Name: addressing practical issues in atomic force microscopy-based micro-indentation on human articular cartilage explants
Uploaded: 2022-10-28T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants at JoVE.com

Vi takker ortopædkirurgerne fra ortopædkirurgisk afdeling på universitetshospitalet i Tuebingen for at have leveret vævsprøverne.

Femoral kondyler indsamlet fra patienter, der gennemgik total knæ artroplastik på universitetshospitalet i Tübingen, Tyskland, blev brugt. Kun ledbruskprøver fra patienter med degenerative og posttraumatiske ledpatologier blev inkluderet i denne undersøgelse. Afdelingsmæssige, institutionelle såvel som lokale etiske udvalgs godkendelse blev opnået inden undersøgelsens påbegyndelse (projekt nr. 674/2016BO2). Der blev modtaget skriftligt informeret samtykke fra alle patienter før deltagelse.
<p class="jove_c...

Som en progressiv og multifaktoriel sygdom udløser OA strukturelle og funktionelle ændringer i ledbrusk. I løbet af OA ledsages forringelser i mekaniske egenskaber af strukturelle og biokemiske ændringer på overfladen af ledbrusk27,31. De tidligste patologiske hændelser, der forekommer i OA, er proteoglycanudtømning kombineret med kollagennetværksforstyrrelse32,33,34</...

På grund af den stadigt mindre størrelse af elektroniske enheder og systemer har den hurtige udvikling af mikro- og nanobaseret teknologi og udstyr fået fart. En sådan enhed er atomkraftmikroskopi (AFM), som kan scanne biologiske overflader og hente topografisk eller biomekanisk information på både nano- og mikrometerskala 1,2. Blandt dets store funktioner kan dette værktøj betjenes som en mikro- såvel som en nano-indenter for at få information om de mekaniske egenskaber ved forskellige biologiske systemer 3,4,5,6. Dataene indsamles ved fysisk kontakt med overfladen gennem en mekanisk sonde, som kan være så lille som ca. 1 nm ved dens spids7. Den resulterende deformation af prøven vises derefter baseret på fordybningsdybden af udkragningsspidsen og den kraft, der påføres prøven8.
Slidgigt (OA) er en langsigtet degenerativ kronisk sygdom karakteriseret ved forringelse af ledbrusk i leddene og omgivende væv, hvilket kan føre til fuldstændig eksponering af knogleoverfladerne. OA's byrde er betydelig; I øjeblikket lider halvdelen af alle kvinder og en tredjedel af alle mænd i alderen 65 år og derover af OA9. Traumer, fedme og den deraf følgende ændrede biomekanik i leddet10 bestemmer ledbruskdegenerationen, som ses som et fælles slutresultat. Den banebrydende undersøgelse af Ganz et al. postulerede, at de tidlige trin i OA-processen kan involvere de biomekaniske egenskaber af brusk11, og siden da har forskere bekræftet denne hypotese12. Ligeledes er det generelt accepteret, at vævets biomekaniske egenskaber er funktionelt orkestreret af den ultrastrukturelle organisation såvel som celle-celle og celle-matrix krydstale. Eventuelle ændringer kan dramatisk påvirke den samlede vævsbiomekaniske funktion13. Til dato er OA-diagnosen klinisk og er baseret på almindelig filmradiografi14. Denne tilgang er tosidet: For det første gør manglen på en defineret degenerativ afskæringstærskel til formulering af diagnosen OA tilstanden vanskelig at kvantificere, og for det andet mangler billeddannelsesmetoder følsomhed og standardisering og kan ikke detektere lokaliserede bruskskader15,16,17. Til dette formål har vurderingen af bruskens mekaniske egenskaber den afgørende fordel, at den beskriver en parameter, der ændrer sig i løbet af OA uanset sygdommens ætiologi og har en direkte indflydelse på vævsfunktionaliteten på et meget tidligt stadium. Indrykningsinstrumenter måler den kraft, hvormed vævet modstår fordybningen. Det er faktisk ikke noget nyt begreb. De tidligste undersøgelser går tilbage til 1980'erne og 1990'erne. I denne periode antydede talrige undersøgelser, at indrykningsinstrumenter designet til artroskopiske målinger af ledbrusk kunne være velegnede til at detektere degenerative ændringer i brusk. Selv for 30 år siden var nogle undersøgelser i stand til at demonstrere, at indrykningsinstrumenter var i stand til at detektere in vivo-ændringer i bruskoverfladen under vævsdegeneration ved at udføre trykstivhedsmålinger under artroskopi18,19,20.
AFM-indrykning (AFM-IT) af ledbrusk giver information om vævets afgørende mekaniske egenskab, nemlig stivhed. Dette er en mekanisk parameter, der beskriver forholdet mellem en påført, ikke-destruktiv belastning og den resulterende deformation af det indrykkede vævsområde21. AFM-IT har vist sig at være i stand til at kvantificere aldersafhængige modifikationer i stivhed i makroskopisk upåvirkede kollagennetværk og således skelne mellem de patologiske ændringer forbundet med OA-debut (grad 0 på Outerbridge-skalaen i ledbrusk)22. Vi har tidligere vist, at AFM-IT'er, baseret på rumlig chondrocytorganisation som en billedbaseret biomarkør for tidlig bruskdegeneration, giver mulighed for ikke kun at kvantificere, men også faktisk identificere de tidligste degenerative mekaniske ændringer. Disse resultater er allerede blevet bekræftet af andre23,24. Derfor fungerer AFM-IT som et interessant værktøj til at diagnosticere og identificere tidlige degenerative ændringer. Disse ændringer kan allerede måles på cellulært niveau, hvilket omformer forståelsen af OA-patofysiologisk proces.
I denne protokol demonstrerer vi en komplet histologisk og biomekanisk klassificeringsprocedure for ledbruskeksplanter, fra native bruskeksplantatforberedelse til AFM-dataindsamling og -behandling. Gennem en trinvis tilgang viser vi, hvordan man genererer, klassificerer og visuelt klassificerer ledbruskvæv i henhold til forskellige stadier af degeneration ved hjælp af 2D stor mosaikbilleddannelse efterfulgt af mikro-AFM-fordybninger.
Selvom AFM-IT i øjeblikket er et af de mest følsomme værktøjer til måling af biomekaniske ændringer i brusk7, har det som enhver anden instrumentel teknik begrænsninger og praktiske særegenheder25, der kan føre til fejlagtig dataindsamling. Til dette formål undersøger vi de mest almindelige problemer, der opstår under AFM-målinger af bruskeksanlæggene, og beskriver, hvor det er muligt, hvordan man minimerer eller overvinder dem. Disse omfatter topografiske aspekter af prøverne og vanskelighederne med at stabilisere dem i et AFM-kompatibelt miljø, fysiske egenskaber ved vævets overflade og de deraf følgende vanskeligheder med at udføre AFM-målinger på sådanne overflader. Eksempler på fejlagtige kraftafstandskurver præsenteres også, hvilket understreger de forhold, der kan forårsage dem. Yderligere begrænsninger, der er forbundet med cantileverspidsens geometri og brugen af Hertz-modellen til dataanalysen, diskuteres også.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>1397-89-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscop (AFM) head&#160;</td>
			<td>CellHesion 200, Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biocompatible sample glue&#160;</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>H000033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcein AM</td>
			<td>Cayman, Ann Arbor, Michigan, USA</td>
			<td>14948</td>
			<td>Cell membrane permeable stain, used for cartilage disc sorting- top view imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cantilever</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>SAA-SPH-5UM</td>
			<td>Frequency Nom: 30KHz, k: 0.2N/m, lenght nom: 115&#956;m, width nom: 40&#956;m,&#160; geometry: rectangular, cylindrical tip with a 5&#956;m end radius</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cartilage ctting device&#160;</td>
			<td>Self-made&#160;</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Cutting plastic device containing predefined wholes of 4mmx1mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CDD camera integrated in the AFM</td>
			<td>The Imaging Source Europe GmbH, Bremen, Germany</td>
			<td>DFK 31BF03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CDD camera integrated in the fluorescence microscope</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>DFC3000G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryotome</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>CM3050S&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data Processing Software for the AFM</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Version 5.0.86,&#160; can be downloaded for free from the following website https://customers.jpk.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium (DMEM)&#160;</td>
			<td>Gibco, Life Technologies, Darmstadt, Germany</td>
			<td>41966052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope (Leica DMi8)</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>11889113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass block cantiliver holder</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>SP-90-05</td>
			<td>Extra long glass block with angled faces, designed especially for the use with the JPK PetriDishHeaterTM (Bruker).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted phase contrast microscope (integrated in the AFM)</td>
			<td>AxioObserver D1, Carl Zeiss Microscopy, Jena, Germany</td>
			<td>L201306_03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without L-glutamine&#160;</td>
			<td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope glass slides</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA</td>
			<td>CLS294775X50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium With DAPI</td>
			<td>ibidi GmbH, Gr&#228;felfing, Germany</td>
			<td>50011</td>
			<td>Mounting media with nuclear DAPI (4&#8242;,6-diamidino-2-phenylindole) counterstaining used for cartilage discs&#160; side view imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA</td>
			<td>P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM (Petri Dish Heater)</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather Medical Products, Osaka, Japan</td>
			<td>2023-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone Skirt</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Protective silicone membrane (D55x0.25) which is placed on the basis of the base of the glas block to prevent&#160; medium condensation in the AFM head.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical program - SPSS</td>
			<td>IBM, Armonk, New York, USA</td>
			<td>SPSS Statistics 22</td>
			<td>Vesion 280.0.0.0 (190)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes&#160;</td>
			<td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen, Switzerland</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-tek O.C.T. Compound</td>
			<td>Sakura Finetek, Alphen aan den Rijn, Netherlands</td>
			<td>SA6255012</td>
			<td>Water-soluble embedding medium&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

addressing practical issues in atomic force microscopy-based micro-indentation on human articular cartilage explants

Uden tvivl er atomkraftmikroskopi (AFM) i øjeblikket en af de mest kraftfulde og nyttige teknikker til at vurdere mikro- og endda nano-signaler på det biologiske område. Men som med enhver anden mikroskopisk tilgang kan der opstå metodologiske udfordringer. Især kan egenskaberne ved prøven, prøveforberedelsen, instrumenttypen og indrykningssonden føre til uønskede artefakter. I denne protokol eksemplificerer vi disse nye problemer på sunde såvel som osteoartritiske ledbruskeksplanter. Til dette formål viser vi først via en trinvis tilgang, hvordan man genererer, klassificerer og visuelt klassificerer ex vivo ledbruskskiver i henhold til forskellige stadier af degeneration ved hjælp af stor 2D-mosaikfluorescensbilleddannelse af hele vævseksplanterne. Den største styrke ved ex vivo-modellen er, at den omfatter alderen, hjemmehørende, menneskelig brusk, der gør det muligt at undersøge slidgigtrelaterede ændringer fra tidlig debut til progression. Derudover præsenteres også almindelige faldgruber i vævsforberedelse samt selve AFM-proceduren sammen med den efterfølgende dataanalyse. Vi viser, hvordan grundlæggende, men afgørende trin såsom prøveforberedelse og -behandling, topografiske prøveegenskaber forårsaget af avanceret degeneration og interaktion mellem prøver og spidser kan påvirke dataindsamling. Vi undersøger også de mest almindelige problemer i AFM og beskriver, hvor det er muligt, hvordan man kan overvinde dem. Kendskab til disse begrænsninger er af største betydning for korrekt dataindsamling, fortolkning og i sidste ende indlejring af resultater i en bred videnskabelig sammenhæng.

Ved hjælp af en selvfremstillet skæreanordning var vi i stand til at eksplante og generere små (4 mm x 1 mm) bruskskiver fra friske humane kondyler indeholdende et enkelt cellulært rumligt mønster30 af enkeltstrenge (SS, figur 2A), dobbeltstrenge (DS), små klynger (SC), store klynger (BC; Figur 2A) og diffus (figur 2B). En repræsentativ bruskeksplante er afbildet i figur 3A</strong...

Watch this Scientific Journal Video about Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants at JoVE.com

Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants

Vi præsenterer en trinvis tilgang til at identificere og løse de mest almindelige problemer forbundet med atomkraftmikroskopimikroindrykninger. Vi eksemplificerer de nye problemer på indfødte menneskelige ledbruskeksplanter, der er kendetegnet ved forskellige grader af slidgigtdrevet degeneration.

Håndtering af praktiske spørgsmål i atomkraftmikroskopibaseret mikroindrykning på humane ledbruskeksplanter

Without a doubt, atomic force microscopy (AFM) is currently one of the most powerful and useful techniques to assess micro and even nano-cues in the ...

Målet med denne protokol var at skabe en in vitro-model til undersøgelse af ledbruskmekaniske egenskaber under begyndelsen og progressionen af slidgigt. Den største fordel ved den nuværende teknik er, at bruskeksplanterne er lette at generere og meget repræsentative for brusk i indfødt. Denne model kan bruges til at analysere og overvåge forskellige slidgigt, diagnostiske og terapeutiske tilgange på biomekanisk niveau.Til at begynde med skal du skære brusk væk fra knoglen ved hjælp af en skalpel. Brug en biopsistans til at generere skiver med en diameter på fire millimeter. Placer skiven på en specialfremstillet skæreenhed.Brug en spatel til at fastgøre og stabilisere bruskskiven. Skær bruskskiven med et barberblad. Brug en spatel til at samle disken og placere den i et 1,5 ml rør.For at blive i bruskprøverne tilsættes 130 mikroliter cellegennemtrængeligt fluorescensfarvestof til hver brønd i 96-brøndpladen og fordeles på pladen som en skive pr. Brønd. Placer 96-brøndpladen på fluorescensmikroskopets pladeholder. Vælg det passende fluorescensfilter og målsætningen.Placer målet under det forudvalgte hul, der indeholder individuel brusk. Fokuser på disken for at se det cellulære mønster. Vælg navigatorfunktionen for at få et overblik over hele brønden.Brug venstre museknap og træk den for at navigere til en anden sceneposition. Vælg en firkant, der omfatter det interesseområde, der skal scannes. Vælg softwarens fokuskortpunktindstilling, og vælg derefter hver enkelt flise ved at venstreklikke i midten af den.Vælg indstillingen fokuskort i det viste vindue med alle de tidligere valgte fliser. Dobbeltklik på en flise for at få vist den og bringe den i korrekt fokus. Klik derefter på Indstil Z for at gemme fokusplanen og fortsæt til næste flise.Når du har justeret fokusplanen for hver enkelt flise, skal du begynde billedoptagelse ved at trykke på start scanning. Fastgør hver forudvalgt bruskskive, der indeholder et cellulært mønster i petriskåle ved at tilføje tilstrækkelig biokompatibel lim på toppen, bunden, venstre og højre side af disken. Dæk skiverne med med 2,5 ml Leibovitz-medium uden L-glutamin.Placer petriskålen i prøveholderen til AFM-enheder. For at kalibrere AFM-udkragningen skal du placere den på overfladen af glasblokkens udkragning, så den hviler på det polerede optiske plan i midten af glasblokken. Sænk udkragningen i trin på 100 mikrometer ved hjælp af stepmotorfunktionen, indtil den er helt nedsænket i mediet.For at identificere det ønskede bruskmålested skal du starte en scannertilgang med udkragningen på et rent prøvefrit område af petriskålen. Træk derefter udkragningen 1,5 millimeter væk fra bunden af pladen. Skift fra brightfield til fluorescensvisning, og identificer visuelt toppen af disken.Flyt AFM-prøveholderen nøjagtigt to millimeter mod midten af disken. Kør en scannertilgang for at nå overfladen af bruskskiven og træk udkragningen tilbage med 100 mikrometer. For at generere en kraftafstandskurve skal du fokusere på cellerne placeret på det ønskede målested.Klik på kørselsknappen for at starte målingerne og få fem kraftafstandskurver på hvert målested. Gem kurverne, når de er inspiceret. For at estimere Youngs moduli ved hjælp af indstillingen åben et parti spektroskopikurver skal du åbne de genererede kraftafstandskurver, der skal analyseres.Vælg Hertz-fit-modellen efterfulgt af elasticitetstilpasningsindstillingen. Visualiser og dokumentér derefter Youngs modul. Tilpas ved hjælp af poissonforholdet på 0,5 og den passende udkragningsspidsradius.Kontroller derefter visuelt kraftafstandskurvens pasform for at sikre korrekthed. Til bestemmelse af indrykningsdybde skal du åbne hver af de genererede kraftafstandskurver i dataanalysesoftwaren og vælge Hertz-fit-modellen som analyseproces. Anvend indstillingen Subtraher grundlinjeforskydning til nulstilling af den lodrette afbøjningsakse, og vælg funktionen forskydning plus hældning.Brug funktionen Find kontaktpunkt til automatisk at identificere kontaktpunktet. Ved hjælp af den lodrette spidspositionsfunktion trækkes afstanden udelukkende for udkragningsafbøjning fra den rå piezohøjde under fordybningen. Vælg elasticitetstilpasningsindstillingen for at få vist den behandlede kraftafstandskurve.Vælg derefter området på grafen, så den flugter med den mest negative værdi på den lodrette spidspositionsakse. I parameterfanen fra XMIN-boksen skal du læse og dokumentere indrykningen. Skiverne indeholdende enkeltstrenge viste højere stivhedsværdier med en median på 2,6 kilo pascal, hvilket er repræsentativt for kompromisløse, sunde bruskområder.Med debut og progression af slidgigt viste AFM-målingerne et stærkt trinvist fald i stivhed på 42% i dobbeltstrenge, 77% i små klynger og i sidste ende 88% i avancerede stadier repræsenteret af store klynger. Diskene indeholder et diffust mønster vist i forhøjet elasticitet med en vigtig variation af Youngs modul enkeltværdier. For alle bruskskiver med tildelt fremherskende cellulær mønsterorganisation viste indrykningsdybden forbundet med det anvendte sætpunkt sig at være omvendt proportional med stivhed.Artefakterne, der ses i de genererede kraftafstandskurver, indikerer enten en suboptimal kontakt mellem AFM-udkragningen og bruskoverfladen eller forkert prøvefiksering til petriskålen. Vores bruskeksplanter kan viderebehandles og analyseres ved hjælp af en række molekylærbiologiske teknikker såsom proteinanalyse via eliza, immunmærkning, vestlig moding eller genanalyse via PCR. Denne metode kan bruges til at studere den direkte virkning af nye terapier på artikulær kartilege og kan hjælpe forskere med at få vigtig indsigt i potommekanismerne ved slidgigt.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bacterial Immobilization for Imaging by Atomic Force Microscopy

AFM is a high-resolution (nm scale) imaging tool that mechanically probes a surface.  It has the ability to image cells and biomolecules, in a liquid ...

Visualization of Recombinant DNA and Protein Complexes Using Atomic Force Microscopy

Atomic force microscopy (AFM) allows for the visualizing of individual proteins, DNA molecules, protein-protein complexes, and DNA-protein complexes. On ...

Quantifying the Mechanical Properties of the Endothelial Glycocalyx with Atomic Force Microscopy

Kvantificering af mekaniske egenskaber af de Endothelial glycocalyx med Atomic Force Microscopy

Our  understanding of the interaction of leukocytes and the vessel wall during  leukocyte capture is limited by an incomplete understanding of the ...

Measuring the Mechanical Properties of Living Cells Using Atomic Force Microscopy

Måling af mekaniske egenskaber af levende celler bruge Atomic Force Microscopy

Mechanical  properties of cells and extracellular matrix (ECM) play important roles in many  biological processes including stem cell differentiation, ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Menneskelige bruskvæv Fabrication Brug Tre-dimensionel Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Novel Atomic Force Microscopy Based Biopanning for Isolation of Morphology Specific Reagents against TDP-43 Variants in Amyotrophic Lateral Sclerosis

Novel Atomic force mikroskopi Based Biopanning til isolering af Morfologi Specifikke reagenser mod TDP-43 varianter i amyotrofisk lateral sklerose

Because protein variants play critical roles in many diseases including TDP-43 in Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS), alpha-synuclein in ...

Atomic Force Microscopy Imaging and Force Spectroscopy of Supported Lipid Bilayers

Atomic force mikroskopi Imaging og Kraft spektroskopi af understøttede lipiddobbeltlag

Atomic force microscopy (AFM) is a versatile, high-resolution imaging technique that allows visualization of biological membranes. It has sufficient ...

3D Hydrogel Scaffolds for Articular Chondrocyte Culture and Cartilage Generation

3D Hydrogel stillads til Artikulære chondrocyt Kultur og brusk Generation

Human articular cartilage is highly susceptible to damage and has limited self-repair and regeneration potential. Cell-based strategies to engineer ...

An Experimental and Finite Element Protocol to Investigate the Transport of Neutral and Charged Solutes across Articular Cartilage

En eksperimentel og Finite Element-protokollen til undersøgelse af Transport af Neutrale og sigtet Opløste stoffer tværs Ledbrusken

Osteoarthritis (OA) is a debilitating disease that is associated with degeneration of articular cartilage and subchondral bone. Degeneration of articular ...

Real-time Visualization and Analysis of Chondrocyte Injury Due to Mechanical Loading in Fully Intact Murine Cartilage Explants

Real-time visualisering og analyse af Chondrocyt skade som følge af mekanisk belastning i fuldt intakt Murine brusk Explants

Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...