Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Мы благодарим Центр ресурсов для животных Юго-Западного медицинского центра Техасского университета за помощь в обучении хирургов и пересмотре протокола. Благодарим службу поддержки Wert Lab за неоценимую помощь. Эта работа была поддержана средствами Национального института здравоохранения (NIH P30EY030413). Biorender.com использовалась для создания мультипликационных схем.

Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию в UTSW (APN#2019-102840).
1. Мышиная орхиэктомия
<ol><li>Подготовьте асептическое рабочее поле и убедитесь, что необходимые хирургические инструменты стерилизованы и легко доступ?...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

Хирургическое удаление яичек и яичников позволяет изучать физиологию мышей в условиях контролируемой гормональной депривации. Этот метод важен для многих областей науки, включая нейродегенерацию, минеральный обмен, сердечно-сосудистое и репродуктивное здоровье 15,16,17,18,19,20,21<sup cl...

Яички и яичники являются основными органами, ответственными за выработку половых гормонов. Каскад гормональных коммуникаций, приводящих к выработке тестостерона и эстрогена, является хорошо охарактеризованным процессом, который начинается в гипоталамусе с высвобождения гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ)1. Высвобождение ГнРГ вызывает высвобождение лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) из гипофиза. Когда эти гормоны попадают в кровоток, они затем влияют на другие ткани в организме. Основной мишенью ЛГ являются яички (у мужчин) и яичники (у женщин)2. В ответ на ЛГ яички вырабатывают и высвобождают тестостерон3. Аналогично яичники вырабатывают эстроген4. В то время как эти гормоны предназначены для подготовки клеток и организма к оплодотворению и обеспечения функционирования репродуктивной системы, многие другие системы организма могут быть затронуты.
Половые гормоны связаны с несколькими физиологическими функциями. Например, эстроген помогает поддерживать гомеостаз костей, предотвращая резорбцию кости остеокластами. По этой причине овариэктомированные мышиные модели могут быть использованы для изучения физиологии заболеваний костей, таких как остеопороз 5,6,7. Тестостерон и эстроген также являются объектами исследований многих сердечно-сосудистых и нейродегенеративных заболеваний. В последнее время повышенная выработка тестостерона в сочетании с диетой с высоким содержанием жиров была связана с сосудистым окислительнымстрессом. В головном мозге изменения ЛГ после овариоэктомии вызвали изменения в пространственной памяти9. Снижение уровня эстрогенов после овариоэктомии также стало модельной системой для изучения гибели клеток в гиппокампе, поскольку это может индуцировать апоптоз, приводящий кдефициту памяти. Тестостерон также показал свою роль в росте почек как у мышей, так и у людей послетрансплантации почки.
Создание лишенной гормонов мышиной модели позволяет изучать половые гормоны и их гормональные каскады на различных заболеваниях или тканях. Это может быть достигнуто путем хирургического удаления яичек (орхиэктомия) или яичников (овариоэктомия). Эта процедура может быть проведена на мышах любой линии в возрасте от отъема (21 день) или в любом взрослом возрасте. Овариоэктомия выполняется самкам мышей, в то время как орхиэктомия выполняется самцам мышей. Удаляя эти органы, можнозначительно снизить уровень эстрогена и тестостерона, а также многих их производных, таких как прогестерон. Процесс выполнения орхиэктомии или овариоэктомии у мышей может быть быстрым и минимально инвазивным при правильной технике. Быстрое иссечение этих органов безопасным и эффективным способом может обеспечить быструю хирургическую обработку, сохраняя при этом минимальное количество мышей за счет 100% выживаемости при правильном выполнении. Здесь мы подробно опишем протокол быстрого иссечения яичек и яичников и продемонстрируем надлежащий послеоперационный мониторинг, чтобы исследователи могли выполнить эту операцию быстро и безопасно. Мы также включаем визуальные примеры половых органов и окружающих тканей, чтобы предоставить хирургу анатомические ориентиры при выполнении этой процедуры.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

Передача сигналов половых гормонов играет важнейшую роль в развитии нескольких систем органов, а также в прогрессировании различных заболеваний, включая нейродегенеративные заболевания. Манипуляции с уровнями половых гормонов в мышиной модельной системе позволяют изучать их влияние на органы/ткани и в рамках прогрессирования заболевания. Орхиэктомия - хирургическое удаление яичек - и овариоэктомия - хирургическое удаление яичников - представляют собой метод истощения эндогенных половых гормонов, чтобы точный уровень гормонов мог быть обеспечен с помощью лекарств или других методов доставки. Здесь мы предлагаем быстрые и минимально инвазивные методы как орхиэктомии, так и овариоэктомии в мышиной модельной системе для снижения уровня половых гормонов. В этом протоколе подробно описывается хирургическая подготовка и иссечение яичек через мошоночный мешок, а также иссечение яичников через два разреза в правой и левой боковой тыльной стороне.

Процедура, представленная здесь, выполняется на мышах в возрасте от одного до трех месяцев на фоне C57BL/6J. Самцы мышей весили 16-28 г, а самки - 14-24 г на момент процедуры. Эта процедура была оптимизирована для мышей разных возрастов, от отъема до взрослого возраста.
Хирургическа...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

В этой рукописи описывается последовательный способ быстрого выполнения орхиэктомии и овариэктомии грызунов, выживающих грызунов.

Мышиная орхиэктомия и овариоэктомия для снижения выработки половых гормонов

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

Общая цель этой процедуры - продемонстрировать хирургическое удаление яичек и яичников мышей быстрым, безопасным и эффективным способом. Мышиная орхиэктомия выполняется путем вентрального разреза по средней линии в мошоночном мешке, где яички изолируются и удаляются с последующим закрытием разреза кожи. Мышиная овариоэктомия выполняется путем дорсолатерального разреза брюшной полости, где яичник изолируется и удаляется, с последующим закрытием разреза кожи с возможностью повторить эту процедуру с другой стороны для выполнения двусторонней овариоэктомии.Чтобы начать мышиную орхиэктомию, сначала запишите вес самца мыши и подготовьтесь к введению соответствующих обезболивающих и анестетиков в соответствии с рекомендациями вашего учреждения. После того, как мышь окажется под наркозом, нанесите на глаза смазывающий гель для глаз, чтобы защитить их от пересыхания во время процедуры. Прежде чем продолжить, убедитесь, что мышь находится в соответствующей плоскости анестезии, выполнив тест на реакцию на щипок ноги.Далее побрейте паховую и мошоночную области мыши. Используя аппликатор с ватным наконечником, нанесите тонкий слой крема для депиляции на место операции и прилегающие участки. Через 30 секунд удалите крем для депиляции чистой марлевой губкой.Переместите мышь в операционную область и убедитесь, что источник тепла доступен. Используйте мягкую клейкую ленту, чтобы приклеить лапки мыши к хирургическому коврику. Если яички поднялись в брюшную полость, слегка надавите на брюшную полость, чтобы помочь им опуститься.Потрите кожу раствором Бетадина, начиная с центра над местом операции и легко двигаясь наружу к границе выбритой области. После скраба с Бетадином нанесите спиртовой скраб, выполненный аналогичным образом. Повторите этот процесс три раза, чтобы обеспечить надлежащую дезинфекцию кожи.Накройте мышь хирургической простыней. Возьмитесь за кожу и сделайте разрез по средней линии длиной примерно от 1 до 1 1/2 сантиметра. Взявшись за границу разреза кожи, с помощью инструмента с тупым концом отделите кожу от подлежащих тканей.Потратьте время на то, чтобы сделать это на боковой, верхней и нижней границах разреза. Затем изолируйте одно яичко, сдвинув разрез кожи прямо над ним. Используйте щипцы, чтобы захватить тонкую, прозрачную кремастерную мышцу, которая окружает яичко.Идентификация правильной ткани может быть подтверждена ее прозрачностью и способностью двигаться независимо от подлежащих тканей, заключенных в ней. Затем надрезают кремастерную мышцу, сделав надрез в верхушке ткани. Наложите фиксирующий зажим на заднюю границу разрезанной кремастерной мышцы, чтобы удерживать натяжение ткани.Используйте щипцы, чтобы захватить яичко и экстериоризировать его из оболочки кремастера. После того, как яичко выйдет, сверните ткань в сторону и локализуйте точку введения кремастера, которая соединяет кремастерную мышцу с яичком и придатком яичка на задней стороне яичка. Зажмите и разорвите эту ткань, чтобы разорвать это соединение.Экстериоризируйте паховую жировую подушку, медленно вытаскивая ее. При этом следите за признаками кровотечения и следите за тем, чтобы не повредить кровеносные сосуды в процессе. Затем используйте пару фиксирующих гемостатов, чтобы пережать семенной канатик и кровеносные сосуды.Удерживая небольшое напряжение на яичке, прижигают семенной канатик и кровеносные сосуды дистальнее зажима гемостата. Медленно отпустите гемостат и убедитесь, что культя ткани имеет хороший гемостаз и не продолжает кровоточить. Небольшое давление наружу на кремастерную мышцу позволит этой культе ткани втянуться в полость тела.Соедините две стороны кремастерной мышцы вместе. Используя рассасывающиеся нити 4-0 или 5-0, наложите шов, чтобы соединить два конца кремастерной мышцы. После того, как шов будет завершен, обрежьте концы шовного материала до 1/2 сантиметра в длину.Повторите этот процесс для другого яичка, сдвинув разрез кожи поверх другой стороны, и выполните те же шаги, что и для удаления первого яичка. После того, как оба яичка были удалены и обе стороны кремастера были зашиты, выверните кожу вверх и приготовьтесь наложить зажим на рану. Следите за тем, чтобы концы шва не попали в зажим для раны.Теперь мышь готова к продолжению послеоперационного мониторинга. Чтобы подготовиться к овариоэктомии у мышей, взвесьте самку мыши и введите обезболивающее лекарство и анестезию в соответствии с рекомендациями вашего учреждения. Нанесите смазывающий гель для глаз и убедитесь, что мышь не реагирует на защемление пальца ноги.Побрейте дорсолатеральные области спины мыши, чтобы подготовить место операции. С помощью аппликатора с ватным наконечником нанесите слой крема для депиляции на выбритый участок. Через 30 секунд снимите крем чистой марлевой губкой.Перенесите мышь на хирургический коврик и убедитесь, что источник тепла доступен. Потрите кожу раствором Бетадина, начиная с центра и двигаясь к границе выбритой области. После этого протрите кожу 70%-ным спиртовым раствором, нанесенным аналогичным образом.Повторите этот процесс в общей сложности три раза, чтобы обеспечить надлежащую дезинфекцию кожи. Спланируйте хирургический разрез в соответствии с письменным протоколом. Наложите хирургическую простыню на место операции мыши.Возьмитесь за кожу щипцами и сделайте разрез на коже сантиметровым разрезом. Используйте инструмент с тупым наконечником или простую пару гемостатов, чтобы отделить кожу от подлежащих тканей. Потратьте время на то, чтобы сделать это на боковой, верхней и нижней границах разреза.Возьмитесь за брюшную стенку и сделайте надрез 1/2 сантиметра. Используйте щипцы, чтобы найти яичник в разрезе, и потяните, чтобы сделать его экстериоральным. После того, как ткани идентифицированы, используйте пару гемостатов, чтобы пережать и раздавить дистальный рог матки.Используйте вторую пару гемостатов или пару щипцов, чтобы зажать чуть дистальнее первого зажима. Удерживая нижний гемостат неподвижно, потяните верхний зажим вверх и в сторону от тела, чтобы выполнить размозжение и разрыв дистального рога матки. Медленно отпустите гемостат и следите за тем, чтобы из места операции не исходило чрезмерное кровотечение.Соедините обе стороны брюшной стенки вместе и зашите разрез, используя один шов с рассасывающимся шовным материалом 4-0. После того, как шов будет закреплен, обрежьте концы шовного материала до 1/2 сантиметра в длину. Сведите обе стороны кожи вместе и приготовьтесь к установке зажима для раны.Разрезая кожу, наложите зажим на рану на место разреза. Теперь мышь готова к продолжению послеоперационного мониторинга. Задокументируйте дату и время процедуры, а также прием анальгетика в соответствии с рекомендациями вашего учреждения.После того, как мышь перенесла хирургическую орхиэктомию или овариоэктомию, переведите ее в чистую, отапливаемую клетку. Как только мышь вернется в положение лежачей грудины, поместите ее в чистую клетку и обеспечьте ей влажный корм и воду. Во время выздоровления часто проверяйте место операции мыши и ищите любые признаки инфекции или кровотечения.Чтобы не повредить зажим для раны, удалите все места обитания иглу грызунов из клетки мыши для овариоэктомии в течение одной недели после операции. Через 14 дней снимите раневые зажимы с кожи мыши. В продемонстрированном протоколе подробно описано, как выполнить орхиэктомию и овариоэктомию у мыши для создания модели с истощением половых гормонов.Это включает в себя удаление яичек через разрез по средней линии в мошонке с последующей экстериоризацией яичек и разрывом семенного канатика в кровеносных сосудах, что приводит к удалению яичка, придатка яичка и паховых жировых пакетов. Хирургическая овариоэктомия может быть выполнена путем дорсолатерального разреза на спинке и экстериоризации яичника, яйцевода и дистального отдела рога матки. Далее следует отсечение дистального рога матки, приводящее к удалению яичника и яйцевода.Тщательная хирургическая техника и надлежащий послеоперационный уход приведут к хорошо заживлению хирургических участков. Эти хирургические процедуры могут быть дополнительно подтверждены путем анализа уровня гормонов в образцах сыворотки крови мышей через неделю после орхиэктомии. Овариоэктомия может быть подтверждена наблюдением атрофии матки после удаления яичников.Этот протокол позволяет быстро и эффективно хирургически удалять яичники и яички у мышей для создания модели, истощенной половыми гормонами. Это может иметь множество применений для изучения того, как истощение этих гормонов влияет на различные органы и физиологические процессы.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Измерение и лечение в борьбе с амблиопией

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Изоляция и Использование разделов крупного рогатого брыжеечной артерии и вены, как биологических испытаний для тестирования для вазоактивности в тонком кишечнике

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

<em&gt; Экс естественных</em&gt; Модель для изучения действия гормонов в груди человека

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Иодповидон ректального Приготовление Время простаты биопсия является простым и воспроизводимых средств для снижения риска инфекции процессуального

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Трансплантация стволовых клеток жировой ткани производные листа для уменьшения утечки после частичное колэктомия в мышиной модели

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Клиническое испытание Оценка безопасности, эффективности и доставки оливкового масла основе трехкамерных мешков для парентерального питания

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

Лежащие в основе кишки гормона с помощью изолированных механизмов увлажненную крыса тонкой кишки

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

Охлаждение или потепление пищевода, чтобы уменьшить травмы пищевода во время левая абляции предсердий в лечении фибрилляции предсердий

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Прогнозирование сетевой фармакологии и экспериментальная проверка механизма действия Trichosanthes-Fritillaria thunbergii против аденокарциномы легкого

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Производство модифицированной аутологичной кондиционированной сыворотки и оценка ex vivo ее лечебного потенциала в эпителии роговицы мышей

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...