Name: aptamer-based target detection facilitated by a 3-stage g-quadruplex isothermal exponential amplification reaction
Uploaded: 2022-10-06T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Aptamer-Based Target Detection Facilitated by a 3-Stage G-Quadruplex Isothermal Exponential Amplification Reaction at JoVE.com

Это исследование было поддержано финансированием исследований и разработок от Aptagen LLC.

См. Дополнительную таблицу 1 (таблица настройки реакции) для подготовки пробирки, включая конкретные объемы и концентрации компонентов реакции. В демонстрируемом здесь протоколе используется предварительно собранный комплект платформы обнаружения, как описано в таблице...

<ol>
	<li>Ellington, A. D., Szostak, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+selection+of+RNA+molecules+that+bind+specific+ligands.">In vitro selection of RNA molecules that bind specific ligands.</a> Nature. 346 (6287), 818-822 (1990).</li><li>Tang, J., Breaker, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+allosteric+ribozymes.">Rational design of allosteric ribozymes.</a> Chemical Biology. 4 (6), 453-459 (1997).</li><li>Stoltenburg, R., Reinemann, C., Strehlitz, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SELEX--A+(r)evolutionary+method+to+generate+high-affinity+nucleic+acid+ligands.">SELEX--A (r)evolutionary method to generate high-affinity nucleic acid ligands.</a> Biomolecular Engineering. 24 (4), 381-403 (2007).</li><li>Liao, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+colorimetric+system+for+detecting+target+antigens+by+a+three-stage+signal+transformation-amplification+strategy.">A simple colorimetric system for detecting target antigens by a three-stage signal transformation-amplification strategy.</a> Biochemistry. 57 (34), 5117-5126 (2018).</li><li>Soukup, G. A., Emilsson, G. A., Breaker, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altering+molecular+recognition+of+RNA+aptamers+by+allosteric+selection.">Altering molecular recognition of RNA aptamers by allosteric selection.</a> Journal of Molecular Biology. 298 (4), 623-632 (2000).</li><li>Van Ness, J., Van Ness, L. K., Galas, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isothermal+reactions+for+the+amplification+of+oligonucleotides.">Isothermal reactions for the amplification of oligonucleotides.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 100 (8), 4504-4509 (2003).</li><li>Cheng, X., Liu, X., Bing, T., Cao, Z., Shangguan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+peroxidase+activity+of+G-quadruplex-hemin+complexes+and+its+application+in+ligand+screening.">General peroxidase activity of G-quadruplex-hemin complexes and its application in ligand screening.</a> Biochemistry. 48 (33), 7817-7823 (2009).</li><li>Nie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reporter-triggered+isothermal+exponential+amplification+strategy+in+ultrasensitive+homogeneous+label-free+electrochemical+nucleic+acid+biosensing.">Reporter-triggered isothermal exponential amplification strategy in ultrasensitive homogeneous label-free electrochemical nucleic acid biosensing.</a> Chemical Communications. 50 (47), 6211-6213 (2014).</li><li>Tabuchi, T., Yokobayashi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+riboswitches.">Cell-free riboswitches.</a> RSC Chemical Biology. 2 (5), 1430-1440 (2021).</li><li>Ao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integration+of+an+expression+platform+in+the+SELEX+cycle+to+select+DNA+aptamer+binding+to+a+disease+biomarker.">Integration of an expression platform in the SELEX cycle to select DNA aptamer binding to a disease biomarker.</a> ACS Omega. 7 (12), 10804-10811 (2022).</li></ol>

Представленный здесь способ использует преимущества перехода между первоначально неупорядоченной вторичной структурой в аллостерическом рибозиме и дополнительной стабильностью, обеспечиваемой связыванием мишени с аптамерным доменом для активации цис-расщепляющего молоткоголово...

Аптамеры обычно представляют собой одноцепочечную ДНК или РНК, отобранную в ходе эволюционного процесса с высоким сродством и специфичностью связывания с желаемыми мишенями1. В дополнение к связывающей способности, аптамеры могут быть связаны и управлять мотивами с функциями сигнала-вывода2,3, усиливая указанный сигнал и улучшая чувствительность системы. Система G-квадруплексной изотермической реакции экспоненциального усиления (GQ-EXPAR) представляет собой трехчастную систему (рис. 1), которая развивает визуальный сигнал при добавлении последовательных компонентов в один реакционный сосуд для получения визуального выхода4. Эта система позволяет обнаруживать конкретную мишень, в данном случае теофиллин, в данном образце в течение 15 минут, используя оптимизированный рабочий процесс, чтобы обеспечить быстрое и специфическое обнаружение интересующей цели. Этот метод следует рассматривать для образцов, где конкретное количественное определение целевой концентрации является меньшей проблемой, чем высокая специфичность ответа за короткий промежуток времени.
Аллостерический рибопереключатель, молекула РНК (рибозим), которая подвергается саморасщеплению, производит начальный сигнал. Эта конструкция основана на рибозиме-молотке с аптамерным доменом, введенным в Stem II в качестве регулятора активности расщепления. Его функция саморасщепления активируется, когда его аптамерный домен стабилизируется при связывании с мишенью5. В противном случае коммутатор неактивен в исходном состоянии.
Последующая реакция экспоненциальной амплификации (EXPAR) использует высвобождение саморасщепляющейся цепи РНК с первой стадии для запуска изотермической реакции амплификации6. Продукт амплификации EXPAR обладает пероксидазной активностью7, выступая в качестве основы для последней стадии системы. Когда некоторые субстраты окисляются в сочетании с распадом перекиси, они производят флуоресцентный выход, который можно измерить на различных приборах. Другие распространенные субстраты могут быть заменены для получения цветного продукта для визуального обнаружения. EXPAR и пероксидазная активность его продуктов амплификации действуют как 2-ступенчатый усилитель сигнала, повышая чувствительность к более высоким уровням по сравнению с традиционными стратегиями 7,8.
Обнаружение теофиллина по сравнению с кофеином используется в качестве примера специфичности этой платформы обнаружения, поскольку они различаются только одной метильной группой (рис. 2). Эта демонстрация системы дает колориметрический выход для визуального обнаружения теофиллина не менее 500 нМ.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3,3&#39;,5,5&#39;-Tetramethylbenzidine dihydrochloride (TMB) solution with H2O2, &#34;MaxSignal TMB Microwell Substrate Solution&#34;</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>FOOD-1806-1000</td>
			<td>Color development reagent. Minimize exposure to light and atmosphere. Previously BIOO Scientific catalog number 1806. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 3-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5&#8217;- TCC CTC CCT CCC TCC CAG TCC AGA CTC TTC CCT CCC TCC CTC CCA GA-Biotin-3&#8217;</td>
			<td>Integrated DNA Technologies (IDT)</td>
			<td>Custom</td>
			<td>Optimized QtQ47 DNA template for EXPAR to produce G-quadruplex, primed by G-quadruplex. This is used for the &#34;exponential&#34; part of EXPAR, to rapidly increase the amount of DNAzyme used for Step 3 color development. Template includes a 3&#39;-biotin to prevent unintended extension by Bst 2.0 DNA polymerase during EXPAR. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5&#8217;-GGG AAC UAU ACA ACC UAG GGC GAC CCU GAU GAG CCU UAU ACC AGC CGA AAG GCC CUU GGC AGA CGU UGA AAC GGU GAA AGC CGU AGG UUG CCC UAG GUU GUA UAG UU-3&#8217;</td>
			<td>Integrated DNA Technologies (IDT)</td>
			<td>Custom</td>
			<td>Theophylline-recognizing allosteric ribozyme sequence (self-cleaving ribozyme regulated by RNA aptamer domain for theophylline) modified from Soukup et al. 
			Soukup, G. A., Emilsson, G. A., and Breaker, R. R. (2000) Altering molecular recognition of RNA aptamers by allosteric selection, Journal of molecular biology 298, 623-632. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 1-3.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5&#8217;-TCC CTC CCT CCC TCC CAG TCC AGA CTC TAC GGC TTT CAC CGT TTC AAC G-Biotin-3&#8217;</td>
			<td>Integrated DNA Technologies (IDT)</td>
			<td>Custom</td>
			<td>Optimized P3tQ49 DNA template for EXPAR to produce G-quadruplex, primed by P3 cleavage product. This is used in Step 2 to translate the cleavage product into DNAzyme used for Step 3 color development. Template includes a 3&#39;-biotin to prevent unintended extension by Bst 2.0 DNA polymerase during EXPAR. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5x Ribozyme Buffer</td>
			<td>Aptagen, LLC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5x composition: 600 mM Tris-HCl (pH 7.5), 150 mM MgCl2, 25 mM DTT. Used in Step 1. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 1-4.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Apta-beaconTM (GQ-EXPAR, TMB) Demonstration Kit</td>
			<td>Aptagen, LLC</td>
			<td>GQ-EXPAR-TMB</td>
			<td>The demo kit showcases the specificity of the colorimetric assay by detecting difficult small molecule targets, theophylline versus caffeine, which only differ by a single methyl group.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bst 2.0 DNA polymerase</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M0537S</td>
			<td>Isothermal amplification polymerase with strand-displacement activity. Part of the Nickase-Polymerase Mix, prepared at 9.375 U/uL. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-1.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffer 3.1</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>B6003SVIAL</td>
			<td>Combined with 2 uL of 10X Isothermal Amplification Buffer and 27.5 uL of nuclease-free water to produce 1.11X EXPAR Buffer in EXPAR Mix. This product replaces the previously-used B7203SVIAL that was part of the initial system development (same composition except non-recombinant BSA). 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caffeine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0750-100G</td>
			<td>Aptamer counter-target (control), prepared with nuclease-free water. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 1-1.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNTPs</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>N0447S</td>
			<td>Part of the EXPAR reaction mixture. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EXPAR reaction mixture</td>
			<td>Aptagen, LLC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>0.44 mM dNTPs, 0.38 &#956;M P3tQ49, 0.38 &#956;M QtQ47, 44.44 mM Tris-HCl (pH 8.4), 63.5 mM NaCl, 31.5 mM KCl, 6.35 mM MgCl2, 1.27 mM MgSO4, 6.35 mM (NH4)2SO4, 63.5 &#956;g/ml BSA, 0.0635 % Tween 20. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H9039</td>
			<td>Resuspended in DMF to a final concentration of 25 uM. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 3-1.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isothermal Amplification Buffer</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>B0537SVIAL</td>
			<td>Combined with 2 uL of 10x Buffer 3.1 and 27.5 &#181;L of nuclease-free water to produce 1.11x EXPAR Buffer in EXPAR Mix. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Amresco (VWR)</td>
			<td>E525-500ML</td>
			<td>Hammerhead ribozyme cofactor, necessary for self-cleavage. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 1-3.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MJ PTC-100 Thermocycler</td>
			<td>MJ Research, Inc.</td>
			<td>PTC-100</td>
			<td>Thermocycler to control incubation temperatures. Any thermocycler or hot block can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N, N-Dimethylformamide (DMF)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>227056-100ML</td>
			<td>Used to resuspend hemin and maximize shelf life in freezer. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 3-1.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nickase-polymerase Mix</td>
			<td>Aptagen, LLC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Nt.BstNBI (9.375 units/&#956;L) and Bst 2.0 DNA polymerase (0.5 units/&#956;L). 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 2-1.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nt.BstNBI</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>R0607S</td>
			<td>Nicking enzyme to allow continued isothermal amplification. Part of the Nickase-Polymerase Mix, prepared at 0.5 U/uL. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 2-1.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 Kinase Buffer</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>B0201SVIAL</td>
			<td>Buffer for enzyme necessary to remove cyclic phosphate. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 1-4.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 polynucleotide kinase</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M0201S</td>
			<td>Removes cyclic phosphate post-cleavage to allow cleavage product to prime isothermal amplification reaction. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as PCR Tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tecan GENios FL</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Genios-FL TWT</td>
			<td>Plate reader to measure absorbance signal from Step 3 results.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Theophylline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T1633-50G</td>
			<td>Aptamer target, prepared with nuclease-free water. 
			Supplied in Apta-beacon Demonstration Kit as Tube 1-2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>American Bioanalytical</td>
			<td>AB14043-01000</td>
			<td>Aptamer binding buffer. 
			Part of Apta-beacon Demonstration Kit Tube 1-4.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

aptamer-based target detection facilitated by a 3-stage g-quadruplex isothermal exponential amplification reaction

Аптамеры представляют собой молекулы распознавания мишеней, которые связываются с высоким сродством и специфичностью. Эти характеристики могут быть использованы для управления другими молекулами, способными генерировать сигналы. Для системы, описанной в настоящем описании, распознавание мишени через аптамерный домен, Stem II модифицированного рибозима молоткоголового типа, активирует саморасщепляющийся рибозим путем стабилизации первоначально неструктурированной конструкции. Цис-расщепляющая РНК действует на стыке Stem III и Stem I, создавая два продукта расщепления. Более длинное произведение расщепления запускает изотермическую реакцию экспоненциального усиления (EXPAR) двух подобных каталитически активных G-квадруплексов. Эти результирующие продукты амплификации катализируют восстановление пероксидазы, которое связано с восстановлением колориметрического субстрата с выходом, который может быть обнаружен невооруженным глазом. Система, состоящая из 3 частей, описанная в настоящем исследовании, улучшает методы обнаружения, такие как иммуноферментные анализы (ИФА), производя визуально обнаруживаемый сигнал, указывающий на присутствие всего 0,5 мкМ теофиллина всего за 15 минут.

Платформа обнаружения, изображенная на рисунке 1 , преобразует распознавание аптамерных мишеней в визуально отчетливые различия между препаратами образца (мишенью и немишенью, рис. 2) за короткий промежуток времени. Аллостерический рибозим, идентифицир?...

Watch this Scientific Journal Video about Aptamer-Based Target Detection Facilitated by a 3-Stage G-Quadruplex Isothermal Exponential Amplification Reaction at JoVE.com

Aptamer-Based Target Detection Facilitated by a 3-Stage G-Quadruplex Isothermal Exponential Amplification Reaction

Настоящий протокол демонстрирует использование быстрого 3-ступенчатого анализа экспоненциального усиления на основе аптамеров для обнаружения целей. Подготовка образцов, усиление сигнала и проявление цвета рассматриваются для реализации этой системы для распознавания присутствия теофиллина по сравнению с присутствием кофеина.

Обнаружение целей на основе аптамеров, чему способствует 3-ступенчатая G-квадруплексная изотермическая реакция экспоненциального усиления

Aptamers are target-recognition molecules that bind with high affinity and specificity. These characteristics can be leveraged to control other molecules ...

Этот метод предлагает способ усиления сигнала от событий связывания в форму, которая обнаруживается визуально при низком использовании ресурсов или может быть количественно определена с помощью приборов на основе поглощения. Это относительно быстрый протокол с одним горшком для определения присутствия мишени аптамера в интересующей выборке. Результаты могут быть сопоставлены со стандартной калибровочной кривой, если требуется количественная оценка.Люди должны быть очень аккуратными при переносе и смешивании растворов, так как недостаточное смешивание приведет к отрицательным результатам. Кроме того, следите за тем, чтобы реагенты и растворы оставались охлажденными до использования, чтобы свести к минимуму фоновый сигнал. Начните с активации продуктов расщепления рибозима путем добавления пяти единиц полинуклеотидкиназы Т4 в пробирку для ПЦР.Затем добавьте один микролитр предварительно подготовленного 5-кратного буфера рибозима в каждую пробирку для образцов. Чтобы визуально продемонстрировать специфичность, добавьте 1,5 микролитра двухмиллимолярного теофиллина или двух миллимоляров кофеина в каждую пробирку для образца в качестве исследуемых образцов и тщательно перемешайте каждый образец путем пипетки от пяти до 10 раз. Затем добавляют два микролитра 600 наномолярной РНК, содержащей целевой аптамерный домен, в каждую пробирку с образцом, а затем пипетируют для быстрого смешивания компонентов.Теперь поместите трубку на холодный блок, чтобы свести к минимуму фоновый сигнал. После подготовки всех реакционных пробирок инкубируйте каждый образец при комнатной температуре ровно три минуты. По окончании инкубации немедленно верните пробирки с образцом в лед.Добавьте 3,5 микролитра ферментной смеси никазполимеразы в каждую пробирку для образца и хорошо перемешайте. Затем добавьте 31,5 микролитра реакционной смеси EXPAR, содержащей матричные нуклеотиды и реакционный буфер, в каждую пробирку для образцов и перемешайте пипеткой. После того, как все образцы будут подготовлены, инкубируйте подготовленный образец при температуре 55 градусов Цельсия в течение пяти минут с помощью таймера.Сразу же верните пробирки с образцами в лед после инкубации. Добавьте два микролитра раствора гемина в каждую пробирку для образца для проявления цвета и хорошо перемешайте. Затем добавьте 58 микролитров коммерчески доступного раствора TMB в каждую пробирку с образцом, хорошо перемешайте и инкубируйте для проявления цвета.Качественно считайте образцы на глаз или количественно оцените результаты с помощью считывателя абсорбционных пластин, как описано в рукописи. Оптимизированная конструкция может распознавать всего 500 наномолярных теофиллинов за 30 минут. Препараты образцов, подвергшиеся воздействию мишени, дают синий цвет, в то время как образцы, не содержащие мишени, остаются бесцветными.Стандартная кривая была подготовлена из сигнала, измеренного на A450 после 30 минут проявления цвета. Важно держать образцы на льду, когда они не проводят инкубацию, так как даже оптимизированная РНК все равно будет демонстрировать низкий уровень фоновой активности.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biomolecular Detection employing the Interferometric Reflectance Imaging Sensor (IRIS)

Biomolecular Detection employing the Interferometric Reflectance Imaging Sensor IRIS

Биомолекулярных Обнаружение использованием интерферометрических датчиков изображения отражения (IRIS)

The sensitive measurement of biomolecular interactions has use in many fields and industries such as basic biology and microbiology, ...

Measurement of Aggregate Cohesion by Tissue Surface Tensiometry

Измерение Совокупный сплоченности по ткани Tensiometry поверхности

Rigorous measurement of intercellular binding energy can only be made using methods grounded in thermodynamic principles in systems at equilibrium.  We ...

Detection and Isolation of Circulating Melanoma Cells using Photoacoustic Flowmetry

Обнаружение и изоляция циркулирующих клеток меланомы использованием Фотоакустическая флоуметрии

Circulating tumor cells (CTCs) are those cells that have separated from a macroscopic tumor and spread through the blood and lymph systems to seed ...

Bacterial Detection &amp; Identification Using Electrochemical Sensors

Bacterial Detection & Identification Using Electrochemical Sensors

Бактериальные обнаружения и идентификации с использованием электрохимических датчиков

Electrochemical  sensors are widely used for rapid and accurate measurement of blood glucose and  can be adapted for detection of a wide variety of ...

Optical Detection of E. coli Bacteria by Mesoporous Silicon Biosensors

Optical Detection of E. coli Bacteria by Mesoporous Silicon Biosensors

Оптический Обнаружение<em&gt; Е. палочка</em&gt; Бактерии по Мезопористые Silicon биосенсоров

A label-free optical biosensor based on a nanostructured porous Si is designed for rapid capture and detection of Escherichia coli K12 bacteria, as a ...

Oscillation and Reaction Board Techniques for Estimating Inertial Properties of a Below-knee Prosthesis

Осцилляционные и реакция Совета методов оценки инерционных свойств в Ниже колена протезирования

The purpose of this study was two-fold: 1) demonstrate a technique that can be used to directly estimate the inertial properties of a below-knee ...

Detection of Exosomal Biomarker by Electric Field-induced Release and Measurement (EFIRM)

Detection of Exosomal Biomarker by Electric Field-induced Release and Measurement EFIRM

Обнаружение Exosomal Biomarker электрическим полем индуцированного выбросов и измерений (EFIRM)

Exosomes are microvesicular structures that play a mediating role in intercellular communication. It is of interest to study the internal cargo of ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Микрожидкостных Платформа с уплотненными электронным детектором для пространственного слежения частиц

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...

Visual Detection of Multiple Nucleic Acids in a Capillary Array

Визуального обнаружения нескольких нуклеиновых кислот в массиве капилляров

Multi-target, short time, and resource-affordable methodologies for the detection of multiple nucleic acids in a single, easy to operate test are urgently ...

Large-area Scanning Probe Nanolithography Facilitated by Automated Alignment and Its Application to Substrate Fabrication for Cell Culture Studies

Большая площадь сканирования зонд нанолитографию способствовало автоматического выравнивания и его применение для изготовления подложки для изучения культуры клеток