Name: addressing practical issues in atomic force microscopy-based micro-indentation on human articular cartilage explants
Uploaded: 2022-10-28T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants at JoVE.com

Vi takker ortopedene fra Ortopedisk avdeling ved Universitetssykehuset i Tuebingen for å ha levert vevsprøvene.

Femoralkondyler samlet fra pasienter som gjennomgår total kneproteseplastikk ved Universitetssykehuset i Tübingen, Tyskland, ble brukt. Kun leddbruskprøver fra pasienter med degenerative og posttraumatiske leddpatologier ble inkludert i denne studien. Godkjenning fra avdelinger, institusjoner og lokale etiske komiteer ble innhentet før studiestart (prosjektnr.674/2016BO2). Det ble innhentet skriftlig informert samtykke fra alle pasientene før deltakelse.
MERK: Et flytskjema over eksperime...

Som en progressiv og multifaktoriell sykdom utløser OA strukturelle og funksjonelle endringer i leddbrusk. I løpet av OA ledsages svekkelser i mekaniske egenskaper av strukturelle og biokjemiske endringer på overflaten av leddbrusk27,31. De tidligste patologiske hendelsene som forekommer i OA er proteoglykanuttømming kombinert med kollagennettverksforstyrrelser32,33,34</su...

På grunn av den stadig krympende størrelsen på elektroniske enheter og systemer, har den raske utviklingen av mikro- og nanobasert teknologi og utstyr fått fart. En slik enhet er atomkraftmikroskopi (AFM), som kan skanne biologiske overflater og hente topografisk eller biomekanisk informasjon på både nano- og mikrometerskala 1,2. Blant de enorme funksjonene kan dette verktøyet betjenes som en mikro- så vel som en nano-indenter for å få informasjon om de mekaniske egenskapene til forskjellige biologiske systemer 3,4,5,6. Dataene samles inn ved fysisk kontakt med overflaten gjennom en mekanisk sonde, som kan være så liten som ca. 1 nm på spissen7. Den resulterende deformasjonen av prøven vises deretter basert på innrykksdybden til utkragingsspissen og kraften som påføres prøven8.
Slitasjegikt (OA) er en langvarig degenerativ kronisk sykdom preget av forverring av leddbrusk i leddene og omkringliggende vev, noe som kan føre til fullstendig eksponering av beinoverflatene. Byrden ved OA er betydelig; For tiden lider halvparten av alle kvinner og en tredjedel av alle menn i alderen 65 og over av OA9. Traumer, fedme og den resulterende endrede biomekanikken til leddet10 bestemmer leddbruskdegenerasjonen, som blir sett på som et vanlig sluttresultat. Den banebrytende studien av Ganz et al. antydet at de tidlige trinnene i OA-prosessen kan innebære de biomekaniske egenskapene til brusk11, og siden da har forskere bekreftet denne hypotesen12. På samme måte er det generelt akseptert at de biomekaniske egenskapene til vevet er funksjonelt orkestrert av den ultrastrukturelle organisasjonen, så vel som cellecelle- og cellematrisekrysstale. Eventuelle endringer kan dramatisk påvirke den generelle vevsbiomekaniske funksjonen13. Hittil er OA-diagnosen klinisk og er basert på vanlig filmradiografi14. Denne tilnærmingen er tosidig: For det første gjør mangelen på en definert degenerativ grenseverdi for å formulere diagnosen OA tilstanden vanskelig å kvantifisere, og for det andre mangler bildebehandlingsmetoder sensitivitet og standardisering og kan ikke oppdage lokaliserte bruskskader15,16,17. For dette formål har vurderingen av bruskens mekaniske egenskaper den avgjørende fordelen at den beskriver en parameter som endres i løpet av OA uavhengig av sykdommens etiologi og har en direkte innflytelse på vevsfunksjonalitet på et svært tidlig stadium. Innrykksinstrumenter måler kraften som vevet motstår innrykket med. Dette er faktisk ikke et nytt konsept; De tidligste studiene går tilbake til 1980- og 1990-tallet. I denne perioden antydet mange studier at innrykksinstrumenter designet for artroskopiske målinger av leddbrusk kunne være godt egnet til å oppdage degenerative forandringer i brusk. Selv for 30 år siden var noen studier i stand til å demonstrere at innrykksinstrumenter var i stand til å oppdage in vivo-endringer i bruskoverflaten under vevsdegenerasjon ved å utføre trykkstivhetsmålinger under artroskopi18,19,20.
AFM-innrykk (AFM-IT) av leddbrusk gir informasjon om en pivotal mekanisk egenskap av vevet, nemlig stivhet. Dette er en mekanisk parameter som beskriver forholdet mellom en påført, ikke-destruktiv belastning og den resulterende deformasjonen av det innrykkede vevsområdet21. AFM-IT har vist seg å være i stand til å kvantifisere aldersavhengige modifikasjoner i stivhet i makroskopisk upåvirkede kollagennettverk, og dermed skille mellom de patologiske endringene forbundet med OA-utbrudd (grad 0 på Outerbridge-skalaen i leddbrusk)22. Vi har tidligere vist at AFM-IT, på grunnlag av romlig kondrocyttorganisasjon som en bildebasert biomarkør for tidlig bruskdegenerasjon, tillater ikke bare kvantifisering, men også faktisk å identifisere de tidligste degenerative mekaniske endringene. Disse funnene er allerede bekreftet av andre23,24. Derfor fungerer AFM-IT som et interessant verktøy for å diagnostisere og identifisere tidlige degenerative endringer. Disse endringene kan allerede måles på cellenivå, og omforme forståelsen av OAs patofysiologiske prosess.
I denne protokollen demonstrerer vi en komplett histologisk og biomekanisk graderingsprosedyre for leddbruskeksplanter, fra innfødt bruskpreparering til AFM-datainnsamling og -behandling. Gjennom en trinnvis tilnærming viser vi hvordan man genererer, graderer og visuelt klassifiserer leddbruskvev i henhold til forskjellige stadier av degenerasjon ved hjelp av 2D stor mosaikkavbildning, etterfulgt av mikro-AFM-innrykk.
Selv om AFM-IT for tiden er et av de mest følsomme verktøyene for å måle biomekaniske endringer i brusk7, som enhver annen instrumentell teknikk, har den begrensninger og praktiske særegenheter25 som kan føre til feilaktig datainnsamling. For dette formål underkaster vi gransking de vanligste problemene som oppstår under AFM-målinger av bruskeksplantene og beskriver, der det er mulig, hvordan vi kan minimere eller overvinne dem. Disse inkluderer topografiske aspekter av prøvene og vanskelighetene med å stabilisere dem i et AFM-kompatibelt miljø, fysiske særegenheter av vevets overflate og de resulterende vanskelighetene med å utføre AFM-målinger på slike overflater. Eksempler på feilaktige kraftavstandskurver presenteres også, med vekt på forholdene som kan forårsake dem. Ytterligere begrensninger knyttet til geometrien til utkragingsspissen og bruken av Hertz-modellen for dataanalysen diskuteres også.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>1397-89-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscop (AFM) head&#160;</td>
			<td>CellHesion 200, Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biocompatible sample glue&#160;</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>H000033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcein AM</td>
			<td>Cayman, Ann Arbor, Michigan, USA</td>
			<td>14948</td>
			<td>Cell membrane permeable stain, used for cartilage disc sorting- top view imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cantilever</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>SAA-SPH-5UM</td>
			<td>Frequency Nom: 30KHz, k: 0.2N/m, lenght nom: 115&#956;m, width nom: 40&#956;m,&#160; geometry: rectangular, cylindrical tip with a 5&#956;m end radius</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cartilage ctting device&#160;</td>
			<td>Self-made&#160;</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Cutting plastic device containing predefined wholes of 4mmx1mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CDD camera integrated in the AFM</td>
			<td>The Imaging Source Europe GmbH, Bremen, Germany</td>
			<td>DFK 31BF03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CDD camera integrated in the fluorescence microscope</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>DFC3000G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryotome</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>CM3050S&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data Processing Software for the AFM</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Version 5.0.86,&#160; can be downloaded for free from the following website https://customers.jpk.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium (DMEM)&#160;</td>
			<td>Gibco, Life Technologies, Darmstadt, Germany</td>
			<td>41966052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope (Leica DMi8)</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>11889113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass block cantiliver holder</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>SP-90-05</td>
			<td>Extra long glass block with angled faces, designed especially for the use with the JPK PetriDishHeaterTM (Bruker).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted phase contrast microscope (integrated in the AFM)</td>
			<td>AxioObserver D1, Carl Zeiss Microscopy, Jena, Germany</td>
			<td>L201306_03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without L-glutamine&#160;</td>
			<td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope glass slides</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA</td>
			<td>CLS294775X50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium With DAPI</td>
			<td>ibidi GmbH, Gr&#228;felfing, Germany</td>
			<td>50011</td>
			<td>Mounting media with nuclear DAPI (4&#8242;,6-diamidino-2-phenylindole) counterstaining used for cartilage discs&#160; side view imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA</td>
			<td>P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM (Petri Dish Heater)</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather Medical Products, Osaka, Japan</td>
			<td>2023-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone Skirt</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Protective silicone membrane (D55x0.25) which is placed on the basis of the base of the glas block to prevent&#160; medium condensation in the AFM head.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical program - SPSS</td>
			<td>IBM, Armonk, New York, USA</td>
			<td>SPSS Statistics 22</td>
			<td>Vesion 280.0.0.0 (190)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes&#160;</td>
			<td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen, Switzerland</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-tek O.C.T. Compound</td>
			<td>Sakura Finetek, Alphen aan den Rijn, Netherlands</td>
			<td>SA6255012</td>
			<td>Water-soluble embedding medium&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

addressing practical issues in atomic force microscopy-based micro-indentation on human articular cartilage explants

Uten tvil er atomkraftmikroskopi (AFM) for tiden en av de kraftigste og mest nyttige teknikkene for å vurdere mikro- og til og med nano-signaler i det biologiske feltet. Men som med alle andre mikroskopiske tilnærminger kan det oppstå metodiske utfordringer. Spesielt kan egenskapene til prøven, prøvepreparering, type instrument og innrykkssonde føre til uønskede artefakter. I denne protokollen eksemplifiserer vi disse nye problemene på sunne så vel som osteoartrittiske leddbruskeksplanter. For dette formål viser vi først via en trinnvis tilnærming hvordan man genererer, graderer og visuelt klassifiserer ex vivo leddbruskskiver i henhold til forskjellige stadier av degenerasjon ved hjelp av stor 2D-mosaikkfluorescensavbildning av hele vevseksplanter. Den største styrken til ex vivo-modellen er at den består av eldre, innfødt, human brusk som gjør det mulig å undersøke slitasjegiktrelaterte endringer fra tidlig begynnelse til progresjon. I tillegg presenteres også vanlige fallgruver i vevspreparering, samt selve AFM-prosedyren sammen med den påfølgende dataanalysen. Vi viser hvordan grunnleggende, men avgjørende trinn som prøvepreparering og -behandling, topografiske prøveegenskaper forårsaket av avansert degenerasjon og interaksjon mellom prøver og spisser kan påvirke datainnsamlingen. Vi underkaster også gransking de vanligste problemene i AFM og beskriver, der det er mulig, hvordan vi kan overvinne dem. Kunnskap om disse begrensningene er av største betydning for riktig datainnsamling, tolkning og til slutt innlemming av funn i en bred vitenskapelig sammenheng.

Ved hjelp av et selvfremstillet skjæreapparat kunne vi eksplantere og generere små (4 mm x 1 mm) bruskskiver fra ferske menneskelige kondyler som inneholder et enkelt cellulært romlig mønster30 enkeltstrenger (SS, figur 2A), doble strenger (DS), små klynger (SC), store klynger (BC; figur 2A), og diffus (figur 2B). En representativ bruskeksplante er avbildet i figur 3A. Valge...

Watch this Scientific Journal Video about Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants at JoVE.com

Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants

Vi presenterer en trinnvis tilnærming for å identifisere og løse de vanligste problemene knyttet til atomkraftmikroskopiske mikroinnrykk. Vi eksemplifiserer de nye problemene på innfødte menneskelige leddbruskeksplanter preget av ulike grader av slitasjegiktdrevet degenerasjon.

Adressering av praktiske problemer i atomkraftmikroskopibasert mikroinnrykk på menneskelige leddbruskeksplanter

Without a doubt, atomic force microscopy (AFM) is currently one of the most powerful and useful techniques to assess micro and even nano-cues in the ...

Målet med denne protokollen var å lage en in vitro-modell for å studere leddbruskmekaniske egenskaper under utbruddet og progresjonen av slitasjegikt. Den største fordelen med den nåværende teknikken er at bruskeksplantene er enkle å generere og svært representative for innfødt alderbrusk. Denne modellen kan brukes til å analysere og overvåke ulike slitasjegikt, diagnostiske og terapeutiske tilnærminger på biomekanisk nivå.For å begynne, kutt brusk vekk fra beinet ved hjelp av en skalpell. Ved hjelp av en biopsi stanse, generere plater på fire millimeter diameter. Plasser platen på en skreddersydd skjæreenhet.Bruk en slikkepott, fest og stabiliser bruskskiven. Klipp bruskskiven med et barberblad. Bruk en slikkepott til å samle platen og legg den i et 1,5 milliliter rør.For å holde seg i bruskprøvene, tilsett 130 mikroliter cellepermeabelt fluorescensfargestoff til hver brønn på 96-brønnplaten og fordel platen på platen som en plate per brønn. Plasser 96-brønnplaten på plateholderen til fluorescensmikroskopet. Velg riktig fluorescensfilter og målet.Plasser målet under den forhåndsvalgte brønnen som inneholder individuell brusk. Fokuser på platen for å se det cellulære mønsteret. Velg navigatørfunksjonen for å få oversikt over hele brønnen.Bruk venstre museknapp og dra den for å navigere til en annen sceneposisjon. Velg en firkant som omfatter interesseområdet som skal skannes. Velg programvarens fokuskartpunktalternativ, og velg deretter hver enkelt flis ved å venstreklikke i midten av den.Velg alternativfokuskartet i det viste vinduet med alle de tidligere valgte flisene. Dobbeltklikk på en flis for å vise og bringe den i riktig fokus. Deretter klikker du på sett Z for å lagre fokusplanen og fortsette til neste flis.Etter å ha justert fokusplanen for hver enkelt flis, kan du begynne bildeopptaket ved å trykke på start skanning. Fest hver forhåndsvalgt bruskplate som inneholder et cellemønster i petriskåler ved å legge til tilstrekkelig biokompatibelt lim på toppen, bunnen, venstre og høyre side av platen. Dekk platene med 2,5 ml Leibovitz medium uten L-glutamin.Plasser petriskålen i prøveholderen for AFM-enheter. For å kalibrere AFM-utkragingen, plasser den på overflaten av glassblokkutkrageren slik at den hviler på det polerte optiske planet i midten av glassblokken. Senk utkragingen i trinn på 100 mikrometer ved hjelp av trinnmotorfunksjonen til den er helt nedsenket i mediet.For å identifisere ønsket bruskmålingssted, start en skannertilnærming med utkragingen på et rent prøvefritt område av petriskålen. Trekk deretter utkragingen 1,5 millimeter bort fra bunnen av platen. Bytt fra lysfelt til fluorescensvisning og identifiser toppen av platen visuelt.Flytt AFM-prøveholderen nøyaktig to millimeter mot midten av platen. Kjør en skannertilnærming for å nå overflaten av bruskskiven og trekk utkragingen inn med 100 mikrometer. For å generere en kraftavstandskurve, fokuser på cellene plassert på ønsket målested.Klikk på løpeknappen for å starte målingene og få fem kraftavstandskurver på hvert målested. Lagre kurvene når de er inspisert. For å estimere Youngs moduli, ved hjelp av alternativet åpne en gruppe spektroskopikurver, åpne de genererte kraftavstandskurvene som skal analyseres.Velg Hertz-fit-modellen etterfulgt av alternativet elastisitet-passform. Deretter visualiserer og dokumenterer du Youngs modul. Tilpass ved hjelp av poissonforholdet på 0,5 og riktig utkragespissradius.Kontroller deretter kraftavstandskurven visuelt for å sikre korrekthet. For bestemmelse av innrykksdybde, åpne hver av de genererte kraftavstandskurvene i dataanalyseprogramvaren og velg Hertz-fit-modellen som analyseprosess. Bruk alternativet for distrahering av grunnlinjeforskyvning på nullstilling for den loddrette nedbøyningsaksen, og velg funksjonen for forskyvning pluss vipping.Bruk funksjonen finn kontaktpunkt til å identifisere kontaktpunktet automatisk. Ved hjelp av funksjonen for vertikal spissposisjon trekker du avstanden som utelukkende tar hensyn til utkragingsavbøyning fra den rå piezohøyden under innrykket. Velg alternativet for tilpassing av elastisitet for å vise den behandlede kraftavstandskurven.Velg deretter området i grafen slik at den stemmer overens med den mest negative verdien på den vertikale posisjonsaksen for spissen. I parameterfanen fra XMIN-boksen leser og dokumenterer du innrykket. Skivene som inneholdt enkeltstrenger viste høyere stivhetsverdier med en median på 2,6 kilo pascal, noe som er representativt for kompromissløse, sunne bruskområder.Med utbrudd og progresjon av slitasjegikt viste AFM-målingene en sterk trinnvis reduksjon i stivhet på 42 % i doble strenger, 77 % i små klynger og til slutt 88 % i avanserte stadier representert av store klynger. Skivene som inneholder et diffust mønster vises i forhøyet elastisitet med en viktig variasjon av Youngs modul enkeltverdier. For alle bruskskivene med tildelt dominerende cellulær mønsterorganisasjon ble innrykksdybden assosiert med det anvendte settpunktet funnet å være omvendt proporsjonal med stivhet.Artefaktene sett i de genererte kraftavstandskurvene indikerer enten en suboptimal kontakt mellom AFM-utkrageren og bruskoverflaten eller feil prøvefiksering til petriskålen. Våre bruskeksplanter kan viderebehandles og analyseres ved hjelp av en rekke molekylærbiologiske teknikker som proteinanalyse via eliza, immunmerking, vestlig moding eller genanalyse via PCR. Denne metoden kan brukes til å studere den direkte effekten av nye terapier på leddkartilege og kan hjelpe forskere til å få viktig innsikt i potommekanismer for slitasjegikt.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bacterial Immobilization for Imaging by Atomic Force Microscopy

AFM is a high-resolution (nm scale) imaging tool that mechanically probes a surface.  It has the ability to image cells and biomolecules, in a liquid ...

Visualization of Recombinant DNA and Protein Complexes Using Atomic Force Microscopy

Atomic force microscopy (AFM) allows for the visualizing of individual proteins, DNA molecules, protein-protein complexes, and DNA-protein complexes. On ...

Quantifying the Mechanical Properties of the Endothelial Glycocalyx with Atomic Force Microscopy

Kvantifisere mekaniske egenskaper endotel Glycocalyx med Atomic Force Microscopy

Our  understanding of the interaction of leukocytes and the vessel wall during  leukocyte capture is limited by an incomplete understanding of the ...

Measuring the Mechanical Properties of Living Cells Using Atomic Force Microscopy

Måling av mekaniske egenskaper Living Cells hjelp Atomic Force Mikroskopi

Mechanical  properties of cells and extracellular matrix (ECM) play important roles in many  biological processes including stem cell differentiation, ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Menneskelig bruskvev Fabrication Bruke Tredimensjonal Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Novel Atomic Force Microscopy Based Biopanning for Isolation of Morphology Specific Reagents against TDP-43 Variants in Amyotrophic Lateral Sclerosis

Novel Atomic Force Mikros Basert Biopanning for isolering av morfologi spesifikke reagenser mot TDP-43 Varianter i Amyotrofisk lateral sklerose

Because protein variants play critical roles in many diseases including TDP-43 in Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS), alpha-synuclein in ...

Atomic Force Microscopy Imaging and Force Spectroscopy of Supported Lipid Bilayers

Atomic Force Microscopy Imaging and Force spektroskopi av Supported lipidbilag

Atomic force microscopy (AFM) is a versatile, high-resolution imaging technique that allows visualization of biological membranes. It has sufficient ...

3D Hydrogel Scaffolds for Articular Chondrocyte Culture and Cartilage Generation

3D Hydrogel Stillas for Ledd chondrocyttransplantasjon Kultur og brusk Generation

Human articular cartilage is highly susceptible to damage and has limited self-repair and regeneration potential. Cell-based strategies to engineer ...

An Experimental and Finite Element Protocol to Investigate the Transport of Neutral and Charged Solutes across Articular Cartilage

En eksperimentell og Finite Element-protokollen for å undersøke Transport av nøytrale og siktet Oppløste stoffer over Leddbrusk

Osteoarthritis (OA) is a debilitating disease that is associated with degeneration of articular cartilage and subchondral bone. Degeneration of articular ...

Real-time Visualization and Analysis of Chondrocyte Injury Due to Mechanical Loading in Fully Intact Murine Cartilage Explants

Sanntids visualisering og analyse av Chondrocyte personskader mekaniske belastninger i fullt intakt Murine brusk Explants

Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...