Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
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Wir danken dem University of Texas Southwestern Medical Center Animal Resource Center für seine Hilfe bei der chirurgischen Ausbildung und der Überprüfung des Protokolls. Wir danken dem Support-Team von Wert Lab für seine unschätzbare Unterstützung. Diese Arbeit wurde mit Mitteln des National Institute of Health (NIH P30EY030413) unterstützt. Biorender.com wurde für die Erstellung von Cartoon-Schaltplänen verwendet.

Alle Tierversuche wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee der UTSW genehmigt (APN#2019-102840).
1. Orchiektomie bei Mäusen
<ol><li>Bereiten Sie ein aseptisches Arbeitsfeld vor und stellen Sie sicher, dass die erforderlichen chirurgischen Instrumente sterilisiert wurden und leicht verfügbar sind. Befolgen Sie aseptische Praktiken für die Überlebenschirurgie von Nagetieren.</li>
	<li>Erfassen Sie das Gewicht der männlichen Maus und verabreichen Sie die bevo...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

Die chirurgische Entfernung von Hoden und Eierstöcken ermöglicht es, die Physiologie von Mäusen unter kontrolliertem Hormonentzug zu untersuchen. Diese Technik ist für viele Bereiche der Wissenschaft wichtig, darunter Neurodegeneration, Mineralstoffwechsel, Herz-Kreislauf und reproduktive Gesundheit 15,16,17,18,19,20,21.<...

Die Hoden und Eierstöcke sind die primären Organe, die für die Produktion von Sexualhormonen verantwortlich sind. Die Kaskade der hormonellen Kommunikation, die zur Produktion von Testosteron und Östrogen führt, ist ein gut charakterisierter Prozess, der im Hypothalamus mit der Freisetzung des Gonadotropin-Releasing-Hormons (GnRH)1 beginnt. Die Freisetzung von GnRH bewirkt die Freisetzung des luteinisierenden Hormons (LH) und des follikelstimulierenden Hormons (FSH) aus der Hirnanhangsdrüse. Wenn diese Hormone in den Blutkreislauf gelangen, wirken sie sich dann auf andere Gewebe im Körper aus. Das primäre Ziel von LH sind die Hoden (bei Männern) und die Eierstöcke (bei Frauen)2. Als Reaktion auf LH produzieren und setzen die Hoden Testosteron3 frei. In ähnlicher Weise produzieren die Eierstöcke Östrogen4. Während die beabsichtigte Wirkung dieser Hormone darin besteht, die Zellen und den Körper auf die Befruchtung vorzubereiten und ein funktionierendes Fortpflanzungssystem zu gewährleisten, können viele andere Körpersysteme betroffen sein.
Sexualhormone wurden mit mehreren physiologischen Funktionen in Verbindung gebracht. Zum Beispiel hilft Östrogen, die Knochenhomöostase aufrechtzuerhalten, indem es die Resorption von Knochen durch Osteoklasten verhindert. Aus diesem Grund können ovariektomierte Mausmodelle verwendet werden, um die Physiologie von Knochenerkrankungen wie Osteoporose zu untersuchen 5,6,7. Testosteron und Östrogen sind auch Forschungsziele für viele kardiovaskuläre und neurodegenerative Erkrankungen. In jüngster Zeit wurde eine erhöhte Testosteronproduktion in Verbindung mit einer fettreichen Ernährung mit vaskulärem oxidativem Stress in Verbindung gebracht8. Im Gehirn haben Veränderungen der LH nach einer Ovariektomie zu Veränderungen des räumlichen Gedächtnisses geführt9. Die Reduktion von Östrogenen nach einer Ovariektomie ist auch zu einem Modellsystem für die Untersuchung des Zelltods im Hippocampus geworden, da dies eine Apoptose induzieren kann, die zu Gedächtnisdefiziten führt10. Testosteron hat auch eine Rolle beim Wachstum der Nieren gezeigt, sowohl in Mausmodellen als auch beim Menschen nach einer Nierentransplantation11.
Die Erstellung eines hormonarmen Mausmodells ermöglicht die Untersuchung von Sexualhormonen und ihren Hormonkaskaden bei verschiedenen Krankheiten oder Geweben. Dies kann durch eine operative Entfernung der Hoden (Orchiektomie) oder der Eierstöcke (Ovariektomie) erreicht werden. Dieses Verfahren kann bei Mäusen jeden Stammes durchgeführt werden, wenn sie bereits im Entwöhnungsalter (einundzwanzig Tage) oder im Erwachsenenalter sind. Die Ovariektomie wird bei weiblichen Mäusen durchgeführt, während die Orchiektomie bei männlichen Mäusen durchgeführt wird. Durch die Entfernung dieser Organe kann der Östrogen- und Testosteronspiegel und viele ihrer Derivate, wie z. B. Progesteron, stark gesenkt werden12,13. Der Prozess der Durchführung von Orchiektomien oder Ovariektomien bei Mäusen kann mit der richtigen Technik schnell und minimalinvasiv sein. Die schnelle Exzision dieser Organe auf sichere und effiziente Weise kann eine schnelle chirurgische Behandlung ermöglichen und gleichzeitig die Anzahl der Mäuse minimal halten, da sie bei korrekter Durchführung eine Überlebensrate von 100 % aufweist. Hier beschreiben wir ein Protokoll für die schnelle Entfernung der Hoden und Eierstöcke und demonstrieren die richtige postoperative Überwachung, damit die Forscher diese Operation schnell und sicher durchführen können. Wir fügen auch visuelle Beispiele der Geschlechtsorgane und des umgebenden Gewebes hinzu, um dem Chirurgen bei der Durchführung dieses Eingriffs anatomische Orientierungspunkte zu liefern.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

Die Signalübertragung von Sexualhormonen spielt eine entscheidende Rolle in mehreren Organsystemen sowie beim Fortschreiten verschiedener Krankheiten, einschließlich neurodegenerativer Erkrankungen. Die Manipulation des Sexualhormonspiegels im murinen Modellsystem ermöglicht die Untersuchung ihrer Auswirkungen auf Organe/Gewebe und auf das Fortschreiten der Krankheit. Die Orchiektomie - die chirurgische Entfernung der Hoden - und die Ovariektomie - die chirurgische Entfernung der Eierstöcke - bieten eine Methode, um die endogenen Sexualhormone zu erschöpfen, so dass die genauen Hormonspiegel durch Medikamente oder andere Verabreichungsmethoden bereitgestellt werden können. Hier stellen wir schnelle und minimalinvasive Methoden sowohl für die Orchiektomie als auch für die Ovariektomie im murinen Modellsystem zur Reduktion von Sexualhormonen zur Verfügung. Dieses Protokoll beschreibt die chirurgische Vorbereitung und Exzision der Hoden durch den Hodensack und die Exzision der Eierstöcke über zwei Schnitte im rechten und linken seitlichen Dorsum.

Das hier vorgestellte Verfahren wird an ein bis drei Monate alten Mäusen im C57BL/6J-Hintergrund durchgeführt. Männliche Mäuse wogen zum Zeitpunkt des Eingriffs 16-28 g und weibliche Mäuse 14-24 g. Dieses Verfahren wurde so optimiert, dass es für Mäuse unterschiedlichen Alters von der Entwöhnung bis zum Erwachsenenalter anwendbar ist.
Bei der chirurgischen Orchiektomie wird ein einzelner Hautschnitt im ventralen Hodensack durchgeführt, wie in Abbildung 1A...

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Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

Dieses Manuskript beschreibt eine konsistente Methode zur schnellen Durchführung von Überlebensorchiektomien und Ovariektomien von Nagetieren.

Orchiektomie und Ovariektomie bei Mäusen zur Verringerung der Sexualhormonproduktion

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die chirurgische Entfernung von murinen Hoden und Eierstöcken auf schnelle, sichere und effektive Weise zu demonstrieren. Die murine Orchiektomie wird durch einen ventralen Mittellinienschnitt in den Hodensack durchgeführt, bei dem die Hoden isoliert und entfernt werden, gefolgt von einem Verschluss des Hautschnitts. Die murine Ovariektomie wird durch einen dorsolateralen Schnitt in den Bauch durchgeführt, bei dem der Eierstock isoliert und entfernt wird, gefolgt von einem Verschluss des Hautschnitts, mit der Möglichkeit, dieses Verfahren auf der anderen Seite zu wiederholen, um eine bilaterale Ovariektomie durchzuführen.Um mit der murinen Orchiektomie zu beginnen, beginnen Sie zunächst mit der Aufzeichnung des Gewichts einer männlichen Maus und bereiten Sie sich darauf vor, die entsprechenden Schmerzmittel und Anästhetika gemäß Ihren institutionellen Richtlinien zu verabreichen. Sobald die Maus unter Narkose steht, bedecken Sie die Augen mit einem befeuchtenden Augengel, um sie während des Eingriffs vor dem Austrocknen zu schützen. Bevor Sie fortfahren, stellen Sie sicher, dass sich die Maus auf einer geeigneten Anästhesieebene befindet, indem Sie einen Zehenkneiftest durchführen.Als nächstes rasieren Sie die Leisten- und Hodensackbereiche der Maus. Tragen Sie mit einem Applikator mit Wattespitze eine dünne Schicht enthaarender Haarentfernungscreme auf die Operationsstelle und die umliegenden Bereiche auf. Nach 30 Sekunden entfernen Sie die Enthaarungscreme mit dem sauberen Mullschwamm.Bringen Sie die Maus in einen Operationsbereich und stellen Sie sicher, dass eine Wärmequelle zur Verfügung steht. Verwenden Sie weiches Klebeband, um die Füße der Maus auf die OP-Matte zu kleben. Wenn die Hoden in den Bauch aufgestiegen sind, üben Sie sanften Druck auf den Bauch aus, um ihnen beim Abstieg zu helfen.Schrubben Sie die Haut mit Betadin-Lösung, beginnend in der Mitte über der Operationsstelle und arbeiten Sie sich leicht nach außen zum Rand des rasierten Bereichs vor. Lassen Sie dem Betadine-Peeling ein Alkohol-Peeling folgen, das auf ähnliche Weise durchgeführt wird. Wiederholen Sie diesen Vorgang dreimal, um eine ordnungsgemäße Hautdesinfektion zu gewährleisten.Decken Sie die Maus mit dem OP-Tuch ab. Fassen Sie die Haut an und machen Sie einen etwa 1 bis 1 1/2 Zentimeter langen Mittellinienschnitt. Fassen Sie den Schnittrand der Haut und trennen Sie die Haut mit einem stumpfen Instrument vom darunter liegenden Gewebe.Nehmen Sie sich Zeit, um dies an den lateralen, oberen und unteren Rändern des Einschnitts zu tun. Als nächstes isolieren Sie einen Hoden, indem Sie den Hautschnitt so verschieben, dass er direkt darauf liegt. Greife mit einer Pinzette den dünnen, durchsichtigen Cremaster-Muskel, der den Hoden umgibt.Die Identifizierung des richtigen Gewebes kann durch seine Transparenz und seine Fähigkeit, sich unabhängig von den darunter liegenden Geweben zu bewegen, bestätigt werden. Als nächstes schneiden Sie den Cremaster-Muskel ein, indem Sie einen Schnitt in die Spitze des Gewebes machen. Platzieren Sie eine Verriegelungsklemme am hinteren Rand des geschnittenen Cremaster-Muskels, um die Spannung auf dem Gewebe zu halten.Greife den Hoden mit einer Pinzette und ziehe ihn aus seiner Cremaster-Hülle heraus. Sobald der Hoden heraus ist, rollen Sie das Gewebe seitlich und lokalisieren Sie den Cremaster-Einstichpunkt, der den Cremaster-Muskel mit dem Hoden und den Nebenhoden auf der hinteren Seite des Hodens verbindet. Klemme und reiße dieses Gewebe, um diese Verbindung zu durchtrennen.Äußere das Leistenfettpolster, indem du es langsam herausziehst. Achten Sie dabei auf Anzeichen von Blutungen und achten Sie darauf, dass Sie dabei keines der Blutgefäße beschädigen. Verwenden Sie als Nächstes ein Paar verriegelnde Hämostaten, um den Samenstrang und die Blutgefäße zu klemmen.Halten Sie eine leichte Spannung auf dem Hoden aufrecht und kauterisieren Sie den Samenstrang und die Blutgefäße distal der Hämosteklemme. Lassen Sie das Hämostat langsam los und stellen Sie sicher, dass der Gewebestumpf eine gute Blutstillung hat und nicht weiter blutet. Wenn Sie einen leichten Druck nach außen auf den Cremaster-Muskel ausüben, kann sich dieser Gewebestumpf in die Körperhöhle zurückziehen.Bringe die beiden Seiten des Cremaster-Muskels zusammen. Platzieren Sie mit resorbierbaren 4-0- oder 5-0-Nähten eine Naht, um die beiden Enden des Cremaster-Muskels zu verbinden. Sobald die Naht fertig ist, schneiden Sie die Enden des Nahtmaterials auf eine Länge von 1/2 Zentimeter ab.Wiederholen Sie diesen Vorgang für den anderen Hoden, indem Sie den Hautschnitt auf die andere Seite schieben, und befolgen Sie die gleichen Schritte, die zum Entfernen des ersten Hodens verwendet wurden. Sobald beide Hoden entfernt und beide Seiten des Cremasters vernäht sind, klappen Sie die Haut nach oben und bereiten Sie sich darauf vor, eine Wundklammer an der Stelle anzubringen. Achten Sie darauf, dass sich die Nahtenden nicht in der Wundklammer verfangen.Die Maus ist nun bereit, mit der postoperativen Überwachung fortzufahren. Um sich auf die Maus-Ovariektomie vorzubereiten, wiegen Sie eine weibliche Maus und verabreichen Sie Schmerzmittel und Anästhesie gemäß Ihren institutionellen Richtlinien. Verabreichen Sie befeuchtendes Augengel und prüfen Sie, ob die Maus nicht auf das Einklemmen der Zehen reagiert.Rasieren Sie die dorsolateralen Regionen des Rückens der Maus, um die Operationsstelle vorzubereiten. Tragen Sie mit einem Applikator mit Wattespitze eine Schicht enthaarende Haarentfernungscreme auf die rasierte Stelle auf. Nach 30 Sekunden die Creme mit einem sauberen Mullschwamm entfernen.Legen Sie die Maus auf eine OP-Matte und stellen Sie sicher, dass eine Wärmequelle zur Verfügung steht. Schrubben Sie die Haut mit Betadin-Lösung, beginnen Sie in der Mitte und arbeiten Sie sich leicht nach außen zum Rand des rasierten Bereichs vor. Schrubben Sie anschließend die Haut mit einer 70%igen Alkohollösung, die auf ähnliche Weise aufgetragen wurde.Wiederholen Sie diesen Vorgang insgesamt dreimal, um eine ordnungsgemäße Hautdesinfektion zu gewährleisten. Planen Sie den chirurgischen Schnitt wie im schriftlichen Protokoll beschrieben. Legen Sie ein OP-Tuch über die Operationsstelle der Maus.Fassen Sie die Haut mit einer Pinzette an und schneiden Sie die Haut mit einem Ein-Zentimeter-Schnitt ein. Verwenden Sie ein Instrument mit stumpfer Spitze oder ein einfaches Paar Hämostate, um die Haut vom darunter liegenden Gewebe zu trennen. Nehmen Sie sich Zeit, um dies an den lateralen, oberen und unteren Rändern des Einschnitts zu tun.Fassen Sie die Bauchdecke und schneiden Sie sie mit einem 1/2 Zentimeter langen Schnitt ein. Verwenden Sie eine Pinzette, um den Eierstock innerhalb des Einschnitts zu lokalisieren, und ziehen Sie, um ihn nach außen zu drücken. Sobald das Gewebe identifiziert wurde, verwenden Sie ein Paar Hämostaten, um das distale Gebärmutterhorn zu klemmen und zu zerquetschen.Verwenden Sie ein zweites Paar Hämostate oder eine Pinzette, um direkt distal der ersten Klemme zu klemmen. Halten Sie den unteren Hämostat ruhig und ziehen Sie die obere Klemme nach oben und vom Körper weg, um das distale Gebärmutterhorn zu zerquetschen und zu reißen. Lassen Sie das Hämostat langsam los und achten Sie darauf, dass keine übermäßigen Blutungen aus der Operationsstelle kommen.Bringen Sie die beiden Seiten der Bauchdecke zusammen und vernähen Sie den Schnitt mit einer einzigen Naht mit 4-0 resorbierbarem Nahtmaterial. Sobald die Naht befestigt ist, schneiden Sie die Enden des Nahtmaterials auf eine Länge von 1/2 Zentimeter ab. Bringen Sie die beiden Hautseiten wieder zusammen und bereiten Sie sich darauf vor, eine Wundklammer zu platzieren.Während Sie die Haut umdrehen, legen Sie eine Wundklammer über die Einschnittsstelle. Die Maus ist nun bereit, mit der postoperativen Überwachung fortzufahren. Dokumentieren Sie das Datum und die Uhrzeit des Eingriffs sowie die Verabreichung von Analgetika gemäß Ihren institutionellen Richtlinien.Sobald sich eine Maus einer chirurgischen Orchiektomie oder Ovariektomie unterzogen hat, setzen Sie sie in einen sauberen, beheizten Käfig. Sobald eine Maus wieder im Brustbein liegt, setzen Sie sie in einen sauberen Käfig und versorgen Sie sie mit feuchtem Futter und Wasser. Kontrollieren Sie während der Genesung häufig die Operationsstelle der Maus und achten Sie auf Anzeichen einer Infektion oder Blutung.Um eine Beschädigung der Wundklammer zu vermeiden, entfernen Sie nach der Operation eine Woche lang alle Nagetier-Iglu-Habitate aus dem Käfig einer Ovariektomie-Maus. Entfernen Sie nach 14 Tagen die Wundklammern von der Haut der Maus. Das demonstrierte Protokoll beschreibt, wie eine Orchiektomie und Ovariektomie in einer Maus durchgeführt wird, um ein Modell mit Sexualhormonmangel zu erstellen.Dabei werden die Hoden durch einen Mittellinienschnitt im Hodensack entfernt, gefolgt von der Exteriorisierung der Hoden und dem Durchtrennen des Samenstrangs in den Blutgefäßen, was zur Entfernung des Hodens, der Nebenhoden und der Leistenfettpolster führt. Die chirurgische Ovariektomie kann durch einen dorsolateralen Schnitt in den Rücken und eine Exteriorisierung des Eierstocks, des Eileiters und des distalen Gebärmutterhorns durchgeführt werden. Anschließend wird das distale Gebärmutterhorn durchtrennt, was zur Entfernung des Eierstocks und des Eileiters führt.Eine sorgfältige Operationstechnik und die richtige postoperative Versorgung führen zu gut verheilten Operationsstellen. Diese chirurgischen Eingriffe können durch die Analyse des Hormonspiegels in Mäuseserumproben eine Woche nach der Orchiektomie weiter validiert werden. Die Ovariektomie kann durch die Beobachtung einer Uterusatrophie nach Entfernung der Eierstöcke bestätigt werden.Dieses Protokoll ermöglicht die schnelle und effektive chirurgische Entfernung von Eierstöcken und Hoden von Mäusen, um ein Sexualhormon-armes Modell zu erstellen. Dies kann viele Anwendungen haben, um zu untersuchen, wie sich der Abbau dieser Hormone auf verschiedene Organe und physiologische Prozesse auswirkt.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Die Messung und Behandlung von Unterdrückung in Amblyopie

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Forschung

Medizin

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Isolierung und Verwendung von Rinder Abschnitte A. und V. mesenterica als Bioassay für Vasoaktivität im Dünndarm Testen

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

Ein<em&gt; Ex-vivo-</em&gt; Modell um die Hormonwirkung in der menschlichen Brust Studieren

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Povidoniod Rectal Vorbereitung bei der Prostata-Nadelbiopsie ist eine einfache und reproduzierbare Mittel zur Gefahr der Verfahrens Infektion zu verringern

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplantation von Fettgewebe-Derived Stem Cell Blatt, Leckage nach teilweiser Colectomy in einem Rattenmodell zu reduzieren

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Eine klinische Studie zur Bewertung der Sicherheit, Wirksamkeit und Lieferung von Dreikammerbeuteln auf Olivenölbasis für die parenterale Ernährung

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

Mechanismen, die Hormonausschüttung der Darm mit der isolierten durchblutet Ratte Dünndarm

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

Kühlung oder Erwärmung der Speiseröhre zur Verringerung der Ösophagus-Verletzung während der linken Atrial-Ablation bei der Behandlung von Vorhofflimmern

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Netzwerkpharmakologische Vorhersage und experimentelle Validierung des Wirkungsmechanismus von Trichosanthes-Fritillaria thunbergii gegen Lungenadenokarzinome

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Herstellung eines modifizierten autologen konditionierten Serums und ex vivo Beurteilung des Heilungspotentials im murinen Hornhautepithel

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...