Name: addressing practical issues in atomic force microscopy-based micro-indentation on human articular cartilage explants
Uploaded: 2022-10-28T14:10:00
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Agradecemos a los cirujanos ortopédicos del Departamento de Cirugía Ortopédica del Hospital Universitario de Tubinga por proporcionar las muestras de tejido.

Se utilizaron cóndilos femorales recogidos de pacientes sometidos a artroplastia total de rodilla en el Hospital Universitario de Tübingen, Alemania. Solo se incluyeron en este estudio muestras de cartílago articular de pacientes con patologías articulares degenerativas y postraumáticas. Antes del inicio del estudio se obtuvo la aprobación de los comités de ética departamentales, institucionales y locales (Proyecto n.º 674/2016BO2). Se recibió el consentimiento informado por escrito de todos los pacientes antes...

Al ser una enfermedad progresiva y multifactorial, la artrosis desencadena cambios estructurales y funcionales en el cartílago articular. A lo largo del curso de la artrosis, las alteraciones en las características mecánicas se acompañan de cambios estructurales y bioquímicos en la superficie del cartílago articular27,31. Los eventos patológicos más tempranos que ocurren en la OA son la depleción de proteoglicanos junto con la disrupción de la red de co...

Debido al tamaño cada vez menor de los dispositivos y sistemas electrónicos, el rápido desarrollo de la tecnología y los equipos basados en micro y nano ha cobrado impulso. Uno de estos dispositivos es la microscopía de fuerza atómica (AFM, por sus siglas en inglés), que puede escanear superficies biológicas y recuperar información topográfica o biomecánica a escalas nanométricas y micrométricas 1,2. Entre sus vastas características, esta herramienta puede ser operada como micro y nano indentador para obtener información sobre las propiedades mecánicas de diversos sistemas biológicos 3,4,5,6. Los datos se recogen por contacto físico con la superficie a través de una sonda mecánica, que puede ser tan pequeña como aproximadamente 1 nm en su punta7. A continuación, se muestra la deformación resultante de la muestra en función de la profundidad de indentación de la punta en voladizo y la fuerza aplicada sobre la muestra8.
La osteoartritis (OA) es una enfermedad crónica degenerativa a largo plazo caracterizada por el deterioro del cartílago articular en las articulaciones y los tejidos circundantes, lo que puede conducir a la exposición completa de las superficies óseas. La carga de la OA es considerable; actualmente, la mitad de las mujeres y un tercio de los hombres de 65 años o más sufren de OA9. Los traumatismos, la obesidad y la consiguiente alteración de la biomecánica de la articulación10 determinan la degeneración del cartílago articular, que se considera un resultado final común. El estudio pionero de Ganz et al. postuló que los primeros pasos del proceso de artrosis pueden involucrar las propiedades biomecánicas del cartílago11, y desde entonces los investigadores han confirmado esta hipótesis12. Del mismo modo, es generalmente aceptado que las propiedades biomecánicas del tejido están orquestadas funcionalmente por la organización ultraestructural, así como por la diafonía célula-célula y célula-matriz. Cualquier alteración puede afectar drásticamente el funcionamiento biomecánico general de los tejidos13. Hasta la fecha, el diagnóstico de la artrosis es clínico y se basa en la radiografía simple14. Este enfoque tiene dos caras: en primer lugar, la falta de un umbral de corte degenerativo definido para formular el diagnóstico de OA hace que la afección sea difícil de cuantificar y, en segundo lugar, los métodos de imagen carecen de sensibilidad y estandarización y no pueden detectar daños localizados en el cartílago15,16,17. Para ello, la evaluación de las propiedades mecánicas del cartílago tiene la ventaja decisiva de que describe un parámetro que cambia durante el curso de la artrosis, independientemente de la etiología de la enfermedad, y que tiene una influencia directa en la funcionalidad tisular en una fase muy temprana. Los instrumentos de indentación miden la fuerza con la que el tejido resiste la indentación. De hecho, este no es un concepto nuevo; Los primeros estudios se remontan a las décadas de 1980 y 1990. En este período, numerosos estudios sugirieron que los instrumentos de indentación diseñados para las mediciones artroscópicas del cartílago articular podrían ser adecuados para detectar cambios degenerativos en el cartílago. Incluso hace 30 años, algunos estudios pudieron demostrar que los instrumentos de indentación eran capaces de detectar in vivo cambios en la superficie del cartílago durante la degeneración tisular mediante la realización de mediciones de rigidez compresiva durante la artroscopia18,19,20.
La indentación de AFM (AFM-IT) del cartílago articular proporciona información sobre una propiedad mecánica fundamental del tejido, a saber, la rigidez. Se trata de un parámetro mecánico que describe la relación entre una carga aplicada no destructiva y la deformación resultante del área tisular dentada21. Se ha demostrado que AFM-IT es capaz de cuantificar las modificaciones de la rigidez dependientes de la edad en redes de colágeno macroscópicamente no afectadas, diferenciando así entre los cambios patológicos asociados a la aparición de la artrosis (grado 0 en la escala de Outerbridge en cartílago articular)22. Hemos demostrado previamente que los AFM-IT, sobre la base de la organización espacial de los condrocitos como un biomarcador basado en imágenes para la degeneración temprana del cartílago, permiten no solo cuantificar, sino también identificar los cambios mecánicos degenerativos más tempranos. Estos hallazgos ya han sido confirmados por otros23,24. Por lo tanto, AFM-IT actúa como una herramienta interesante para diagnosticar e identificar cambios degenerativos tempranos. Estos cambios ya se pueden medir a nivel celular, remodelando la comprensión del proceso fisiopatológico de la artrosis.
En este protocolo, demostramos un procedimiento completo de clasificación histológica y biomecánica de explantes de cartílago articular, desde la preparación del explante de cartílago nativo hasta la adquisición y procesamiento de datos de AFM. A través de un enfoque paso a paso, mostramos cómo generar, clasificar y clasificar visualmente el tejido del cartílago articular de acuerdo con las diferentes etapas de degeneración mediante imágenes de mosaico grande en 2D, seguidas de indentaciones de micro-AFM.
A pesar de que, en la actualidad, la AFM-IT es una de las herramientas más sensibles para medir los cambios biomecánicos en el cartílago7, como cualquier otra técnica instrumental, tiene limitaciones y peculiaridades prácticas25 que pueden llevar a la adquisición errónea de datos. Con este fin, sometemos a escrutinio los problemas más comunes que surgen durante las mediciones de AFM de los explantes de cartílago y describimos, en la medida de lo posible, cómo minimizarlos o superarlos. Estos incluyen los aspectos topográficos de las muestras y las dificultades para estabilizarlas en un entorno compatible con AFM, las peculiaridades físicas de la superficie del tejido y las dificultades resultantes para realizar mediciones de AFM en dichas superficies. También se presentan ejemplos de curvas fuerza-distancia erróneas, haciendo hincapié en las condiciones que pueden causarlas. También se discuten las limitaciones adicionales inherentes a la geometría de la punta en voladizo y el uso del modelo Hertz para el análisis de datos.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>1397-89-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscop (AFM) head&#160;</td>
			<td>CellHesion 200, Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biocompatible sample glue&#160;</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>H000033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcein AM</td>
			<td>Cayman, Ann Arbor, Michigan, USA</td>
			<td>14948</td>
			<td>Cell membrane permeable stain, used for cartilage disc sorting- top view imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cantilever</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>SAA-SPH-5UM</td>
			<td>Frequency Nom: 30KHz, k: 0.2N/m, lenght nom: 115&#956;m, width nom: 40&#956;m,&#160; geometry: rectangular, cylindrical tip with a 5&#956;m end radius</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cartilage ctting device&#160;</td>
			<td>Self-made&#160;</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Cutting plastic device containing predefined wholes of 4mmx1mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CDD camera integrated in the AFM</td>
			<td>The Imaging Source Europe GmbH, Bremen, Germany</td>
			<td>DFK 31BF03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CDD camera integrated in the fluorescence microscope</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>DFC3000G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryotome</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>CM3050S&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data Processing Software for the AFM</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Version 5.0.86,&#160; can be downloaded for free from the following website https://customers.jpk.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium (DMEM)&#160;</td>
			<td>Gibco, Life Technologies, Darmstadt, Germany</td>
			<td>41966052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope (Leica DMi8)</td>
			<td>Leica Biosystems, Wetzlar, Germany</td>
			<td>11889113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass block cantiliver holder</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>SP-90-05</td>
			<td>Extra long glass block with angled faces, designed especially for the use with the JPK PetriDishHeaterTM (Bruker).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted phase contrast microscope (integrated in the AFM)</td>
			<td>AxioObserver D1, Carl Zeiss Microscopy, Jena, Germany</td>
			<td>L201306_03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without L-glutamine&#160;</td>
			<td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope glass slides</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA</td>
			<td>CLS294775X50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium With DAPI</td>
			<td>ibidi GmbH, Gr&#228;felfing, Germany</td>
			<td>50011</td>
			<td>Mounting media with nuclear DAPI (4&#8242;,6-diamidino-2-phenylindole) counterstaining used for cartilage discs&#160; side view imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA</td>
			<td>P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM (Petri Dish Heater)</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather Medical Products, Osaka, Japan</td>
			<td>2023-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone Skirt</td>
			<td>Bruker Nano GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Protective silicone membrane (D55x0.25) which is placed on the basis of the base of the glas block to prevent&#160; medium condensation in the AFM head.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical program - SPSS</td>
			<td>IBM, Armonk, New York, USA</td>
			<td>SPSS Statistics 22</td>
			<td>Vesion 280.0.0.0 (190)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes&#160;</td>
			<td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen, Switzerland</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-tek O.C.T. Compound</td>
			<td>Sakura Finetek, Alphen aan den Rijn, Netherlands</td>
			<td>SA6255012</td>
			<td>Water-soluble embedding medium&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

addressing practical issues in atomic force microscopy-based micro-indentation on human articular cartilage explants

Sin lugar a dudas, la microscopía de fuerza atómica (AFM) es actualmente una de las técnicas más potentes y útiles para evaluar micro e incluso nano-señales en el campo biológico. Sin embargo, al igual que con cualquier otro enfoque microscópico, pueden surgir desafíos metodológicos. En particular, las características de la muestra, la preparación de la muestra, el tipo de instrumento y la sonda de indentación pueden dar lugar a artefactos no deseados. En este protocolo, ejemplificamos estos problemas emergentes en explantes de cartílago articular sanos y osteoartríticos. Con este fin, primero mostramos a través de un enfoque paso a paso cómo generar, clasificar y clasificar visualmente discos de cartílago articular ex vivo de acuerdo con diferentes etapas de degeneración mediante imágenes de fluorescencia de mosaico 2D de gran tamaño de los explantes de tejido completo. La principal fortaleza del modelo ex vivo es que comprende cartílago humano nativo envejecido que permite la investigación de los cambios relacionados con la osteoartritis desde el inicio temprano hasta la progresión. Además, también se presentan los errores más comunes en la preparación de los tejidos, así como el procedimiento real de MFA junto con el posterior análisis de los datos. Mostramos cómo los pasos básicos pero cruciales, como la preparación y el procesamiento de la muestra, las características topográficas de la muestra causadas por la degeneración avanzada y la interacción muestra-punta, pueden afectar la adquisición de datos. También sometemos a escrutinio los problemas más comunes en la AFM y describimos, en la medida de lo posible, cómo superarlos. El conocimiento de estas limitaciones es de suma importancia para la correcta adquisición de datos, la interpretación y, en última instancia, la incorporación de los hallazgos en un contexto científico amplio.

Utilizando un dispositivo de corte de fabricación propia, pudimos explantar y generar pequeños discos de cartílago (4 mm x 1 mm) a partir de cóndilos humanos frescos que contenían un patrón espacial celularúnico 30 de cuerdas simples (SS, Figura 2A), cuerdas dobles (DS), grupos pequeños (SC), grupos grandes (BC; Figura 2A) y difusa (Figura 2B). En la Figura 3A se muestra ...

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Addressing Practical Issues in Atomic Force Microscopy-Based Micro-Indentation on Human Articular Cartilage Explants

Presentamos un enfoque paso a paso para identificar y abordar los problemas más comunes asociados con las microindentaciones de microscopía de fuerza atómica. Ejemplificamos los problemas emergentes en los explantes nativos de cartílago articular humano caracterizados por varios grados de degeneración impulsada por la osteoartritis.

Abordaje de cuestiones prácticas en la microindentación basada en microscopía de fuerza atómica en explantes de cartílago articular humano

Without a doubt, atomic force microscopy (AFM) is currently one of the most powerful and useful techniques to assess micro and even nano-cues in the ...

El objetivo de este protocolo fue crear un modelo in vitro para estudiar las propiedades mecánicas del cartílago articular durante el inicio y la progresión de la artrosis. La principal ventaja de la presente técnica es que los explantes de cartílago son fáciles de generar y altamente representativos del cartílago de la edad nativa. Este modelo se puede utilizar para analizar y monitorizar diversos enfoques de artrosis, diagnósticos y terapéuticos a nivel biomecánico.Para empezar, corta el cartílago del hueso con un bisturí. Con un punzón de biopsia, genere discos de cuatro milímetros de diámetro. Coloque el disco en un dispositivo de corte hecho a medida.Con una espátula, fije y estabilice el disco cartilaginoso. Corta el disco cartilaginoso con una cuchilla de afeitar. Con una espátula, recoge el disco y colócalo en un tubo de 1,5 mililitros.Para permanecer en las muestras de cartílago, agregue 130 microlitros de tinte de fluorescencia permeable a las células a cada pocillo de la placa de 96 pocillos y distribuya el disco en la placa como un disco por pocillo. Coloque la placa de 96 pocillos en el soporte de placas del microscopio de fluorescencia. Seleccione el filtro de fluorescencia adecuado y el objetivo.Coloque el objetivo debajo del pocillo preseleccionado que contiene cartílago individual. Concéntrese en el disco para ver el patrón celular. Seleccione la función de navegador para obtener una visión general de todo el pozo.Utilice el botón izquierdo del ratón y arrástrelo para navegar a una posición de escenario diferente. Seleccione un cuadrado que abarque el área de interés que se va a escanear. Seleccione la opción de punto de mapa de enfoque del software y luego seleccione cada mosaico individual haciendo clic izquierdo en el centro del mismo.Seleccione la opción mapa de enfoque en la ventana que aparece con todos los mosaicos seleccionados anteriormente. Haga doble clic en un mosaico para mostrarlo y enfocarlo correctamente. A continuación, haga clic en establecer Z para guardar el plan focal y continúe con el siguiente mosaico.Después de ajustar el plan focal para cada mosaico individual, comience la adquisición de imágenes presionando iniciar escaneo. Fije cada disco de cartílago preseleccionado que contenga un patrón celular en placas de Petri agregando suficiente pegamento biocompatible en los lados superior, inferior, izquierdo y derecho del disco. Cubrir los discos con 2,5 mililitros de medio Leibovitz sin L-glutamina.Coloque la placa de Petri en el portamuestras de los dispositivos AFM. Para calibrar el voladizo AFM, colóquelo en la superficie del voladizo del bloque de vidrio de modo que descanse sobre el plano óptico pulido en el centro del bloque de vidrio. Baje el voladizo en pasos de 100 micrómetros utilizando la función de motor paso a paso hasta que esté completamente sumergido en el medio.Para identificar el sitio de medición de cartílago deseado, inicie un enfoque de escáner con el voladizo en un área limpia libre de muestras de la placa de Petri. A continuación, retraiga el voladizo a 1,5 milímetros de distancia de la parte inferior de la placa. Cambie de la vista de campo claro a la de fluorescencia e identifique visualmente la parte superior del disco.Mueva el portamuestras AFM exactamente dos milímetros hacia el centro del disco. Ejecute un enfoque de escáner para llegar a la superficie del disco de cartílago y retraer el voladizo 100 micrómetros. Para generar una curva de fuerza-distancia, concéntrese en las celdas colocadas en el sitio de medición deseado.Haga clic en el botón Ejecutar para iniciar las mediciones y adquirir cinco curvas de fuerza-distancia en cada sitio de medición. Guarde las curvas una vez inspeccionadas. Para estimar los módulos de Young, utilizando la opción abrir un lote de curvas de espectroscopia, abra las curvas de fuerza-distancia generadas para ser analizadas.Seleccione el modelo de ajuste de Hertz seguido de la opción de ajuste de elasticidad. A continuación, visualiza y documenta el módulo de Young. Adáptese utilizando la relación de poisson de 0,5 y el radio de punta en voladizo adecuado.A continuación, compruebe visualmente el ajuste de la curva fuerza-distancia para garantizar su corrección. Para determinar la profundidad de indentación, abra cada una de las curvas de fuerza-distancia generadas en el software de análisis de datos y seleccione el modelo de ajuste de Hertz como proceso de análisis. Aplique la opción restar desplazamiento de línea base a poner a cero el eje de deflexión vertical y seleccione la función de desplazamiento más inclinación.Utilice la función de búsqueda de punto de contacto para identificar automáticamente el punto de contacto. Usando la función de posición de punta vertical, reste la distancia teniendo en cuenta únicamente la deflexión en voladizo de la altura piezoeléctrica bruta durante la indentación. Seleccione la opción de ajuste de elasticidad para mostrar la curva de fuerza-distancia procesada.A continuación, seleccione el área del gráfico para que se alinee con el valor más negativo en el eje de posición vertical de la punta. En la pestaña de parámetros del cuadro XMIN, lea y documente la sangría. Los discos que contenían cuerdas simples mostraron valores de rigidez más altos con una mediana de 2,6 kilos pascales, que es representativa de áreas de cartílago sanas y sin compromisos.Con el inicio y la progresión de la osteoartritis, las mediciones de AFM mostraron una fuerte disminución gradual de la rigidez del 42 % en las cuerdas dobles, del 77 % en grupos pequeños y, finalmente, del 88 % en las etapas avanzadas representadas por grupos grandes. Los discos que contienen un patrón difuso se muestran en elevada elasticidad con una variación importante de los valores únicos del módulo de Young. Para todos los discos cartilaginosos con una organización de patrón celular predominante asignada, se encontró que la profundidad de indentación asociada con el punto de ajuste empleado era inversamente proporcional a la rigidez.Los artefactos observados en las curvas de fuerza-distancia generadas son indicativos de un contacto subóptimo entre el voladizo de AFM y la superficie del cartílago o de una fijación incorrecta de la muestra a la placa de Petri. Nuestros explantes de cartílago se pueden procesar y analizar utilizando una variedad de técnicas biológicas moleculares, como el análisis de proteínas a través de eliza, el etiquetado inmunológico, la modificación occidental o el análisis de genes mediante PCR. Este método se puede utilizar para estudiar el impacto directo de las nuevas terapias en el cartílago articular y puede ayudar a los investigadores a obtener información importante sobre los mecanismos de la osteoartritis.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bacterial Immobilization for Imaging by Atomic Force Microscopy

Inmovilización de bacterias para tratamiento de imágenes de microscopía de fuerza atómica

AFM is a high-resolution (nm scale) imaging tool that mechanically probes a surface.  It has the ability to image cells and biomolecules, in a liquid ...

Investigación

Bioingeniería

Visualization of Recombinant DNA and Protein Complexes Using Atomic Force Microscopy

La visualización de ADN recombinante y complejos de proteínas utilizando microscopía de fuerza atómica

Atomic force microscopy (AFM) allows for the visualizing of individual proteins, DNA molecules, protein-protein complexes, and DNA-protein complexes. On ...

Quantifying the Mechanical Properties of the Endothelial Glycocalyx with Atomic Force Microscopy

La cuantificación de las propiedades mecánicas de la glicocálix endotelial con la Microscopía de Fuerza Atómica

Our  understanding of the interaction of leukocytes and the vessel wall during  leukocyte capture is limited by an incomplete understanding of the ...

Measuring the Mechanical Properties of Living Cells Using Atomic Force Microscopy

Medición de las propiedades mecánicas de las células vivas mediante microscopía de fuerza atómica

Mechanical  properties of cells and extracellular matrix (ECM) play important roles in many  biological processes including stem cell differentiation, ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

El cartílago humano Tissue Fabrication Usando tridimensional Tecnología de impresión inyección de tinta

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Novel Atomic Force Microscopy Based Biopanning for Isolation of Morphology Specific Reagents against TDP-43 Variants in Amyotrophic Lateral Sclerosis

Novela Microscopía de Fuerza Atómica Based biopanning para el aislamiento de Morfología reactivos específicos contra la TDP-43 variantes en la esclerosis lateral amiotrófica

Because protein variants play critical roles in many diseases including TDP-43 in Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS), alpha-synuclein in ...

Atomic Force Microscopy Imaging and Force Spectroscopy of Supported Lipid Bilayers

Fuerza Atómica Microscopía Imaging y Fuerza Espectroscopia de admitidos Bilayers lípidos

Atomic force microscopy (AFM) is a versatile, high-resolution imaging technique that allows visualization of biological membranes. It has sufficient ...

3D Hydrogel Scaffolds for Articular Chondrocyte Culture and Cartilage Generation

3D hidrogel andamios para articular condrocitos cultura y cartílago Generación

Human articular cartilage is highly susceptible to damage and has limited self-repair and regeneration potential. Cell-based strategies to engineer ...

An Experimental and Finite Element Protocol to Investigate the Transport of Neutral and Charged Solutes across Articular Cartilage

Un experimental y el Protocolo de elementos finitos para investigar el transporte de solutos neutros y cargadas a través de cartílago articular

Osteoarthritis (OA) is a debilitating disease that is associated with degeneration of articular cartilage and subchondral bone. Degeneration of articular ...

Real-time Visualization and Analysis of Chondrocyte Injury Due to Mechanical Loading in Fully Intact Murine Cartilage Explants

Visualización en tiempo real y análisis de la lesión de condrocitos debido a cargas mecánicas en explantes de cartílago murino intacta

Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...