Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

We danken het Animal Resource Center van het Southwestern Medical Center van de Universiteit van Texas voor hun hulp bij chirurgische training en protocolbeoordeling. We danken het ondersteuningsteam van Wert Lab voor hun onschatbare hulp. Dit werk is ondersteund door fondsen van het National Institute of Health (NIH P30EY030413). Biorender.com werd gebruikt voor het maken van cartoonschema's.

Alle dierproeven zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee van UTSW (APN#2019-102840).
1. Muizen orchidectomie
<ol><li>Bereid een aseptisch werkveld voor en zorg ervoor dat de benodigde chirurgische instrumenten zijn gesteriliseerd en direct beschikbaar zijn. Volg aseptische praktijken voor overlevingschirurgie bij knaagdieren.</li>
	<li>Noteer het gewicht van de mannelijke muis en dien de voorkeursmethode van anesthesie toe volgens de institutione...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

Chirurgische verwijdering van testikels en eierstokken maakt het mogelijk om de fysiologie van muizen te bestuderen onder gecontroleerde hormoondeprivatie. Deze techniek is belangrijk voor veel wetenschapsgebieden, waaronder neurodegeneratie, mineraalmetabolisme, cardiovasculaire en reproductieve gezondheid 15,16,17,18,19,20,21.</s...

De teelballen en eierstokken zijn de primaire organen die verantwoordelijk zijn voor de productie van geslachtshormonen. De cascade van hormonale communicatie die leidt tot de productie van testosteron en oestrogeen is een goed gekarakteriseerd proces dat begint in de hypothalamus met de afgifte van gonadotropine-releasing hormoon (GnRH)1. De afgifte van GnRH veroorzaakt de afgifte van luteïniserend hormoon (LH) en follikelstimulerend hormoon (FSH) uit de hypofyse. Als deze hormonen in de bloedbaan terechtkomen, beïnvloeden ze andere weefsels in het lichaam. Het primaire doelwit van LH zijn de teelballen (bij mannen) en de eierstokken (bij vrouwen)2. Als reactie op LH produceren de teelballen testosteronen geven het testosteron af. Evenzo produceren de eierstokken oestrogeen4. Hoewel de beoogde effecten van deze hormonen zijn om de cellen en het lichaam voor te bereiden op bevruchting en te zorgen voor een functionerend voortplantingssysteem, kunnen veel andere lichaamssystemen worden beïnvloed.
Geslachtshormonen zijn in verband gebracht met verschillende fysiologische functies. Oestrogeen helpt bijvoorbeeld de bothomeostase te handhaven door de resorptie van bot door osteoclasten te voorkomen. Om deze reden kunnen ovariëctomische muismodellen worden gebruikt om de fysiologie van botziekten zoals osteoporose te bestuderen 5,6,7. Testosteron en oestrogeen zijn ook onderzoeksdoelen voor veel cardiovasculaire en neurodegeneratieve ziekten. Onlangs is een verhoogde testosteronproductie in combinatie met een vetrijk dieet in verband gebracht met vasculaire oxidatieve stress. In de hersenen hebben veranderingen in LH na ovariëctomie veranderingen in het ruimtelijk geheugen veroorzaakt9. Vermindering van oestrogenen na ovariëctomie is ook een modelsysteem geworden voor het bestuderen van celdood in de hippocampus, omdat dit apoptose kan induceren, wat resulteert in geheugenstoornissen10. Testosteron heeft ook een rol getoond bij de groei van de nieren, zowel in muismodellen als bij mensen na niertransplantatie11.
De creatie van een hormoonarm muizenmodel maakt het mogelijk om geslachtshormonen en hun hormooncascades op verschillende ziekten of weefsels te bestuderen. Dit kan worden bereikt door chirurgische verwijdering van de teelballen (orchidectomie) of eierstokken (ovariëctomie). Deze procedure kan worden uitgevoerd bij muizen van elke stam wanneer ze zo jong zijn als de speenleeftijd (eenentwintig dagen) of elke volwassen leeftijd. Ovariëctomie wordt uitgevoerd bij vrouwelijke muizen, terwijl orchidectomie wordt uitgevoerd bij mannelijke muizen. Door deze organen te verwijderen, kunnen de niveaus van oestrogeen en testosteron, en veel van hun derivaten, zoals progesteron, sterk worden verlaagd12,13. Het proces van het uitvoeren van orchidectomieën of ovariëctomieën bij muizen kan met de juiste techniek snel en minimaal invasief zijn. Snelle excisie van deze organen op een veilige en efficiënte manier kan een snelle chirurgische verwerking mogelijk maken, terwijl het aantal muizen minimaal wordt gehouden door een overlevingspercentage van 100% te hebben wanneer het correct wordt uitgevoerd. Hier beschrijven we een protocol voor de snelle excisie van de testikels en eierstokken en demonstreren we de juiste postoperatieve monitoring om onderzoekers in staat te stellen deze operatie snel en veilig uit te voeren. We voegen ook visuele voorbeelden toe van de geslachtsorganen en omliggende weefsels om de chirurg anatomische oriëntatiepunten te bieden bij het uitvoeren van deze procedure.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

Geslachtshormoonsignalering speelt een cruciale rol in meerdere orgaansystemen en bij de progressie van verschillende ziekten, waaronder neurodegeneratieve ziekten. De manipulatie van geslachtshormoonspiegels in het muizenmodelsysteem maakt het mogelijk om hun impact op organen/weefsels en binnen ziekteprogressie te bestuderen. Orchiectomie - de chirurgische verwijdering van de teelballen - en ovariëctomie - de chirurgische verwijdering van de eierstokken - bieden een methode om de endogene geslachtshormonen uit te putten, zodat de precieze hormoonspiegels kunnen worden geleverd door middel van medicijnen of andere toedieningsmethoden. Hier bieden we snelle en minimaal invasieve methoden voor zowel orchidectomie als ovariëctomie in het muizenmodelsysteem voor de vermindering van geslachtshormonen. Dit protocol beschrijft de chirurgische voorbereiding en excisie van de teelballen door de scrotumzak en excisie van de eierstokken via twee incisies in het rechter en linker laterale dorsum.

De hier gepresenteerde procedure wordt uitgevoerd bij muizen van één tot drie maanden oud op de C57BL/6J-achtergrond. Mannelijke muizen wogen 16-28 g en vrouwelijke muizen wogen 14-24 g op het moment van de procedure. Deze procedure is geoptimaliseerd om toepasbaar te zijn voor muizen van vele leeftijden, van het spenen tot de volwassenheid.
Chirurgische orchidectomie omvat een enkele incisie in de ventrale scrotumzak, zoals afgebeeld in figuur 1A. Beide testike...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

Dit manuscript beschrijft een consistente manier om snel overleving uit te voeren knaagdierorchidtomieën en ovariëctomieën.

Muizen orchidectomie en ovariëctomie om de productie van geslachtshormonen te verminderen

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

Het algemene doel van deze procedure is om de chirurgische verwijdering van muizentestikels en eierstokken op een snelle, veilige en effectieve manier aan te tonen. Muizen orchiectomie wordt uitgevoerd door een ventrale middellijnincisie in de scrotumzak, waar de teelballen worden geïsoleerd en verwijderd, gevolgd door sluiting van de huidincisie. De ovariëctomie van muizen wordt uitgevoerd door een dorsolaterale incisie in de buik waar de eierstok wordt geïsoleerd en verwijderd, gevolgd door sluiting van de huidincisie, met de mogelijkheid om deze procedure aan de andere kant te herhalen om een bilaterale ovariëctomie uit te voeren.Om met de muizenorchidectomie te beginnen, begint u eerst met het registreren van het gewicht van een mannelijke muis en bereidt u zich voor op het toedienen van de juiste pijnstillers en anesthetica volgens de richtlijnen van uw instelling. Zodra de muis onder narcose is, bedek je de ogen met een bevochtigende ooggel om ze te beschermen tegen uitdroging tijdens de procedure. Voordat u verder gaat, moet u ervoor zorgen dat de muis zich op een geschikt anesthesievlak bevindt door een teenknijpresponstest uit te voeren.Scheer vervolgens de lies- en scrotumgebieden van de muis. Breng met een wattenstaafje een dunne laag ontharingscrème aan op de operatieplaats en de omliggende gebieden. Verwijder na 30 seconden de ontharingscrème met de schone gaasspons.Breng de muis over naar een operatiegebied en zorg ervoor dat er een warmtebron beschikbaar is. Gebruik zacht plakband om de voetjes van de muis aan de operatiemat te plakken. Als de teelballen in de buik zijn opgestegen, oefen dan lichte druk uit op de buik om ze te helpen indalen.Scrub de huid met Betadine-oplossing, beginnend in het midden boven de operatieplaats en werk gemakkelijk naar buiten toe naar de rand van het geschoren gebied. Volg de Betadine-scrub met een alcoholscrub die op dezelfde manier wordt uitgevoerd. Herhaal dit proces drie keer om een goede desinfectie van de huid te garanderen.Bedek de muis met het operatielaken. Pak de huid vast en maak een incisie in de middellijn van ongeveer 1 tot 1 1/2 centimeter lang. Pak de snijrand van de huid vast en gebruik een instrument met stompe punt om de huid van het onderliggende weefsel te scheiden.Neem de tijd om dit te doen aan de laterale, superieure en inferieure randen van de incisie. Isoleer vervolgens een testikel door de huidincisie te verschuiven om er direct bovenop te zitten. Gebruik een pincet om de dunne, transparante cremaster-spier rond de zaadbal vast te pakken.De identificatie van het juiste weefsel kan worden bevestigd door de transparantie en het vermogen om onafhankelijk te bewegen van de onderliggende weefsels die erin zijn ingesloten. Snijd vervolgens de cremaster-spier in door een incisie te maken in de top van het weefsel. Plaats een vergrendelingsklem op de achterste rand van de doorgesneden cremaster-spier om spanning op het weefsel te houden.Gebruik een pincet om de zaadbal vast te pakken en uit de schede te halen. Zodra de zaadbal eruit is, rolt u het weefsel zijwaarts en lokaliseert u het cremaster-inbrengpunt dat de cremaster-spier verbindt met de zaadbal en de bijbal aan de achterkant van de zaadbal. Klem en scheur dit weefsel om deze verbinding te verbreken.Exterioriseer het liesvetkussen door het er langzaam uit te trekken. Let hierbij op tekenen van bloedingen en zorg ervoor dat u daarbij geen van de bloedvaten beschadigt. Gebruik vervolgens een paar vergrendelende hemostaten om de zaadstreng en bloedvaten vast te klemmen.Terwijl u lichte spanning op de zaadbal houdt, schroeit u de zaadstreng en bloedvaten distaal van de hemostaatklem dicht. Laat de hemostaat langzaam los en zorg ervoor dat de weefselstomp een goede hemostase heeft en niet blijft bloeden. Door een lichte buitenwaartse druk uit te oefenen op de cremaster-spier, kan deze weefselstomp zich terugtrekken in de lichaamsholte.Breng de twee kanten van de cremaster-spier samen. Gebruik 4-0 of 5-0 resorbeerbare hechtingen om een hechting te plaatsen om de twee uiteinden van de cremaster-spier te verbinden. Zodra de hechting klaar is, knipt u de uiteinden van het hechtmateriaal af tot een lengte van 1/2 centimeter.Herhaal dit proces voor de andere zaadbal door de huidincisie naar de andere kant te schuiven en volg dezelfde stappen die worden gebruikt om de eerste zaadbal te verwijderen. Zodra beide testikels zijn verwijderd en beide zijden van de cremaster zijn gehecht, brengt u de huid naar boven en bereidt u zich voor om een wondclip op het gebied aan te brengen. Zorg ervoor dat de uiteinden van de hechting niet vast komen te zitten in de wondklem.De muis is nu klaar om door te gaan met postoperatieve monitoring. Om u voor te bereiden op ovariëctomie bij muizen, weegt u een vrouwelijke muis en dient u pijnstillers en anesthesie toe volgens de richtlijnen van uw instelling. Dien bevochtigende ooggel toe en controleer of de muis niet op het knijpen van de tenen reageert.Scheer de dorsolaterale gebieden van de rug van de muis om de operatieplaats voor te bereiden. Breng met een wattenstaafje een laag ontharingscrème aan op het geschoren gebied. Verwijder na 30 seconden de crème met een schone gaasspons.Leg de muis op een operatiemat en zorg ervoor dat er een warmtebron beschikbaar is. Scrub de huid met Betadine-oplossing, begin in het midden en werk gemakkelijk naar buiten toe naar de rand van het geschoren gebied. Volg dit door de huid te scrubben met een 70% alcoholoplossing die op dezelfde manier wordt aangebracht.Herhaal dit proces in totaal drie keer om een goede desinfectie van de huid te garanderen. Plan de chirurgische incisie zoals beschreven in het schriftelijke protocol. Plaats een chirurgisch laken over de operatieplaats van de muis.Pak de huid vast met een tang en snijd de huid in met een incisie van één centimeter. Gebruik een instrument met stompe punt of een gewoon paar hemostaten om de huid van het onderliggende weefsel te scheiden. Neem de tijd om dit te doen aan de laterale, superieure en inferieure randen van de incisie.Pak de buikwand vast en maak een incisie van 1/2 centimeter. Gebruik een pincet om de eierstok in de incisie te lokaliseren en trek eraan om deze naar buiten te brengen. Zodra de weefsels zijn geïdentificeerd, gebruikt u een paar hemostaten om de distale baarmoederhoorn vast te klemmen en te verpletteren.Gebruik een tweede paar hemostaten of een pincet om net distaal van de eerste klem te klemmen. Houd de onderste hemostaat stil, trek de bovenste klem omhoog en weg van het lichaam om een verbrijzeling en scheur van de distale baarmoederhoorn uit te voeren. Laat de hemostaat langzaam los en kijk of er geen overmatig bloedverlies uit de operatieplaats komt.Breng de twee zijden van de buikwand bij elkaar en hecht de incisie dicht, met behulp van een enkele hechting met 4-0 resorbeerbaar hechtmateriaal. Zodra de hechting is vastgezet, knipt u de uiteinden van het hechtmateriaal af tot een lengte van 1/2 centimeter. Breng de twee kanten van de huid weer bij elkaar en bereid je voor op het plaatsen van een wondclip.Terwijl u de huid losmaakt, plaatst u een wondklem over de incisieplaats. De muis is nu klaar om door te gaan met postoperatieve monitoring. Documenteer de datum en tijd van de procedure en de pijnstillende toediening volgens de richtlijnen van uw instelling.Zodra een muis een chirurgische orchidectomie of ovariëctomie heeft ondergaan, brengt u hem over naar een schone, verwarmde kooi. Zodra een muis weer sternale ligplaats heeft gekregen, plaatst u hem in een schone kooi en zorgt u voor vochtig voer en water. Controleer tijdens hun herstel regelmatig de operatieplaats van de muis en zoek naar tekenen van infectie of bloeding.Om schade aan de wondklem te voorkomen, verwijdert u alle knaagdieriglo-habitats uit de kooi van een ovariëctomiemuis gedurende een week na de operatie. Verwijder na 14 dagen de wondklemmen van de huid van de muis. Het gedemonstreerde protocol beschrijft hoe een orchidectomie en ovariëctomie bij een muis moeten worden uitgevoerd om een model met geslachtshormoon te genereren.Dit omvat het verwijderen van de testikels via een incisie in de middellijn in het scrotum, gevolgd door het exterioriseren van de testikels en het doorsnijden van de zaadstreng in bloedvaten, wat resulteert in het verwijderen van de testikel, bijbal en liesvetkussentjes. Chirurgische ovariëctomie kan worden uitgevoerd door een dorsolaterale incisie in het dorsum en exteriorisatie van de eierstok, eileider en distale baarmoederhoorn. Dit wordt gevolgd door het doorsnijden van de distale baarmoederhoorn, wat leidt tot verwijdering van de eierstok en eileider.Zorgvuldige chirurgische techniek en goede postoperatieve zorg zullen resulteren in goed genezen operatieplaatsen. Deze chirurgische ingrepen kunnen verder worden gevalideerd door hormoonspiegels in serummonsters van muizen een week na orchidectomie te analyseren. Ovariëctomie kan worden bevestigd door de observatie van baarmoederatrofie na verwijdering van de eierstokken.Dit protocol maakt de snelle en effectieve chirurgische verwijdering van eierstokken en teelballen van muizen mogelijk om een model met geslachtshormoon te genereren. Dit kan veel toepassingen hebben om te bestuderen hoe uitputting van deze hormonen verschillende organen en fysiologische processen beïnvloedt.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

De meting en behandeling van Onderdrukking in Amblyopie

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Isoleren en het gebruik van de afdelingen van Bovine mesenterica en Vein als Bioassay om te testen voor vasoactiviteit in de dunne darm

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

Een<em&gt; Ex vivo</em&gt; Model naar Hormoon Actie studie in de menselijke borst

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Povidonjood rectale Voorbereiding op het moment van prostaatnaaldbiopten is een eenvoudige en reproduceerbare middelen om het risico van infectie te verminderen Procedurele

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplantatie van stamcellen adipeus weefsel afkomstige blad om lekkage na gedeeltelijke Colectomy in een Rat-Model

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Een klinisch onderzoek waarin de veiligheid, werkzaamheid en levering van op olijfolie gebaseerde drie kamer zakken voor parenterale voeding worden geëvalueerd

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

Mechanismen die ten grondslag liggen aan de Gut hormoon afscheiding met behulp van de geïsoleerde geperfundeerd Rat dunne darm

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

Koelen of opwarmen van de slokdarm om slokdarmletsel te verminderen tijdens linker atrialablatie bij de behandeling van atriumfibrilleren

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Netwerk farmacologie voorspelling en experimentele validatie van Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Werkingsmechanisme tegen long adenocarcinoom

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Productie van gemodificeerd autoloog geconditioneerd serum en ex vivo beoordeling van het genezingspotentieel ervan in murine cornea-epitheel

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...