Des primates non humains ont été utilisés pour étudier la pathogenèse du prolapsus; Les singes-écureuils en particulier sont l’une des seules espèces autres que les humains à pouvoir développer un prolapsus spontané, ce qui en fait l’un des modèles animaux les plus pertinents20. Des primates non humains ont également été utilisés pour étudier des interventions chirurgicales gynécologiques telles que la sacrocolpopexie23 et la transplantation utérine24. À l’instar de leurs homologues ovins et porcins, la principale limite des primates non humains en tant que modèle animal de prolapsus est le coût de l’entretien, des soins et de la pension19.
Bien que le bassin du rongeur soit orienté horizontalement avec un rapport de taille de la tête au canal de naissance beaucoup plus faible que chez les humains19, les rats conviennent aux études sur les petits animaux de la chirurgie USLS car ils ont une anatomie, une cellularité, une architecture histologique et une composition matricielle similaires à celles de l’USL25 humaine. De plus, ils sont bénéfiques en termes d’entretien et d’embarquement. Malgré ces attributs bénéfiques, il n’y a pas de rapports publiés d’un modèle de réparation USLS chez le rat. Par conséquent, l’objectif est de décrire un protocole pour l’hystérectomie et l’USLS chez le rat de Lewis multipare. Ce protocole sera bénéfique pour les chercheurs qui visent à étudier la physiopathologie et les composantes chirurgicales des POP en utilisant ce modèle animal accessible.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64311/64311fig01.jpg"> Figure 1 : Prolapsus des organes pelviens. (A) L’orientation normale des organes dans la cavité péritonéale et (B) la descente dramatique des organes en cas de prolapsus. Après une hystérectomie, (C) la suspension du ligament utéros-sacré restaure le vagin et les structures environnantes à leur position anatomique appropriée. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64311/64311fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pad</td>
			<td>BD</td>
			<td>326895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Tear Ointment</td>
			<td>American Health Service Sales Corp</td>
			<td>PH-PARALUBE-O</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluehill software</td>
			<td>Instron</td>
			<td>Bluehill 3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavicide 1 disinfectant</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22 998 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compression platean</td>
			<td>Instron</td>
			<td>2501-163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Puritan Medical</td>
			<td>806-WC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponge, 8-Ply</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95038-728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Forceps</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MMDS1222115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>DYND04045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors, 5&#189;&#34;, Sharp</td>
			<td>American Health Service Sales Corp</td>
			<td>4-222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opioid Analgesic (Buprenorphine XR)</td>
			<td>Fidelis Animal Health</td>
			<td>Ethiqa XR</td>
			<td>0.65&#160;mg/kg&#160;SC&#160;Q72</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSAID Analgesic (Meloxicam SR)</td>
			<td>Wildlife Pharmaceuticals, LLC</td>
			<td>Meloxicam SR</td>
			<td>1&#160;mg/kg&#160;SC&#160;q72</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II, 3-0 Polydioxanone Suture, SH-1</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z316H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II, 5-0 P olydioxanone Suture, RB-1</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z303H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS1862107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Stainless Surgical #10</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>4-310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS15210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor, Micro, Curved, 4.5&#34;</td>
			<td>Westcott</td>
			<td>MDS0910311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Column Universal Testing System</td>
			<td>Instron</td>
			<td>5943 S3873</td>
			<td>1 kN force capacity, 10 N load cell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Natural Rubber Latex Gloves</td>
			<td>Accutech</td>
			<td>91225075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture,Vicryl,6-0,P-3</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J492G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape,Umbilical,Cotton,1/8X18&#34;</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>U10T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tension and Compression Load Cell</td>
			<td>Instron</td>
			<td>2530-10N</td>
			<td>10N load cell (1 kgf, 2 lbf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary surgical adhesive (skin glue)</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>31477</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of a uterosacral ligament suspension rat model

Le prolapsus des organes pelviens (POP) est un trouble courant du plancher pelvien (VFI) susceptible d’avoir un impact significatif sur la qualité de vie d’une femme. Environ 10% à 20% des femmes subissent une chirurgie de réparation du plancher pelvien pour traiter le prolapsus aux États-Unis. Les cas de VFI entraînent un coût annuel global de 26,3 milliards de dollars aux États-Unis seulement. Cette condition multifactorielle a un impact négatif sur la qualité de vie et pourtant les options de traitement n’ont fait que diminuer dans un passé récent. Une option chirurgicale courante est la suspension du ligament utéro-sacré (USLS), qui est généralement réalisée en apposant la voûte vaginale au ligament utéro-sacré dans le bassin. Cette réparation a une incidence de complications plus faible par rapport à celles avec une augmentation de maille, mais se distingue par un taux d’échec relativement élevé allant jusqu’à 40%. Compte tenu du manque de modèles animaux standard pour étudier le dysfonctionnement du plancher pelvien, il existe un besoin clinique urgent d’innovation dans ce domaine en mettant l’accent sur le développement de modèles animaux rentables et accessibles. Dans ce manuscrit, nous décrivons un modèle de LSU chez le rat impliquant une hystérectomie complète suivie d’une fixation de la voûte vaginale restante au ligament utéro-sacré. L’objectif de ce modèle est d’imiter la procédure effectuée sur les femmes pour pouvoir utiliser le modèle pour ensuite étudier des stratégies réparatrices qui améliorent l’intégrité mécanique de l’attachement ligamentaire. Il est important de noter que nous décrivons également le développement d’une procédure d’essai de traction in situ pour caractériser l’intégrité de l’interface à des moments choisis après une intervention chirurgicale. Dans l’ensemble, ce modèle sera un outil utile pour les futures études qui étudient les options de traitement pour la réparation des POP via USLS.

Faisabilité chirurgicale et mise en place de suture utéro-sacrée Il n’y avait aucune complication peropératoire liée à l’hystérectomie ou à la suspension du ligament utéro-sacré chez aucun des animaux. Il y a eu peu de saignements lors de l’ablation des cornes utérines, à condition que le système vasculaire adjacent soit serré avant le retrait. Des saignements limités ont permis une bonne visualisation des ligaments utéro-sacrés pour la mise en place des points de suture et ont empêché les lésions peropératoires de l’intestin, du rectum, de l’urétéral ou de la vessie. Après la mise en place des sutures, la jonction nouvellement formée USL-voûte vaginale a empêché le mouvement du moignon cervical/utérin, comme le montre la figure 5C. Au cours des trois premiers jours postopératoires, les animaux ont été contrôlés quotidiennement, puis toutes les deux semaines jusqu’à la fin de l’expérience. Avec les analgésiques opioïdes et AINS à libération prolongée administrés au moment de la chirurgie, des analgésiques supplémentaires ont été jugés inutiles. D’après notre expérience avec 16 chirurgies animales (n = 8 pour les groupes témoin et USLS), une perte de poids devrait être attendue au cours de la première semaine suivant la chirurgie avec une perte moyenne de 5,7 ± 1,4% du poids du jour de la chirurgie. Comme prévu, les rats ont lentement pris du poids au cours des 23 semaines suivantes, avec un gain de poids moyen de 15,1 ± 4,5% au cours de l’expérience.
Essais mécaniques de la réparation de l’USLS Pour démontrer la fonctionnalité de la réparation de l’USLS, des essais de traction uniaxiaux ont été effectués. Après l’euthanasie de l’animal au moment postopératoire choisi, 24 semaines dans cette étude, la zone chirurgicale doit être soigneusement disséquée pour visualiser la jonction de la voûte vaginale USL, comme le montre la figure 6A. Comparée à d’autres méthodologies pour tester les LSU du rat avec d’autres structures de soutien et organes pelviens29,42, la méthode décrite ici est la première à tester la LSU du rat de manière isolée. Le ruban ombilical utilisé dans cette étude a été stratégiquement choisi pour sa flexibilité, car la conformité du ruban permettait une perturbation minimale du tissu pendant la préparation des essais de traction. Les données sur le déplacement de la charge doivent donc être ajustées pour tenir compte de la faible quantité d’étirement apportée par la bande ombilicale. La figure 9 fournit un exemple de données obtenues par essai de traction et la figure 9A fournit un exemple de diagramme contrainte-déformation typique. La communication des données sur le stress et la déformation est recommandée, car cette information est normalisée et indépendante de la taille des échantillons34 et peut être mieux comparée d’une étude à l’autre. Pour le ligament utéro-sacré intact, nous rapportons des propriétés structurelles telles que la charge ultime (2,9 ± 0,5 N) et la rigidité (0,4 ± 0,1 N/mm) ainsi que des propriétés normalisées du matériau telles que la contrainte ultime (2,1 ± 0,4 MPa), la déformation ultime (1,6 ± 0,5) et le module tangent (4,0 ± 1,1 MPa). Dans les tests uniaxiaux effectués sur les organes reproducteurs du rat et toutes leurs connexions tissulaires de soutien par Moalli et al., ils ont signalé une charge ultime à la défaillance (13,2 ± 1,1 N) et une rigidité (2,9 ± 0,9 N/mm) supérieures à l’USL29 isolée. Les travaux effectués par Moalli et al. et d’autres ouvrages34,35 mentionnent la grande variabilité entre les spécimens testés, comme le montrent les données présentées ici. Pour la réparation de la suspension du ligament utéro-sacré, nous avons constaté que toutes les propriétés structurelles du matériau (rigidité, 0,33 ± 0,13 N/mm; charge ultime, 2,6 ± 1,3 N) et les propriétés normalisées du matériau (contrainte ultime, 1,8 ± 0,7 MPa; déformation ultime 1,3 ± 0,3; module tangent, 3,0 ± 0,9 MPa) étaient inférieures à celles de la LSU native.

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Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model

Le prolapsus des organes pelviens affecte des millions de femmes dans le monde et pourtant, certaines interventions chirurgicales courantes ont des taux d’échec aussi élevés que 40%. L’absence de modèles animaux standard pour étudier cette condition entrave les progrès. Nous proposons le protocole suivant comme modèle pour la suspension du ligament utéro-sacré et les essais de traction in vivo .

Développement d’un modèle de ligament utéros-sacré en suspension chez le rat

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately ...

Notre protocole est l’un des premiers à utiliser un modèle de rat pour décrire la chirurgie de suspension du ligament utéro-sacré, et peut donc vraiment servir de modèle pour les futurs chercheurs afin d’étudier les résultats précliniques et les modifications de la chirurgie. Le ligament utéros-sacré rad est similaire dans l’anatomie, la cellularité, l’architecture histologique et la composition par rapport au ligament utéro-sacré humain. Ces composants, combinés aux avantages en termes de coûts et de faisabilité, en font un très bon modèle pour étudier l’augmentation et les résultats de la chirurgie de suspension du ligament utéro-sacré.La méthode d’essai de traction pourrait être adaptée pour être utilisée dans d’autres modèles animaux du plancher pelvien. De plus, les futurs chercheurs pourraient utiliser une configuration de chirurgie générale pour informer d’autres chirurgies du prolapsus et des rongeurs comme la sacrocolpopexie. Pour commencer, portez une blouse chirurgicale, un couvre-chef, un masque et des gants stériles.Drapez l’animal avec un champ stérile en ne laissant que l’abdomen exposé. Il peut y avoir des saignements dus à un traumatisme causé par la coupe autour de la paire de mamelons caudaux. Si nécessaire, cela peut être rendu hémostatique avec de la pression ou du nitrate d’argent.Faites une incision de sept centimètres le long de la linea alba juste en dessous du processus xiphoïde jusqu’à la ligne inférieure du mamelon à l’aide d’une lame de scalpel. L’incision doit se terminer à 0,5 à un centimètre rostro de l’orifice urétral. Ensuite, faites une incision à travers la couche musculaire en dessous.Assemblez l’écarteur abdominal et inspectez la cavité abdominale. À l’aide d’une pince à iris, localisez doucement la corne utérine gauche. Élevez doucement la corne utérine gauche avec une pince à pince ou à moustique.Commencez l’hystérectomie en ligaturant la corne sous l’ovaire et l’oviducte à l’aide d’une pince anti-moustique. Pour continuer l’hystérectomie, serrez et coupez le système vasculaire adjacent, le tissu conjonctif et la graisse de la corne utérine à l’aide de micro-ciseaux. N’oubliez pas de serrer le tissu conjonctif avant le retrait pour réduire les saignements.Placez les pinces aussi près que possible de l’interface utérine et jusqu’à la jonction utérocervicale. Pinçonner à travers la corne utérine près du point de bifurcation à l’aide d’une pince à moustiques. Polir la corne ipsilatérale juste céphale à la pince pour éviter les saignements.En raison du petit calibre des vaisseaux du rat, la ligature des moignons utérins avec une pince temporaire était suffisante pour cette chirurgie. Cependant, cette technique peut être modifiée au besoin en scellant les pédicules par électrocautérisation ou par ligature de suture. Ajustez l’écarteur abdominal pour exposer le bassin.Inspectez la voûte vaginale exposée et les tissus ligamentaires et conjonctifs de soutien du plancher pelvien attachés au vagin et au col de l’utérus. Identifiez l’uretère bilatéralement, qui est juste médial aux ovaires. Identifiez les ligaments utéro-sacrés qui peuvent être trouvés attachés au col de l’utérus juste en dessous des moignons restants des cornes utérines.Le ligament est tracé dans l’orientation médiale céphaladide vers le sacrum. Mettez une suture de polydioxanone à trois zéro sur une petite aiguille effilée et placez un point à travers le ligament utéro-sacré gauche situé haut sur le ligament et près du sacrum. Tirez sur le point pour vous assurer qu’il a capturé le ligament utéro-sacré en veillant à ce que la structure ligamentaire s’insère dans le col de l’utérus, l’origine se divisant derrière le rectum où elle se fixe au sacrum.Encore une fois, identifiez l’uretère pour vous assurer qu’il n’a pas été incorporé ou plié avec le point utéro-sacré. Ensuite, passez le point de polydioxanone gauche à travers la face gauche de la voûte vaginale tout en incorporant les aspects antérieur et postérieur de la coiffe vaginale. Répétez ces étapes pour terminer la procédure de suspension du ligament utéro-sacré du côté droit.Une fois les points utéro-sacrés placés bilatéralement, attachez solidement la suture à l’aide d’un nœud carré de sorte que la voûte vaginale soit élevée céphalade vers le sacrum. Tout d’abord, disséquez le tissu adipeux jusqu’à ce que la voûte vaginale soit visible. Continuez à retirer les coussinets graisseux abdominaux jusqu’à ce que le ligament utéros-sacré intact soit clairement visible ou à la jonction entre le ligament utéro-sacré et la voûte vaginale.À l’aide d’une règle flexible, mesurez la distance entre l’insertion utéro-sacrée et la voûte vaginale pour estimer la longueur originale du tissu. Enfiler le ruban ombilical derrière le ligament utéros-sacré intact ou la jonction de suspension du ligament utéro-sacré de manière à ce que le tissu soit centré sur le ruban ombilical. Mesurez la hauteur et la largeur du tissu à l’endroit où il croise le ruban ombilical à l’aide d’un pied à coulisse numérique.Pour estimer les valeurs, utilisé pour calculer la section transversale. Pour les essais de traction, placez l’animal de manière à ce que l’échantillon soit centré sous la poignée. Immobiliser la région pelvienne entourant le spécimen en fixant l’animal à la plaque.Abaissez les cellules de charge de manière à ce que les queues du ruban ombilical atteignent facilement la poignée. Fixez le ruban ombilical dans la poignée en laissant le ruban mou pour éviter la manipulation de l’échantillon. Ouvrez ensuite le test de pré-conditionnement dans l’interface du logiciel et étiquetez le test avec le nom de l’échantillon.Assurez-vous que la méthode de préconditionnement inclut l’étape de préchargement. Cliquez pour lancer le test de préconditionnement qui préchargera l’échantillon à 0,015 Newton. Une fois que la force de précharge est stable, le test préconditionnera l’échantillon à un taux d’allongement de 0,1 millimètre par seconde pendant 30 secondes.Après 30 secondes, laissez le tissu reposer pendant une minute. En attendant, chargez le régime de test de défaillance de l’extraction. Étiquetez le test avec le nom de l’échantillon et cliquez sur Suivant pour passer à la fenêtre suivante.Entrez la longueur de jauge de l’échantillon, puis cliquez sur Suivant pour passer à la page de test. Équilibrez le tout et cliquez sur Démarrer. Laissez le test fonctionner à un taux d’allongement de 0,1 millimètre par seconde jusqu’à ce que le tissu ait été retiré à la rupture.L’essai produira des données sur le déplacement de la charge. Après la mise en place des sutures à l’aide de ce protocole, la jonction nouvellement formée entre le ligament utéro-sacré et la voûte vaginale a été élevée céphalade vers le sacrum et a empêché le mouvement du moignon cervical. Pour l’échantillon intact de ligament utéro-sacré et de suspension du ligament utéro-sacré, les essais de traction ont été évalués par des diagrammes tels que la courbe de déplacement de charge, l’analyse de la déformation sous contrainte et l’équation d’ajustement de la pente de la courbe de ligne.Les données ont montré que toutes les propriétés structurelles du matériau de l’échantillon de réparation étaient inférieures à celles du ligament utéro-sacré natif. Les structures sont petites, et donc les identifier nécessite la pratique d’une dissection méticuleuse. Le théâtre en particulier peut être difficile à identifier, donc une portée de dissection peut être utile.Nous suggérons également de pratiquer avec des chirurgies de cadavres avant les chirurgies de survie. Nous décrivons une voie d’augmentation de la suspension du ligament utéro-sacré ainsi qu’une nouvelle méthodologie pour les tests mécaniques du ligament. L’objectif est que l’augmentation décrite dans notre protocole rende la chirurgie du prolapsus plus réussie à l’avenir, et donc meilleure pour les patients.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Recherche

Médecine

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson's Disease

Développement d&#39;une manière unilatérale-lésés 6-OHDA modèle murin de la maladie de Parkinson

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Modèle Rat de rupture de la barrière hémato-encéphalique pour permettre ciblée Therapeutics neurovasculaire

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Un modèle d&#39;infusion de nutriments chronique chez le rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

Élaboration d&#39;un modèle de rat à base alpha-synucléine pour la maladie de Parkinson par injection stéréotaxique d&#39;un vecteur viral adéno-associé recombinant

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...

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Le diméthylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Modèle chez le rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Chirurgie Shunt, droite Cathétérisme cardiaque et vasculaire Morphometry dans un modèle de rat pour Flow-induite Hypertension artérielle pulmonaire

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Mesure de la contractilité isométrique de l’artère mésentérique de souris à l’aide de fil myographie

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