Name: fluorescence lifetime macro imager for biomedical applications
Uploaded: 2023-04-07T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fluorescence Lifetime Macro Imager for Biomedical Applications at JoVE.com

साइंस फाउंडेशन आयरलैंड से इस काम के लिए वित्तीय सहायता, एसएफआई/12/आरसी/2276_P2, एसएफआई/17/आरसी-पीएचडी/3484 और 18/एसपी/3522 और ब्रेकथ्रू कैंसर रिसर्च (प्रेसिजन ऑन्कोलॉजी आयरलैंड) को कृतज्ञता पूर्वक स्वीकार किया जाता है।

जानवरों के साथ सभी प्रक्रियाओं को यूरोपीय समुदाय परिषद निर्देश (2010/63 / ईयू) के अनुसार स्वास्थ्य उत्पाद नियामक प्राधिकरण (एचपीआरए, आयरलैंड) द्वारा जारी प्राधिकरणों के तहत किया गया था और यूनिवर्सिटी कॉले?...

<ol>
	<li>Papkovsky, D. B., Dmitriev, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+oxygen+and+hypoxia+in+cell+and+tissue+samples.">Imaging of oxygen and hypoxia in cell and tissue samples.</a> Cellular and Molecular Life Sciences. 75 (16), 2963-2980 (2018).</li><li>Carreau, A., El Hafny-Rahbi, B., Matejuk, A., Grillon, C., Kieda, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+is+the+partial+oxygen+pressure+of+human+tissues+a+crucial+parameter?+Small+molecules+and+hypoxia.">Why is the partial oxygen pressure of human tissues a crucial parameter? Small molecules and hypoxia.</a> Journal of Cellular and Molecular Medicine. 15 (6), 1239-1253 (2011).</li><li>Yoshihara, T., Hirakawa, Y., Hosaka, M., Nangaku, M., Tobita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+imaging+of+living+cells+and+tissues+using+luminescent+molecular+probes.">Oxygen imaging of living cells and tissues using luminescent molecular probes.</a> Journal of Photochemistry and Photobiology C: Photochemistry Reviews. 30, 71-95 (2017).</li><li>Papkovsky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorescence+based+oxygen+sensors+essential+tools+for+cell+biology+and+life+science+research.">Phosphorescence based oxygen sensors essential tools for cell biology and life science research.</a> 17th International Meeting on Chemical Sensors - IMCS. , 71-72 (2018).</li><li>Tsytsarev, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+brain+metabolism+activity+using+a+phosphorescent+oxygen-sensitive+probe.">In vivo imaging of brain metabolism activity using a phosphorescent oxygen-sensitive probe.</a> Journal of Neuroscience Methods. 216 (2), 146-151 (2013).</li><li>O'Donovan, C., Hynes, J., Yashunski, D., Papkovsky, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorescent+oxygen-sensitive+materials+for+biological+applications.">Phosphorescent oxygen-sensitive materials for biological applications.</a> Journal of Materials Chemistry. 15, 2946-2951 (2005).</li><li>Dmitriev, R. I., Papkovsky, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+probes+and+techniques+for+O+2+measurement+in+live+cells+and+tissue.">Optical probes and techniques for O 2 measurement in live cells and tissue.</a> Cellular and Molecular Life Sciences. 69 (12), 2025-2039 (2012).</li><li>Papkovsky, D. B., Zhdanov, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorescence+based+oxygen+sensors+and+probes+for+biomedical+research.">Phosphorescence based oxygen sensors and probes for biomedical research.</a> Advanced Environmental, Chemical, and Biological Sensing Technologies XIV. 10215, 102150 (2017).</li><li>Rumsey, W. L., Vanderkooi, J. M., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+phosphorescence:+A+novel+method+for+measuring+oxygen+distribution+in+perfused+tissue.">Imaging of phosphorescence: A novel method for measuring oxygen distribution in perfused tissue.</a> Science. 241 (4873), 1649-1651 (1988).</li><li>Hogan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorescence+quenching+method+for+measurement+of+intracellular+PO+2+in+isolated+skeletal+muscle+fibers.">Phosphorescence quenching method for measurement of intracellular PO 2 in isolated skeletal muscle fibers.</a> Journal of Applied Physiology. 86 (2), 720-724 (1999).</li><li>Apreleva, S. V., Wilson, D. F., Vinogradov, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tomographic+imaging+of+oxygen+by+phosphorescence+lifetime.">Tomographic imaging of oxygen by phosphorescence lifetime.</a> Applied Optics. 45 (33), 8547-8559 (2006).</li><li>Becker, W., Shcheslavskiy, V., R&#252;ck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+phosphorescence+and+fluorescence+lifetime+imaging+by+multi-dimensional+TCSPC+and+multi-pulse+excitation.">Simultaneous phosphorescence and fluorescence lifetime imaging by multi-dimensional TCSPC and multi-pulse excitation.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 1035, 19-30 (2017).</li><li>Wolfbeis, O. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luminescent+sensing+and+imaging+of+oxygen:+Fierce+competition+to+the+Clark+electrode.">Luminescent sensing and imaging of oxygen: Fierce competition to the Clark electrode.</a> BioEssays. 37 (8), 921-928 (2015).</li><li>Dmitriev, R. I., Zhdanov, A. V., Nolan, Y. M., Papkovsky, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+neurosphere+oxygenation+with+phosphorescent+probes.">Imaging of neurosphere oxygenation with phosphorescent probes.</a> Biomaterials. 34 (37), 9307-9317 (2013).</li><li>Shcheslavskiy, V. I., Neubauer, A., Bukowiecki, R., Dinter, F., Becker, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+fluorescence+and+phosphorescence+lifetime+imaging.">Combined fluorescence and phosphorescence lifetime imaging.</a> Applied Physics Letters. 108, 091111 (2016).</li><li>Babilas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+phosphorescence+imaging+of+pO2+using+planar+oxygen+sensors.">In vivo phosphorescence imaging of pO2 using planar oxygen sensors.</a> Microcirculation. 12 (6), 477-487 (2005).</li><li>Babilas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcutaneous+pO2+imaging+during+tourniquet-induced+forearm+ischemia+using+planar+optical+oxygen+sensors.">Transcutaneous pO2 imaging during tourniquet-induced forearm ischemia using planar optical oxygen sensors.</a> Skin Research and Technology. 14 (3), 304-311 (2008).</li><li>Golub, A. S., Pittman, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PO2+measurements+in+the+microcirculation+using+phosphorescence+quenching+microscopy+at+high+magnification.">PO2 measurements in the microcirculation using phosphorescence quenching microscopy at high magnification.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 294 (6), 2905-2916 (2008).</li><li>Zhdanov, A. V., Golubeva, A. V., Okkelman, I. A., Cryan, J. F., Papkovsky, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+oxygen+gradients+in+giant+umbrella+cells:+An+ex+vivo+PLIM+study.">Imaging of oxygen gradients in giant umbrella cells: An ex vivo PLIM study.</a> American Journal of Physiology - Cell Physiology. 309 (7), 501-509 (2015).</li><li>Becker, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+lifetime+imaging+-+Techniques+and+applications.">Fluorescence lifetime imaging - Techniques and applications.</a> Journal of Microscopy. 247 (2), 119-136 (2012).</li><li>Jenkins, J., Dmitriev, R. I., Papkovsky, D. B., Becker, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+cell+and+tissue+O+2+by+TCSPC-PLIM.">Imaging cell and tissue O 2 by TCSPC-PLIM.</a> Advanced Time-Correlated Single Photon Counting Applications. , 225-247 (2015).</li><li>Becker, W., K&#246;nig, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+TCSPC-FLIM+techniques.">Advanced TCSPC-FLIM techniques.</a> Multiphoton Microscopy and Fluorescence Lifetime Imaging: Applications in Biology and Medicine. , 23-52 (2018).</li><li>Wei, L., Yan, W., Ho, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+fluorescence+lifetime+analytical+microsystems:+Contact+optics+and+CMOS+time-resolved+electronics.">Recent advances in fluorescence lifetime analytical microsystems: Contact optics and CMOS time-resolved electronics.</a> Sensors. 17 (12), 2800 (2017).</li><li>Hirvonen, L. M., Suhling, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wide-field+TCSPC:+Methods+and+applications.">Wide-field TCSPC: Methods and applications.</a> Measurement Science and Technology. 28, 012003 (2017).</li><li>Hirvonen, L. M., Festy, F., Suhling, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wide-field+time-correlated+single-photon+counting+(TCSPC)+lifetime+microscopy+with+microsecond+time+resolution.">Wide-field time-correlated single-photon counting (TCSPC) lifetime microscopy with microsecond time resolution.</a> Optics Letters. 39 (19), 5602 (2014).</li><li>Sparks, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+new+gated+optical+image+intensifiers+for+fluorescence+lifetime+imaging.">Characterisation of new gated optical image intensifiers for fluorescence lifetime imaging.</a> Review of Scientific Instruments. 88 (1), 013707 (2017).</li><li>Chelushkin, P. S., Tunik, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Progress in Photon Science: Emerging New Directions. 115, (2017).</li><li>Sen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+macro-imager+based+on+Tpx3Cam+optical+camera+for+PLIM+applications.">A new macro-imager based on Tpx3Cam optical camera for PLIM applications.</a> Proceedings of SPIE. , 113591 (2020).</li><li>Fisher-Levine, M., Nomerotski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TimepixCam:+A+fast+optical+imager+with+time-stamping.">TimepixCam: A fast optical imager with time-stamping.</a> Journal of Instrumentation. 11, (2016).</li><li>Nomerotski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+and+time+stamping+of+photons+with+nanosecond+resolution+in+Timepix+based+optical+cameras.">Imaging and time stamping of photons with nanosecond resolution in Timepix based optical cameras.</a> Nuclear Instruments and Methods in Physics Research, Section A: Accelerators, Spectrometers, Detectors and Associated Equipment. 937. 937, 26-30 (2019).</li><li>Poikela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Timepix3:+A+65K+channel+hybrid+pixel+readout+chip+with+simultaneous+ToA/ToT+and+sparse+readout.">Timepix3: A 65K channel hybrid pixel readout chip with simultaneous ToA/ToT and sparse readout.</a> Journal of Instrumentation. 9, 05013 (2014).</li><li>Nomerotski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+TimepixCam,+a+fast+imager+for+the+time-stamping+of+optical+photons.">Characterization of TimepixCam, a fast imager for the time-stamping of optical photons.</a> Journal of Instrumentation. 12, 01017 (2017).</li><li>Hirvonen, L. M., Fisher-Levine, M., Suhling, K., Nomerotski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photon+counting+phosphorescence+lifetime+imaging+with+TimepixCam.">Photon counting phosphorescence lifetime imaging with TimepixCam.</a> Review of Scientific Instruments. 88, 013104 (2017).</li><li>Visser, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SPIDR:+A+read-out+system+for+Medipix3+&amp;+Timepix3.">SPIDR: A read-out system for Medipix3 &amp; Timepix3.</a> Journal of Instrumentation. 10, 12028 (2015).</li><li>Tsytsarev, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+brain+metabolism+activity+using+a+phosphorescent+oxygen-sensitive+probe.">In vivo imaging of brain metabolism activity using a phosphorescent oxygen-sensitive probe.</a> Journal of Neuroscience Methods. 216 (2), 146-151 (2013).</li><li>Sen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+O2+concentration+in+ex-vivo+tissue+samples+on+a+fast+PLIM+macro-imager.">Mapping O2 concentration in ex-vivo tissue samples on a fast PLIM macro-imager.</a> Scientific Reports. 10, 19006 (2020).</li><li>Kersemans, V., Cornelissen, B., Allen, P. D., Beech, J. S., Smart, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+tumor+volume+measurement+in+the+awake,+manually+restrained+mouse+using+MRI.">Subcutaneous tumor volume measurement in the awake, manually restrained mouse using MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 37 (6), 1499-1504 (2013).</li><li>Sen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+luminescence+lifetime+macro-imager+based+on+a+Tpx3Cam+optical+camera.">New luminescence lifetime macro-imager based on a Tpx3Cam optical camera.</a> Biomedical Optics Express. 11 (1), 77-88 (2020).</li><li>Papkovsky, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorescent+polymer+films+for+optical+oxygen+sensors.">Phosphorescent polymer films for optical oxygen sensors.</a> Biosensors and Bioelectronics. 7 (3), 199-206 (1992).</li><li>Sen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+planar+phosphorescence+based+oxygen+sensors+on+a+TCSPC-PLIM+macro-imager.">Characterization of planar phosphorescence based oxygen sensors on a TCSPC-PLIM macro-imager.</a> Sensors and Actuators, B: Chemical. 321, 128459 (2020).</li><li>Lakowicz, J. R., Szmacinski, H., Nowaczyk, K., Berndt, K. W., Johnson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+lifetime+imaging.">Fluorescence lifetime imaging.</a> Analytical Biochemistry. 202 (2), 316-330 (1992).</li></ol>

उपरोक्त प्रोटोकॉल नए इमेजर की असेंबली और माइक्रोसेकंड एफएलआईएम / पीएलआईएम मोड में इसके संचालन का विस्तृत विवरण देते हैं। टीसीएसपीसी-आधारित नई पीढ़ी का टीपीएक्स 3 कैम कैमरा, छवि तीव्र, उत्सर्जन फिल्टर ...

ओ 2 जीवित प्रणालियों के लिए प्रमुख पर्यावरणीय मापदंडों में से एक है, और ओ 2 के वितरण और इसकी गतिशीलता का ज्ञान कई जैविक अध्ययनों 1,2,3 के लिए महत्वपूर्ण है। फॉस्फोरेसेंट प्रोब 4,5,6,7,8 और पीएलआईएम 9,10,11,12,13 के माध्यम से ऊतक ऑक्सीकरण का आकलन जैविक और चिकित्सा अनुसंधान 3,9,14,15,16 में लोकप्रियता प्राप्त कर रहा है। 17,18,19. ऐसा इसलिए है क्योंकि पीएलआईएम, प्रतिदीप्ति या फॉस्फोरेसेंस तीव्रता माप के विपरीत, बाहरी कारकों जैसे जांच एकाग्रता, फोटोब्लीचिंग, उत्तेजना तीव्रता, ऑप्टिकल संरेखण, प्रकीर्णन और ऑटोफ्लोरेसेंस से प्रभावित नहीं होता है।
हालांकि, वर्तमान ओ2 पीएलआईएम प्लेटफॉर्म उनकी संवेदनशीलता, छवि अधिग्रहण गति, सटीकता और सामान्य प्रयोज्यता से सीमित हैं। समय-सहसंबद्ध एकल फोटॉन गिनती (टीसीएसपीसी), एक रास्टर स्कैनिंग प्रक्रिया के साथ संयुक्त, अक्सर पीएलआईएम और फ्लोरेसेंस लाइफटाइम इमेजिंग माइक्रोस्कोपी (एफएलआईएम) उपकरणों20,21,22 में उपयोग किया जाता है। हालांकि, चूंकि पीएलआईएम को एक लंबे पिक्सेल निवास समय (मिलीसेकंड रेंज में) की आवश्यकता होती है, इसलिए छवि अधिग्रहण का समय एफएलआईएम अनुप्रयोगों20,22,23 के लिए आवश्यक समय से बहुत लंबा है। सीएमओएस कैमरों जैसी अन्य तकनीकों में एकल फोटॉन संवेदनशीलता की कमी होती है और कम फ्रेम दर20,24,25,26 होती है। इसके अलावा, मौजूदा पीएलआईएम सिस्टम ज्यादातर सूक्ष्म प्रारूप में उपयोग किए जाते हैं, जबकि मैक्रोस्कोपिक सिस्टमकम आम हैं।
टीसीएसपीसी आधारित पीएलआईएम मैक्रो इमेजर28 को इनमें से कई सीमाओं को दूर करने के लिए स्थापित किया गया था। इमेजर के डिजाइन को एक नए ऑप्टो-मैकेनिकल एडाप्टर, क्रिकेट के उपयोग से बहुत सुविधाजनक बनाया गया था, जिसमें निम्नलिखित हैं: i) दो सी-माउंट एडेप्टर, जो पीछे की तरफ कैमरा मॉड्यूल और सामने की तरफ उद्देश्य लेंस का आसान युग्मन प्रदान करते हैं; (ii) क्रिकेट के बाहरी हिस्से में एक छवि गहनता के लिए एक आंतरिक आवास और उत्तरार्द्ध के लिए एक पावर सॉकेट; iii) फ्रंट-साइड सी-माउंट एडाप्टर के पीछे एक आंतरिक स्थान जहां एक मानक 25 मिमी उत्सर्जन फिल्टर को इंटेंसिफायर के सामने रखा जा सकता है; और iv) रिंग नियामकों के साथ एक अंतर्निहित प्रकाश कोलिमेटिंग ऑप्टिक्स, जो कैमरा चिप पर कुरकुरा छवियों का उत्पादन करने के लिए लेंस और कैमरे के बीच ऑप्टिकल संरेखण / ध्यान केंद्रित करने की अनुमति देता है।
इकट्ठे इमेजर में, कैमरा मॉड्यूल को क्रिकेट एडाप्टर के पीछे की तरफ युग्मित किया गया है, जिसमें एक फोटोकैथोड से युक्त एक इमेज इंटेंसिफायर भी है, जिसके बाद एक माइक्रोचैनल प्लेट (एमसीपी), एक एम्पलीफायर और एक तेज सिंटिलेटर, पी 47 फॉस्फोर है। क्रिकेट के अंदर 760 एनएम ± 50 एनएम उत्सर्जन फिल्टर फिट किया गया है, और एक उद्देश्य लेंस, एनएमवी -50 एम 11', फ्रंट साइड सी-माउंट एडाप्टर से जुड़ा हुआ है। अंत में, लेंस और कैमरा रिंग नियामकों के साथ ऑप्टिकल रूप से संरेखित होते हैं।
इंटेंसिफायर की भूमिका आने वाले फोटॉनों का पता लगाना और उन्हें कैमरा चिप पर प्रकाश के तेज विस्फोट में परिवर्तित करना है, जो पंजीकृत हैं और उत्सर्जन क्षय और आजीवन छवियों को उत्पन्न करने के लिए उपयोग किए जाते हैं। कैमरा मॉड्यूल में एक उन्नत टीसीएसपीसी-आधारित ऑप्टिकल सेंसर सरणी (256 पिक्सेल x 256 पिक्सल) और एक नई पीढ़ी की रीडआउट चिप 29,30,31,32,33 शामिल है, जो 1.6 एनएस के समय रिज़ॉल्यूशन और 80 एमपिक्सेल / सेकंड रीडआउट दर के साथ इमेजिंग चिप के प्रत्येक पिक्सेल पर फोटॉन के आगमन के समय (टीओए) और टाइम ओवर थ्रेशोल्ड (टीओटी) की एक साथ रिकॉर्डिंग की अनुमति देता है।
इस कॉन्फ़िगरेशन में, इंटेंसिफायर वाले कैमरे में सिंगल-फोटॉन संवेदनशीलता होती है। यह डेटा-संचालित है और त्वरित पिक्सेल डिटेक्टर रीडआउट (एसपीआईडीआर) सिस्टम34 पर आधारित है। इमेजर के स्थानिक रिज़ॉल्यूशन को पहले प्लानर फॉस्फोरेसेंट ओ2 सेंसर और एक रिज़ॉल्यूशन प्लेट मास्क के साथ चित्रित किया गया था। इंस्ट्रूमेंट रिस्पांस फंक्शन (आईआरएफ) को अन्य सभी मापों के लिए उपयोग की जाने वाली सेटिंग्स के तहत एक प्लानर फ्लोरोसेंट सेंसर की इमेजिंग द्वारा मापा गया था। लगभग 2.6 एनएस की डाई का जीवनकाल पीएलआईएम मोड में आईआरएफ माप के लिए उपयोग किए जाने के लिए पर्याप्त छोटा था। इमेजर क्रमशः 39.4 μm और 30.6 ns (आधे-अधिकतम पर पूर्ण चौड़ाई) के स्थानिक और लौकिक रिज़ॉल्यूशन के साथ आकार में 18 मिमी x 18 मिमी तक की वस्तुओं की छवि बना सकताहै।
निम्नलिखित प्रोटोकॉल मैक्रो इमेजर की असेंबली और जैविक नमूनों में ओ 2 एकाग्रता के मानचित्रण के लिए इसके बाद के उपयोग का वर्णन करते हैं, जो पहले से विशेषता वाले निकट-अवरक्त ओ 2 जांच, नैनोओ2-आईआर 35 के साथ सना हुआ है। जांच प्लैटिनम (II) बेंजोपोरफाइरिन (पीटीबीपी) डाई पर आधारित एक उज्ज्वल, फोटोस्टेबल, सेल-पारगम्य ओ2-सेंसिंग जांच है। यह 625 एनएम पर उत्तेजित है, 760 एनएम पर उत्सर्जन करता है, और शारीरिक सीमा (ओ2 के 0% -21% या 0-210 μM) मेंO2 के लिए एक मजबूत ऑप्टिकल प्रतिक्रिया प्रदान करता है। इमेजर को पीटी (II) -पोर्फिरीन रंगों के आधार पर विभिन्न सेंसर सामग्रियों को चिह्नित करने के लिए भी प्रदर्शित किया जाता है। कुल मिलाकर, इमेजर कॉम्पैक्ट और लचीला है, एक आम फोटोग्राफिक कैमरे के समान। वर्तमान सेटअप में, इमेजर विभिन्न वाइडफील्ड पीएलआईएम अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त है। एक तेज लेजर स्रोत के साथ एलईडी को प्रतिस्थापित करने से इमेजर के प्रदर्शन में और सुधार होगा और संभावित रूप से नैनोसेकंड एफएलआईएम अनुप्रयोगों को सक्षम किया जा सकता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>627 nm LED</td>
			<td>Parts Express</td>
			<td></td>
			<td>Can be replaced with different LED based on the excitation wavelength of the sensor. Used 390 nm LED for Pt-porphyrin dyes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>760 &#177; 50 nm emission filter</td>
			<td>Edmund Optics</td>
			<td>84-788</td>
			<td>Can be replaced with different filter based on the emission wavelength of the sensor. Used 650 &#177; 50 nm bandpass filter for Pt-porphyrin dyes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balb/c mice</td>
			<td>Envigo, UK</td>
			<td>Balb/c</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black box</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>XE25C9/M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cricket Adapter</td>
			<td>Photonis</td>
			<td>Cricket-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CT26 cells&#160;</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CT26.WT</td>
			<td>https://www.atcc.org/products/crl-2638</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D0697</td>
			<td>Other media can also be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ Software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Free Image analysis software. Can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/index.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCP-125 image intensifier with P47 phosphor screen</td>
			<td>Photonis</td>
			<td>PP0360EF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini dishes</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.3900.300</td>
			<td>35 mm diameter&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mylar plastic film, 75 micron&#160;</td>
			<td>RS Ireland</td>
			<td>785-0795</td>
			<td>Othe plastic substrates can also be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanO2-IR</td>
			<td>home-made</td>
			<td>n/a</td>
			<td>The probe can be synthesised according to the published method &#39;Tsytsarev V, Arakawa H, Borisov S, Pumbo E, Erzurumlu RS, Papkovsky DB. In vivo imaging of brain metabolism activity using a phosphorescent oxygen-sensitive probe. J Neurosci Methods. 2013 Jun 15;216(2):146-51. doi: 10.1016/j.jneumeth.2013.04.005. Epub 2013 Apr 25. PMID: 23624034; PMCID: PMC3719178.&#39; or provided by our lab.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NMV-50M11&#8221; 50 mm lens</td>
			<td>Navitar</td>
			<td></td>
			<td>Other lenses compatibel with C-mount adators can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical breadboard</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>MB1836</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri Dishes</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.1472.001</td>
			<td>92 mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Supply</td>
			<td>Tenma</td>
			<td>72-10495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulse Generator</td>
			<td>Tenma</td>
			<td>TGP110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sophy</td>
			<td>Amsterdam Scientific Instruments</td>
			<td>n/z</td>
			<td>Provided by ASI together with the Tpx3Cam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tpx3Cam</td>
			<td>Amsterdam Scientific Instruments</td>
			<td>TPXCAM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tri2 Software</td>
			<td>University of Oxford</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Free Time Resolved Imaging software, can be downloaded from: https://users.ox.ac.uk/~atdgroup/index.shtml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XYZ Translation Stage</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>LT3</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fluorescence lifetime macro imager for biomedical applications

यह पेपर एक नया फोटोलुमिनेसेंस लाइफटाइम इमेजर प्रस्तुत करता है जो ठोस अवस्था, ओ 2-संवेदनशील कोटिंग्स से लेकर घुलनशील ओ 2-संवेदनशील जांच से सना जीवित पशु ऊतक के नमूनों तक विभिन्न फॉस्फोरेसेंट नमूनों में आणविक ऑक्सीजन (ओ2) एकाग्रता को मैप करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। विशेष रूप से, नैनोपार्टिकल-आधारित नियर-इन्फ्रारेड प्रोब नैनोओ 2-आईआर, जो 625 एनएम प्रकाश उत्सर्जक डायोड (एलईडी) के साथ उत्तेजित है और 760 एनएम पर उत्सर्जित होता है, का उपयोग किया गया था। इमेजिंग सिस्टम टाइमपिक्स 3 कैमरा (टीपीएक्स 3 कैम) और ऑप्टो-मैकेनिकल एडाप्टर पर आधारित है, जिसमें एक इमेज इंटेंसिफायर भी है। ओ2 फॉस्फोरेसेंस लाइफटाइम इमेजिंग माइक्रोस्कोपी (पीएलआईएम) आमतौर पर विभिन्न अध्ययनों के लिए आवश्यक है, लेकिन वर्तमान प्लेटफार्मों में उनकी सटीकता, सामान्य लचीलापन और प्रयोज्यता में सीमाएं हैं।
यहां प्रस्तुत प्रणाली एक तेज और अत्यधिक संवेदनशील इमेजर है, जिसे एक एकीकृत ऑप्टिकल सेंसर और रीडआउट चिप मॉड्यूल, टीपीएक्स 3 कैम पर बनाया गया है। यह सतह से सना आंतों के ऊतक के नमूनों या बड़ी आंत के इंट्राल्यूमिनल रूप से दाग वाले टुकड़ों से उच्च तीव्रता वाले फॉस्फोरेसेंस संकेतों और स्थिर जीवनकाल मूल्यों का उत्पादन करने के लिए दिखाया गया है और लगभग 20 सेकंड या उससे कम में ऊतक ओ2 स्तरों के विस्तृत मानचित्रण की अनुमति देता है। बेहोश जानवरों में ग्राफ्टेड ट्यूमर में हाइपोक्सिया की इमेजिंग पर प्रारंभिक प्रयोग भी प्रस्तुत किए गए हैं। हम यह भी वर्णन करते हैं कि इमेजर को उत्तेजना के लिए 390 एनएम एलईडी और उत्सर्जन के लिए बैंडपास 650 एनएम फिल्टर का उपयोग करके पीटी-पोर्फिरीन रंगों पर आधारित ओ2-संवेदनशील सामग्री के साथ उपयोग के लिए फिर से कॉन्फ़िगर किया जा सकता है। कुल मिलाकर, पीएलआईएम इमेजर को उपयोग की जाने वाली जांच के लिए जीवनकाल मूल्यों के सटीक मात्रात्मक माप और ओ2 एकाग्रता के संबंधित दो-आयामी मानचित्रों का उत्पादन करने के लिए पाया गया था। यह पूर्व विवो ऊतक मॉडल और जीवित जानवरों के चयापचय इमेजिंग के लिए भी उपयोगी है।

पूर्व विवो इमेजिंग अनुप्रयोगों के लिए, आंतों के ऊतकों के टुकड़े ऊतक के सेरसल पक्ष पर नैनोओ 2-आईआर जांच के सामयिक अनुप्रयोग से दागदार थे। गहरे धुंधलापन के लिए, जांच के 1 μL को लुमेन में इंजेक्ट किया गया ?...

Watch this Scientific Journal Video about Fluorescence Lifetime Macro Imager for Biomedical Applications at JoVE.com

Fluorescence Lifetime Macro Imager for Biomedical Applications

यह पेपर लंबे क्षय उत्सर्जक नमूनों के मैक्रोस्कोपिक फोटोलुमिनेसेंस लाइफटाइम इमेजिंग के लिए एक नए, तेज ऑप्टिकल इमेजर के उपयोग का वर्णन करता है। इमेजिंग के लिए सेंसर सामग्री की तैयारी और लक्षण वर्णन और जैविक नमूनों का अध्ययन करने में इमेजर के आवेदन के साथ एकीकरण, छवि अधिग्रहण और विश्लेषण प्रक्रियाओं का वर्णन किया गया है।

बायोमेडिकल अनुप्रयोगों के लिए फ्लोरेसेंस लाइफटाइम मैक्रो इमेजर

This paper presents a new photoluminescence lifetime imager designed to map the molecular oxygen (O2) concentration in different phosphorescent samples ...

हमारा प्रोटोकॉल समर्पित जांच और संवेदन सामग्री के माध्यम से मैक्रोस्कोपिक वस्तुओं, विशेष रूप से जीवित पशु ऊतक और पूरे जानवरों में फॉस्फोरेसेंस जीवनकाल और ऑक्सीजन एकाग्रता का विस्तृत 2 डी मानचित्रण प्रदान करता है। यह जानकारी अनुसंधान के कई क्षेत्रों के लिए महत्वपूर्ण है। हमारा प्रोटोकॉल एक एकीकृत और कॉम्पैक्ट इमेजिंग मॉड्यूल का उपयोग करता है जो टीसीएसपीसी मोड में संचालित होता है और जीवन ऊतक जैसे जटिल जैविक नमूनों में जीवनकाल और ऑक्सीजन वितरण का आसान और सटीक विज़ुअलाइज़ेशन प्रदान करता है।क्रिकेट एडाप्टर लें और इसे विभिन्न पक्षों से निरीक्षण करें। क्रिकेट में रखे गए फोटॉनिस PP0360EF इंटेंसिफायर को दिखाने के लिए फ्रंट साइड सी-माउंट एडाप्टर को हटा दें, और फिर सी-माउंट एडाप्टर को वापस रखें। क्रिकेट के फ्रंट साइड सी-माउंट एडाप्टर को निकालें और 650 प्लस / माइनस 50 नैनोमीटर उत्सर्जन फिल्टर डालें।सी-माउंट को वापस रखकर इसे ठीक करें। फिर, टीपीएक्स तीन-कैम कैमरा मॉड्यूल को उनके रिंग एडेप्टर के माध्यम से क्रिकेट मॉड्यूल के बैकसाइड से कनेक्ट करें। सी-माउंट एडाप्टर के माध्यम से लेंस को क्रिकेट मॉड्यूल के सामने की तरफ से कनेक्ट करें।एलईडी को बिजली की आपूर्ति और पल्स जनरेटर से कनेक्ट करें। अब, ब्लैक बॉक्स के अंदर ब्रेडबोर्ड से जुड़ी एक पोस्ट पर 390-नैनोमीटर सुपर ब्राइट एलईडी माउंट करें। एलईडी चालू करें और छवि बनाए जा रहे नमूने के प्रभावी और समान उत्तेजना सुनिश्चित करने के लिए इसे केंद्रित करें।ऑप्टिकल ब्लैक बॉक्स के शीर्ष पर कैमरा असेंबली को उस चरण की ओर नीचे की ओर माउंट करें जहां नमूने चित्रित किए जाएंगे। कैमरे और एलईडी को दो-पल्स जनरेटर और चार-चैनल ऑसिलोस्कोप से कनेक्ट करें। ऑसिलोस्कोप और पल्स जनरेटर पर सेटिंग्स का उपयोग करके, कैमरे और एलईडी को भेजी गई दालों को सिंक्रनाइज़ करें।क्रिकेट यूनिट पर विशेष केबल और सॉकेट का उपयोग करें ताकि इंटेंसिफायर को मानक बिजली की आपूर्ति से जोड़ा जा सके और लाभ को 2.7 वोल्ट पर सेट किया जा सके। कैमरा लेंस के सामने नमूना रखें। फिर, इंटेंसिफायर को छोड़कर कैमरा और सभी विद्युत मॉड्यूल चालू करें।परिचालन मापदंडों को ट्यून करने के लिए एसओएफआई सॉफ़्टवेयर को सक्रिय करें, जैसे कि फोकस और नमूना संरेखण। मॉड्यूल में, फ्रेम एक्सपोजर को 0.01 सेकंड तक सेट करें। अनंत फ़्रेम का चयन करें और पिक्सेल ऑपरेशन मोड को सीमा से अधिक समय पर सेट करें।फिर, पूर्वावलोकन पर जाएं और Medipix/Timepix फ़्रेम विंडो खोलने के लिए सक्रिय मॉड्यूल का चयन करें। अगले चरण में, रिकॉर्डिंग शुरू करने के बाद, रंग पैमाने को समायोजित करें और छवि को वांछित अभिविन्यास में घुमाएं। उसके बाद, कमरे में रोशनी बंद करें और इंटेंसिफायर चालू करें।अच्छे कंट्रास्ट और चमक के साथ नमूनों की स्पष्ट छवियां उत्पन्न करने के लिए लेंस और क्रिकेट एडाप्टर की फोकसिंग क्षमताओं के साथ नमूना मंच पर कैमरा ऑप्टिक्स पर ध्यान केंद्रित करें। एक बार फ़ोकस पूरा हो जाने के बाद, सोफी सॉफ़्टवेयर बंद करें। फिर, टर्मिनल पर जाएं, बाइनरी प्रारूप में कच्चे डेटा को प्राप्त करने और टर्मिनल को बंद करने के लिए कस्टम-डिज़ाइन सॉफ़्टवेयर के आदेशों को निष्पादित करें।अधिग्रहित डेटा संसाधित करने के लिए एक नया टर्मिनल खोलें। डेटा फ़ाइल लोड करें और डेटा रिड्यूसर चलाएँ। सी भाषा में लिखे गए एक समर्पित प्रोग्राम के साथ पोस्ट-प्रोसेस डेटा का विश्लेषण करें जो डेटा को आईसीएस छवि फ़ाइल में लिखेगा।इसके बाद, स्वतंत्र रूप से उपलब्ध टाइम रिज़ॉल्व्ड इमेजिंग सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके आईसीएस छवि फ़ाइलों को खोलें, और फॉस्फोरेसेंस क्षय को फिट करने के लिए दो घातीय कार्यों का उपयोग करें। अंत में, फिट डे खोलें। उपलब्ध छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर के साथ आईसीएस छवि फ़ाइलें।लुकअप टेबल का उपयोग करके फॉस्फोरेसेंस लाइफटाइम छवियां उत्पन्न करें और उन्हें छद्म रंग पैमाने में कोड करें। संपूर्ण छवि या रुचि के क्षेत्रों के लिए औसत जीवनकाल मूल्यों की गणना करने के लिए माप फ़ंक्शन का उपयोग करें। ऑक्सीजन युक्त और डीऑक्सीजनेटेड अवस्थाओं में प्लैटिनम ऑक्टाथाइलपोर्फिरिन डाई सेंसर स्पॉट की फॉस्फोरेसेंस तीव्रता और फॉस्फोरेसेंस लाइफटाइम इमेजिंग माइक्रोस्कोपी छवियां दिखाई जाती हैं।सुनिश्चित करें कि क्रिकेट के अंदर सही उत्सर्जन फ़िल्टर लगाया गया है और सही एलईडी, केबल कनेक्शन और पल्स सेटिंग्स का उपयोग किया गया है। वर्तमान में, यह प्रोटोकॉल पशु मॉडल तक सीमित है, लेकिन संभावित रूप से ऊतक हाइपोक्सिया, जैसे कैंसर, स्ट्रोक और सूजन से जुड़े पैथोलॉजिकल राज्यों के निदान और उपचार के लिए लागू किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Biology

BioMEMS and Cellular Biology: Perspectives and Applications

BioMEMS और सेलुलर जीवविज्ञान: परिप्रेक्ष्य और अनुप्रयोग

The ability to culture cells has revolutionized hypothesis testing in basic cell and molecular biology research. It has become a standard methodology in ...

Microfluidic Applications for Disposable Diagnostics

प्रयोज्य निदान के लिए microfluidic अनुप्रयोगों

In this interview, Dr. Klapperich discusses the fabrication of thermoplastic microfluidic devices and their application for development of new ...

Automated System for Single Molecule Fluorescence Measurements of Surface-immobilized Biomolecules

भूतल immobilized biomolecules के एकल अणु प्रतिदीप्ति माप के लिए स्वचालित प्रणाली

Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) microscopy has been widely used to study the structure and dynamics of molecules of biological interest, ...

Time-lapse Imaging of Mitosis After siRNA Transfection

SiRNA अभिकर्मक के बाद समय चूक सूत्रीविभाजन की इमेजिंग

Changes in cellular organization and chromosome dynamics that occur during mitosis are tightly coordinated to ensure accurate inheritance of genomic and ...

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

एक - पूर्व ओवो चिकन भ्रूण संस्कृति इमेजिंग और Microsurgery अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त प्रणाली

Understanding the relationships between genetic and microenvironmental factors that drive normal and malformed embryonic development is fundamental for ...

A Fluorescence Microscopy Assay for Monitoring Mitophagy in the Yeast Saccharomyces cerevisiae

A Fluorescence Microscopy Assay for Monitoring Mitophagy in the Yeast Saccharomyces cerevisiae

खमीर में एक निगरानी Mitophagy के लिए प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी परख Saccharomyces cerevisiae

Autophagy is important for turnover of cellular components under a range of different conditions. It serves an essential homeostatic function as well as a ...

Absolute Quantum Yield Measurement of Powder Samples

पाउडर नमूने के पूर्ण क्वांटम यील्ड मापन

Measurement of fluorescence quantum yield has become an important tool in the search for new solutions in the development, evaluation, quality control and ...

Infinium Assay for Large-scale SNP Genotyping Applications

बड़े पैमाने पर SNP जीनोटाइपिंग अनुप्रयोगों के लिए इंफिनियम परख

Genotyping variants in the human genome has proven to be an efficient method to identify genetic associations with phenotypes. The distribution of ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

उच्च throughput अनुप्रयोगों के लिए वयस्क zebrafish दिल की वसूली

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Genetic Barcoding with Fluorescent Proteins for Multiplexed Applications

मल्टिप्लेक्स अनुप्रयोगों के लिए फ्लोरोसेंट प्रोटीन के साथ जेनेटिक बारकोडिंग

Fluorescent proteins, fluorescent dyes and fluorophores in general have revolutionized the field of molecular cell biology. In particular, the discovery ...