Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Vi takker University of Texas Southwestern Medical Center Animal Resource Center for deres hjelp i kirurgisk trening og protokollgjennomgang. Vi takker Wert Labs supportteam for deres uvurderlige hjelp. Dette arbeidet har blitt støttet av midler fra National Institute of Health (NIH P30EY030413). Biorender.com ble brukt til å lage tegneserieskjemaer.

Alle dyreforsøk ble godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee ved UTSW (APN#2019-102840).
1. Murine orkiektomi
<ol><li>Forbered et aseptisk arbeidsfelt og sørg for at nødvendige kirurgiske instrumenter er sterilisert og lett tilgjengelige. Følg aseptisk praksis for gnagere overlevelse kirurgi.</li>
	<li>Registrer vekten av hannmusen og administrer den foretrukne anestesimetoden i henhold til institusjonelle retningslinjer. I denne protokollen ble 2 % isoflu...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

Kirurgisk fjerning av testikler og eggstokker gjør det mulig å studere murinfysiologi under kontrollert hormonmangel. Denne teknikken er viktig for mange fagområder, inkludert nevrodegenerasjon, mineralmetabolisme, kardiovaskulær og reproduktiv helse 15,16,17,18,19,20,21. Her beskriver v...

Testiklene og eggstokkene er de primære organene som er ansvarlige for kjønnshormonproduksjon. Kaskaden av hormonell kommunikasjon som fører til produksjon av testosteron og østrogen er en godt karakterisert prosess som begynner i hypothalamus med frigjøring av gonadotropinfrigjørende hormon (GnRH)1. Utgivelsen av GnRH forårsaker frigjøring av luteiniserende hormon (LH) og follikkelstimulerende hormon (FSH) fra hypofysen. Når disse hormonene kommer inn i blodet, påvirker de deretter andre vev i kroppen. Det primære målet for LH er testiklene (hos menn) og eggstokkene (hos kvinner)2. Som svar på LH, testiklene produsere og frigjøre testosteron3. På samme måte produserer eggstokkene østrogen4. Mens de tilsiktede effektene av disse hormonene er å forberede cellene og kroppen for befruktning og sikre et fungerende reproduksjonssystem, kan mange andre kroppslige systemer påvirkes.
Kjønnshormoner har vært knyttet til flere fysiologiske funksjoner. For eksempel bidrar østrogen til å opprettholde beinhomeostase ved å forhindre resorpsjon av bein av osteoklaster. Av denne grunn kan ovariektomiserte musemodeller brukes til å studere fysiologien til bein sykdommer som osteoporose 5,6,7. Testosteron og østrogen er også forskningsmål for mange kardiovaskulære og nevrodegenerative sykdommer. Nylig har forhøyet testosteronproduksjon kombinert med fettfattig diett vært knyttet til vaskulær oksidativ stress8. I hjernen har endringer i LH etter ovariektomi forårsaket endringer i romlig minne9. Reduksjon av østrogener etter ovariektomi har også blitt et modellsystem for å studere celledød i hippocampus, da dette kan indusere apoptose, noe som resulterer i hukommelsesunderskudd10. Testosteron har også vist en rolle i veksten av nyrer både i musemodeller og mennesker etter nyretransplantasjon11.
Opprettelsen av en hormonberøvet murinmodell gjør det mulig å studere kjønnshormoner og deres hormonkaskader på ulike sykdommer eller vev. Dette kan oppnås ved kirurgisk fjerning av testiklene (orkiektomi) eller eggstokkene (ovariektomi). Denne prosedyren kan utføres hos mus av hvilken som helst belastning når de er så unge som avvenningsalder (tjueen dager) eller hvilken som helst voksen alder. Ovariektomi utføres hos kvinnelige mus, mens orkiektomi utføres hos hannmus. Ved å fjerne disse organene, kan nivåene av østrogen og testosteron, og mange av deres derivater, som progesteron, reduseres kraftig12,13. Prosessen med å utføre orkiektomier eller ovariektomier hos mus kan være rask og minimalt invasiv med riktig teknikk. Rask eksisjon av disse organene på en sikker og effektiv måte kan muliggjøre rask kirurgisk behandling samtidig som musenumrene holdes minimale ved å ha en 100% overlevelsesrate når de utføres riktig. Her beskriver vi en protokoll for rask eksisjon av testiklene og eggstokkene og demonstrerer riktig postkirurgisk overvåking for å gjøre det mulig for forskere å utføre denne operasjonen raskt og trygt. Vi inkluderer også visuelle eksempler på kjønnsorganene og omkringliggende vev for å gi kirurgen anatomiske landemerker når du utfører denne prosedyren.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

Kjønnshormonsignalering spiller en kritisk rolle i flere organsystemer, så vel som i utviklingen av ulike sykdommer, inkludert nevrodegenerativ sykdom. Manipulering av kjønnshormonnivåer i murine modellsystemet gjør det mulig å studere deres innvirkning på organer / vev og innen sykdomsprogresjon. Orkiektomi - kirurgisk fjerning av testiklene - og ovariektomi - kirurgisk fjerning av eggstokkene - gir en metode for å tømme de endogene kjønnshormonene slik at de nøyaktige hormonnivåene kan tilveiebringes gjennom legemiddel eller andre leveringsmetoder. Her tilbyr vi raske og minimalt invasive metoder for både orkiektomi og ovariektomi i murine modellsystemet for reduksjon av kjønnshormoner. Denne protokollen beskriver kirurgisk forberedelse og eksisjon av testiklene gjennom pungsekken, og eksisjon av eggstokkene via to snitt i høyre og venstre lateral dorsum.

Prosedyren som presenteres her utføres i en til tre måneder gammel mus i C57BL/6J-bakgrunnen. Hannmus veide 16-28 g, og kvinnelige mus veide 14-24 g på tidspunktet for prosedyren. Denne prosedyren er optimalisert for å kunne brukes for mus i mange aldre, fra avvenning til voksen alder.
Kirurgisk orkiektomi innebærer et enkelt hudsnitt i ventral pungsekk, som vist i figur 1A. Begge testiklene fjernes en om gangen og kuttes gjennom vas deferens og spermatiske b...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

Dette manuskriptet beskriver en konsistent måte å raskt utføre overlevelse gnagere orkiektomier og ovariektomier.

Murine Orchiectomy og Ovariectomy for å redusere kjønnshormonproduksjonen

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

Det overordnede målet med denne prosedyren er å demonstrere kirurgisk fjerning av murine testikler og eggstokkene på en rask, sikker og effektiv måte. Murine orchiectomy utføres ved et ventralt midtlinjesnitt i pungen, hvor testiklene isoleres og fjernes, etterfulgt av lukking av hudsnittet. Murine ovariektomi utføres ved et dorsolateralt snitt i magen hvor eggstokken isoleres og fjernes, etterfulgt av lukking av hudsnittet, med mulighet til å gjenta denne prosedyren på den andre siden for å utføre en bilateral ovariektomi.For å starte murine orkiektomi, må du først begynne med å registrere vekten av en mannlig mus og forberede seg på å administrere passende smertestillende medisiner og anestetika i henhold til institusjonens retningslinjer. Når musen er under anestesi, dekk øynene med en smørende øyegel for å beskytte dem mot å tørke ut under prosedyren. Før du fortsetter, må du sørge for at musen er i et passende anestesiplan ved å utføre en tå-klype-responstest.Deretter barberer du musens inguinal og scrotal områder. Bruk en applikator med bomullstipp og påfør et tynt lag hårfjerningskrem på operasjonsstedet og områdene rundt. Etter 30 sekunder, fjern hårfjerningskremet med den rene gasbindsvampen.Overfør musen til et kirurgisk område og sørg for at en varmekilde er tilgjengelig. Bruk myk tape for å feste musens føtter til operasjonsmatten. Hvis testiklene har steget opp i magen, bruk forsiktig trykk på magen for å hjelpe dem ned.Skrubb huden med Betadine-løsning, start i midten over operasjonsstedet og arbeid lett utover mot grensen til det barberte området. Følg Betadine skrubb med en alkoholskrubb utført på lignende måte. Gjenta denne prosessen tre ganger for å sikre riktig desinfeksjon av huden.Dekk musen med kirurgisk drapering. Ta tak i huden og gjør et midtlinjesnitt omtrent 1 til 1 1/2 centimeter i lengde. Ta tak i kuttgrensen til huden, bruk et stumpt tippet instrument for å skille huden fra det underliggende vevet.Ta deg tid til å gjøre dette på snittets laterale, overordnede og nedre grenser. Deretter isolerer du en testikkel ved å skyve hudsnittet for å være direkte på toppen av det. Bruk en tang for å ta tak i den tynne, gjennomsiktige cremastermuskelen som omgir testikkelen.Identifikasjon av riktig vev kan bekreftes av dets gjennomsiktighet og dets evne til å bevege seg uavhengig av det underliggende vevet som er innelukket i det. Deretter snitter du cremastermuskelen ved å lage et snitt i toppen av vevet. Plasser en låseklemme på den bakre kanten av den kuttede cremastermuskelen for å holde spenningen på vevet.Bruk en tang for å ta tak i testikkelen og eksteriorisere den fra cremaster-skjeden. Når testikkelen er ute, rull vevet lateralt og lokaliser cremaster-innsettingspunktet som forbinder cremastermuskelen til testikkelen og bitestikkelen på bakre side av testikkelen. Klem og riv dette vevet for å bryte denne forbindelsen.Utvend lyskefettputen ved å trekke den sakte ut. Mens du gjør dette, se etter tegn på blødning og sørg for å ikke skade noen av blodårene i prosessen. Deretter bruker du et par låsehemostater for å klemme spermatisk ledning og blodkar.Mens du holder liten spenning på testiklen, cauterize spermatisk ledning og blodkar distalt for hemostatklemmen. Frigjør hemostaten sakte og sørg for at vevsstubben har god hemostase og ikke fortsetter å bløde. Ved å påføre et lite utadgående trykk på cremastermuskelen vil denne vevsstubben trekke seg inn i kroppshulen.Før de to sidene av cremastermuskelen sammen. Bruk 4-0 eller 5-0 absorberbare suturer, plasser en sutur for å bli med i de to endene av cremastermuskelen. Når suturen er ferdig, trim endene av suturmaterialet slik at de er 1/2 centimeter lange.Gjenta denne prosessen for den andre testikkelen ved å skyve hudsnittet for å være på toppen av den andre siden, og følg de samme trinnene som brukes til å fjerne den første testikkelen. Når begge testiklene er fjernet og begge sider av cremasteren er suturert, må du bøye huden oppover og forberede deg på å påføre en sårklemme på området. Pass på at suturendene ikke blir fanget i sårklemmen.Musen er nå klar til å fortsette med postoperativ overvåking. For å forberede murine ovariektomi, veie en kvinnelig mus og administrere smertestillende medisiner og anestesi i henhold til institusjonelle retningslinjer. Administrer smørende øyegel og kontroller at musen ikke har noen tå-klemme-respons.Barber de dorsolaterale områdene av musens rygg for å forberede operasjonsstedet. Bruk en applikator med bomullstipp og påfør et lag hårfjerningskrem på det barberte området. Etter 30 sekunder, fjern kremet med en ren gasbind svamp.Overfør musen til en kirurgisk matte og sørg for at en varmekilde er tilgjengelig. Skrubb huden med Betadine-løsning, start i midten og arbeid lett utover mot grensen til det barberte området. Følg dette ved å skrubbe huden med 70% alkoholoppløsning påført på lignende måte.Gjenta denne prosessen totalt tre ganger for å sikre riktig desinfeksjon av huden. Planlegg det kirurgiske snittet som beskrevet i den skriftlige protokollen. Plasser en kirurgisk drapering over musens operasjonssted.Ta tak i huden med tang og snitt huden med et snitt på en centimeter. Bruk et stumpt instrument eller et vanlig par hemostater for å skille huden fra det underliggende vevet. Ta deg tid til å gjøre dette på snittets laterale, overordnede og nedre grenser.Ta tak i bukveggen og snitt med et snitt på 1/2 centimeter. Bruk et par tang for å finne eggstokken i snittet og trekk for å utrydde den. Når vevet er identifisert, bruk et par hemostater for å klemme og knuse det distale livmorhornet.Bruk et andre par hemostater eller et par tang for å klemme bare distalt til den første klemmen. Hold den nederste hemostaten stille, trekk toppklemmen opp og bort fra kroppen for å utføre en knusing og rive av det distale livmorhornet. Slipp langsomt hemostaten og se for å sikre at det ikke er overdreven blødning som kommer fra operasjonsstedet.Ta de to sidene av bukveggen sammen og sutur snittet lukket, ved hjelp av en enkelt sutur med 4-0 absorberbart suturmateriale. Når suturen er sikret, trimmer du endene av suturmaterialet slik at de er 1/2 centimeter lange. Før de to sidene av huden sammen igjen og forbered deg på å plassere en sårklemme.Mens everting huden, plasser en sårklemme over snittstedet. Musen er nå klar til å fortsette med postoperativ overvåking. Dokumenter prosedyredato og -klokkeslett og smertestillende administrasjon i henhold til institusjonens retningslinjer.Når en mus har gjennomgått kirurgisk orkiektomi eller ovariektomi, overfør dem til et rent, oppvarmet bur. Når en mus har gjenvunnet sternal recumbency, plasser dem i et rent bur og gi fuktig chow og vann. Under utvinningen, sjekk ofte på musens operasjonssted og se etter tegn på infeksjon eller blødning.For å forhindre skade på sårklemmen, fjern eventuelle gnageriglohabitater fra buret til en ovariektomimus i en uke etter operasjonen. Etter 14 dager, fjern sårklemmene fra musens hud. Den demonstrerte protokollen beskriver hvordan man utfører en orkiektomi og ovariektomi i en mus for å generere en kjønnshormon-utarmet modell.Dette innebærer å fjerne testiklene gjennom et midtlinjesnitt i pungen, etterfulgt av å eksteriorisere testiklene og kutte spermatisk ledning i blodkar, noe som resulterer i fjerning av testikkel, epididymis og inguinal fett pads. Kirurgisk ovariektomi kan utføres ved et dorsolateralt snitt i dorsum og eksteriorisering av eggstokken, ovidukten og distal livmorhorn. Dette følges av å kutte det distale livmorhornet, noe som fører til fjerning av eggstokken og ovidukten.Forsiktig kirurgisk teknikk og riktig postoperativ behandling vil resultere i godt helbredede kirurgiske steder. Disse kirurgiske prosedyrene kan valideres ytterligere ved å analysere hormonnivåer i museserumprøver en uke etter orkiektomi. Ovariektomi kan bekreftes ved observasjon av livmoratrofi etter fjerning av eggstokkene.Denne protokollen muliggjør rask og effektiv kirurgisk fjerning av eggstokkene og testiklene fra mus for å generere en kjønnshormon-utarmet modell. Dette kan ha mange bruksområder for å studere hvordan uttømming av disse hormonene påvirker ulike organer og fysiologiske prosesser.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Den Måling og behandling av undertrykkelse i Amblyopi

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Isolere og bruke Deler av Bovine mesenteriske arterie og vene som en biologisk metode for å teste for vasoactivity i tynntarmen

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

En<em&gt; Ex vivo</em&gt; Modell for å studere Hormone Handling i Human Breast

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Povidone Jod Rektal Forberedelse på tidspunktene Prostata Needle Biopsi er en enkel og reproduserbar virkemiddel for å redusere risikoen for prosedyre Infeksjon

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplantasjon av fettvev-avledet stilk cellen ark å redusere lekkasje etter delvis Colectomy i en rotte modell

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

En klinisk studie vurdere sikkerhet, effekt, og levering av olivenolje-baserte tre-kammer poser for parenteral ernæring

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

Mekanismene bak Gut hormon sekresjonen bruker den isolerte Perfused rotte tynntarmen

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

Kjøling eller oppvarming av spiserøret for å redusere esophageal skade under venstre atriefasjon ablasjon i behandling av atrieflimmer

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Nettverksfarmakologi prediksjon og eksperimentell validering av Trichosanthes-Fritillaria thunbergii virkningsmekanisme mot lungeadenokarsinom

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Produksjon av modifisert autologt kondisjonert serum og ex vivo vurdering av dets helbredende potensial i musint hornhinneepitel

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...