Name: synovial fluid analysis to identify osteoarthritis
Uploaded: 2022-10-20T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synovial Fluid Analysis to Identify Osteoarthritis at JoVE.com

يود المؤلفون أن يشكروا البروفيسور ليوناردو بونزي على إرشاده الثمين في مجال تحليل السائل الزليلي ومستشفى جامعة بادوفا لدعمه.

يتوافق البروتوكول الحالي مع المبادئ التوجيهية للجنة الأخلاقيات في مستشفى جامعة بادوفا. تم جمع SF بموافقة المريض من مفاصل الركبة للمرضى الذين يتلقون بزل المفصل العلاجي لانصباب المفاصل عند تقديمهم الأولي إلى العيادة أو استجابة لتوهج التهاب المفاصل. كانت موانع الإجراء: اعتلال التخثر ، الأد?...

<ol>
	<li>Cui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional+prevalence,+incidence+and+risk+factors+of+knee+osteoarthritis+in+population-based+studies.">Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies.</a> EClinicalMedicine. 29, 100587 (2020).</li><li>Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis.">Osteoarthritis.</a> Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).</li><li>Mandell, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , (2022).</li><li>Schmerling, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+initial+evaluation+of+the+adult+patient+with+acute+musculoskeletal+symptoms.">Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).</li><li>Coakley, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RCGP+and+BSAC+guidelines+for+management+of+the+hot+swollen+joint+in+adults.">RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults.</a> Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).</li><li>Frallonardo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+calcium+phosphate+and+pyrophosphate+crystals+in+early+and+late+osteoarthritis:+relationship+with+clinical+indices+and+inflammation.">Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation.</a> Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).</li><li>Nalbant, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+fluid+features+and+their+relations+to+osteoarthritis+severity:+new+findings+from+sequential+studies.">Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies.</a> Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).</li><li>Fuerst, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcification+of+articular+cartilage+in+human+osteoarthritis.">Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).</li><li>Campillo-Gimenez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+potential+of+four+different+phases+of+calcium+pyrophosphate+relies+on+NF-&#954;B+activation+and+MAPK+pathways.">Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-&#954;B activation and MAPK pathways.</a> Frontiers in Immunology. 9, 2248 (2018).</li><li>Paz&#225;r, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+calcium+phosphate+crystals+induce+monocyte/macrophage+IL-1&#946;+secretion+through+the+NLRP3+inflammasome+in+vitro.">Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1&#946; secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro.</a> The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).</li><li>Mart&#237;n, M. J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+cell+count+in+body+fluids:+a+review.">Automated cell count in body fluids: a review.</a> Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).</li><li>Seghezzi, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+cellular+analysis+of+synovial+fluids+by+optical+microscopy+and+automated+count+using+the+Sysmex+XN+body+fluid+mode.">Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode.</a> Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).</li><li>Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supravital+staining+of+synovial+fluid+with+Testsimplets.">Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets.</a> Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).</li><li>Lumbreras, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+for+crystals+in+synovial+fluid:+training+of+the+analysts+results+in+high+consistency.">Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency.</a> Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).</li><li>Tieng, A., Franchin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knee+arthrocentesis+in+adults.">Knee arthrocentesis in adults.</a> Journal of Visualized Experiments. , e63135 (2022).</li><li>Punzi, L., Oliviero, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arthrocentesis+and+synovial+fluid+analysis+in+clinical+practice:+value+of+sonography+in+difficult+cases.">Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).</li><li>Schumacher, H. R., Reginato, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , (1991).</li><li>Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detailed+protocol+for+characterizing+the+murine+C1498+cell+line+and+its+associated+leukemia+mouse+model.">Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (116), e54270 (2016).</li><li>Oliviero, F., Punzi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basics+of+Polarized+Light+Microscopy.">Basics of Polarized Light Microscopy.</a> Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , 79-90 (2022).</li><li>Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alizarin+red+S+staining+as+a+screening+test+to+detect+calcium+compounds+in+synovial+fluid.">Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).</li><li>Favero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+fluid+fetuin-A+levels+in+patients+affected+by+osteoarthritis+with+or+without+evidence+of+calcium+crystals.">Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals.</a> Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).</li><li>Frallonardo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+calcium+crystals+in+knee+osteoarthritis+synovial+fluid:+a+comparison+between+polarized+light+and+scanning+electron+microscopy.">Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy.</a> Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).</li><li>Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+analysis+of+synovial+fluid:+current+and+potential+uses+to+improve+clinical+outcomes.">Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes.</a> Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).</li></ol>

في الزراعة العضوية ، يساعد تحليل SF في تحديد خصائص المرض من خلال خطوات بسيطة: تعداد الكريات البيض الكلي والتفاضلي والبحث عن البلورات ، بما في ذلك CPP و BCP. علاوة على ذلك ، قد يسلط اكتشاف بلورات جامعة ولاية ميشيغان الضوء على الأمراض المصاحبة المهمة.
على الرغم من التكاليف المنخفض?...

هشاشة العظام (OA) هو مرض مزمن معقد ومتعدد العوامل في المفاصل ، مع انتشار عالمي مجمع يقدر ب 16٪ في الأشخاص الذين تتراوح أعمارهم بين 15 وما فوق ، و 23٪ في الأشخاص الذين تتراوح أعمارهم بين 40 وما فوق1. من المتوقع أن يزداد حدوث هشاشة العظام بسبب شيخوخة السكان وزيادة عوامل الخطر ، مثل السمنة ومتلازمة التمثيل الغذائي2.
من بين القضايا الرئيسية المرتبطة بهشاشة العظام صعوبة تشخيص المرض في مراحله المبكرة والعلاجات المتاحة حاليا التي تقتصر على إدارة الألم والأدوية بطيئة المفعول (SYSADOAs) مثل الجليكوزامينوجليكان. يعتمد تشخيص هشاشة العظام على الأعراض السريرية ونتائج التصوير. ومع ذلك ، فإن عدم وجود علاقة بين التقييمين يمكن أن يسبب سنوات من التأخير في تشخيص هشاشة العظام وبدء العلاج2. يتميز الزراعة العضوية بالعمليات التنكسية والالتهابات منخفضة الدرجة ، والتي يمكن التحقيق فيها بسهولة عن طريق تحليل السائل الزليلي (SF). SF عبارة عن غسيل بلازمي لزج غني بحمض الهيالورونيك ، الذي يشحم مساحة المفصل ، ويوفر العناصر الغذائية والأكسجين للغضروف ، ويزيل النفايات الأيضية. يعمل SF أيضا كممتص للصدمات ، وبالتالي يحمي المفاصل أثناء الإجهاد والإجهاد3.
تحليل SF هو طريقة بسيطة وموثوقة يجب إجراؤها دائما أثناء التقييم الأولي للمرضى الذين يعانون من أعراض الجهاز العضلي الهيكلي وانصباب المفاصل3. تشمل التوصيات الصادرة عن الكلية الأمريكية لأمراض الروماتيزم والجمعية البريطانية لأمراض الروماتيزم وغيرها تحليل SF بين الاختبارات التشخيصية للأمراض الروماتيزمية التي يجب إجراؤها بشكل أساسي في تقييم التهاب المفاصل الأحادي الحاد 4,5. توفر أعداد الكريات البيض الكلية والتفاضلية التي تم الحصول عليها من تحليل SF لقطة للعملية المرضية التي تحدث في المفصل ، وبالتالي تصنيف درجة الالتهاب. يعد تحديد البلورات المسببة للأمراض ، مثل بلورات اليورات أحادية الصوديوم (MSU) وبيروفوسفات الكالسيوم (CPP) ، تحت الضوء المستقطب ، أمرا حيويا في تشخيص وعلاج التهاب المفاصل البلوري (مثل النقرس والنقرس الكاذب). علاوة على ذلك ، يشير وجود الكائنات الحية الدقيقة إلى تشخيص التهاب المفاصل الإنتاني.
بلورات الكالسيوم متكررة في العينات التي تم جمعها من المرضى الذين يعانون من OA6. تم الإبلاغ عن بلورات فوسفات الكالسيوم الأساسية (BCP) و CPP في حوالي 22٪ و 23٪ من عينات SF ، على التوالي ، من المرضى الذين يعانون من OA6. على الرغم من أن دورها لا يزال غير واضح ، فقد ارتبطت هذه البلورات بأشكال أكثر حدة من OA7 وتعتبر ظاهرة عرضية للعملية المرضية نفسها. تم الكشف عن بلورات الكالسيوم في 100٪ من عينات الأنسجة من مرضى الزراعة العضوية الذين يخضعون لاستبدال الركبة8. علاوة على ذلك ، تم افتراض أن بلورات الكالسيوم قد تكون متورطة في التسبب في هشاشة العظام بسبب آثارها الالتهابية ، والتي أظهرتها العديد من الدراسات9 وتوسطت ، جزئيا على الأقل ، التهاب NLRP310.
في الآونة الأخيرة ، تم وصف بلورات الكالسيوم في كل من المراحل المبكرةوالمتأخرة 6 من الزراعة العضوية ، مما يشير إلى أنها قد تلعب دورا حيويا في تشخيص مجموعات فرعية سريرية مختلفة من الزراعة العضوية والعلاج الدوائي.
الهدف العام من تحليل SF ذو شقين: تحديد درجة التهاب SF وتشخيص التهاب المفاصل البلوري أو الإنتاني عن طريق تحديد بلورات أو كائنات دقيقة معينة. إنها أداة مفيدة وبسيطة وموثوقة بشكل خاص في تشخيص هشاشة العظام ، بسبب النمط غير الالتهابي النموذجي مع نسبة منخفضة جدا أو غياب العدلات.
مزايا على التقنيات البديلة يتكون تحليل SF من إجراءات بسيطة تشمل تعداد الكريات البيض الكلي والتفاضلي والبحث البلوري. لا يزال العد اليدوي للخلايا الذي يقوم به فنيو المختبراتالخبراء 3,11 هو المعيار الذهبي للتحليل الخلوي للسوائل الزليلية وسوائل الجسم الأخرى. ومع ذلك ، نظرا للقيود التي تستغرق وقتا طويلا والتباين بين المراقبين وأثناءهم لهذه الطريقة ، حلت عدادات الخلايا الآلية تدريجيا محل العد اليدوي في المختبرات السريرية الروتينية الكبيرة حيث تم تكييف أجهزة تحليل الدم والبول لتمكين تحليل SF11,12. ومع ذلك ، يقدم العد اليدوي بعض المزايا في إعدادات محددة: (1) في الإسعافية ، للحصول على قيمة WBC الإجمالية والتفاضلية في الوقت المحدد ؛ (2) لتحديد أنواع الخلايا مثل الخلايا أحادية النواة الخلوية (Reiter) أو الخلايا غير المكونة للدم مثل الخلايا الزليلية ، التي لا تستطيع العدادات الآلية التعرف عليها ؛ (3) عندما تكون العينة صغيرة جدا بحيث لا يمكن معالجتها بواسطة الأداة ؛ (4) إنشاء سجلات مختبرية محلية يسهل الوصول إليها لأغراض البحث. ميزة أخرى للعد اليدوي هي تلطيخ inupravital ، وهي طريقة تسمح بتمايز الخلايا بسرعة كبيرة ومباشرة بعد إعداد الشريحة الزجاجية. على النقيض من ذلك ، تتطلب البقع التقليدية ، مثل إجراءات رايت وماي-جرونوالد-جيمسا ، مسحات SF المجففة بالهواء ووقتا لتلطيخ الخلايا13. على الرغم من أنها غير مناسبة للتحليلات الروتينية الحساسة للوقت ، إلا أن طرق التلوين هذه تكشف عن مجموعات خلايا أكثر تفصيلا في العينة ، بما في ذلك كريات الدم الحمراء ، والخلايا القاعدية ، والحمضات ، والكريات البيض متعددة الأشكال النووية ، والخلايا الليمفاوية ، والصفائح الدموية.
أخيرا ، يتم إجراء تحليل SF الروتيني للبلورات باستخدام تقنية بسيطة تعتمد على المجهر الضوئي المستقطب ، والتي توفر نتائج سريعة14. تسفر الطرق البديلة ، مثل المسح والمجهر الإلكتروني ، عن نتائج أكثر دقة وحساسية ، لكن استخدامها في الممارسة السريرية اليومية غير ممكن بسبب ارتفاع التكاليف وإعداد العينات وتحليلها الذي يستغرق وقتا طويلا.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alizarin red S</td>
			<td>Merck</td>
			<td>A5533</td>
			<td>For BCP crystal search</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Burker chamber</td>
			<td>Merck</td>
			<td>BR718905</td>
			<td>For total white blood cell count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glasses</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C7931</td>
			<td>For microscopic examination&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA tubes</td>
			<td>BD</td>
			<td>368861</td>
			<td>For SF collection&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides&#160;</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S8902</td>
			<td>For crystal search</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambda filter (compensator)</td>
			<td>Any&#160;</td>
			<td>Refer to microscope company</td>
			<td>For crystal identification&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Malassez-Potain pipette</td>
			<td>Artiglass</td>
			<td>54830000</td>
			<td>For dilution of synovial fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene blue solution</td>
			<td>Merck</td>
			<td>3978</td>
			<td>For total white blood cell count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polarized microscope&#160;</td>
			<td>Leica, Nikon, others</td>
			<td>Depending on the model and company</td>
			<td>For complete synovial fluid analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polarizing lens</td>
			<td>Any&#160;</td>
			<td>Refer to microscope company</td>
			<td>For crystal identification&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Testsimplet&#160;</td>
			<td>Waldeck</td>
			<td>14386</td>
			<td>Supravital staining for cell differentiation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synovial fluid analysis to identify osteoarthritis

تحليل السائل الزليلي (SF) مهم في تشخيص هشاشة العظام (OA). تساعد الميزات العيانية والمجهرية ، بما في ذلك عدد خلايا الدم البيضاء الكلية والتفاضلية (WBC) ، في تحديد الطبيعة غير الالتهابية ل SF ، والتي تعد سمة مميزة ل OA. في المرضى الذين يعانون من هشاشة العظام ، لا يتجاوز WBC في عينات SF عادة 2000 خلية لكل ميكرولتر ، والنسبة المئوية للخلايا الالتهابية ، مثل العدلات ، منخفضة جدا أو غائبة. بلورات الكالسيوم متكررة في SF التي تم جمعها من مرضى الزراعة العضوية. على الرغم من أن دورها في التسبب في هشاشة العظام لا يزال غير واضح ، فقد ارتبطت بعملية التهابية خفيفة وتطور مرض أكثر حدة. في الآونة الأخيرة ، تم وصف بلورات الكالسيوم في كل من المراحل المبكرة والمتأخرة من الزراعة العضوية ، مما يشير إلى أنها قد تلعب دورا حيويا في تشخيص مجموعات فرعية سريرية مختلفة من الزراعة العضوية والعلاج الدوائي. الهدف العام من تحليل SF في الزراعة العضوية ذو شقين: التأكد من الدرجة غير الالتهابية ل SF وتسليط الضوء على وجود بلورات الكالسيوم.

غالبا ما تتورم المفاصل الكبيرة المتأثرة بهشاشة العظام وتنتج كميات كبيرة من SF ، والتي يتم تصريفها عن طريق بزل المفصل15. تشمل الخصائص العيانية ل SF التي تم تقييمها مباشرة بعد بزل المفصل بشكل أساسي الكمية واللون والوضوح واللزوجة17. على الرغم من خصوصيتها المنخفضة ?...

Watch this Scientific Journal Video about Synovial Fluid Analysis to Identify Osteoarthritis at JoVE.com

Synovial Fluid Analysis to Identify Osteoarthritis

يستخدم تحليل السائل الزليلي تحت المجهر الضوئي المرسل والمستقطب والمعوض لتقييم الطبيعة الالتهابية أو غير الالتهابية للعينة من خلال خطوات بسيطة. من المفيد بشكل خاص في هشاشة العظام الكشف عن بلورات الكالسيوم وتحديد مجموعة فرعية أكثر حدة من هشاشة العظام.

تحليل السائل الزليلي لتحديد هشاشة العظام

Synovial fluid (SF) analysis is important in diagnosing osteoarthritis (OA). Macroscopic and microscopic features, including total and differential white ...

يمكن أن يكشف تحليل السائل الزليلي عن درجة الالتهاب ووجود بلورات مسببة للأمراض أثناء التقييم الأولي للمريض الذي يعاني من أعراض الجهاز العضلي الهيكلي وانصباب المفاصل. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي بساطتها وموثوقيتها. في بضع خطوات ، يمكن للطبيب الحصول على معلومات تشخيصية مهمة عن مرض المريض.يعد تحديد بلورات معينة أمرا حيويا للتشخيص والعلاج. تشير بلورات اليورات إلى النقرس ، بينما يشير بيروفوسفات الكالسيوم وبلورات الكالسيوم الأخرى إلى اعتلال المفاصل المرتبط بالكالسيوم أو شكل أكثر حدة من هشاشة العظام. للبدء ، خذ عينة السائل الزليلي التي تم جمعها أثناء بزل المفصل للمفاصل المتورمة للمرضى.على حجم العينة بالملليلتر وانقلها بشكل منفصل إلى أنبوب يحتوي على مضاد للتخثر EDTA وأنبوب آخر بدون أي مادة مضافة. في الحالات المشتبه بها من العدوى ، قم بنقل بضعة ملليلتر من عينة السائل الزليلي إلى زجاجة مزرعة للاختبار الميكروبيولوجي. لفحص العينة مجهريا ، خذ أنبوبا يحتوي على العينة وحدد لون العينة ، والذي يمكن أن يتراوح من شاحب إلى أصفر غامق.سجل وجود الدم ، إن وجد. تحديد درجة وضوح العينة من خلال مراقبتها في الإضاءة الخلفية وتحديد سهولة قراءة صفحة مطبوعة من خلال الأنبوب الذي يحتوي على العينة. ثم قم بتقييم لزوجة العينة عن طريق تقطيرها من ماصة يمكن التخلص منها.في حين أن ظهور سلسلة طويلة من السائل يشير إلى لزوجة عالية ، فإن تكوين قطرات يدل على انخفاض اللزوجة. راقب العينة من خلال الأنبوب مع وجود ضوء في الخلفية لوجود أي مواد جسيمية بما في ذلك شظايا الأنسجة أو الفيبرين. لتحديد إجمالي عدد خلايا الدم البيضاء ، اسحب 0.5 ميكرولتر من العينة من الأنبوب الذي يحتوي على EDTAA باستخدام ماصة Malassez-Potain.استخدم نفس الماصة لرسم 9.5 ميكرولتر من محلول الميثيلين الأزرق 0.1٪. امزج العينة ومحلول الميثيلين الأزرق في الماصة عن طريق الانعكاس اللطيف. تخلص من القطرات القليلة الأولى قبل صب الخليط في غرفة العد في مقياس الدم.الآن عد الخلايا في مربعين متتاليين من أصل تسعة واضرب الرقم الذي تم الحصول عليه في 100. عبر عن إجمالي عدد خلايا الدم البيضاء على أنه عدد كريات الدم البيضاء لكل ملليمتر مكعب. استخدم عينة السائل الزليلي من الأنبوب بدون أي مادة مضافة لتحديد عدد خلايا الدم البيضاء التفاضلية لعينات السائل الزليلي.لتحديد عدد الخلايا التفاضلية باستخدام تلطيخ فوق حيوي ، خذ شريحة جاهزة للاستخدام مطلية مسبقا باللون البنفسجي البلوري والأزرق الميثيلين وضع قطرة صغيرة واحدة من العينة في وسط الشريحة. بعد ذلك ، قم بتغطية قطرة العينة بغطاء وضع قطرة من زيت الغمر المجهري على قسيمة الغطاء. لاستخدام التلوين التقليدي لتقدير عدد الخلايا التفاضلية ، ابدأ بوضع قطرة صغيرة من العينة في نهاية شريحة نظيفة.الآن استخدم شريحة ثانية أو غطاء لنشر القطرة على طول الشريحة بحركة أمامية. دع اللطاخة تجف في الهواء. افحص الشريحة التي تحتوي على اللطاخة المجففة بالهواء تحت هدف غمر الزيت 1،000X.قدر عدد الخلايا التفاضلية عن طريق عد 100 خلية متتالية مع تمييز الخلايا متعددة الأشكال النووية والوحيدات والخلايا الليمفاوية عن بعضها البعض. قم بتنظيف شريحة زجاجية بورق بصري أو ناعم مشرب بالإيثانول. ضع قطرة صغيرة من العينة غير مختلطة مع أي مادة مضافة على الشريحة الزجاجية وقم بتغطيتها بغطاء قبل وضع الشريحة تحت المجهر.ركز الشريحة تحت المجهر باستخدام هدف تكبير منخفض الطاقة وافحصها بعناية تحت مجال ساطع بهدف 40X. انظر داخل الخلايا وخارجها لتحديد البلورات وفقا لحجمها وشكلها ، والتي قد تكون معينية أو على شكل إبرة أو على شكل قضيب. ثم أدخل مرشح الاستقطاب بين مصدر الضوء والعينة.لإنشاء خلفية داكنة ، قم بتدوير المستقطب حتى يصبح محوره البصري عموديا على المحلل. بمجرد تحديد بلورة ثنائية الانكسار ، أدخل المعوض بين المستقطب والعينة وحركه موازيا أو عموديا على المحور الأصلي للبلورة. مراقبة اللون الذي كشفت عنه البلورة.بالنسبة لتلطيخ Alizarin Red ، امزج قطرة من عينة السائل الزليلي مع حجم متساو من محلول Alizarin Red المعد مسبقا على شريحة نظيفة. قم بتغطية الشريحة بغطاء وافحصها عند تكبير 400X تحت المجهر لتحديد البلورات. تشير الخصائص العيانية لعينات السائل الزليلي إلى درجة الالتهاب.ترتبط العينة ذات اللون الأصفر الباهت والمزيد من الوضوح بشكل عام بالحالات غير الالتهابية مثل هشاشة العظام. من ناحية أخرى ، تشير العينة ذات اللون الأصفر الداكن والمظهر العكر إلى وجود خلايا وحطام وحمض الهيالورونيك وشظايا الفيبرين المرتبطة بالانصباب الالتهابي. كانت الكريات البيض التي لوحظت في عينات السائل الزليلي من مرضى هشاشة العظام في الغالب وحيدات وخلايا أحادية النواة أخرى مثل الخلايا الزليلية.تم الكشف عن بلورات بيروفوسفات الكالسيوم في عينات السائل الزليلي مما يشير إلى مستويات أعلى نسبيا من السيتوكينات الالتهابية. علاوة على ذلك ، كشف تلطيخ Alizarin Red الإيجابي عن وجود بلورات فوسفات الكالسيوم الأساسية في العينات. من المهم جدا فحص الشريحة بعناية تحت الضوء العادي عند البحث عن البلورات.تذكر أن بلورات البيروفوسفات غالبا ما تكون ثنائية الانكسار ضعيفة ويمكن تفويتها تحت الضوء المستقطب. أدى وجود بلورات الكالسيوم في السائل الزليلي وارتباطها بشكل أكثر حدة من المرض إلى قيام الباحثين باستكشاف آليات جديدة في التسبب في المرض وتطور هشاشة العظام.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

العزلة والخلوية Phenotyping من الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع الزلالية السائل والعظام من Minipigs

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cell Subsets within the Murine Spleen, Bone Marrow, Lymph Nodes and Synovial Tissue in an Osteoarthritis Model

تحليل تدفق الخلايا الخلوية من المجموعات الفرعية الخلية المناعية داخل الطحال مورين, نخاع العظام, الغدد الليمفاوية والأنسجة الزليلي في نموذج هشاشة العظام

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent ...

Evaluation of Fluid Overload by Bioelectrical Impedance Vectorial Analysis

تقييم الحمل الزائد للسوائل عن طريق التحليل المتجه للمقاومة الكهربائية الحيوية

Early detection and management of fluid overload are critically important in acute illness, as the impact of therapeutic intervention can result in ...

Ameliorating Osteoarthritis in Mice Using Silver Nanoparticles

تحسين هشاشة العظام في الفئران باستخدام جسيمات الفضة النانوية

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most commonly encountered degenerative diseases of the joints in people over 45 years of age. Currently, there are ...

Standardized Tuina Manipulation for Knee Osteoarthritis in Rats

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Understanding the Mechanism of Tuina Manipulation in Rats (Video) | JoVE

التلاعب Tuina للحد من الالتهاب وفقدان الغضروف في الفئران هشاشة العظام في الركبة

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...

Performing Fu's Subcutaneous Needling for Degenerative Knee Osteoarthritis

Performing Fu's Subcutaneous Needling for Degenerative Knee Osteoarthritis (Video) | JoVE 

أداء الوخز بالإبر تحت الجلد فو لالتهاب المفاصل التنكسي في الركبة

Treating Knee Osteoarthritis with Tuina in a Rabbit Model

Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis

Using a Rabbit Model to Explore the Efficacy of Tuina in Treating Knee Osteoarthritis (Video) | JoVE

تدخل Tuina في نموذج أرنب لالتهاب المفاصل في الركبة

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of ...

Experimental Modeling of Knee Osteoarthritis in Rats

Experimental Modeling of Knee Osteoarthritis in Rats (Video) | JoVE 

النمذجة التجريبية لالتهاب المفاصل في الركبة في الفئران

A Reproducible Cartilage Impact Model to Generate Post-Traumatic Osteoarthritis in the Rabbit

نموذج تأثير الغضروف القابل للتكرار لتوليد هشاشة العظام بعد الصدمة في الأرنب

Post-traumatic osteoarthritis (PTOA) is responsible for 12% of all osteoarthritis cases in the United States. PTOA can be initiated by a single traumatic ...

Therapeutic Potential of Tuina Massage for Knee Osteoarthritis

Tuina Intervention in Sodium Monoiodoacetate Injection-Induced Rat Model of Knee Osteoarthritis

Treating Knee Osteoarthritis with Tuina - A New Perspective (Video) | JoVE

تدخل Tuina في نموذج الفئران الناجم عن حقن أحادي يودوأسيتات الصوديوم لالتهاب المفاصل في الركبة

Knee osteoarthritis (KOA), a common degenerative joint disorder, is characterized by chronic pain and disability, which can progress to irreparable ...