Name: synovial fluid analysis to identify osteoarthritis
Uploaded: 2022-10-20T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synovial Fluid Analysis to Identify Osteoarthritis at JoVE.com

Авторы выражают благодарность профессору Леонардо Пунци за его ценное наставничество в области анализа синовиальной жидкости и Университетской больнице Падуи за поддержку.

Настоящий протокол соответствует руководящим принципам Комитета по этике Университетской больницы Падуи. СФ собирали с согласия пациента из коленных суставов пациентов, получавших терапевтический артроцентез по поводу выпота в суставах при их первичном обращении в клинику или в отв...

<ol>
	<li>Cui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional+prevalence,+incidence+and+risk+factors+of+knee+osteoarthritis+in+population-based+studies.">Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies.</a> EClinicalMedicine. 29, 100587 (2020).</li><li>Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis.">Osteoarthritis.</a> Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).</li><li>Mandell, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , (2022).</li><li>Schmerling, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+initial+evaluation+of+the+adult+patient+with+acute+musculoskeletal+symptoms.">Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).</li><li>Coakley, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RCGP+and+BSAC+guidelines+for+management+of+the+hot+swollen+joint+in+adults.">RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults.</a> Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).</li><li>Frallonardo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+calcium+phosphate+and+pyrophosphate+crystals+in+early+and+late+osteoarthritis:+relationship+with+clinical+indices+and+inflammation.">Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation.</a> Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).</li><li>Nalbant, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+fluid+features+and+their+relations+to+osteoarthritis+severity:+new+findings+from+sequential+studies.">Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies.</a> Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).</li><li>Fuerst, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcification+of+articular+cartilage+in+human+osteoarthritis.">Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).</li><li>Campillo-Gimenez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+potential+of+four+different+phases+of+calcium+pyrophosphate+relies+on+NF-&#954;B+activation+and+MAPK+pathways.">Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-&#954;B activation and MAPK pathways.</a> Frontiers in Immunology. 9, 2248 (2018).</li><li>Paz&#225;r, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+calcium+phosphate+crystals+induce+monocyte/macrophage+IL-1&#946;+secretion+through+the+NLRP3+inflammasome+in+vitro.">Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1&#946; secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro.</a> The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).</li><li>Mart&#237;n, M. J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+cell+count+in+body+fluids:+a+review.">Automated cell count in body fluids: a review.</a> Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).</li><li>Seghezzi, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+cellular+analysis+of+synovial+fluids+by+optical+microscopy+and+automated+count+using+the+Sysmex+XN+body+fluid+mode.">Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode.</a> Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).</li><li>Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supravital+staining+of+synovial+fluid+with+Testsimplets.">Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets.</a> Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).</li><li>Lumbreras, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+for+crystals+in+synovial+fluid:+training+of+the+analysts+results+in+high+consistency.">Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency.</a> Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).</li><li>Tieng, A., Franchin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knee+arthrocentesis+in+adults.">Knee arthrocentesis in adults.</a> Journal of Visualized Experiments. , e63135 (2022).</li><li>Punzi, L., Oliviero, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arthrocentesis+and+synovial+fluid+analysis+in+clinical+practice:+value+of+sonography+in+difficult+cases.">Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).</li><li>Schumacher, H. R., Reginato, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , (1991).</li><li>Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detailed+protocol+for+characterizing+the+murine+C1498+cell+line+and+its+associated+leukemia+mouse+model.">Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (116), e54270 (2016).</li><li>Oliviero, F., Punzi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basics+of+Polarized+Light+Microscopy.">Basics of Polarized Light Microscopy.</a> Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , 79-90 (2022).</li><li>Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alizarin+red+S+staining+as+a+screening+test+to+detect+calcium+compounds+in+synovial+fluid.">Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).</li><li>Favero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+fluid+fetuin-A+levels+in+patients+affected+by+osteoarthritis+with+or+without+evidence+of+calcium+crystals.">Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals.</a> Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).</li><li>Frallonardo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+calcium+crystals+in+knee+osteoarthritis+synovial+fluid:+a+comparison+between+polarized+light+and+scanning+electron+microscopy.">Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy.</a> Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).</li><li>Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+analysis+of+synovial+fluid:+current+and+potential+uses+to+improve+clinical+outcomes.">Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes.</a> Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).</li></ol>

При ОА SF-анализ помогает определить характеристики заболевания с помощью простых шагов: общего и дифференциального количества лейкоцитов и поиска кристаллов, включая CPP и BCP. Кроме того, обнаружение кристаллов МГУ может выявить важные сопутствующие заболевания.
Несмотр?...

Остеоартрит (ОА) является сложным и многофакторным хроническим заболеванием суставов, общая распространенность которого, по оценкам, составляет 16% у пациентов в возрасте 15 лет и старше и 23% у пациентов в возрасте 40 лет и старше1 года. Ожидается, что заболеваемость ОА увеличится из-за старения населения и увеличения факторов риска, таких как ожирение и метаболический синдром2.
Среди основных проблем, связанных с ОА, - сложность диагностики заболевания на ранних стадиях и доступные в настоящее время методы лечения, ограниченные обезболиванием и симптоматическими препаратами медленного действия (SYSADOA), такими как гликозаминогликаны. Диагноз ОА основывается на клинических симптомах и результатах визуализации. Однако отсутствие корреляции между этими двумя оценками может привести к многолетней задержке постановки диагноза ОА и начала лечения2. ОА характеризуется дегенеративными процессами и вялотекущим воспалением, которые можно легко исследовать с помощью анализа синовиальной жидкости (СФ). SF - это вязкий плазматический диализат, богатый гиалуроновой кислотой, который смазывает суставную щель, обеспечивает хрящ питательными веществами и кислородом, а также удаляет метаболические отходы. SF также действует как амортизатор, тем самым защищая суставы во время напряжения и деформации3.
Анализ SF является простым и надежным методом, который всегда должен выполняться во время первичной оценки пациентов с симптомами опорно-двигательного аппарата и выпотом в суставах3. Рекомендации Американского колледжа ревматологии, Британского общества ревматологии и других включают SF-анализ в число диагностических тестов на ревматические заболевания, которые необходимо проводить в основном при оценке острого моноартрита 4,5. Общее и дифференциальное количество лейкоцитов, полученное при анализе SF, дает представление о патологическом процессе, происходящем в суставе, тем самым классифицируя степень воспаления. Идентификация патогенных кристаллов, таких как кристаллы мононатриевого урата (MSU) и пирофосфата кальция (CPP), в поляризованном свете, имеет жизненно важное значение для диагностики и лечения кристаллического артрита (например, подагры и псевдоподагры). Кроме того, наличие микроорганизмов предполагает диагноз септического артрита.
Кристаллы кальция часто встречаются в образцах, взятых у пациентов с ОА6. Основные кристаллы фосфата кальция (BCP) и CPP были зарегистрированы примерно в 22% и 23% образцов SF, соответственно, у пациентов с ОА6. Хотя их роль остается неясной, эти кристаллы были связаны с более тяжелыми формами ОА7 и считаются эпифеноменом самого патологического процесса. Кристаллы кальция были обнаружены в 100% образцов тканей пациентов с ОА, перенесших замену коленного сустава8. Кроме того, была выдвинута гипотеза о том, что кристаллы кальция могут быть вовлечены в патогенез ОА из-за их воспалительных эффектов, продемонстрированных несколькими исследованиями9 и опосредованных, по крайней мере частично, воспалением NLRP310.
Совсем недавно кристаллы кальция были описаны как на ранних, так и на поздних стадиях6 ОА, что указывает на то, что они могут играть жизненно важную роль в диагностике различных клинических подмножеств ОА и фармакологического лечения.
Общая цель анализа SF двоякая: определить степень воспаления SF и диагностировать кристаллический или септический артрит путем идентификации конкретных кристаллов или микроорганизмов. Это особенно полезный, простой и надежный инструмент в диагностике ОА из-за типичного невоспалительного паттерна с очень низким процентом или отсутствием нейтрофилов.
Преимущества перед альтернативными методами SF-анализ состоит из простых процедур, которые включают общее и дифференциальное количество лейкоцитов и поиск кристаллов. Ручной подсчет клеток, выполняемый опытными лаборантами 3,11, остается золотым стандартом цитологического анализа синовиальных и других жидкостей организма. Однако из-за ограниченности, занимающей много времени, а также изменяемости этого метода между и внутри наблюдателя автоматические счетчики клеток постепенно заменили ручной подсчет в крупных рутинных клинических лабораториях, где анализаторы крови и мочи были адаптированы для проведения анализа SF11,12. Тем не менее, ручной подсчет дает некоторые преимущества в определенных условиях: (1) в амбулаторных условиях, чтобы вовремя получить общее и дифференциальное значение лейкоцитов; (2) для идентификации типов клеток, таких как цитофагоцитарные мононуклеарные (Reiter) клетки или негемопоэтические клетки, такие как синовиоциты, которые автоматические счетчики не могут распознать; (3) когда образец слишком мал для обработки прибором; (4) создание местных лабораторных реестров, которые легко доступны для исследовательских целей. Еще одним преимуществом ручного подсчета является обескровленное окрашивание, метод, который позволяет дифференцировать клетки очень быстро и сразу после подготовки предметного стекла. Напротив, традиционные окрашивания, такие как процедуры Райта и Майя-Грюнвальда-Гимзы, требуют высушенных на воздухе мазков SF и времени для окрашивания клеток13. Несмотря на то, что эти методы окрашивания не подходят для чувствительных ко времени рутинных анализов, они выявляют более подробные клеточные популяции в образце, включая эритроциты, базофилы, эозинофилы, полиморфноядерные лейкоциты, лимфоциты и тромбоциты.
Наконец, рутинный SF-анализ кристаллов выполняется с использованием простой методики, основанной на поляризованной световой микроскопии, которая обеспечивает быстрые результаты14. Альтернативные методы, такие как сканирование и электронная микроскопия, дают более точные и чувствительные результаты, но их использование в повседневной клинической практике нецелесообразно из-за высокой стоимости и трудоемкой подготовки и анализа образцов.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alizarin red S</td>
			<td>Merck</td>
			<td>A5533</td>
			<td>For BCP crystal search</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Burker chamber</td>
			<td>Merck</td>
			<td>BR718905</td>
			<td>For total white blood cell count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glasses</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C7931</td>
			<td>For microscopic examination&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA tubes</td>
			<td>BD</td>
			<td>368861</td>
			<td>For SF collection&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides&#160;</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S8902</td>
			<td>For crystal search</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambda filter (compensator)</td>
			<td>Any&#160;</td>
			<td>Refer to microscope company</td>
			<td>For crystal identification&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Malassez-Potain pipette</td>
			<td>Artiglass</td>
			<td>54830000</td>
			<td>For dilution of synovial fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene blue solution</td>
			<td>Merck</td>
			<td>3978</td>
			<td>For total white blood cell count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polarized microscope&#160;</td>
			<td>Leica, Nikon, others</td>
			<td>Depending on the model and company</td>
			<td>For complete synovial fluid analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polarizing lens</td>
			<td>Any&#160;</td>
			<td>Refer to microscope company</td>
			<td>For crystal identification&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Testsimplet&#160;</td>
			<td>Waldeck</td>
			<td>14386</td>
			<td>Supravital staining for cell differentiation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synovial fluid analysis to identify osteoarthritis

Анализ синовиальной жидкости (СФ) важен для диагностики остеоартрита (ОА). Макроскопические и микроскопические признаки, включая общее и дифференциальное количество лейкоцитов (WBC), помогают определить невоспалительную природу SF, которая является отличительной чертой ОА. У пациентов с ОА лейкоциты в образцах СФ обычно не превышают 2000 клеток на микролитр, а процент воспалительных клеток, таких как нейтрофилы, очень низок или отсутствует. Кристаллы кальция часто встречаются в СФ, собранных у пациентов с ОА. Хотя их роль в патогенезе ОА остается неясной, они были связаны с легким воспалительным процессом и более тяжелым прогрессированием заболевания. В последнее время кристаллы кальция были описаны как на ранних, так и на поздних стадиях ОА, что указывает на то, что они могут играть жизненно важную роль в диагностике различных клинических подмножеств ОА и фармакологического лечения. Общая цель анализа СФ при ОА двоякая: установить невоспалительную степень СФ и выделить присутствие кристаллов кальция.

Крупные суставы, пораженные ОА, часто опухают и производят значительное количество SF, которые дренируются с помощью артроцентеза15. Макроскопические характеристики SF, оцениваемые сразу после артроцентеза, по существу включают количество, цвет, прозрачность и вязкост?...

Watch this Scientific Journal Video about Synovial Fluid Analysis to Identify Osteoarthritis at JoVE.com

Synovial Fluid Analysis to Identify Osteoarthritis

Анализ синовиальной жидкости при проходящей, поляризованной и компенсированной световой микроскопии используется для оценки воспалительной или невоспалительной природы образца с помощью простых шагов. Это особенно полезно при остеоартрите для обнаружения кристаллов кальция и выявления более тяжелой подгруппы остеоартрита.

Анализ синовиальной жидкости для выявления остеоартроза

Synovial fluid (SF) analysis is important in diagnosing osteoarthritis (OA). Macroscopic and microscopic features, including total and differential white ...

Анализ синовиальной жидкости может выявить степень воспаления и наличие патогенных кристаллов при первоначальном обследовании пациента с симптомами опорно-двигательного аппарата и выпотом в суставах. Главным преимуществом данной методики является ее простота и надежность. За несколько шагов клиницист может получить важную диагностическую информацию о заболевании пациента.Идентификация конкретных кристаллов имеет жизненно важное значение для диагностики и лечения. Кристаллы уратов указывают на подагру, тогда как пирофосфат кальция и другие кристаллы кальция указывают на артропатии, связанные с кальцием, или более тяжелую форму остеоартрита. Для начала берут образец синовиальной жидкости, собранный при артроцентезе опухших суставов пациентов.Аннотируйте объем образца в миллилитрах и перенесите его отдельно в пробирку, содержащую антикоагулянт ЭДТА, и еще одну пробирку без каких-либо добавок. При подозрении на инфекцию асептически перенесите несколько миллилитров образца синовиальной жидкости в культуральную бутылку для микробиологического тестирования. Чтобы исследовать образец макроскопически, возьмите пробирку с образцом и определите цвет образца, который может варьироваться от бледного до темно-желтого.Запишите наличие крови, если таковая имеется. Определите степень четкости образца, наблюдая за ним в контровом свете и определяя легкость чтения печатной страницы через трубку, содержащую образец. Затем оцените вязкость образца, капнув его из одноразовой пипетки.В то время как появление длинной нити жидкости указывает на высокую вязкость, образование капель свидетельствует о низкой вязкости. Наблюдайте за образцом через пробирку со светом на заднем плане на наличие любых твердых частиц, включая фрагменты тканей или фибрин. Чтобы определить общее количество лейкоцитов, возьмите 0,5 микролитра образца из пробирки, содержащей ЭДТАА, с помощью пипетки Malassez-Potain.Используйте ту же пипетку, чтобы набрать 9,5 микролитров 0,1% раствора метиленового синего. Смешайте образец и раствор метиленового синего в пипетке путем легкой инверсии. Выбросьте первые несколько капель перед тем, как вылить смесь в счетную камеру гемоцитометра.Теперь посчитайте ячейки в двух последовательных квадратах из девяти и умножьте полученное число на 100. Выразите общее количество лейкоцитов как количество лейкоцитов на кубический миллиметр. Используйте образец синовиальной жидкости из пробирки без каких-либо добавок для определения дифференциального количества лейкоцитов в образцах синовиальной жидкости.Чтобы определить дифференциальное количество клеток с помощью супривитального окрашивания, возьмите готовое к использованию предметное стекло, предварительно покрытое кристаллическим фиолетовым и метиленовым синим, и поместите одну небольшую каплю образца в центр предметного стекла. Затем накройте каплю образца покровным стеклом и поместите каплю иммерсионного масла для микроскопа на покровное стекло. Чтобы использовать традиционное окрашивание для оценки дифференциального количества клеток, начните с того, что поместите небольшую каплю образца в конец чистого предметного стекла.Теперь используйте второй слайд или покровное стекло, чтобы распределить каплю по слайду движением вперед. Дайте мазку высохнуть на воздухе. Осмотрите предметное стекло, содержащее высушенный на воздухе мазок под объективом погружения в масло в 1 000 раз.Оцените дифференциальное количество клеток, подсчитав 100 последовательных клеток, различая полиморфноядерные клетки, моноциты и лимфоциты друг от друга. Очистите предметное стекло оптической или мягкой бумагой, пропитанной этанолом. Нанесите небольшую каплю образца, не смешанного с какой-либо добавкой, на предметное стекло и накройте его покровным стеклом, прежде чем поместить предметное стекло под микроскоп.Сфокусируйте предметное стекло под микроскопом, используя объектив с малым увеличением, и внимательно изучите его под ярким полем с 40-кратным объективом. Загляните внутрь и снаружи клеток, чтобы идентифицировать кристаллы по их размеру и форме, которые могут быть ромбовидными, игольчатыми или стержневидными. Затем вставьте поляризационный фильтр между источником света и образцом.Для создания темного фона поворачивайте поляризатор до тех пор, пока его оптическая ось не станет перпендикулярна анализатору. После того, как двулучепреломляющий кристалл идентифицирован, вставьте компенсатор между поляризатором и образцом и переместите его параллельно или перпендикулярно оптической оси кристалла. Наблюдайте за цветом, раскрываемым кристаллом.Для окрашивания Ализарином Красным смешайте каплю образца синовиальной жидкости с равным объемом ранее приготовленного раствора Ализарина Красного на чистом предметном стекле. Накройте предметное стекло покровным стеклом и исследуйте под микроскопом при 400-кратном увеличении, чтобы идентифицировать кристаллы. Макроскопические характеристики образцов синовиальной жидкости указывали на степень воспаления.Образец с бледно-желтым цветом и большей четкостью обычно ассоциируется с невоспалительными состояниями, такими как остеоартрит. С другой стороны, образец, имеющий темно-желтый цвет и мутный вид, указывает на наличие клеток, мусора, гиалуроновой кислоты и фрагментов фибрина, которые связаны с воспалительными выпотами. Лейкоциты, наблюдаемые в образцах синовиальной жидкости у пациентов с остеоартритом, были в основном моноцитами и другими мононуклеарными клетками, такими как синовиоциты.Кристаллы пирофосфата кальция были обнаружены в образцах синовиальной жидкости, что указывает на относительно более высокие уровни воспалительных цитокинов. Кроме того, положительное окрашивание Ализарином красным выявило наличие в образцах основных кристаллов фосфата кальция. Очень важно внимательно осматривать предметное стекло при обычном освещении при поиске кристаллов.Помните, что кристаллы пирофосфата часто имеют слабое двулучепреломление и могут быть пропущены при поляризованном свете. Наличие кристаллов кальция в синовиальной жидкости и их связь с более тяжелой формой заболевания побудили исследователей изучить новые механизмы патогенеза и прогрессирования остеоартрита.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

Выделение и клеточная Фенотипирование мезенхимальных стволовых клеток, полученных из синовиальной жидкости и костного мозга карликовых свиней

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cell Subsets within the Murine Spleen, Bone Marrow, Lymph Nodes and Synovial Tissue in an Osteoarthritis Model

Цитометрия потока Анализ подмножества иммунных клеток в murine spleen, костном мозге, лимфатических узлах и синовиальной ткани в модели остеоартрита

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent ...

Evaluation of Fluid Overload by Bioelectrical Impedance Vectorial Analysis

Оценка перегрузки жидкости с помощью векторного анализа биоэлектрического импеданса

Early detection and management of fluid overload are critically important in acute illness, as the impact of therapeutic intervention can result in ...

Ameliorating Osteoarthritis in Mice Using Silver Nanoparticles

Улучшение состояния остеоартрита у мышей с помощью наночастиц серебра

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most commonly encountered degenerative diseases of the joints in people over 45 years of age. Currently, there are ...

Standardized Tuina Manipulation for Knee Osteoarthritis in Rats

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Understanding the Mechanism of Tuina Manipulation in Rats (Video) | JoVE

Манипуляция Tuina для уменьшения воспаления и потери хряща у крыс с остеоартритом коленного сустава

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...

Performing Fu's Subcutaneous Needling for Degenerative Knee Osteoarthritis

Performing Fu's Subcutaneous Needling for Degenerative Knee Osteoarthritis (Video) | JoVE 

Выполнение подкожного иглоукалывания Фу при дегенеративном остеоартрите коленного сустава

Treating Knee Osteoarthritis with Tuina in a Rabbit Model

Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis

Using a Rabbit Model to Explore the Efficacy of Tuina in Treating Knee Osteoarthritis (Video) | JoVE

Вмешательство Туина в кроличью модель остеоартроза коленного сустава

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of ...

Experimental Modeling of Knee Osteoarthritis in Rats

Experimental Modeling of Knee Osteoarthritis in Rats (Video) | JoVE 

Экспериментальное моделирование артроза коленного сустава у крыс

A Reproducible Cartilage Impact Model to Generate Post-Traumatic Osteoarthritis in the Rabbit

Воспроизводимая модель хрящевого удара для формирования посттравматического остеоартрита у кролика

Post-traumatic osteoarthritis (PTOA) is responsible for 12% of all osteoarthritis cases in the United States. PTOA can be initiated by a single traumatic ...

Therapeutic Potential of Tuina Massage for Knee Osteoarthritis

Tuina Intervention in Sodium Monoiodoacetate Injection-Induced Rat Model of Knee Osteoarthritis

Treating Knee Osteoarthritis with Tuina - A New Perspective (Video) | JoVE

Вмешательство Tuina в модели остеоартрита коленного сустава крысы, индуцированной инъекцией монойодоацетата натрия

Knee osteoarthritis (KOA), a common degenerative joint disorder, is characterized by chronic pain and disability, which can progress to irreparable ...