Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

نشكر مركز الموارد الحيوانية التابع للمركز الطبي الجنوبي الغربي بجامعة تكساس على مساعدتهم في التدريب الجراحي ومراجعة البروتوكول. نشكر فريق دعم Wert Lab على مساعدتهم التي لا تقدر بثمن. تم دعم هذا العمل بأموال من المعهد الوطني للصحة (NIH P30EY030413). تم استخدام Biorender.com لإنشاء مخططات الرسوم المتحركة.

تمت الموافقة على جميع التجارب على الحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات في UTSW (APN # 2019-102840).
1. استئصال الخصية الفئران
<ol><li>قم بإعداد حقل عمل معقم وتأكد من تعقيم الأدوات الجراحية اللازمة وتوافرها بسهولة. اتبع الممارسات المعقمة لجراحة بقاء القوا?...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

يسمح الاستئصال الجراحي للخصيتين والمبيضين بدراسة فسيولوجيا الفئران تحت الحرمان الهرموني الخاضع للرقابة. هذه التقنية مهمة للعديد من مجالات العلوم ، بما في ذلك التنكس العصبي ، والتمثيل الغذائي المعدني ، والقلب والأوعية الدموية ، والصحة الإنجابية15،16،17،<sup class="xref"...

الخصيتان والمبيضان هما الجهازان الأساسيان المسؤولان عن إنتاج الهرمونات الجنسية. سلسلة الاتصالات الهرمونية التي تؤدي إلى إنتاج هرمون التستوستيرون والإستروجين هي عملية مميزة بشكل جيد تبدأ في منطقة ما تحت المهاد مع إطلاق هرمون إفراز الغدد التناسلية (GnRH)1. يؤدي إطلاق GnRH إلى إفراز الهرمون اللوتيني (LH) والهرمون المنبه للجريب (FSH) من الغدة النخامية. عندما تدخل هذه الهرمونات إلى مجرى الدم ، فإنها تؤثر بعد ذلك على الأنسجة الأخرى في الجسم. الهدف الأساسي ل LH هو الخصيتين (عند الذكور) والمبيضين (عند الإناث)2. استجابة ل LH ، تنتج الخصيتان وتطلق هرمون التستوستيرون3. وبالمثل ، تنتج المبايض هرمون الاستروجين4. في حين أن الآثار المقصودة لهذه الهرمونات هي إعداد الخلايا والجسم للإخصاب وضمان عمل الجهاز التناسلي ، يمكن أن تتأثر العديد من أجهزة الجسم الأخرى.
تم ربط الهرمونات الجنسية بالعديد من الوظائف الفسيولوجية. على سبيل المثال، يساعد الإستروجين في الحفاظ على الاتزان الداخلي للعظام عن طريق منع ارتشاف العظام بواسطة الخلايا الآكلة للعظم. لهذا السبب ، يمكن استخدام نماذج الفئران المبيضة لدراسة فسيولوجيا أمراض العظام مثل هشاشة العظام5،6،7. التستوستيرون والإستروجين هي أيضا أهداف بحثية للعديد من أمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض التنكسية العصبية. في الآونة الأخيرة ، تم ربط إنتاج هرمون التستوستيرون المرتفع إلى جانب النظام الغذائي عالي الدهون بالإجهاد التأكسدي الوعائي8. في الدماغ ، تسببت التغيرات في LH بعد استئصال المبيض في حدوث تغييرات في الذاكرة المكانية9. أصبح الحد من هرمون الاستروجين بعد استئصال المبيض أيضا نظاما نموذجيا لدراسة موت الخلايا في الحصين ، حيث يمكن أن يؤدي ذلك إلى موت الخلايا المبرمج ، مما يؤدي إلى عجز في الذاكرة10. أظهر التستوستيرون أيضا دورا في نمو الكلى في كل من نماذج الفئران والبشر بعد زرع الكلى11.
يسمح إنشاء نموذج الفئران المحرومة من الهرمونات بدراسة الهرمونات الجنسية وشلالات هرموناتها على الأمراض أو الأنسجة المختلفة. يمكن تحقيق ذلك عن طريق الاستئصال الجراحي للخصيتين (استئصال الخصية) أو المبايض (استئصال المبيض). يمكن إجراء هذا الإجراء في الفئران من أي سلالة عندما تكون صغيرة مثل سن الفطام (واحد وعشرون يوما) أو أي عمر بالغ. يتم إجراء استئصال المبيض في إناث الفئران ، بينما يتم إجراء استئصال الخصية في ذكور الفئران. عن طريق إزالة هذه الأعضاء ، يمكن تخفيض مستويات هرمون الاستروجين والتستوستيرون ، والعديد من مشتقاتها ، مثل البروجسترون ، بشكل كبير12,13. يمكن أن تكون عملية إجراء استئصال الخصية أو استئصال المبيض في الفئران سريعة وطفيفة التوغل باستخدام التقنية المناسبة. يمكن أن يسمح الاستئصال السريع لهذه الأعضاء بطريقة آمنة وفعالة بالمعالجة الجراحية السريعة مع الحفاظ على الحد الأدنى من أعداد الفئران من خلال الحصول على معدل بقاء بنسبة 100٪ عند إجرائها بشكل صحيح. هنا ، نقوم بتفصيل بروتوكول للاستئصال السريع للخصيتين والمبيضين ونوضح المراقبة المناسبة بعد الجراحة لتمكين الباحثين من إجراء هذه الجراحة بسرعة وأمان. نقوم أيضا بتضمين أمثلة مرئية للأعضاء التناسلية والأنسجة المحيطة بها لتزويد الجراح بمعالم تشريحية عند إجراء هذا الإجراء.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

تلعب إشارات هرمون الجنس دورا مهما في أنظمة الأعضاء المتعددة وكذلك في تطور الأمراض المختلفة ، بما في ذلك الأمراض التنكسية العصبية. يسمح التلاعب بمستويات هرمون الجنس في نظام نموذج الفئران بدراسة تأثيرها على الأعضاء / الأنسجة وضمن تطور المرض. يوفر استئصال الخصية - الاستئصال الجراحي للخصيتين - واستئصال المبيض - الاستئصال الجراحي للمبيض - طريقة لاستنفاد الهرمونات الجنسية الداخلية بحيث يمكن توفير مستويات هرمون دقيقة من خلال الأدوية أو طرق التوصيل الأخرى. هنا ، نقدم طرقا سريعة وطفيفة التوغل لكل من استئصال الخصية واستئصال المبيض في نظام نموذج الفئران لتقليل الهرمونات الجنسية. يفصل هذا البروتوكول التحضير الجراحي واستئصال الخصيتين من خلال كيس الصفن ، واستئصال المبيضين عن طريق شقين في الظهر الجانبي الأيمن والأيسر.

يتم تنفيذ الإجراء المعروض هنا على الفئران التي تتراوح أعمارها بين شهر وثلاثة أشهر في خلفية C57BL / 6J. وزن الفئران الذكور 16-28 جم ، ووزن الفئران الإناث 14-24 جم في وقت الإجراء. تم تحسين هذا الإجراء ليكون قابلا للتطبيق على الفئران من العديد من الأعمار ، من الفطام حتى مرحلة البلوغ.
يتض?...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

تصف هذه المخطوطة طريقة متسقة لإجراء عمليات استئصال خصية القوارض واستئصال المبيض بسرعة للبقاء على قيد الحياة.

استئصال الخصية واستئصال المبيض لتقليل إنتاج هرمون الجنس

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو إظهار الاستئصال الجراحي لخصيتي الفئران والمبيضين بطريقة سريعة وآمنة وفعالة. يتم إجراء استئصال خصية الفئران عن طريق شق خط الوسط البطني في كيس الصفن ، حيث يتم عزل الخصيتين وإزالتهما ، يليه إغلاق شق الجلد. يتم إجراء استئصال المبيض الفئران عن طريق شق ظهري جانبي في البطن حيث يتم عزل المبيض وإزالته ، يليه إغلاق شق الجلد ، مع خيار تكرار هذا الإجراء على الجانب الآخر لإجراء استئصال المبيض الثنائي.لبدء استئصال الخصية للفأر ، ابدأ أولا بتسجيل وزن الفأر الذكر واستعد لإدارة مسكنات الألم والتخدير المناسبة وفقا لإرشادات مؤسستك. بمجرد أن يصبح الفأر تحت التخدير ، قم بتغطية العينين بجل مزلق للعين لحمايتهما من الجفاف أثناء العملية. قبل المتابعة ، تأكد من أن الماوس في مستوى التخدير المناسب عن طريق إجراء اختبار استجابة قرصة إصبع القدم.بعد ذلك ، حلق المناطق الأربية وكيس الصفن من الماوس. باستخدام قضيب ذو رأس قطني ، ضعي طبقة رقيقة من كريم إزالة الشعر على موقع الجراحة والمناطق المحيطة بها. بعد 30 ثانية ، قم بإزالة كريم مزيل الشعر باستخدام اسفنجة الشاش النظيفة.انقل الماوس إلى منطقة جراحية وتأكد من توفر مصدر للحرارة. استخدم شريطا لاصقا ناعما للصق أقدام الماوس بحصيرة الجراحة. إذا صعدت الخصيتان إلى البطن ، فاستخدم ضغطا لطيفا على البطن لمساعدتهما على النزول.افرك الجلد بمحلول Betadine ، بدءا من المنتصف فوق موقع الجراحة واعمل بسهولة للخارج باتجاه حدود المنطقة المحلوقة. اتبع مقشر Betadine مع فرك الكحول بطريقة مماثلة. كرر هذه العملية ثلاث مرات لضمان تطهير الجلد بشكل صحيح.غطي الفأر بالستارة الجراحية. أمسك الجلد وقم بعمل شق في خط الوسط يبلغ طوله حوالي 1 إلى 1 1/2 سم. عند الإمساك بالحدود المقطوعة للجلد ، استخدم أداة ذات رأس حاد لفصل الجلد عن الأنسجة الكامنة.خذ بعض الوقت للقيام بذلك على الحدود الجانبية والعلوية والسفلية للشق. بعد ذلك ، اعزل خصية واحدة عن طريق تحريك شق الجلد لتكون فوقها مباشرة. استخدم زوجا من الملقط للإمساك بعضلة المشمرة الرفيعة والشفافة التي تحيط بالخصية.يمكن تأكيد تحديد النسيج الصحيح من خلال شفافيته وقدرته على التحرك بشكل مستقل عن الأنسجة الكامنة المغلقة بداخله. بعد ذلك ، شق عضلة المشمرة عن طريق إجراء شق في قمة الأنسجة. ضع مشبك قفل على الحد الخلفي لعضلة المشمرة المقطوعة لتثبيت التوتر على الأنسجة.استخدم زوجا من الملقط للإمساك بالخصية وإخراجها من غمد المشرقة. بمجرد خروج الخصية ، قم بلف الأنسجة بشكل جانبي وقم بتوطين نقطة إدخال المشمرة التي تربط عضلة المشمرة بالخصية والبربخ على الجانب الخلفي من الخصية. المشبك وتمزيق هذا النسيج لقطع هذا الاتصال.قم بإضفاء الطابع الخارجي على وسادة الدهون الأربية عن طريق سحبها ببطء للخارج. أثناء القيام بذلك ، راقب علامات النزيف وتأكد من عدم الإضرار بأي من الأوعية الدموية في هذه العملية. بعد ذلك ، استخدم زوجا من مرقئ القفل لتثبيت الحبل المنوي والأوعية الدموية.أثناء الاحتفاظ بتوتر طفيف على الخصية ، قم بكي الحبل المنوي والأوعية الدموية البعيدة عن مشبك مرقئ. حرر المرقئ ببطء وتأكد من أن جذع الأنسجة لديه إرقاء جيد ولا يستمر في النزيف. إن تطبيق ضغط خارجي طفيف على عضلة المشمرة سيسمح لجذع الأنسجة هذا بالتراجع إلى تجويف الجسم.اجمع جانبي عضلة المشمرة معا. باستخدام 4-0 أو 5-0 خيوط قابلة للامتصاص ، ضع خياطة لربط طرفي عضلة المشرقة. بمجرد الانتهاء من الخيط ، قم بقص نهايات مادة الخياطة ليكون طولها 1/2 سنتيمتر.كرر هذه العملية للخصية الأخرى عن طريق تحريك شق الجلد ليكون فوق الجانب الآخر ، واتبع نفس الخطوات المستخدمة لإزالة الخصية الأولى. بمجرد إزالة كلتا الخصيتين وخياطة جانبي المشرقة ، قم بتحريك الجلد لأعلى واستعد لتطبيق مشبك الجرح على المنطقة. تأكد من أن نهايات الخيط لن يتم القبض عليها في مشبك الجرح.الماوس جاهز الآن لمواصلة المراقبة بعد العملية الجراحية. للتحضير لاستئصال المبيض الفأر ، قم بوزن أنثى فأر وإعطاء مسكنات الألم والتخدير وفقا لإرشادات مؤسستك. قم بإدارة جل العين المزلق وتحقق للتأكد من أن الماوس ليس لديه استجابة قرصة إصبع القدم.احلق المناطق الظهرية الجانبية من ظهر الفأر لإعداد موقع الجراحة. باستخدام أداة تطبيق ذات رأس قطني ، ضعي طبقة من كريم إزالة الشعر المزيل للشعر على المنطقة المحلوقة. بعد 30 ثانية ، قم بإزالة الكريم باستخدام اسفنجة شاش نظيفة.انقل الماوس إلى حصيرة جراحية وتأكد من توفر مصدر للحرارة. افركي الجلد بمحلول Betadine ، بدءا من المنتصف والعمل بسهولة للخارج باتجاه حدود المنطقة المحلوقة. اتبع هذا عن طريق فرك الجلد بمحلول كحول 70٪ يطبق بطريقة مماثلة.كرر هذه العملية لما مجموعه ثلاث مرات لضمان تطهير الجلد بشكل صحيح. خطط للشق الجراحي كما هو مفصل في البروتوكول المكتوب. ضع ستارة جراحية على موقع جراحة الفأر.أمسك الجلد بالملقط وشق الجلد بشق سنتيمتر واحد. استخدم أداة ذات رأس حاد أو زوج عادي من مرقئ لفصل الجلد عن الأنسجة الكامنة. خذ بعض الوقت للقيام بذلك على الحدود الجانبية والعلوية والسفلية للشق.أمسك جدار البطن وشق بشق 1/2 سم. استخدم زوجا من الملقط لتحديد موقع المبيض داخل الشق وسحبه لإضفاء الطابع الخارجي عليه. بمجرد تحديد الأنسجة ، استخدم زوجا من مرقئ لربط وسحق قرن الرحم البعيد.استخدم زوجا ثانيا من مرقئ الدم أو زوجا من الملقط لتثبيت المشبك البعيد عن المشبك الأول. امسك مرقئ القاع ، اسحب المشبك العلوي لأعلى وبعيدا عن الجسم لأداء سحق وتمزق قرن الرحم البعيد. حرر المرقئ ببطء وراقبه للتأكد من عدم وجود نزيف مفرط قادم من موقع الجراحة.اجمع جانبي جدار البطن معا وخيط الشق مغلقا ، باستخدام خياطة واحدة مع مادة خياطة قابلة للامتصاص 4-0. بمجرد تثبيت الخيط ، قم بقص نهايات مادة الخياطة ليكون طولها 1/2 سنتيمتر. اجمع جانبي الجلد معا واستعد لوضع مشبك الجرح.أثناء تحريك الجلد ، ضع مشبك الجرح فوق موقع الشق. الماوس جاهز الآن لمواصلة المراقبة بعد العملية الجراحية. قم بتوثيق تاريخ الإجراء ووقته وإدارة المسكنات وفقا لإرشاداتك المؤسسية.بمجرد خضوع الفأر لاستئصال الخصية الجراحي أو استئصال المبيض ، انقله إلى قفص نظيف وساخن. بمجرد أن يستعيد الفأر الاستلقاء القصي ، ضعه في قفص نظيف ووفر طعاما رطبا وماء. أثناء التعافي ، تحقق بشكل متكرر من موقع جراحة الفأر وابحث عن أي علامات للعدوى أو النزيف.لمنع تلف مشبك الجرح ، قم بإزالة أي موائل كوخ الإسكيمو للقوارض من قفص فأر استئصال المبيض لمدة أسبوع واحد بعد الجراحة. بعد 14 يوما ، قم بإزالة مقاطع الجرح من جلد الماوس. يوضح البروتوكول الموضح كيفية إجراء استئصال الخصية واستئصال المبيض في الفأر لإنشاء نموذج مستنفد للهرمونات الجنسية.يتضمن ذلك إزالة الخصيتين من خلال شق خط الوسط في كيس الصفن ، يليه إضفاء الطابع الخارجي على الخصيتين وقطع الحبل المنوي في الأوعية الدموية ، مما يؤدي إلى إزالة الخصية والبربخ ومنصات الدهون الأربية. يمكن إجراء استئصال المبيض الجراحي عن طريق شق ظهري جانبي في الظهر وإضفاء الطابع الخارجي على المبيض وقناة البيض وقرن الرحم البعيد. ويتبع ذلك قطع قرن الرحم البعيد ، مما يؤدي إلى إزالة المبيض وقناة البيض.ستؤدي التقنية الجراحية الدقيقة والرعاية المناسبة بعد العملية الجراحية إلى مواقع جراحية جيدة الشفاء. يمكن التحقق من صحة هذه العمليات الجراحية عن طريق تحليل مستويات الهرمون في عينات مصل الفئران بعد أسبوع واحد من استئصال الخصية. يمكن تأكيد استئصال المبيض من خلال ملاحظة ضمور الرحم بعد إزالة المبايض.يتيح هذا البروتوكول الاستئصال الجراحي السريع والفعال للمبيض والخصيتين من الفئران لتوليد نموذج مستنفد للهرمونات الجنسية. يمكن أن يكون لهذا العديد من الاستخدامات لدراسة كيفية تأثير استنفاد هذه الهرمونات على مختلف الأعضاء والعمليات الفسيولوجية.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

قياس وعلاج الحول في قمع

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

عزل وعن طريق أقسام الأبقار الشريان والوريد المساريقي باعتباره الأحيائي لاختبار لVasoactivity في الأمعاء الدقيقة

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

ل<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; نموذج لدراسة هرمون العمل في الثدي البشري

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

البوفيدون اليود إعداد المستقيم في وقت البروستاتا إبرة الخزعة هو وسيلة بسيطة وقابلة للتكرار للحد من مخاطر العدوى الإجرائي

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

زرع صفحة الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للحد من تسرب بعد Colectomy الجزئية في نموذج الفئران

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

تجربة سريرية لتقييم سلامة وفعالية وتسليم أكياس ثلاث غرف من زيت الزيتون للتغذية بالحقن

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

الآليات الأساسية لإفراز هرمون الأمعاء التي تستخدم عزل Perfused الفئران الأمعاء

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

تبريد أو تسخين المريء للحد من إصابة المريء أثناء الاستئصال الأذيني الأيسر في علاج الرجفان الأذيني

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

التنبؤ بعلم الأدوية الشبكي والتحقق التجريبي من آلية عمل Trichosanthes-Fritillaria thunbergii ضد سرطان الرئة الغدي

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

إنتاج مصل مكيف ذاتي معدل وتقييم خارج الجسم الحي لإمكاناته العلاجية في ظهارة قرنية الفئران

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...