Name: source and route of pyrrolizidine alkaloid contamination in tea samples
Uploaded: 2022-09-28T14:00:00
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이 작업은 중국 국립 자연 과학 재단 (32102244), 국가 농산물 품질 및 안전 및 위험 평가 프로젝트 (GJFP2021001), 안후이 성 자연 과학 재단 (19252002) 및 USDA (HAW05020H)의 지원을 받았습니다.

본 연구를 위해 다음과 같은 잡초 종을 수집하였다: Ludwigia prostrata Roxb., Murdannia triquetra (Wall. ex C. B. Clarke) Bruckn., Ageratum conyzoides L., Chenopodium ambrosioides, Trachelospermum jasminoide (L.) Lem., Ageratum conyzoides L., Emilia sonchifolia (L.) DC, Ageratum conyzoides L. 및 Crassocephalum crepidioides (벤스.) S. 무어. 신선한 찻잎은 다양한 Longjing 43# 차나무에서 채취했?...

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	<li>Schramm, S., Kohler, N., Rozhon, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyrrolizidine+alkaloids:+Biosynthesis,+biological+activities+and+occurrence+in+crop+plants.">Pyrrolizidine alkaloids: Biosynthesis, biological activities and occurrence in crop plants.</a> Molecules. 24 (3), 498 (2019).</li><li>EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scientific+opinion+on+pyrrolizidine+alkaloids+in+food+and+feed.">Scientific opinion on pyrrolizidine alkaloids in food and feed.</a> EFSA Journal. 9 (11), 134 (2011).</li><li>Ma, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+and+regulation+of+hepatotoxic+pyrrolizidine+alkaloids+in+food:+A+critical+review+of+recent+research.">Determination and regulation of hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids in food: A critical review of recent research.</a> Food and Chemical Toxicology. 119, 50-60 (2018).</li><li>Keuth, O., Humpf, H. U., F&#252;rst, P., Melton, L., Shahidi, F., Varelis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyrrolizidine+Alkaloids:+Analytical+Challenges.">Pyrrolizidine Alkaloids: Analytical Challenges.</a> Encyclopedia of Food Chemistry. 1, 348-355 (2019).</li><li>Huang, D. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyrrolizidine+alkaloids+and+its+source+analysis+in+tea.">Pyrrolizidine alkaloids and its source analysis in tea.</a> Journal of Food Safety &amp; Quality. 9 (2), 229-236 (2018).</li><li>Liang, A. H., Ye, Z. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+situation+of+the+toxicity+researches+on+Senecio.">General situation of the toxicity researches on Senecio.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 31 (2), 93-97 (2006).</li><li>Li, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+study+of+pyrrolizidine+alkaloid-induced+hepatic+sinusoidal+obstruction+syndrome+in+rats.">Proteomic study of pyrrolizidine alkaloid-induced hepatic sinusoidal obstruction syndrome in rats.</a> Chemical Research in Toxicology. 28 (9), 1715-1727 (2015).</li><li>Jia, Z. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catalytic+enantioselective+synthesis+of+a+pyrrolizidine-alkaloid-inspired+compound+collection+with+antiplasmodial+activity.">Catalytic enantioselective synthesis of a pyrrolizidine-alkaloid-inspired compound collection with antiplasmodial activity.</a> The Journal of Organic Chemistry. 83, 7033-7041 (2018).</li><li>Yang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+evidence+of+pyrrolizidine+alkaloid+N-oxide-induced+hepatic+sinusoidal+obstruction+syndrome+in+humans.">First evidence of pyrrolizidine alkaloid N-oxide-induced hepatic sinusoidal obstruction syndrome in humans.</a> Archives of Toxicology. 91 (12), 3913-3925 (2017).</li><li>Chen, Z., Huo, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+veno-occlusive+disease+associated+with+toxicity+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+herbal+preparations.">Hepatic veno-occlusive disease associated with toxicity of pyrrolizidine alkaloids in herbal preparations.</a> Netherlands Journal of Medicine. 68 (6), 252-260 (2010).</li><li>Mattocks, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chemistry and Toxicology of Pyrrolizidine Alkaloid. , (1986).</li><li>Picron, J. F., Herman, M., Van Hoeck, E., Goscinny, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+strategies+for+the+determination+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+plant+based+food+and+examination+of+the+transfer+rate+during+the+infusion+process.">Analytical strategies for the determination of pyrrolizidine alkaloids in plant based food and examination of the transfer rate during the infusion process.</a> Food Chemistry. 266, 514-523 (2018).</li><li>Kowalczyk, E., Kwiatek, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+the+sum+parameter+method+for+the+determination+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+teas.">Application of the sum parameter method for the determination of pyrrolizidine alkaloids in teas.</a> Food Additives &amp; Contaminants: Part A. 37 (4), 622-633 (2020).</li><li>EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+for+human+health+related+to+the+presence+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+honey,+tea,+herbal+infusions+and+food+supplements.">Risks for human health related to the presence of pyrrolizidine alkaloids in honey, tea, herbal infusions and food supplements.</a> EFSA Journal. 15 (7), 04908 (2017).</li><li>Han, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyrrolizidine+alkaloids+in+tea:+A+review+of+analytical+methods,+contamination+levels+and+health+risk.">Pyrrolizidine alkaloids in tea: A review of analytical methods, contamination levels and health risk.</a> Food Science. 42 (17), 255-266 (2021).</li><li>Nowak, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interspecific+transfer+of+pyrrolizidine+alkaloids:+An+unconsidered+source+of+contaminations+of+phytopharmaceuticals+and+plant+derived+commodities.">Interspecific transfer of pyrrolizidine alkaloids: An unconsidered source of contaminations of phytopharmaceuticals and plant derived commodities.</a> Food Chemistry. 213, 163-168 (2016).</li><li>Selmar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+pyrrolizidine+alkaloids+between+living+plants:+A+disregarded+source+of+contaminations.">Transfer of pyrrolizidine alkaloids between living plants: A disregarded source of contaminations.</a> Environmental Pollution. 248, 456-461 (2019).</li><li>Izcara, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniaturized+and+modified+QuEChERS+method+with+mesostructured+silica+as+clean-up+sorbent+for+pyrrolizidine+alkaloids+determination+in+aromatic+herbs.">Miniaturized and modified QuEChERS method with mesostructured silica as clean-up sorbent for pyrrolizidine alkaloids determination in aromatic herbs.</a> Food Chemistry. 380, 132189 (2022).</li><li>Izcara, S., Casado, N., Morante-Zarcero, S., Sierra, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+miniaturized+QuEChERS+method+combined+with+ultrahigh+liquid+chromatography+coupled+to+tandem+mass+spectrometry+for+the+analysis+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+oregano+samples.">A miniaturized QuEChERS method combined with ultrahigh liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids in oregano samples.</a> Foods. 9 (9), 1319 (2020).</li><li>Van Wyk, B. E., Stander, M. A., Long, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senecio+angustifolius+as+the+major+source+of+pyrrolizidine+alkaloid+contamination+of+rooibos+tea+(Aspalathus+linearis).">Senecio angustifolius as the major source of pyrrolizidine alkaloid contamination of rooibos tea (Aspalathus linearis).</a> South African Journal of Botany. 110, 124-131 (2017).</li><li>Johnson, A. E., Molyneux, R. J., Merrill, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemistry+of+toxic+range+plants.+Variation+in+pyrrolizidine+alkaloid+content+of+Senecio,+Amsinckia,+and+Crotalaria+species.">Chemistry of toxic range plants. Variation in pyrrolizidine alkaloid content of Senecio, Amsinckia, and Crotalaria species.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 33 (1), 50-55 (1985).</li><li>Vrieling, K., de Vos, H., van Wijk, C. A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+analysis+of+the+concentrations+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+Senecio+jacobaea.">Genetic analysis of the concentrations of pyrrolizidine alkaloids in Senecio jacobaea.</a> Phytochemistry. 32 (5), 1141-1144 (1993).</li><li>Han, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development,+optimization,+validation+and+application+of+ultra+high+performance+liquid+chromatography+tandem+mass+spectrometry+for+the+analysis+of+pyrrolizidine+alkaloids+and+pyrrolizidine+alkaloid+N-oxides+in+teas+and+weeds.">Development, optimization, validation and application of ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids and pyrrolizidine alkaloid N-oxides in teas and weeds.</a> Food control. 132, 108518 (2022).</li><li>Bodi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+tea,+herbal+drugs+and+honey.">Determination of pyrrolizidine alkaloids in tea, herbal drugs and honey.</a> Food Additives &amp; Contaminants: Part A. 31 (11), 1886-1895 (2014).</li><li>European Union Commission. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Commission+Regulation+(EU)+2020/2040+of+11+December+2020+amending+Regulation+(EC)+No+1881/2006+as+regards+maximum+levels+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+certain+foodstuffs.">Commission Regulation (EU) 2020/2040 of 11 December 2020 amending Regulation (EC) No 1881/2006 as regards maximum levels of pyrrolizidine alkaloids in certain foodstuffs.</a> Official Journal of the European Union. 14 (12), 1-4 (2020).</li></ol>

현재 연구는 차 샘플에서 PA의 오염 경로와 출처를 탐색하고 차 식물의 다른 부분에서 PA의 분포를 탐색하는 효과적이고 민감한 방법을 개발하도록 설계되었습니다. 그러나 이 연구에서는 크로마토그래피 컬럼에서 15개의 PA만이 성공적으로 분리되었으며, 이는 식물 종 3,4의 많은 수의 알칼로이드에 비해 매우 적은 수입니다. 이것은 컬럼 자체의 패킹 특...

2차 대사산물인 피롤리지딘 알칼로이드(PA)는 초식동물, 곤충, 병원균으로부터 식물을 보호한다 1,2. 지금까지 전 세계적으로 6,000종 이상의 식물 종에서 서로 다른 구조를 가진 660개 이상의 PA와 PA-N-산화물(PANO)이 발견되었습니다 3,4. PA 생산 식물은 주로 국화과, 보라기과, 파바과, 아포시나과에서 발견됩니다 5,6. PA는 불안정한 디하이드로피롤리지딘 알칼로이드로 쉽게 산화되는데, 이는 강한 친전자성을 가지며 DNA 및 단백질과 같은 친핵체를 공격하여 간세포 괴사, 정맥 폐색, 간경변, 복수 및 기타 증상을 유발할 수 있습니다 7,8. PA 독성의 주요 표적 기관은 간입니다. PA는 또한 폐, 신장 및 기타 장기 독성과 돌연변이 유발 성, 발암 성 및 발달 독성을 유발할 수 있습니다 9,10.
PA가 함유된 전통 허브, 보충제 또는 차의 섭취 또는 우유, 꿀 또는 육류와 같은 식품의 간접적인 오염(PA가 포함된 목초지 섭취로 인한 독성)으로 인해 많은 국가에서 인간 및 동물 중독 사례가 보고되었습니다.11,12,13. 유럽식품안전청(EFSA)의 조사 결과에 따르면 (허브) 차와 같은 물질은 인체가 PA/PANO에 노출되는 중요한 원인이다14. 차 샘플은 PA를 생산하지 않는 반면, PA 생산 식물은 일반적으로 차밭에서 발견됩니다(예: Emilia sonchifolia, Senecio angulatus 및 Ageratum conyzoides)15. 이전에는 차가 수확 및 가공 중에 생산 공장의 PA로 오염될 수 있다고 의심되었습니다. 그러나 일부 손으로 딴 찻잎(즉, PA 생산 식물이 없음)에서도 PA가 검출되어 다른 경로나 오염원이 있어야 함을 시사한다16. 돼지풀(Senecio jacobaea)과 멜리사(Melissa officinalis), 페퍼민트(Mentha piperita), 파슬리(Petroselinum crispum), 카모마일(Matricaria recutita), 한련(Tropaeolum majus)의 공동 재배 실험을 실시한 결과, 이들 식물 모두에서 PA가 검출되는 것으로 나타났다17. PA는 실제로 토양18,19를 통해 살아있는 식물간에 전달되고 교환되는 것으로 확인되었습니다. Van Wyk et al.20은 루이보스 차(Aspalathus linearis)가 잡초가 풍부한 지역에서 심하게 오염되었으며 동일한 유형과 비율의 PA를 함유하고 있음을 발견했습니다. 그러나 잡초가 없는 지역의 루이보스 차에서는 PA가 검출되지 않았습니다.
현재 선택성과 감도가 높은 초고성능 액체 크로마토그래피 탠덤 질량분석법(UPLC-MS/MS)은 농산물 및 식품의 PA의 정성 및 정량 분석에 널리 사용되었습니다21,22. 시료 처리 방법은 일반적으로 고체상 추출법(SPE) 또는 복합 식품 매트릭스 추출물의 QuEChERS(Quick Easy Cheap Effective Rugged Safe) 세척으로 구성되며, 이는 가능한 가장 높은 감도12,19를 얻을 수 있습니다. 그러나 토양, 잡초 및 신선한 찻잎과 같은 복잡한 매트릭스에서 PA를 검출하고 정량화할 수 있는 강력한 분석 방법은 여전히 부족합니다.
이 연구는 흡착제 정제 방법과 결합된 UPLC-MS/MS를 사용하여 말린 차 샘플, 신선한 찻잎, 잡초 및 잡초 근권 토양 샘플에서 15개의 PA를 분석했습니다. 또한, 중국 안후이성 진자이 차밭의 5개 샘플링 장소에서 15쌍의 잡초 및 잡초 뿌리권 토양 샘플과 60개의 신선한 찻잎 샘플을 수집하여 15개의 PA에 대해 분석했습니다. 이러한 결과는 차의 품질과 안전성을 보장하기 위해 차 샘플에서 PA(오염)의 출처 및 경로에 대한 조사 방법과 일부 정보를 제공할 수 있습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetonitrile (99.9%)</td>
			<td>Tedia Company,Inc.</td>
			<td>21115197</td>
			<td>CAS No:75-05-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia (25%-28%)</td>
			<td>Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td>181210</td>
			<td>CAS No:1336-21-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium formate (97.0%)</td>
			<td>Anpel Laboratory Technoiogies (shanghai)</td>
			<td>G0860050</td>
			<td>CAS No:540-69-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon-GCB</td>
			<td>CNW</td>
			<td>B7760030</td>
			<td>120-400 MESH, 10g. per box&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Z 36 HK</td>
			<td>HERMLE</td>
			<td>Z36HK</td>
			<td>30000&#160;rpm (min:10 rpm), Dimensions (W x H x D):&#160;71.5 cm&#215; 42 cm &#215; 51 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercially available tea product</td>
			<td>Lvming, Qingshan, Luyuchun, Changling, Huixing, Wuyunjian, Heshengchun</td>
			<td>loose tea</td>
			<td>Green tea</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Europine N-oxid (EuNO) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>323256</td>
			<td>CAS No:65582-53-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Europine (Eu) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>98222</td>
			<td>CAS No:570-19-4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formate (98.0%)</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>E2022005</td>
			<td>CAS No:64-18-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HC-C18</td>
			<td>CNW</td>
			<td>D2110060</td>
			<td>40-63 &#956;m,100g.per box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heliotrine (He) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>906426</td>
			<td>CAS No:303-33-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heliotrine-N-oxide (HeNO) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>22581</td>
			<td>CAS No:6209-65-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High speed centrifuge TG16-WS</td>
			<td>cence</td>
			<td>203158000</td>
			<td>Max:16000 r/min, 330 &#215; 390 &#215; 300 mm (L &#215; W &#215; H), Capacity: 6 &#215; 50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HSS T3 column</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186004976</td>
			<td>ACQUITY UPLC HSS T3 (2.1 &#215; 100 mm 1.8 &#956;m)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intermedine (Im) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>114843</td>
			<td>CAS No:10285-06-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intermedine-N-oxide (ImNO) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>340066</td>
			<td>CAS No:95462-14-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jacobine (Jb) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>132282048</td>
			<td>CAS No:6870-67-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jacobine-N-oxide (JbNO) (98.0%)</td>
			<td>ChemFaces</td>
			<td>CFN00461</td>
			<td>CAS No:38710-25-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl Alcohol (99.9%)</td>
			<td>Tedia Company,Inc.</td>
			<td>21115100</td>
			<td>CAS No:67-56-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PSA</td>
			<td>Agela</td>
			<td>P19-00833</td>
			<td>40-60 &#956;m, 60 &#197; 100g.per box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retrorsine (Re) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>5281743</td>
			<td>CAS No:480-54-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retrorsine-N-oxide (ReNO) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>5281734</td>
			<td>CAS No:15503-86-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Senecionine (Sc) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>5280906</td>
			<td>CAS No:130-01-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Senecionine-N-oxide (ScNO) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>5380876</td>
			<td>CAS No:13268-67-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seneciphylline N-oxid (SpNO) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>6442619</td>
			<td>CAS No:38710-26-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seneciphylline (Sp) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>5281750</td>
			<td>CAS No:480-81-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Senkirkine (Sk) (98.0%)</td>
			<td>BioCrick</td>
			<td>5281752</td>
			<td>CAS No:2318-18-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPE PCX</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>12108206</td>
			<td>Cation Mixed Mode, 6 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfuric acid (97%)</td>
			<td>Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td>1003019</td>
			<td>CAS No:7664-93-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trisodium citrate</td>
			<td>Sinpharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td>20121009</td>
			<td>CAS No:6132-04-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Supmile</td>
			<td>KQ-600B</td>
			<td>Inner slot size: 500 &#215; 300 &#215; 150 mm; Capacity: 22.5 L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UPLC-xevoTQMS</td>
			<td>Waters</td>
			<td>ZPLYY-003</td>
			<td>Triple four-stage rod mass analyzer, Waters Alliance 2695/Waters ACQUITY UPLC Liquid Phase System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath thermostat oscillator</td>
			<td>Guoyu instrument</td>
			<td>SHY-2AHS</td>
			<td>Oscillation times:&#160; 60-300 times/min, Constant temperature range: room temperature to 100 &#176;C</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

source and route of pyrrolizidine alkaloid contamination in tea samples

독성 피롤리지딘 알칼로이드(PA)는 차 샘플에서 발견되어 인체 건강에 위협이 됩니다. 그러나 차 샘플에서 PA 오염의 원인과 경로는 불분명하다. 이 연구에서는 UPLC-MS/MS와 결합된 흡착 방법을 개발하여 잡초 Ageratum conyzoides L., A. conyzoides rhizospheric 토양, 신선한 찻잎 및 말린 차 샘플에서 15개의 PA를 측정했습니다. 평균 회수율은 78%-111% 범위였으며 상대 표준 편차는 0.33%-14.8%였습니다. 중국 안후이성의 진자이 차밭에서 15쌍의 A. conyzoides 및 A. conyzoides 근권 토양 샘플과 60개의 신선한 찻잎 샘플을 수집하여 15개의 PA에 대해 분석했습니다. 중간중간-N-옥사이드(ImNO)와 세네시오닌(Sn)을 제외하고 신선한 찻잎에서 15개의 PA가 모두 검출된 것은 아닙니다. ImNO(34.7μg/kg)의 함량은 Sn(9.69μg/kg)보다 컸습니다. 또한, ImNO와 Sn은 모두 차 나무의 어린 잎에 집중되어 있었고, 그 함량은 오래된 잎에서 더 낮았다. 결과는 차의 PA가 차밭에서 PA를 생산하는 잡초-토양-신선한 찻잎의 경로를 통해 옮겨진 것으로 나타났습니다.

말린 차 시료, 신선한 찻잎, 잡초 및 토양에서 15PA의 최적화된 흡착제 정제 및 분석 방법을 확립하고 SPE 카트리지를 사용하여 일반적으로 사용되는 정제 방법과 비교했습니다. 그 결과 SPE 카트리지를 사용한 말린 차 샘플, 잡초 및 신선한 찻잎에서 15개의 PA의 회수율은 72%-120%인 반면 흡착제 정제를 사용한 것은 78%-98%인 것으로 나타났습니다(그림 1). 흡착제 정화를 사용한 토?...

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Source and Route of Pyrrolizidine Alkaloid Contamination in Tea Samples

본 프로토콜은 차밭에서 PA를 생산하는 잡초의 차 샘플에서 피롤리지딘 알칼로이드(PA)의 오염을 설명합니다.

차 샘플에서 Pyrrolizidine 알칼로이드 오염의 출처 및 경로

Toxic pyrrolizidine alkaloids (PAs) are found in tea samples, which pose a threat to human health. However, the source and route of PA contamination in ...

잡초, 토양, 신선한 찻잎 및 건조 차 샘플에서 15가지 피롤리지딘 알칼로이드의 검출 방법 개발은 차에서 피롤리지딘 알칼로이드 오염원을 탐색하기 위한 기술 지원을 제공할 수 있습니다. 고체상 추출과 비교하여 토양 샘플에 대한 흡착제 방법은 피롤리지딘 알칼로이드 분석에서 시간을 절약하고 비용을 절감하며 회수율을 높일 수 있습니다. 예열 된 말린 차 제품, 신선한 찻잎 또는 잡초에서 추출을 시작하려면 50 밀리리터 원심 분리기 튜브에서 샘플 1 그램의 무게를 측정하고 리터당 0.1 몰의 황산 용액 10 밀리리터를 튜브에 첨가합니다.다음으로, 고체상 추출을 사용하여 분석해야 하는 경우 시료를 2분 동안 와동시키고, 흡착제 클린업을 사용하여 분석해야 하는 경우 1분 동안 와류합니다. 그런 다음 샘플을 15 분 동안 초음파 추출한 다음 실온에서 10 분 동안 9, 390G에서 원심 분리합니다. 그런 다음 끝이 플라스틱인 스포이드를 사용하여 상청액 용액을 50밀리리터 원심분리기 튜브로 옮깁니다.추출을 두 번 수행 한 후 상청액을 튜브에 결합시킵니다. 준비된 토양에서 추출을 시작하려면 50 밀리리터 원심 분리기 튜브에서 샘플 1g의 무게를 잰다. 리터당 0.1몰의 0.1밀리리터를 3구연산 삼나트륨 용액에 첨가하여 토양 pH를 6.0으로 조정하고 샘플을 2분 동안 방치합니다.그런 다음 리터당 0.1몰의 황산 메탄올 용액 10밀리리터를 튜브에 넣고 샘플을 2분 동안 와동시킨 다음 30분 동안 진탕합니다. 다음으로, 앞에서 설명한 것처럼 30 분 동안 초음파 추출을 수행하십시오. 그런 다음 샘플을 9, 390G에서 10분 동안 원심분리합니다.그리고 플라스틱 팁 스포이드를 사용하여 상층액을 50 밀리리터 원심 분리기 튜브로 옮깁니다. 추출을 2회 수행한 후, 상층액을 합친다. 5 밀리리터의 메탄올과 5 밀리리터의 탈 이온수로 고체상 추출 또는 SPE 카트리지를 활성화하십시오.활성화 후, 샘플 추출에서 10 밀리리터의 상청액을 사전 활성화 된 카트리지에 첨가한다. 샘플 용액 레벨이 카트리지의 상부 층에 도달한 후, 5밀리리터의 1% 포름산 용액으로 샘플 매트릭스를 용리한 다음 5밀리리터의 메탄올로 용리하고 용리액을 버립니다. 다음으로, 0.5% 암모니아수를 함유하는 5밀리리터의 메탄올로 분석물을 용리합니다.0.22미크론 멤브레인 필터를 통해 용리액을 여과하여 UPLC-MS/MS로 분석합니다. 흡착제를 사용하여 샘플 클린업을 수행하려면 GCB, PSA 및 C10을 손상시키는 흡착제가 10 밀리그램에서 20 밀리그램에서 15 밀리그램의 비율로 10 밀리리터 원심 분리기 튜브를 준비합니다. 그런 다음 샘플 처리 후 얻은 상청액 2 밀리리터를 첨가하십시오.다음으로, 시료와 흡착제 혼합물을 상온에서 8분 동안 9, 390 G에서 1분 동안 원심분리한다. 생성된 상등액 1밀리리터를 0.22미크론 멤브레인 필터를 통해 샘플 바이알에 여과한 후 UPLC-MS/MS로 분석합니다. 이 연구에서는 SPE 카트리지 방법과 비교하여 흡착제 정제 기술을 사용하여 신선한 찻잎, 말린 차 샘플 및 잡초에서 15개의 피롤리지딘 알칼로이드를 더 높은 비율로 회수했습니다.흡착제 정제를 사용한 토양 내 알칼로이드의 회수율은 79-111 %5 개의 샘플링 장소에서 수집 된 신선한 찻잎에서 세네 시오닌보다 더 높은 함량의 인터 메딘 N- 옥사이드가 검출되었다. 세네시오닌은 샘플링 사이트 1과 2의 성숙한 잎에서 검출되지 않았습니다. 11개의 피롤리지딘 알칼로이드 중 토양에서 인터메딘 N-옥사이드만 검출된 반면, 차나무의 다른 부분에서는 세네시오닌과 인터메딘 N-옥사이드가 검출되었습니다.또한, 두 개의 잎을 가진 하나의 새싹에서 Intermedine N-oxide의 함량이 가장 높은 것으로 나타났습니다. 이것을 먼저 시도하는 동안 가장 중요한 것은 리터당 0.1몰의 0.1밀리리터를 더하여 토양 pH를 6.0으로 조정하는 것입니다. 이 방법은 다른 식용 식물의 알칼로이드 분석에 적용할 수 있으며 알칼로이드의 출처를 탐색하기 위한 자연 기술도 제공합니다.

Research

JoVE Journal

Environment

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형광 파우더를 사용하여 소매 환경에서의 미생물 오염을 추적 - 소매 델리 카트슨 환경 예

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연구

환경과학

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엔테로 바이러스 및 문화 RT-qPCR에 의해 물에서 노로 바이러스의 발생의 EPA 방법 1615 측정. 바이러스 샘플의 I. 컬렉션

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

Use of a Filter Cartridge for Filtration of Water Samples and Extraction of Environmental DNA

여과 물 샘플 및 환경 DNA의 추출을위한 필터 카트리지의 사용

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies ...

Experimental Protocol for Detecting Cyanobacteria in Liquid and Solid Samples with an Antibody Microarray Chip

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검출 실험 프로토콜<em&gt; 시아 노 박테리아</em&gt; 항체 마이크로 어레이 칩과 액체 및 고체 시료에

Global warming and eutrophication make some aquatic ecosystems behave as true bioreactors that trigger rapid and massive cyanobacterial growth; this has ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

많은 샘플을 이용한 실험에서 토양 미생물을 특성화하기위한 지질 추출 및 분석 방법

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Traditional methods of identifying fungal exposures in occupational environments, such as culture and microscopy-based approaches, have several ...

In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples

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제자리에서 파라핀 포함 성인 산호 샘플에 대 한 교 잡 기술

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Choice and No-Choice Bioassays to Study the Pupation Preference and Emergence Success of Ectropis grisescens

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선택 및 아니오 선택 생물 검정 Pupation 환경과 Ectropis grisescens 의 출현 성공 공부

Many insects live above the ground as larvae and adults and as pupate below the ground. Compared to the above-ground stages of their life cycles, less ...

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Communities of nonvascular cryptogams, such as mosses or lichens, are an important part of the Earth's biodiversity, contributing to the regulation of the ...

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형태와 오픈 소스 소프트웨어 파이프라인 Agar에 움직일 활성된 슬러지 입자의 크기 측정

Experimental bioreactors, such as those treating wastewater, contain particles whose size and shape are important parameters. For example, the size and ...