Name: development of a uterosacral ligament suspension rat model
Uploaded: 2022-08-17T14:30:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model at JoVE.com

Vi takker professor Silvia Blemker for bruk av hennes Instron og Prof. George Christ for bruk av hans kirurgiske plass, samt den 3D-printede holderen og grepet. Dette arbeidet ble støttet av UVA-Coulter Translational Research Partnership og DoD (W81XWH-19-1-0157).

Forfatterne har ingenting å avsløre.

Protokollen er kjent for flere fordeler. Så vidt vi vet, er det den første publiserte beskrivelsen av USLS i rottemodellen og vil gi fremtidige etterforskere reproduserbare trinn for å utføre denne prosedyren i forskningsmiljøet. For det andre inkluderer vi en ny protokoll for strekkprøving av det opprinnelige og kirurgiske grensesnittet til USL. Strekkprøvingsprotokollen kan brukes i lignende studier som undersøker nye vevstekniske tilnærminger for å øke innfødte vevsreparasjoner som USLS. Videre er rottemodellen i seg selv nyttig for studier av bekkenbunnsplager på grunn av enkel håndtering/ombordstigning, kort levetid og kostnadseffektivitet sammenlignet med større dyremodeller. Begrensninger i protokollen inkluderer manglende evne til å vurdere en av de viktigste komplikasjonene ved USLS, ureteral kinking. Til tross for dette hadde vi ingen tilfeller av antatt ureterskade i denne studien. En annen vurdering er at den horisontale orienteringen av bekkenet, forholdet mellom små foster og fødselskanal og mangel på spontan prolaps i rottemodellen begrenser noen anvendelighet av resultater for mennesker. Imidlertid er bruken av flergangsrotter en styrke ved denne studien, siden dette står for den ledende risikofaktoren i utviklingen av POP3.
Etableringen av en vellykket protokoll for hysterektomi og USLS i Lewis-rotta vil være et nyttig verktøy for fremtidige forskere som undersøker kirurgiske komponenter i POP, samtidig som variasjonen i testing av USLs mekaniske oppførsel minimeres. Kirurgiske dyremodeller er fordelaktige ved at de tillater forskere å designe klinisk relevante eksperimenter som kontrollerer for paritet, kroppsmasse, sykdom og ernæring34 samtidig som den etiske risikoen for innledende studier hos mennesker reduseres. Videre tillater standardiserte modeller for POP forskere å omgå begrensningene i menneskelig vevsinnsamling. Spesielt vil strekkprøvingsmetodene beskrevet i denne protokollen muliggjøre konsistens mellom studier. Tidligere gnagermodeller testet de mekaniske egenskapene til hele bekkenregionen, som inkluderer livmorhalsen, skjeden og de flere bekkenstøttebåndene29,42. Metodene beskrevet her tillater måling av USL på en måte som opprettholder de opprinnelige spinal- og cervikale vedleggene. Det skal bemerkes at strekkprøvingsmetodene ikke vurderer USL alene, men heller USL i kombinasjon med innsetting i sakrum og livmorhals. Dette er en styrke ved studien, da den gjenspeiler de vanlige in situ-kreftene som ligamentet blir utsatt for. Vi erkjenner at den mekaniske oppførselen til det isolerte ligamentet ville være annerledes hvis det ble testet ex vivo uten sine opprinnelige vedlegg. Dette gjelder spesielt siden rottestrukturene er små og begrenser muligheten for å samle en prøve som er egnet for ex vivo-testing. USL-ene opplever lasting i flere retninger in situ, så testens uniaxiale natur er en begrensning, men bruk av denne metoden gir meningsfulle sammenligninger mellom tidligere studier av rotte USL-mekanikk29,42. Selv om det for øyeblikket ikke er noen allment akseptert standard mekanisk testprotokoll, vil denne modellen være et nyttig verktøy for fremtidige vevstekniske studier på feltet.
Flere trinn beskrevet i denne protokollen er kritiske for dyrenes helse og velvære, samt reproduserbarheten til USLS-operasjonen og påfølgende strekkprøving. For det første er det viktig å skaffe både smertestillende og antiinflammatoriske legemidler beskrevet som smertestillende alene ble funnet å være utilstrekkelig for smertebehandling. Det profylaktiske antibiotikumet reduserer risikoen for infeksjon på operasjonsstedet og er standarden på omsorg ved menneskelig kirurgi. Når det gjelder USLS kirurgisk prosedyre, unngå skade på eggstokkene og minimere blodtap er avgjørende for en vellykket operasjon. Trinn 1.3.3 og 1.3.4 beskriver å skille toppen av livmorhornet fra den tilstøtende eggstokken; Det må utvises forsiktighet for å opprettholde denne disseksjonen på siden av livmorhornet for å forhindre forstyrrelse av delikate kar rundt eggstokken, noe som kan føre til overdreven blødning. Av notatet har andre etterforskere vist at ovariefunksjonen er bevart etter fjerning av livmorhornene43. Videre, hvis eggstokkene blir forstyrret eller fjernet, vil den generelle kollagenfibrilarkitekturen bli forstyrret, og endre de mekaniske egenskapene til vevet44,45. Når livmorhornet er trygt skilt fra eggstokken, er det et klart disseksjonsplan som tillater isolering av livmorhornet fra de omkringliggende fettputene og vaskulaturen. Til tross for det klare disseksjonsplanet, bør pediklene langs livmorhornet sikres med en klemme før transeksjon med mikrosaks. I motsetning til kirurgisk praksis hos mennesker har vi funnet at suturligering av hysterektomipediklene er unødvendig, da klemming av pedicle før transeksjon sikrer tilstrekkelig hemostase. Trinn 1.3.6 i protokollen beskriver denne forsiktige prosessen for å minimere blodtap. Som hysterektomi blir utført, bør stor forsiktighet utvises for å identifisere urinlederne som nevnt i trinn 1.3.6 og 1.3.8. Å forstå den anatomiske nærheten til urineren er kritisk, da en av de vanligste komplikasjonene forbundet med USL hos mennesker er ureteral skade46.
Avslutningsvis presenterer vi en ny protokoll for å utføre hysterektomi, uterosacral ligamentsuspensjon og strekkprøving av USL i en rottemodell. Vi forventer at våre funn vil hjelpe fremtidige grunnvitenskapelige etterforskere ved å gi en klar, reproduserbar beskrivelse av disse prosedyrene og dermed tillate fremskritt av bekkenorganprolapsforskning.

Pelvic organ prolaps (POP) er en vanlig bekkenbunnslidelse som påvirker millioner av kvinner over hele verden med potensial til å påvirke mange aspekter av en kvinnes liv betydelig, spesielt med1 år. Spesielt vil ca 13% av kvinnene i USA gjennomgå kirurgi for prolaps eller urininkontinens2. En tilstand som er mest vanlig etter graviditet og fødsel, prolaps er preget av nedstigning av bekkenorganer, hovedsakelig de forskjellige delene av skjeden og / eller livmoren, utover deres normale posisjon i bukhulen. Dette fører til plagsomme symptomer på vaginal bule eller trykk, tarm, blære og seksuell dysfunksjon, og generelt redusert livskvalitet. Andre risikofaktorer for POP inkluderer fedme, tobakksbruk, kronisk hoste og forstoppelse3.
Hos friske kvinner støttes bekkenbunnsorganene av levator ani-musklene, uterosacral ligaments (USL), kardinalleddbånd, bindevevsfester til bekkensideveggen og de distale strukturer i perineallegemet 4,5. USL er blant de viktigste apikale støttestrukturene for både uterus og apikal vagina, og brukes derfor ofte i kirurgisk korreksjon av POP (figur 1). Strukturell støtte fra USL stammer fra det tette kollagenøse bindevevet i sakralområdet som overgår til tett pakket glatt muskulatur. På grunn av denne kompositoriske gradienten blir USL sammenvevd med livmor- og vaginalmuskulaturen for å gi solid støtte til bekkenorganene 6,7. I uterosacral ligament suspensjon (USLS), er USL festet til vaginalhvelvet etter en hysterektomi, gjenopprette skjeden og de omkringliggende strukturer til sin anatomiske posisjon i bukrommet. Imidlertid, uavhengig av en transvaginal eller laparoskopisk rute, er USLS-prosedyren plaget av en relativt høy feilrate på opptil 40% i noen studier 8,9. Tilbakefallsraten av plagsomme vaginale bulesymptomer 5 år etter reparasjon for apikal romprolaps, som USL, var ca. 40 % i en stor multisenter randomisert kontrollert studie9. I samme studie var rebehandling for tilbakevendende prolaps ved 5 år ca. 10%. Mekanismen bak denne høye feilraten er ikke studert, men å gjenopprette skjeden og de omkringliggende strukturene til deres anatomiske posisjon krever suturplassering i det tette kollagenøse området av USL10,11 i stedet for glatt muskelregion. Derfor kan den høye feilraten skyldes den mekaniske og kompositoriske feilpasningen av det kirurgisk dannede vagina-USL-grensesnittet sammenlignet med den komplette integrasjonen sett i det opprinnelige cervikal-USL-vedlegget.
Den økonomiske effekten av å behandle disse lidelsene er også bemerkelsesverdig, med omtrent $ 300 millioner brukt årlig i USA på ambulant omsorg12, og mer enn $ 1 milliard brukt årlig i direkte kostnader for kirurgiske prosedyrer13. Til tross for de enorme økonomiske ressursene som er dedikert til å behandle disse forholdene, forblir komplikasjonene som oppstår fra mange prolapsoperasjoner nedslående. For eksempel tilbyr polypropylennettbaserte apikale prolapsreparasjoner, som sacrocolpopexy, høyere suksessrate sammenlignet med innfødte vevsreparasjoner14, men på bekostning av potensielle komplikasjoner som maskeeksponering eller erosjon. FDA mottok nesten 3000 klager relatert til maskekomplikasjoner mellom 2008 og 2010 alene. Dette kulminerte i en ordre fra FDA om å stoppe produksjon og salg av alle transvaginalt plasserte mesh-produkter for POP i april 201915. Derfor er det et sterkt klinisk behov for andre materialer enn polypropylen, og modeller for å teste dem, som kan øke reparasjoner av vevsprolaps og øke suksessraten sammenlignet med tradisjonelle teknikker med sutur alene.
Siden FDA-kunngjøringen i 2019 har de fleste bekkenkirurger sluttet å bruke transvaginalt plassert nett for prolapsreparasjoner, noe som får etterforskere til å søke nye vevstekniske tilnærminger for å øke innfødte vevsreparasjoner16,17,18 som med mesenkymale stromale celler (MSC)9,20 . Med dette skiftet i fokus er det et presserende behov for foredling av dyremodeller som kan bistå med utvikling av nye materialer; Utfordringen i denne prosessen er å balansere klinisk relevans med kostnad. For dette formål har grunnleggende vitenskap og kliniske etterforskere som studerer bekkenorganprolaps benyttet seg av flere dyremodeller så langt, inkludert rotter, mus, kaniner, sauer, svin og ikke-menneskelige primater19. Prosessen med å identifisere en optimal dyremodell er utfordrende, da mennesker er tobente, ikke har hale og har en traumatisk fødselsprosess sammenlignet med andre pattedyrarter20. Svin21 har blitt brukt til å simulere robotisk sacrocolpopexy, mens sauer har blitt brukt til å simulere vaginal prolaps reparasjoner22. Selv om disse dyremodellene er klinisk relevante, er de begrenset i gjennomførbarhet av kostnader og vedlikehold. Ikke-menneskelige primater har blitt brukt til å studere patogenesen av prolaps; Spesielt ekornaper er en av de eneste andre artene enn mennesker som kan utvikle spontan prolaps, noe som gjør dem til en av de mest relevante dyremodellene20. Ikke-menneskelige primater har også blitt brukt til å studere gynekologiske kirurgiske prosedyrer som sacrocolpopexy23 og livmortransplantasjon24. I likhet med deres saue- og svinekolleger er den primære begrensningen for ikke-menneskelige primater som en dyremodell for prolaps kostnaden for vedlikehold, stell og ombordstigning19.
Selv om gnagerbekkenet er orientert horisontalt med et mye mindre hode-til-fødsel-kanalstørrelsesforhold sammenlignet med mennesker19, er rotter egnet for små dyrestudier av USLS-kirurgi siden de har lignende USL-anatomi, cellularitet, histologisk arkitektur og matrisesammensetning sammenlignet med den menneskelige USL25. Videre er de fordelaktige når det gjelder vedlikehold og ombordstigning. Til tross for disse fordelaktige egenskapene, er det ingen publiserte rapporter om en rottemodell for USLS-reparasjon. Derfor er målet å beskrive en protokoll for hysterektomi og USLS hos flergangsfødende Lewis-rotte. Denne protokollen vil være gunstig for etterforskere som tar sikte på å studere patofysiologi og kirurgiske komponenter av POP ved hjelp av denne tilgjengelige dyremodellen.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64311/64311fig01.jpg"> Figur 1 Bekkenorganprolaps. (A) Den normale orienteringen av organer i bukhulen og (B) den dramatiske organnedstigningen når prolaps oppstår. Etter hysterektomi, (C) uterosacral ligament suspensjon gjenoppretter skjeden og omkringliggende strukturer til riktig anatomisk posisjon. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64311/64311fig01large.jpg" target="_blank">Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pad</td>
			<td>BD</td>
			<td>326895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Tear Ointment</td>
			<td>American Health Service Sales Corp</td>
			<td>PH-PARALUBE-O</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluehill software</td>
			<td>Instron</td>
			<td>Bluehill 3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavicide 1 disinfectant</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22 998 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compression platean</td>
			<td>Instron</td>
			<td>2501-163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Puritan Medical</td>
			<td>806-WC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponge, 8-Ply</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95038-728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Forceps</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MMDS1222115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>DYND04045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors, 5&#189;&#34;, Sharp</td>
			<td>American Health Service Sales Corp</td>
			<td>4-222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opioid Analgesic (Buprenorphine XR)</td>
			<td>Fidelis Animal Health</td>
			<td>Ethiqa XR</td>
			<td>0.65&#160;mg/kg&#160;SC&#160;Q72</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSAID Analgesic (Meloxicam SR)</td>
			<td>Wildlife Pharmaceuticals, LLC</td>
			<td>Meloxicam SR</td>
			<td>1&#160;mg/kg&#160;SC&#160;q72</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II, 3-0 Polydioxanone Suture, SH-1</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z316H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II, 5-0 P olydioxanone Suture, RB-1</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z303H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS1862107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Stainless Surgical #10</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>4-310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS15210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor, Micro, Curved, 4.5&#34;</td>
			<td>Westcott</td>
			<td>MDS0910311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Column Universal Testing System</td>
			<td>Instron</td>
			<td>5943 S3873</td>
			<td>1 kN force capacity, 10 N load cell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Natural Rubber Latex Gloves</td>
			<td>Accutech</td>
			<td>91225075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture,Vicryl,6-0,P-3</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J492G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape,Umbilical,Cotton,1/8X18&#34;</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>U10T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tension and Compression Load Cell</td>
			<td>Instron</td>
			<td>2530-10N</td>
			<td>10N load cell (1 kgf, 2 lbf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary surgical adhesive (skin glue)</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>31477</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of a uterosacral ligament suspension rat model

Pelvic organ prolaps (POP) er en vanlig bekkenbunnslidelse (PFD) med potensial til å påvirke kvinnens livskvalitet betydelig. Omtrent 10% -20% av kvinnene gjennomgår bekkenbunnsreparasjonskirurgi for å behandle prolaps i USA. PFD-tilfeller resulterer i en samlet årlig kostnad på 26.3 milliarder dollar bare i USA. Denne multifaktorielle tilstanden har en negativ innvirkning på livskvaliteten, og likevel har behandlingsalternativene bare gått ned i den siste tiden. Et vanlig kirurgisk alternativ er uterosacral ligament suspensjon (USLS), som vanligvis utføres ved å feste vaginalhvelvet til uterosacral ligament i bekkenet. Denne reparasjonen har en lavere forekomst av komplikasjoner sammenlignet med de med maskeforstørrelse, men er kjent for en relativt høy feilrate på opptil 40%. Tatt i betraktning mangelen på standard dyremodeller for å studere bekkenbunnsdysfunksjon, er det et presserende klinisk behov for innovasjon på dette feltet med fokus på å utvikle kostnadseffektive og tilgjengelige dyremodeller. I dette manuskriptet beskriver vi en rottemodell av USLS med komplett hysterektomi etterfulgt av fiksering av gjenværende vaginalhvelv til uterosakralligamentet. Målet med denne modellen er å etterligne prosedyren som utføres på kvinner for å kunne bruke modellen til å undersøke reparative strategier som forbedrer den mekaniske integriteten til ligamentfestet. Det er viktig at vi også beskriver utviklingen av en in situ strekkprøvingsprosedyre for å karakterisere grensesnittintegritet ved utvalgte tidspunkter etter kirurgisk inngrep. Samlet sett vil denne modellen være et nyttig verktøy for fremtidige studier som undersøker behandlingsalternativer for POP-reparasjon via USLS.

Kirurgisk gjennomførbarhet og plassering av uterosacral sutur Det var ingen intraoperative komplikasjoner relatert til hysterektomi eller uterosacral ligamentsuspensjon hos noen av dyrene. Det var minimal blødning under fjerning av livmorhornene, forutsatt at den tilstøtende vaskulaturen ble klemt fast før fjerning. Begrenset blødning tillot god visualisering av uterosacral ligamenter for suturplassering og forhindret intraoperativ tarm, endetarm, ureteral eller blæreskade. Etter suturplassering hindret det nydannede USL-vaginalhvelvkrysset bevegelse av cervikal/uterinstubben som vist i figur 5C. I løpet av de tre første postoperative dagene ble dyrene kontrollert daglig, og deretter annenhver uke til forsøkets slutt. Med opioider med utvidet frisetting og NSAID-analgetika administrert på operasjonstidspunktet, ble ytterligere analgetika funnet å være unødvendig. Basert på vår erfaring med 16 dyreoperasjoner (n = 8 for både kontroll- og USLS-gruppen), bør det forventes et vekttap den første uken etter kirurgi med et gjennomsnittlig tap på 5,7 ± 1,4 % fra operasjonsdagvekt. Som forventet gikk rottene sakte opp i vekt i løpet av de påfølgende 23 ukene, med en gjennomsnittlig vektøkning på 15,1 ± 4,5% i løpet av forsøket.
Mekanisk testing av USLS-reparasjonen For å demonstrere funksjonaliteten til USLS-reparasjonen ble det utført uniaxial strekkprøving. Etter avliving av dyret ved valgt postoperativ tidsperiode, 24 uker i denne studien, bør operasjonsområdet dissekeres nøye for å visualisere USL-vaginalhvelvkrysset som vist i figur 6A. Sammenlignet med andre metoder for å teste rotte USL sammen med andre støttestrukturer og bekkenorganer29,42, er metoden beskrevet her den første som tester rotte USL på en isolert måte. Navlestrengen som ble brukt i denne studien ble strategisk valgt på grunn av sin fleksibilitet, da båndoverensstemmelsen tillot minimal forstyrrelse av vevet under forberedelse av strekkprøving. Lastforskyvningsdata må derfor justeres for å ta hensyn til den lille mengden strekk som navlebåndet bidrar med. Figur 9 gir et eksempel på data innhentet via strekkprøving med figur 9A som et eksempel på et typisk spenningsbelastningsplott. Rapportering av spenningsbelastningsdata anbefales da denne informasjonen er normalisert og uavhengig av størrelsen på prøvene34 og bedre kan sammenlignes på tvers av studier. For det intakte uterosacralligamentet rapporterer vi strukturelle egenskaper som ultimate load (2,9 ± 0,5 N) og stivhet (0,4 ± 0,1 N / mm) samt normaliserte materialegenskaper som ultimate stress (2,1 ± 0,4 MPa), ultimate belastning (1,6 ± 0,5) og tangentmodul (4,0 ± 1,1 MPa). I de uniaxiale testene utført på rottens reproduktive organer og alle deres støttende vevsforbindelser av Moalli et al., rapporterte de en endelig belastning ved svikt (13,2 ± 1,1 N) og stivhet (2,9 ± 0,9 N / mm) høyere enn den isolerte USL29. Arbeidet utført av Moalli et al. og annen litteratur34,35 nevner den høye variasjonen mellom testede prøver som vist i dataene som presenteres her. For reparasjon av uterosacral ligament suspensjon fant vi at alle strukturelle materialegenskaper (stivhet, 0,33 ± 0,13 N / mm; ultimate belastning, 2,6 ± 1,3 N) og normaliserte materialegenskaper (ultimate stress, 1,8 ± 0,7 MPa; ultimate belastning 1,3 ± 0,3; tangentmodul, 3,0 ± 0,9 MPa) var lavere enn den opprinnelige USL.

Watch this Scientific Journal Video about Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model at JoVE.com

Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model

Bekkenorganprolaps påvirker millioner av kvinner over hele verden, og likevel har noen vanlige kirurgiske inngrep feilfrekvenser så høye som 40%. Mangelen på standard dyremodeller for å undersøke denne tilstanden hindrer fremgang. Vi foreslår følgende protokoll som modell for uterosacral ligament suspensjon og in vivo strekkprøving.

Utvikling av en uterosacral ligament suspensjon rotte modell

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately ...

Vår protokoll er en av de første som bruker en rottemodell for å beskrive uterosacral ligament suspensjonskirurgi, og kan derfor virkelig tjene som en blåkopi for fremtidige etterforskere for å studere prekliniske utfall og modifikasjoner av operasjonen. Rad uterosacral ligament er lik i anatomi, cellularitet, histologisk arkitektur og sammensetning sammenlignet med det humane uterosacral ligamentet. Disse komponentene kombinert med kostnadsfordelene og gjennomførbarheten gjør det til en virkelig flott modell for å studere forstørrelse og utfall av uterosacral ligament suspensjonskirurgi.Strekkprøvingsmetoden kan tilpasses for bruk i andre modeller av bekkenbunnsdyr. I tillegg kan fremtidige etterforskere bruke et generelt kirurgisk oppsett for å informere andre prolapsoperasjoner og gnagere som sacrocolpopexy. For å begynne, bruk en kirurgisk kjole, hodedeksel, maske og sterile hansker.Draper dyret med et sterilt felt, slik at bare magen blir utsatt. Det kan være noen blødninger på grunn av traumer fra klipping rundt det kaudale brystvortelet. Om nødvendig kan dette gjøres hemostatisk med trykk eller sølvnitrat.Lag et syv centimeter snitt nedover linea alba fra like under xiphoidprosessen til den nedre brystvortelinjen ved hjelp av et skalpellblad. Snittet skal ende 0,5 til en centimeter rostro fra urinrørsåpningen. Deretter gjør du et snitt gjennom muskellaget under.Monter abdominal retractor og inspiser bukhulen. Bruk iristang, finn forsiktig venstre livmorhorn. Løft forsiktig venstre livmorhorn med en griper eller myggklemme.Begynn hysterektomi ved å ligere hornet under eggstokken og ovidukten ved hjelp av en myggklemme. For å fortsette hysterektomi, klemme og trimme tilstøtende vaskulatur, bindevev og fett fra livmorhornet ved hjelp av mikrosaks. Husk å klemme bindevevet før fjerning for å redusere blødning.Plasser klemmene så nær livmorgrensesnittet som mulig, og opp til det uterokerviske krysset. Klem over livmorhornet nær bifurkasjonspunktet ved hjelp av myggtang. Excise det ipsilaterale hornet bare cephalad til klemmen for å unngå blødning.På grunn av rottekarets lille kaliber var ligering av livmorstubbene med en midlertidig klemme tilstrekkelig for denne operasjonen. Imidlertid kan denne teknikken modifiseres etter behov ved enten å forsegle pediklene med elektrokauterisering eller suturligering. Juster abdominalretractoren for å eksponere det nedre bekkenet.Inspiser den eksponerte vaginale hvelvet og bekkenbunnsstøtten, ligamental og bindevev festet til skjeden og livmorhalsen. Identifiser urineren bilateralt, som bare er medial til eggstokkene. Identifiser uterosacral leddbånd som finnes festet til livmorhalsen like under de resterende stubbene av livmorhornene.Ligamentet spores i cephalad mediale orientering mot sacrum. Sett en tre null polydioksanon sutur på en liten konisk nål og legg en søm gjennom venstre uterosacral ligament plassert høyt på ligamentet og nær sacrum. Trekk på sømmen for å sikre at den har fanget uterosacral ligamentet, slik at ligamentstrukturen setter inn i livmorhalsen med opprinnelsen som deler seg bak endetarmen der den festes til sakrummet.Igjen, identifiser urineren for å sikre at den ikke har blitt innlemmet i eller knekket med uterosacral søm. Pass deretter venstre polydioksanonsøm gjennom venstre aspekt av vaginalhvelvet mens du inkorporerer både de fremre og bakre aspektene av vaginalmansjetten. Gjenta disse trinnene for å fullføre prosedyren for uterosacral ligament suspensjon på høyre side.Etter at uterosacralmaskene er plassert bilateralt, knyt suturen sikkert med en firkantet knute slik at vaginalhvelvet er forhøyet cephalad mot sakrummet. Først dissekerer du fettvevet til vaginalhvelvet er synlig. Fortsett å fjerne bukfettputene til enten det intakte uterosacral ligamentet er tydelig synlig eller i krysset mellom uterosacral ligament og vaginalhvelvet er synlig.Ved hjelp av en fleksibel linjal måler du avstanden mellom uterosacral innsetting og vaginalhvelvet for å estimere den opprinnelige lengden på vevet. Tråd navlestreng bak det intakte uterosacral ligamentet eller uterosacral ligament suspensjonskrysset slik at vevet er sentrert på navlestrengen. Mål høyden og bredden på vevet der det krysser med navlestrengen ved hjelp av digital tykkelse.For å estimere verdiene, brukes til å beregne tverrsnittsareal. For strekkprøving, plasser dyret slik at prøven er sentrert under grepet. Immobiliser bekkenområdet rundt prøven ved å feste dyret til platen.Senket lastcellene slik at halene på navlebåndet lett når grepet. Fest navlestrengen i grepet, slik at båndet slakker for å unngå prøvemanipulering. Åpne deretter prekondisjoneringstesten i programvaregrensesnittet og merk testen med prøvenavnet.Kontroller at forhåndskondisjoneringsmetoden inkluderer trinnet for forhåndsinnlasting. Klikk for å starte prekondisjoneringstesten som vil forhåndslaste prøven på 0,015 Newton. Når forspenningskraften er stabil, vil testen forutse prøven med en forlengelseshastighet på 0,1 millimeter per sekund i 30 sekunder.Etter 30 sekunder, la vevet hvile i ett minutt. I mellomtiden laster du trekket til feiltestregimet. Merk testen med prøvenavnet og klikk på Neste for å komme til neste vindu.Skriv inn målerlengden på prøven, og klikk deretter på ved siden av for å gå over til testsiden. Balanser alle og klikk på Start. La testen kjøre med en forlengelseshastighet på 0,1 millimeter per sekund til vevet har blitt trukket til svikt.Testen vil produsere data om belastningsforskyvning. Etter suturplassering ved hjelp av denne protokollen ble det nydannede overgangen mellom uterosakralligamentet og vaginalhvelvet forhøyet cephalad mot korsbenet og hindret bevegelse av cervikalstubben. For intakt uterosacral ligament og uterosacral ligament suspensjonsprøve ble strekkprøving evaluert ved plott som belastningsforskyvningskurve, spenningsbelastningsanalyse og helning av linjekurvepassligningen.Dataene viste at alle strukturelle materialegenskaper til reparasjonsprøven var lavere enn for det opprinnelige uterosacral ligamentet. Strukturene er små, og derfor krever identifisering av dem øvelse i nitid disseksjon. Teater spesifikt kan være utfordrende å identifisere, så en dissekering omfang kan være nyttig.Vi vil også foreslå å øve med kadaveroperasjoner før overlevelsesoperasjoner. Vi beskriver en vei for forsterkning av uterosacral ligamentsuspensjon samt en ny metodikk for mekanisk testing av ligamentet. Målet er at forsterkningen beskrevet i vår protokoll skal gjøre prolapskirurgi mer vellykket i fremtiden, og dermed bedre for pasientene.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson's Disease

Utvikling av en ensidig-lesioned 6-OHDA mus modell av Parkinsons sykdom

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Rotte modell av blod-hjerne barrieren avbrudd i Tillat Målrettet nevrovaskulære Therapeutics

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

En modell av kronisk næringsstoff Infusion i Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

Utvikling av en Alpha-synuclein Based Rat Modell for Parkinsons sykdom via Stereo Injeksjon av en rekombinant adenoassosiert Viral Vector

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Den Dimethylnitrosamine indusert leverfibrose Model i Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Shunt Surgery, Høyre hjertekateterisering, og Vaskulær morfometri i en rottemodell for Flow-indusert pulmonal arteriell hypertensjon

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk Contractility måling av musen hvem arterien bruker Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

Akupunktur i en rottemodell av astma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

En ikke-invasiv metode for å generere den sykliske belastningsinduserte intraartikulære brusklesjonsmodellen til rottekneet

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...