Name: development of a uterosacral ligament suspension rat model
Uploaded: 2022-08-17T14:30:00
Duration: 8 min 58 s
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シルビア・ブレムカー教授にはインストロンを使用し、ジョージ・クライスト教授には手術スペースと3Dプリントされたホルダーとグリップを使用していただき、感謝します。この研究は、UVA-コールタートランスレーショナルリサーチパートナーシップと国防総省(W81XWH-19-1-0157)の支援を受けました。

著者は開示するものは何もありません。

このプロトコルは、いくつかの利点で注目に値します。私たちの知る限り、これはラットモデルにおけるUSLSの最初の公開された説明であり、将来の研究者に研究環境でこの手順を実行するための再現可能な手順を提供します。第二に、USLのネイティブおよび外科的インターフェースの引張試験のための新しいプロトコルが含まれています。引張試験プロトコルは、USLSなどのネイティブ組織修復を強化するための新しい組織工学的アプローチを調査する同様の研究に利用できます。さらに、ラットモデル自体は、大型動物モデルと比較して、取り扱い/搭乗が容易で、寿命が短く、コスト効率が高いため、骨盤底障害の研究に役立ちます。プロトコルの制限には、USLSの主な合併症の1つである尿管ねじれを評価できないことが含まれます。それにもかかわらず、この研究では尿管損傷と推定される症例はありませんでした。別の考慮事項は、骨盤の水平方向、小さな胎児の頭と産道の比率、およびラットモデルにおける自然脱出の欠如は、ヒトへの結果の適用性を制限することです。しかし、多面ラットの使用は、POP3の発症における主要な危険因子を説明するため、この研究の強みです。
ルイスラットにおける子宮摘出術とUSLSの成功したプロトコルの確立は、USLの機械的挙動をテストする際の変動を最小限に抑えながら、POPの外科的コンポーネントを調査する将来の研究者にとって有用なツールになります。外科動物モデルは、研究者がヒトでの最初の研究の倫理的リスクを軽減しながら、同等性、体重、疾患、および栄養34を制御する臨床的に関連する実験を設計できるという点で有益です。さらに、POPの標準化されたモデルにより、研究者はヒト組織収集の制限を回避できます。特に、このプロトコルに記載されている引張試験方法は、研究間の一貫性を可能にします。以前のげっ歯類モデルは、子宮頸部、膣、および複数の骨盤支持靭帯を含む骨盤領域全体の機械的特性をテストしました29,42。ここで説明する方法は、本来の脊椎および頸部の付着を維持する方法でUSLの測定を可能にします。引張試験方法はUSLのみを評価するのではなく、仙骨および子宮頸部への挿入と組み合わせてUSLを評価することに注意する必要があります。これは、靭帯が受ける通常のin situ力を反映しているため、この研究の強みです。孤立した靭帯の機械的挙動は、天然の付着物なしでex vivoでテストされた場合、異なることを認めています。ラットの構造が小さく、ex vivo試験に適したサンプルを収集する可能性を制限するため、これは特に当てはまります。USLはその場で複数の方向に荷重をかける経験があるため、テストの一軸性は制限ですが、この方法を使用すると、ラットUSL力学の以前の研究間の有意義な比較が可能になります29,42。現在、広く受け入れられている標準的な機械的試験プロトコルはありませんが、このモデルは、現場での将来の組織工学研究に役立つツールになります。
このプロトコルに記載されているいくつかのステップは、動物の健康と幸福、およびUSLS手術とその後の引張試験の再現性にとって重要です。第一に、鎮痛薬と消炎薬の両方を入手することが不可欠であり、鎮痛薬だけでは疼痛管理には不十分であることが判明した。予防的抗生物質は、手術部位感染のリスクを低下させ、人間の手術における標準治療です。USLSの外科的処置に関しては、卵巣への損傷を回避し、失血を最小限に抑えることが手術を成功させるために不可欠です。ステップ1.3.3および1.3.4では、子宮角の上部を隣接する卵巣から分離することについて説明しています。過度の出血を引き起こす可能性がある卵巣の周りの繊細な血管の破壊を防ぐために、子宮角の側面でこの解剖を維持するように注意する必要があります。注目すべきことに、他の研究者は、子宮角の除去後も卵巣機能が維持されることを示しました43。さらに、卵巣が破壊または除去されると、全体的なコラーゲン線維構造が乱され、その組織の機械的特性が変化します44,45。子宮角が卵巣から安全に分離されると、解剖の明確な平面があり、周囲の脂肪パッドおよび血管系から子宮角を分離することができます。解剖の明確な平面にもかかわらず、子宮角に沿った茎は、マイクロハサミで切断する前にクランプで固定する必要があります。ヒトの外科手術とは対照的に、子宮摘出術の椎弓根の縫合結紮は、切断前に椎弓根をクランプすることで十分な止血が保証されるため、不要であることがわかりました。プロトコルのステップ1.3.6では、失血を最小限に抑えるためのこの慎重なプロセスについて説明しています。子宮摘出術が行われている間、ステップ1.3.6および1.3.8で述べたように尿管を特定するために細心の注意を払う必要があります。ヒトのUSLに関連する最も一般的な合併症の1つは尿管損傷であるため、尿管の解剖学的近接性を理解することは重要です46。
結論として、ラットモデルでUSLの子宮摘出術、子宮仙靭帯懸濁液、および引張試験を行うための新しいプロトコルを提示します。私たちの発見は、これらの手順の明確で再現可能な説明を提供することにより、将来の基礎科学研究者を支援し、それによって骨盤臓器脱研究の進歩を可能にすることを期待しています。

骨盤臓器脱(POP)は、世界中の何百万人もの女性に影響を与える一般的な骨盤底障害であり、特に1歳の女性の生活の多くの側面に大きな影響を与える可能性があります。特に、米国の女性の約13%が脱出または尿失禁の手術を受けます2。妊娠および出産後に最も一般的な状態である脱出は、腹腔内の正常な位置を超えて、骨盤内臓器、主に膣および/または子宮のさまざまな区画が下降することを特徴としています。これは、膣の膨らみや圧力、腸、膀胱、性機能障害の厄介な症状を引き起こし、全体的な生活の質の低下につながります。POPの他の危険因子には、肥満、タバコの使用、慢性咳、便秘などがあります3。
健康な女性では、骨盤底器官は挙筋、子宮仙骨靭帯(USL)、枢機卿靭帯、骨盤側壁への結合組織の付着、および会陰体の遠位構造によって支えられています4,5。USLは、子宮と頂端膣の両方にとって最も重要な頂端支持構造の一つであり、したがって、POPの外科的矯正によく使用されます(図1)。USLの構造的サポートは、仙骨部の密集したコラーゲン結合組織に由来し、密集した平滑筋に移行します。この組成勾配により、USLは子宮および膣の筋肉組織と織り交ぜられ、骨盤内臓器をしっかりとサポートします6,7。子宮仙骨靭帯懸濁液(USLS)では、子宮摘出術後にUSLが膣金庫に固定され、膣と周囲の構造が腹部コンパートメントの解剖学的位置に復元されます。しかし、経膣経路または腹腔鏡経路に関係なく、USLS手順は、一部の研究では最大40%の比較的高い失敗率に悩まされています8,9。USLなどの根尖脱出症の修復後5年後の厄介な膣膨らみ症状の再発率は、大規模な多施設ランダム化比較試験で約40%でした9。同じ試験では、5年後の再発脱出の再治療は約10%でした。.この高い失敗率のメカニズムは研究されていませんが、膣とその周囲の構造を解剖学的位置に戻すには、平滑筋領域ではなくUSL10,11の高密度コラーゲン領域に縫合糸を配置する必要があります。したがって、高い故障率は、ネイティブの頸部-USLアタッチメントに見られる完全な統合と比較して、外科的に形成された膣-USLインターフェースの機械的および組成的不一致が原因である可能性があります。
これらの疾患の治療による経済的影響も顕著であり、米国では外来治療に年間約3億ドルが費やされており12、外科手術の直接費用に年間10億ドル以上が費やされています13。これらの状態の治療に専念する莫大な経済的資源にもかかわらず、多くの脱出手術から生じる合併症は落胆したままです。例えば、仙骨肛門固定術などのポリプロピレンメッシュベースの頂端脱出修復は、天然組織修復と比較して高い成功率を提供します14が、メッシュの露出や侵食などの潜在的な合併症を犠牲にします。FDAは、2008年から2010年の間だけで、メッシュ合併症に関連する約3,000件の苦情を受け取りました。これは、2019年4月にPOP用のすべての経膣的に配置されたメッシュ製品の製造と販売を停止するというFDAによる命令で最高潮に達しました15。したがって、ポリプロピレン以外の材料とそれらをテストするためのモデルに対する強い臨床的ニーズがあり、それはネイティブの組織脱出修復を強化し、縫合糸のみの従来の技術と比較して成功率を高める可能性があります。
2019年のFDAの発表以来、ほとんどの骨盤外科医は脱出修復のための経膣的に配置されたメッシュの使用をやめており、研究者は間葉系間質細胞(MSC)など、ネイティブ組織修復を強化するための新しい組織工学的アプローチを模索するよう促しています16,17,1899,20.この焦点のシフトに伴い、新しい材料の開発に役立つ動物モデルの改良が急務です。このプロセスの課題は、臨床的関連性とコストのバランスを取ることです。この目的のために、骨盤臓器脱を研究する基礎科学および臨床研究者は、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、および非ヒト霊長類を含む、これまでにいくつかの動物モデルを利用してきました19。人間は他の哺乳類種と比較して二足歩行であり、尾がなく、外傷性の出産プロセスがあるため、最適な動物モデルを特定するプロセスは困難です20。豚21はロボット仙骨肛門固定術をシミュレートするために利用され、羊は膣脱修復をシミュレートするために使用されてきました22。これらの動物モデルは、臨床的に関連性があるものの、コストとメンテナンスによって実現可能性が限られています。非ヒト霊長類は、脱出の病因を研究するために使用されてきました。特にリスザルは、自然脱出を発症する可能性のある人間以外の唯一の種の1つであり、最も関連性の高い動物モデルの1つになっています20。非ヒト霊長類は、仙骨肛門固定術23や子宮移植24などの婦人科外科手術の研究にも使用されています。羊や豚の対応物と同様に、脱出の動物モデルとしての非ヒト霊長類の主な制限は、維持、世話、および搭乗のコストです19。
げっ歯類の骨盤は水平に向けられており、頭と産道のサイズ比は人間に比べてはるかに小さい19が、ラットはUSLの解剖学的構造、細胞性、組織学的構造、およびマトリックス組成が類似しているため、USLS手術の小動物研究に適しています人間のUSL25と比較して。さらに、それらはメンテナンスと搭乗の面で有益です。これらの有益な属性にもかかわらず、USLS修復のラットモデルの公表された報告はない。したがって、目的は、多胎ルイスラットにおける子宮摘出術およびUSLSのプロトコルを記述することです。このプロトコルは、このアクセス可能な動物モデルを使用してPOPの病態生理学および外科的コンポーネントを研究することを目指す研究者にとって有益です。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64311/64311fig01.jpg"> 図1:骨盤臓器脱 。 (A)腹腔内の臓器の正常な方向、および(B)脱出が発生した場合の劇的な臓器低下。子宮摘出術後、(C)子宮仙靭帯懸濁液は、膣と周囲の構造を適切な解剖学的位置に復元します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64311/64311fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pad</td>
			<td>BD</td>
			<td>326895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Tear Ointment</td>
			<td>American Health Service Sales Corp</td>
			<td>PH-PARALUBE-O</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluehill software</td>
			<td>Instron</td>
			<td>Bluehill 3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavicide 1 disinfectant</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22 998 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compression platean</td>
			<td>Instron</td>
			<td>2501-163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Puritan Medical</td>
			<td>806-WC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponge, 8-Ply</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95038-728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Forceps</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MMDS1222115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>DYND04045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors, 5&#189;&#34;, Sharp</td>
			<td>American Health Service Sales Corp</td>
			<td>4-222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opioid Analgesic (Buprenorphine XR)</td>
			<td>Fidelis Animal Health</td>
			<td>Ethiqa XR</td>
			<td>0.65&#160;mg/kg&#160;SC&#160;Q72</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSAID Analgesic (Meloxicam SR)</td>
			<td>Wildlife Pharmaceuticals, LLC</td>
			<td>Meloxicam SR</td>
			<td>1&#160;mg/kg&#160;SC&#160;q72</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II, 3-0 Polydioxanone Suture, SH-1</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z316H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II, 5-0 P olydioxanone Suture, RB-1</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z303H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS1862107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Stainless Surgical #10</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>4-310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS15210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor, Micro, Curved, 4.5&#34;</td>
			<td>Westcott</td>
			<td>MDS0910311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Column Universal Testing System</td>
			<td>Instron</td>
			<td>5943 S3873</td>
			<td>1 kN force capacity, 10 N load cell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Natural Rubber Latex Gloves</td>
			<td>Accutech</td>
			<td>91225075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture,Vicryl,6-0,P-3</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J492G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape,Umbilical,Cotton,1/8X18&#34;</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>U10T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tension and Compression Load Cell</td>
			<td>Instron</td>
			<td>2530-10N</td>
			<td>10N load cell (1 kgf, 2 lbf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary surgical adhesive (skin glue)</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>31477</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of a uterosacral ligament suspension rat model

骨盤臓器脱(POP)は、女性の生活の質に大きな影響を与える可能性のある一般的な骨盤底障害(PFD)です。米国では、女性の約10%〜20%が脱出症を治療するために骨盤底修復手術を受けています。PFDのケースは、米国だけで年間263億ドルの費用をもたらします。この多因子状態は生活の質に悪影響を及ぼしますが、治療の選択肢は最近減少しているだけです。一般的な外科的選択肢の1つは、子宮仙靭帯懸濁液(USLS)であり、これは通常、膣冠を骨盤内の子宮仙靭帯に固定することによって行われる。この修復は、メッシュ増強を伴うものと比較して合併症の発生率が低いですが、最大40%の比較的高い故障率で注目に値します。骨盤底機能障害を研究するための標準的な動物モデルがないことを考えると、費用効果が高くアクセスしやすい動物モデルの開発に焦点を当てたこの分野での革新の緊急の臨床的必要性があります。この原稿では、子宮全摘出術とそれに続く残りの膣金庫の子宮仙靭帯への固定を含むUSLSのラットモデルについて説明します。このモデルの目標は、女性に実行される手順を模倣して、モデルを使用して、靭帯アタッチメントの機械的完全性を改善する修復戦略を調査できるようにすることです。重要なことに、外科的介入後の選択された時点で界面の完全性を特徴付けるための in situ 引張試験手順の開発についても説明します。全体として、このモデルは、USLS を介した POP修復の治療オプションを調査する将来の研究に役立つツールになります。

外科的実現可能性と子宮仙骨縫合の配置 いずれの動物においても子宮摘出術および子宮仙靭帯懸垂に関連する術中合併症は認められなかった。隣接する血管系が除去前にクランプされていれば、子宮角の除去中の出血は最小限であった。出血が限られているため、縫合糸留置のための子宮仙靭帯の良好な視覚化が可能になり、術中の腸、直腸、尿管、または膀胱の損傷が防止されました。縫合糸の配置後、新しく形成されたUSL-膣ボールト接合部は、 図5Cに示すように頸部/子宮断端の動きを妨げました。術後最初の3日間は、動物を毎日チェックし、その後実験が終了するまで隔週でチェックしました。手術時に徐放性オピオイドとNSAID鎮痛薬を投与すると、追加の鎮痛薬は不要であることがわかりました。16回の動物手術(対照群とUSLS群の両方でn = 8)の経験に基づくと、手術後の最初の週に体重の減少が予想され、手術日の体重から平均5.7±1.4%減少することが予想されます。予想通り、ラットはその後の23週間でゆっくりと体重が増加し、実験の過程で平均体重増加は15.1±4.5%でした。
USLS修理の機械的試験 USLS修理の機能を実証するために、一軸引張試験が実施されました。選択した術後時点(この研究では24週間)で動物を安楽死させた後、図6Aに示すように、USLと膣ボールトの接合部を視覚化するために手術領域を注意深く解剖する必要があります。ラットUSLを他の支持構造および骨盤内臓器と一緒に試験するための他の方法論と比較して29、42、ここで説明する方法は、ラットUSLを単離された様式で試験する最初のものである。この研究で使用されたアンビリカルテープは、テープのコンプライアンスにより引張試験準備中の組織の破壊を最小限に抑えることができるため、その柔軟性を考慮して戦略的に選択されました。したがって、荷重変位データは、アンビリカルテープによる少量の伸縮を考慮して調整する必要があります。図9は引張試験によって得られたデータの例を示し、図9Aは典型的な応力-ひずみプロットの例を示しています。応力-ひずみデータの報告は、この情報が正規化され、試験片34のサイズとは無関係であり、研究間でより適切に比較できるため、推奨されます。無傷の子宮仙靭帯については、極限荷重(2.9 ± 0.5 N)や剛性(0.4 ± 0.1 N/mm)などの構造特性と、極限応力(2.1 ± 0.4 MPa)、極限ひずみ(1.6 ± 0.5)、接線弾性率(4.0 ± 1.1 MPa)などの正規化された材料特性を報告します。Moalliらがラットの生殖器官とそのすべての支持組織接続に対して実施した一軸試験では、単離されたUSL29よりも高い破壊時の最終荷重(13.2 ± 1.1 N)と剛性(2.9 ± 0.9 N / mm)が報告されました。Moalliらによって行われた研究および他の文献34,35は、ここに提示されたデータに示されているように、試験された標本間の高い変動性に言及している。子宮仙靭帯懸垂修復では、すべての構造材料特性(剛性0.33 ± 0.13 N/mm、極限荷重2.6 ± 1.3 N)と正規化材料特性(極限応力1.8 ± 0.7 MPa、極限ひずみ1.3 ± 0.3、接線弾性率3.0 ± 0.9 MPa)がネイティブUSLよりも低いことがわかりました。

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Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model

骨盤臓器脱は世界中の何百万人もの女性に影響を及ぼしていますが、それでもいくつかの一般的な外科的介入の失敗率は40%にもなります。この状態を調査するための標準的な動物モデルの欠如は、進歩を妨げます。子宮仙靭帯懸垂および in vivo 引張試験のモデルとして、以下のプロトコルを提案します。

子宮仙靭帯サスペンションラットモデルの開発

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately ...

私たちのプロトコルは、ラットモデルを使用して子宮仙靭帯サスペンション手術を説明する最初のプロトコルの1つであるため、将来の研究者が前臨床結果と手術の変更を研究するための青写真として実際に役立ちます。ラド子宮仙靭帯は、人間の子宮仙靭帯と比較して、解剖学的、細胞性、組織学的構造、および組成が似ています。これらのコンポーネントは、コストメリットと実現可能性を組み合わせることで、子宮仙靭帯サスペンション手術の増強と結果を研究するための非常に優れたモデルになります。引張試験方法は、他の骨盤底動物モデルでの使用に適合させることができます。さらに、将来の研究者は、一般的な手術のセットアップを使用して、他の脱出手術や仙骨肛門固定術などのげっ歯類に通知できます。まず、手術用ガウン、ヘッドカバー、マスク、滅菌手袋を着用します。腹部だけを露出させたまま滅菌フィールドで動物を覆います。尾側の乳首の周りのクリッピングによる外傷による出血があるかもしれません。必要ならば、これを圧力または硝酸銀で止血させることができる。メスの刃を使用して、剣状突起のすぐ下から下部乳首のラインまで、リネアアルバを下って7センチの切開を行います。切開は尿道開口部から0.5〜1センチメートルのロストロで終了する必要があります。次に、下の筋肉層を切開します。腹部開創器を組み立て、腹腔を検査します。虹彩鉗子を使用して、左子宮角をそっと見つけます。グラスパーまたは蚊のクランプで左の子宮角をそっと持ち上げます。蚊のクランプを使用して卵巣と卵管の下の角を結紮することによって子宮摘出術を開始します。子宮摘出術を続けるには、マイクロハサミを使用して子宮角から隣接する血管系、結合組織、および脂肪をクランプしてトリミングします。出血を減らすために、除去する前に結合組織をクランプすることを忘れないでください。クランプを子宮界面のできるだけ近くに、子宮頸部接合部まで配置します。蚊の鉗子を使用して分岐点近くの子宮角を横切ってクランプします。出血を避けるために、同側の角をクランプにちょうど頭状に切除します。ラット血管の口径が小さいため、この手術には一時的なクランプによる子宮断端の結紮で十分でした。しかしながら、この技術は、電気焼灼または縫合結糸のいずれかで椎弓根を密封することによって必要に応じて修正することができる。腹部開創器を調整して、骨盤下部を露出させます。露出した膣金庫と骨盤底支持靭帯と膣と子宮頸部に付着した結合組織を検査します。卵巣の内側にある両側の尿管を特定します。子宮角の残りの切り株のすぐ下の子宮頸部に付着している子宮仙骨靭帯を特定します。靭帯は、仙骨に向かって頭側の内側の向きで追跡されます。小さな先細りの針に3つのゼロポリジオキサノン縫合糸を置き、靭帯の高い位置にあり仙骨の近くにある左子宮仙靭帯にステッチを置きます。ステッチを引っ張って子宮仙骨靭帯を捕らえたことを確認し、靭帯構造が子宮頸部に挿入され、原点が直腸の後ろで分割され、仙骨に付着することを確認します。繰り返しになりますが、尿管を特定して、子宮仙骨縫合に組み込まれたり、子宮仙骨縫合でねじれたりしていないことを確認します。次に、左のポリジオキサノンステッチを膣ボールトの左側の側面に通し、膣カフの前部と後部の両方を組み込みます。これらの手順を繰り返して、右側の子宮仙靭帯吊り下げ手順を完了します。子宮仙骨ステッチを両側に配置した後、膣の金庫が仙骨に向かって頭蓋骨が高くなるように、正方形の結び目を使用して縫合糸をしっかりと結びます。まず、膣金庫が見えるまで脂肪組織を解剖します。無傷の子宮仙骨靭帯がはっきりと見えるか、子宮仙骨靭帯と膣金庫の間の接合部が見えるまで、腹部脂肪パッドを取り除き続けます。柔軟な定規を使用して、子宮仙骨挿入と膣金庫の間の距離を測定し、組織の元の長さを推定します。組織が臍帯の中心になるように、無傷の子宮仙靭帯または子宮仙靭帯サスペンション接合部の後ろに臍帯テープを通します。デジタルキャリパーを使用して、アンビリカルテープと交差する組織の高さと幅を測定します。値を推定するために、断面積の計算に用いられる。引張試験では、試験片がグリップの下の中央になるように動物を配置します。動物をプラテンに固定することにより、標本を囲む骨盤領域を固定します。アンビリカルテープの尾がグリップに届きやすいようにロードセルを下げました。試料の操作を避けるために、テープをたるませたままアンビリカルテープをグリップに固定します。次に、ソフトウェアインターフェイスでプレコンディショニングテストを開き、テストにサンプル名のラベルを付けます。プレコンディショニング方法にプリロードステップが含まれていることを確認します。クリックしてプレコンディショニングテストを開始し、サンプルを0.015ニュートンでプリロードします。予圧力が安定したら、テストはサンプルを毎秒0.1ミリメートルの伸び率で30秒間事前調整します。30秒後、組織を1分間休ませます。それまでの間、プルから障害テスト体制をロードします。テストにサンプル名のラベルを付け、[次へ] をクリックして次のウィンドウに移動します。サンプルのゲージ長を入力し、横をクリックしてテストページに遷移します。すべてのバランスを取り、[開始]をクリックします。組織が破損するまで、毎秒0.1ミリメートルの伸長率でテストを実行できるようにします。テストでは、荷重変位データが生成されます。このプロトコルを使用して縫合糸を配置した後、子宮仙骨靭帯と膣金庫の間に新たに形成された接合部は、仙骨に向かって頭蓋骨を上昇させ、頸部断端の動きを妨げました。無傷の子宮仙靭帯および子宮仙骨靭帯懸垂サンプルについて、引張試験は、荷重変位曲線、応力ひずみ解析、および折れ線曲線適合式の傾きなどのプロットによって評価されました。データは、修復サンプルのすべての構造材料特性が天然の子宮仙靭帯のそれよりも低いことを示しました。構造は小さいため、それらを特定するには綿密な解剖の練習が必要です。特に演劇は特定が難しい場合があるため、分析範囲が役立つ場合があります。また、サバイバル手術の前に死体手術で練習することをお勧めします。子宮仙靭帯懸濁液の増強経路と、靭帯の機械的試験のための新しい方法論について説明します。目標は、私たちのプロトコルに記載されている増強が、脱出手術を将来より成功させ、したがって患者にとってより良いものにすることです。

Research

JoVE Journal

Medicine

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