Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

אנו מודים למרכז משאבי בעלי החיים של המרכז הרפואי של אוניברסיטת טקסס סאות'ווסטרן על עזרתם בהכשרה כירורגית ובסקירת פרוטוקולים. אנו מודים לצוות התמיכה של Wert Lab על עזרתם שלא תסולא בפז. עבודה זו נתמכה על ידי כספים מהמכון הלאומי לבריאות (NIH P30EY030413). Biorender.com שימש ליצירת סכמות מצוירות.

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים ב- UTSW (APN#2019-102840).
1. כריתת מורין
<ol><li>הכינו שדה עבודה אספטי וודאו שכלי הניתוח הדרושים עוקרו וזמינים. בצע שיטות אספטיות עבור ניתוח הישרדות מכרסמים.</li>
	<li>רשום את משקל העכבר הזכר ונהל את שיטת הה...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

הסרה כירורגית של אשכים ושחלות מאפשרת ללמוד פיזיולוגיה של מורין תחת חסך הורמונלי מבוקר. טכניקה זו חשובה עבור תחומים רבים של מדע, כולל ניוון עצבי, מטבוליזם מינרלי, לב וכלי דם, ובריאות הרבייה 15,16,17,18,19,20,21....

האשכים והשחלות הם האיברים העיקריים האחראים על ייצור הורמוני המין. מפל התקשורת ההורמונלית המוביל לייצור טסטוסטרון ואסטרוגן הוא תהליך מאופיין היטב שמתחיל בהיפותלמוס עם שחרורו של הורמון משחרר גונדוטרופין (GnRH)1. שחרור GnRH גורם לשחרור הורמון luteinizing (LH) והורמון מגרה זקיק (FSH) מבלוטת יותרת המוח. כאשר הורמונים אלה נכנסים לזרם הדם, הם משפיעים על רקמות אחרות בגוף. המטרה העיקרית של LH היא האשכים (אצל זכרים) והשחלות (אצל נקבות)2. בתגובה ל- LH, האשכים מייצרים ומשחררים טסטוסטרון3. באופן דומה, השחלות מייצרות אסטרוגן4. בעוד ההשפעות המיועדות של הורמונים אלה הן להכין את התאים ואת הגוף להפריה ולהבטיח מערכת רבייה מתפקדת, מערכות גוף רבות אחרות יכולות להיות מושפעות.
הורמוני מין נקשרו למספר תפקודים פיזיולוגיים. לדוגמה, אסטרוגן מסייע לשמור על הומאוסטזיס העצם על ידי מניעת ספיגת עצם על ידי אוסטאוקלסטים. מסיבה זו, מודלים עכבר השחלה ניתן להשתמש כדי ללמוד את הפיזיולוגיה של מחלות עצם כגון אוסטאופורוזיס 5,6,7. טסטוסטרון ואסטרוגן הם גם מטרות מחקר עבור מחלות לב וכלי דם רבות ומחלות נוירודגנרטיביות. לאחרונה, ייצור טסטוסטרון מוגבר יחד עם תזונה עתירת שומן נקשרו לעקה חמצונית וסקולרית8. במוח, שינויים ב- LH לאחר כריתת שחלות גרמו לשינויים בזיכרון המרחבי9. הפחתת אסטרוגנים לאחר כריתת שחלות הפכה גם למערכת מודל לחקר מוות תאי בהיפוקמפוס, שכן זה יכול לגרום אפופטוזיס, וכתוצאה מכך ליקויים בזיכרון10. טסטוסטרון הראה גם תפקיד בצמיחת הכליות הן במודלים של עכברים והן בבני אדם לאחר השתלת כליה11.
יצירת מודל מורין נטול הורמונים מאפשרת לחקור את הורמוני המין ואת מפל ההורמונים שלהם על מחלות או רקמות שונות. זה יכול להיות מושגת על ידי הסרה כירורגית של האשכים (orchiectomy) או השחלות (ovariectomy). הליך זה יכול להתבצע בעכברים מכל זן כאשר הם צעירים כמו גיל הגמילה (עשרים ואחד ימים) או כל גיל בוגר. כריתת שחלות מבוצעת בעכברים נקבות, ואילו כריתת שחלות מבוצעת בעכברים זכרים. על ידי הסרת איברים אלה, רמות האסטרוגן והטסטוסטרון, ורבים מהנגזרות שלהם, כגון פרוגסטרון, ניתן להפחית באופן משמעותי12,13. תהליך ביצוע כריתת שחלות או כריתת שחלות בעכברים יכול להיות מהיר וזעיר פולשני עם הטכניקה הנכונה. כריתה מהירה של איברים אלה בצורה בטוחה ויעילה יכולה לאפשר עיבוד כירורגי מהיר תוך שמירה על מספרי עכברים מינימליים על ידי שיעור הישרדות של 100% כאשר מבוצע כראוי. כאן, אנו מפרטים פרוטוקול לכריתה מהירה של האשכים והשחלות ומדגימים את הניטור הנכון לאחר הניתוח כדי לאפשר לחוקרים לבצע ניתוח זה במהירות ובבטחה. אנו כוללים גם דוגמאות חזותיות של איברי המין והרקמות הסובבות כדי לספק למנתח ציוני דרך אנטומיים בעת ביצוע הליך זה.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

איתות הורמוני מין ממלא תפקיד קריטי במערכות איברים מרובות, כמו גם בהתקדמות של מחלות שונות, כולל מחלות נוירודגנרטיביות. המניפולציה של רמות הורמוני המין במערכת מודל מורין מאפשרת לחקור את השפעתם על איברים/רקמות ובתוך התקדמות המחלה. אורכיאקטומיה - הסרה כירורגית של האשכים - וכריתת שחלות - הסרה כירורגית של השחלות - מספקות שיטה לדלדול הורמוני המין האנדוגניים, כך שניתן יהיה לספק את רמות ההורמונים המדויקות באמצעות תרופות או שיטות מסירה אחרות. כאן, אנו מספקים שיטות מהירות וזעיר פולשניות הן לכריתת שחלות והן לכריתת שחלות במערכת מודל מורין להפחתת הורמוני מין. פרוטוקול זה מפרט את ההכנה הכירורגית והכריתה של האשכים דרך שק האשכים, וכריתה של השחלות דרך שני חתכים בגב הלטרלי הימני והשמאלי.

ההליך המוצג כאן מבוצע בעכברים בני חודש עד שלושה חודשים על רקע C57BL/6J. עכברים זכרים שקלו 16-28 גרם, ועכברות נקבות שקלו 14-24 גרם בזמן ההליך. הליך זה הותאם כך שיהיה ישים עבור עכברים בגילאים רבים, החל מהגמילה ועד לבגרות.
כריתה כירורגית כוללת חתך עור יחיד בשק האשכים הגחוני, כפי שמתואר <str...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

כתב יד זה מתאר דרך עקבית לבצע במהירות כריתת מכרסמים הישרדותית וכריתת שחלות.

Murine Orchiectomy ו Ovariectomy כדי להפחית את ייצור הורמוני המין

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים הסרה כירורגית של אשכים ושחלות מורין בצורה מהירה, בטוחה ויעילה. כריתת אורכיקטומיה מבוצעת על ידי חתך בקו האמצע הגחוני לתוך שק האשכים, שם האשכים מבודדים ומוסרים, ולאחר מכן סגירת חתך העור. כריתת שחלות מורין מבוצעת על ידי חתך דורסולטרלי לתוך הבטן שבו השחלה מבודדת ומוסרת, ואחריה סגירת חתך העור, עם אפשרות לחזור על הליך זה בצד השני כדי לבצע כריתת שחלות דו צדדית.כדי להתחיל את כריתת האורכיקטומיה, תחילה התחל ברישום משקלו של עכבר זכר והתכונן למתן תרופות הכאב וההרדמה המתאימות בהתאם להנחיות המוסדיות שלך. ברגע שהעכבר נמצא תחת הרדמה, כסו את העיניים בג'ל עיניים משמן כדי להגן עליהן מפני התייבשות במהלך ההליך. לפני שתמשיך, ודא כי העכבר נמצא במישור מתאים של הרדמה על ידי ביצוע בדיקת תגובה צביטת בוהן.לאחר מכן, לגלח את אזורי המפשעה ושק האשכים של העכבר. בעזרת מוליך צמר גפן, יש למרוח שכבה דקה של קרם להסרת שיער על אתר הניתוח והסביבה. לאחר 30 שניות, להסיר את קרם depilatory עם ספוג גזה נקי.העבירו את העכבר לאזור כירורגי וודאו שיש מקור חום זמין. השתמש בסרט הדבקה רך כדי להצמיד את רגלי העכבר למזרן הניתוח. אם האשכים עלו לתוך הבטן, להשתמש בלחץ עדין על הבטן כדי לעזור להם לרדת.יש לשפשף את העור בתמיסת בטאדין, החל מהמרכז מעל אתר הניתוח ולעבוד בקלות החוצה לכיוון גבול האזור המגולח. בצע את פילינג Betadine עם פילינג אלכוהול המבוצע באופן דומה. חזור על תהליך זה שלוש פעמים כדי להבטיח חיטוי עור תקין.כסו את העכבר עם הרפש הכירורגי. אחזו בעור ובצעו חתך בקו האמצע באורך של כ-1 עד 1 וחצי סנטימטרים. באחיזת הגבול החתוך של העור, השתמש במכשיר קהה כדי להפריד את העור מהרקמה שמתחתיו.קח זמן לעשות זאת על הגבולות הרוחביים, העליונים והנחותים של החתך. לאחר מכן, בודדו אשך אחד על ידי החלקת חתך העור כך שיהיה ישירות עליו. השתמש בזוג מלקחיים כדי לתפוס את שריר הקרמסטר הדק והשקוף המקיף את האשך.זיהוי הרקמה הנכונה יכול להיות מאושר על ידי שקיפותה ויכולתה לנוע באופן עצמאי מהרקמות הסגורות בתוכה. לאחר מכן, לחתוך את שריר cremaster על ידי ביצוע חתך לתוך קודקוד הרקמה. הניחו מהדק נעילה על הגבול האחורי של שריר הקרמסטר החתוך כדי להחזיק את המתח על הרקמה.השתמש בזוג מלקחיים כדי לתפוס את האשך ולהוציא אותו מנדן הקרמסטר שלו. ברגע שהאשך יוצא, מגלגלים את הרקמה לרוחב וממקמים את נקודת החדרת הקרמסטר המחברת בין שריר הקרמסטר לאשך ואפידידימיס בצד האחורי של האשך. הדקו וקרעו את הרקמה הזו כדי לנתק את הקשר הזה.הוציאו את כרית השומן המפשעתי החוצה על ידי משיכה איטית החוצה. תוך כדי כך, שימו לב לסימני דימום והקפידו לא לפגוע בכלי הדם בתהליך. לאחר מכן, השתמש בזוג המוסטטים ננעלים כדי להדק את חוט הזרע וכלי הדם.תוך כדי החזקת מתח קל על האשך, לצרוב את חוט הזרע וכלי הדם דיסטלי למהדק hemostat. שחררו לאט את ההמוסטאט וודאו שלגדם הרקמה יש המוסטזיס טוב ולא ממשיך לדמם. הפעלת לחץ קל כלפי חוץ על שריר הקרמסטר תאפשר לגדם הרקמה לסגת לתוך חלל הגוף.קרב את שני הצדדים של שריר cremaster יחד. באמצעות 4-0 או 5-0 תפרים נספגים, מניחים תפר כדי לחבר את שני הקצוות של שריר cremaster. לאחר סיום התפר, חותכים את קצות חומר התפר כך שאורכם יהיה 1/2 סנטימטר.חזור על תהליך זה עבור האשך השני על ידי החלקת חתך העור להיות בצד השני, ובצע את אותם השלבים המשמשים להסרת האשך הראשון. לאחר ששני האשכים הוסרו ונתפרו שני צידי הקרמסטר, יש לכרות את העור כלפי מעלה ולהתכונן למרוח קליפס פצע על האזור. יש לוודא שקצות התפרים לא ייתפסו בקליפ הפצע.העכבר מוכן כעת להמשיך בניטור לאחר הניתוח. כדי להתכונן לכריתת שחלות מורין, שקלו עכברה נקבה ותנו תרופות נגד כאבים והרדמה בהתאם להנחיות המוסדיות שלכם. יש למרוח ג'ל עיניים משמן ולוודא שלעכבר אין תגובה של צביטת אצבע.לגלח את האזורים הגביים של גב העכבר כדי להכין את אתר הניתוח. בעזרת מוליך צמר גפן, מרחו שכבה של קרם להסרת שיער על האזור המגולח. לאחר 30 שניות, להסיר את הקרם עם ספוג גזה נקי.העבירו את העכבר למזרן כירורגי וודאו שיש מקור חום זמין. יש לשפשף את העור בתמיסת בטאדין, להתחיל במרכז ולעבוד בקלות החוצה לכיוון גבול האזור המגולח. לאחר מכן יש לקרצף את העור בתמיסת אלכוהול 70% באופן דומה.חזור על תהליך זה בסך הכל שלוש פעמים כדי להבטיח חיטוי עור תקין. תכננו את החתך הניתוחי כמפורט בפרוטוקול הכתוב. הניחו וילון כירורגי מעל אתר הניתוח של העכבר.תופסים את העור במלקחיים וחותכים את העור בחתך של סנטימטר אחד. השתמש במכשיר קהה או זוג רגיל של המוסטטים כדי להפריד את העור מהרקמה שמתחת. קח זמן לעשות זאת על הגבולות הרוחביים, העליונים והנחותים של החתך.תופסים את דופן הבטן וחותכים בחתך של 1/2 סנטימטר. השתמש בזוג מלקחיים כדי לאתר את השחלה בתוך החתך ומשוך כדי להוציא אותה. לאחר זיהוי הרקמות, השתמש בזוג המוסטטים כדי להדק ולמחוץ את קרן הרחם הדיסטלית.השתמש זוג שני של hemostats או זוג מלקחיים כדי להדק רק דיסטלי למהדק הראשון. מחזיק את hemostat התחתון עדיין, למשוך את מהדק העליון למעלה והרחק מהגוף לבצע ריסוק וקרע של קרן הרחם דיסטלית. שחררו לאט את ההמוסט וצפו כדי לוודא שאין דימום מוגזם שמגיע מאתר הניתוח.מקרבים את שני צידי דופן הבטן ותופרים את החתך סגור, באמצעות תפר בודד בעל 4-0 חומר תפר נספג. לאחר חיבור התפר, חותכים את קצות חומר התפר כך שאורכם יהיה 1/2 סנטימטר. החזירו את שני צידי העור זה לזה והתכוננו להניח קליפס לפצע.בעת כריתת העור, מניחים קליפס פצע מעל אתר החתך. העכבר מוכן כעת להמשיך בניטור לאחר הניתוח. תעד את ההליך, תאריך ושעה ומתן משכך כאבים בהתאם להנחיות המוסדיות שלך.לאחר שעכבר עבר כריתת שחלות כירורגית, העבר אותו לכלוב נקי ומחומם. לאחר שהעכבר חזר לשכיבה עצם החזה, הניחו אותו בכלוב נקי וספקו צ'או לח ומים. במהלך ההחלמה שלהם, לעתים קרובות לבדוק את האתר הכירורגי של העכבר ולחפש כל סימנים של זיהום או דימום.כדי למנוע נזק לקליפ הפצע, יש להסיר את כל בתי הגידול של איגלו מכרסם מהכלוב של עכבר לכריתת שחלות למשך שבוע לאחר הניתוח. לאחר 14 יום, הסר את קליפסי הפצע מעור העכבר. הפרוטוקול שהודגם מפרט כיצד לבצע כריתת שחלות וכריתת שחלות בעכבר כדי ליצור מודל דל הורמוני מין.פעולה זו כוללת הסרת האשכים דרך חתך קו אמצע בשק האשכים, ואחריו יציאה חיצונית של האשכים וניתוק חוט הזרע בכלי הדם, וכתוצאה מכך הסרת האשך, אפידידימיס וכריות שומן מפשעתי. כריתת שחלות כירורגית יכולה להתבצע על ידי חתך דורסולטרלי לתוך הדורסום ויציאה חיצונית של השחלה, האובידוקט וקרן הרחם הדיסטלית. זה ואחריו קטיעת קרן הרחם דיסטלית, המוביל להסרת השחלה ואת oviduct.טכניקה כירורגית זהירה וטיפול נכון לאחר הניתוח יביאו לאתרי ניתוח נרפאים היטב. הליכים כירורגיים אלה יכולים להיות מאומתים עוד יותר על ידי ניתוח רמות ההורמונים בדגימות סרום עכבר שבוע לאחר כריתת אורכיקטומיה. כריתת השחלות יכולה להיות מאושרת על ידי תצפית של ניוון הרחם לאחר הסרת השחלות.פרוטוקול זה מאפשר הסרה כירורגית מהירה ויעילה של שחלות ואשכים מעכברים כדי ליצור מודל נטול הורמוני מין. זה יכול להיות שימושים רבים כדי לחקור כיצד דלדול של הורמונים אלה משפיע על איברים שונים ותהליכים פיזיולוגיים.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

המדידה והטיפול בדיכוי בעין עצלה

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

בידוד ושימוש בסעיפים של עורקי שור mesenteric ווריד כמבדק לבדיקת Vasoactivity במעי הדק

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

<em&gt; Ex vivo</em&gt; דגם לחקר הורמוני פעולה בשד האדם

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Povidone יוד רקטלי הכנה בזמן של ערמונית הביופסיה מחט היא אמצעי פשוט לשחזור כדי להפחית את הסיכון של זיהום פרוצדורלי

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

השתלת תאי רקמת שומן-Derived גיליון כדי להפחית את זליגת לאחר קיצור קיבה חלקית במודל של עכברים

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

ניסוי קליני מעריך את הבטיחות, היעילות והאספקה של תיקים בעלי שמן זית בעלי שלושה חדרי מזון עבור הזנה פריבאל

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

המנגנונים שבבסיס הפרשת הורמון תחושת הבטן באמצעות מבודד את Perfused המעי הדק עכברוש

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

קירור או התחממות הוושט כדי להפחית את פגיעת הוושט במהלך פרפור שמאל אבלציה בטיפול פרפור פרוזדורים

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

חיזוי פרמקולוגיה ברשת ותיקוף ניסיוני של מנגנון הפעולה Trichosanthes-Fritillaria thunbergii נגד אדנוקרצינומה של הריאות

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

ייצור סרום מותנה אוטולוגי מותאם והערכת Ex Vivo של פוטנציאל הריפוי שלו באפיתל הקרנית

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...