Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Texas Üniversitesi Güneybatı Tıp Merkezi Hayvan Kaynak Merkezi'ne cerrahi eğitim ve protokol incelemesindeki yardımları için teşekkür ederiz. Wert Lab destek ekibine paha biçilmez yardımları için teşekkür ederiz. Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüsü'nün (NIH P30EY030413) fonlarıyla desteklenmiştir. Biorender.com, çizgi film şemalarının oluşturulmasında kullanıldı.

Tüm hayvan deneyleri, UTSW'deki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır (APN # 2019-102840).
1. Murin orşiektomi
<ol><li>Aseptik bir çalışma alanı hazırlayın ve gerekli cerrahi aletlerin sterilize edildiğinden ve kolayca bulunabildiğinden emin olun. Kemirgen sağkalım cerrahisi için aseptik uygulamaları takip edin.</li>
	<li>Erkek farenin ağırlığını kaydedin ve tercih edilen anestezi yöntemini kurumsal yönergelere g?...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

Testislerin ve yumurtalıkların cerrahi olarak çıkarılması, kontrollü hormon yoksunluğu altında murin fizyolojisinin incelenmesine izin verir. Bu teknik, nörodejenerasyon, mineral metabolizması, kardiyovasküler ve üreme sağlığıdahil olmak üzere birçok bilim alanı için önemlidir 15,16,17,18,19,20,21.<...

Testisler ve yumurtalıklar, seks hormonu üretiminden sorumlu birincil organlardır. Testosteron ve östrojen üretimine yol açan hormonal iletişim kademesi, hipotalamusta gonadotropin salgılatıcı hormonun (GnRH) salınmasıyla başlayan iyi karakterize edilmiş bir süreçtir1. GnRH salınımı, hipofiz bezinden luteinize edici hormon (LH) ve folikül uyarıcı hormon (FSH) salınımına neden olur. Bu hormonlar kan dolaşımına girdiğinde, vücuttaki diğer dokuları etkiler. LH'nin birincil hedefi testisler (erkeklerde) ve yumurtalıklardır (kadınlarda)2. LH'ye yanıt olarak, testisler testosteron3 üretir ve serbest bırakır. Benzer şekilde, yumurtalıklar östrojen4 üretir. Bu hormonların amaçlanan etkileri, hücreleri ve vücudu döllenmeye hazırlamak ve işleyen bir üreme sistemi sağlamak olsa da, diğer birçok vücut sistemi etkilenebilir.
Cinsiyet hormonları çeşitli fizyolojik işlevlerle ilişkilendirilmiştir. Örneğin östrojen, kemiğin osteoklastlar tarafından emilmesini önleyerek kemik homeostazının korunmasına yardımcı olur. Bu nedenle, osteoporoz 5,6,7 gibi kemik hastalıklarının fizyolojisini incelemek için yumurtalıklı fare modelleri kullanılabilir. Testosteron ve östrojen ayrıca birçok kardiyovasküler ve nörodejeneratif hastalık için araştırma hedefleridir. Son zamanlarda, yüksek yağlı diyetle birlikte yüksek testosteron üretimi, vasküler oksidatif stres ile ilişkilendirilmiştir8. Beyinde, ovariektomi sonrası LH'deki değişiklikler uzamsal bellekte değişikliklere neden olmuştur9. Yumurtalıkektomiyi takiben östrojenlerin azaltılması, hipokampusta hücre ölümünü incelemek için bir model sistem haline gelmiştir, çünkü bu, apoptozu indükleyebilir ve hafıza eksikliklerine neden olabilir10. Testosteron ayrıca böbrek naklini takiben hem fare modellerinde hem de insanlarda böbreklerin büyümesinde rol oynamıştır11.
Hormondan yoksun bir fare modelinin oluşturulması, cinsiyet hormonlarının ve bunların hormonlarının çeşitli hastalıklar veya dokular üzerindeki kademeli olarak incelenmesine izin verir. Bu, testislerin (orşiektomi) veya yumurtalıkların (ovariektomi) cerrahi olarak çıkarılmasıyla gerçekleştirilebilir. Bu prosedür, sütten kesme yaşı (yirmi bir gün) veya herhangi bir yetişkin yaşı kadar küçükken herhangi bir suştaki farelerde gerçekleştirilebilir. Dişi farelerde ovariektomi, erkek farelerde ise orşiektomi yapılır. Bu organları çıkararak, östrojen ve testosteron seviyeleri ve progesteron gibi türevlerinin çoğu büyük ölçüde azaltılabilir12,13. Farelerde orkiektomi veya yumurtalık yapma süreci, uygun teknikle hızlı ve minimal invaziv olabilir. Bu organların güvenli ve verimli bir şekilde hızlı bir şekilde çıkarılması, doğru yapıldığında %100 hayatta kalma oranına sahip olarak fare sayılarını minimumda tutarken hızlı cerrahi işlemlere izin verebilir. Burada, testislerin ve yumurtalıkların hızlı eksizyonu için bir protokolü detaylandırıyoruz ve araştırmacıların bu ameliyatı hızlı ve güvenli bir şekilde gerçekleştirmelerini sağlamak için uygun ameliyat sonrası izlemeyi gösteriyoruz. Cerraha bu prosedürü gerçekleştirirken anatomik işaretler sağlamak için cinsiyet organlarının ve çevresindeki dokuların görsel örneklerini de dahil ediyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

Seks hormonu sinyali, çoklu organ sistemlerinde ve nörodejeneratif hastalık da dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların ilerlemesinde kritik bir rol oynar. Fare model sisteminde cinsiyet hormonu seviyelerinin manipülasyonu, organlar / dokular üzerindeki etkilerinin ve hastalığın ilerlemesinin incelenmesine izin verir. Orşiektomi - testislerin cerrahi olarak çıkarılması - ve yumurtalıkların cerrahi olarak çıkarılması - endojen seks hormonlarını tüketmek için bir yöntem sağlar, böylece kesin hormon seviyeleri ilaç veya diğer dağıtım yöntemleriyle sağlanabilir. Burada, cinsiyet hormonlarının azaltılması için murin model sisteminde hem orşiektomi hem de ovariektomi için hızlı ve minimal invaziv yöntemler sunuyoruz. Bu protokol, testislerin skrotal keseden cerrahi hazırlığını ve eksizyonu ile yumurtalıkların sağ ve sol lateral dorsumdan iki kesiden çıkarılmasını detaylandırır.

Burada sunulan prosedür, C57BL / 6J arka planında bir ila üç aylık farelerde gerçekleştirilir. İşlem sırasında erkek fareler 16-28 g ağırlığındaydı ve dişi fareler 14-24 g ağırlığındaydı. Bu prosedür, sütten kesmeden yetişkinliğe kadar birçok yaştaki fareler için geçerli olacak şekilde optimize edilmiştir.
Cerrahi orşiektomi, Şekil 1A'da gösterildiği gibi ventral skrotal kesede tek bir cilt insizyonu içerir. Her iki testis te...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

Bu el yazması, hayatta kalma kemirgen orkiektomilerini ve yumurtalıklarını hızlı bir şekilde gerçekleştirmenin tutarlı bir yolunu açıklamaktadır.

Seks Hormonu Üretimini Azaltmak için Murin Orşiektomi ve Ovariektomi

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

Bu prosedürün genel amacı, murin testislerinin ve yumurtalıklarının hızlı, güvenli ve etkili bir şekilde cerrahi olarak çıkarılmasını göstermektir. Murin orşiektomi, testislerin izole edildiği ve çıkarıldığı skrotal kese içine ventral orta hat insizyonu ve ardından cilt kesisinin kapatılması ile gerçekleştirilir. Murin ovariektomi, yumurtalığın izole edildiği ve çıkarıldığı karın içine dorsolateral bir kesi ile gerçekleştirilir, ardından cilt kesisi kapatılır ve bu prosedürü diğer tarafta iki taraflı yumurtalıkektomi yapmak için tekrarlama seçeneği sunulur.Murin orşiektomiye başlamak için önce bir erkek farenin ağırlığını kaydederek başlayın ve kurumsal yönergelerinize göre uygun ağrı kesici ilaçları ve anestezikleri uygulamaya hazırlanın. Fare anestezi altına alındıktan sonra, işlem sırasında kurumasını önlemek için gözleri kayganlaştırıcı bir göz jeli ile kapatın. Devam etmeden önce, ayak parmağını kıstırma tepki testi yaparak farenin uygun bir anestezi düzleminde olduğundan emin olun.Ardından, farenin kasık ve skrotal bölgelerini tıraş edin. Pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak, ameliyat bölgesine ve çevresine ince bir tabaka tüy dökücü tüy dökücü krem uygulayın. 30 saniye sonra tüy dökücü kremi temiz gazlı bezle çıkarın.Fareyi cerrahi bir alana aktarın ve bir ısı kaynağının mevcut olduğundan emin olun. Farenin ayaklarını cerrahi paspasa yapıştırmak için yumuşak yapışkan bant kullanın. Testisler karın içine yükselmişse, inmelerine yardımcı olmak için karın üzerine hafif bir baskı uygulayın.Cildi Betadine solüsyonu ile ovalayın, ameliyat bölgesinin ortasından başlayarak ve traş edilen alanın sınırına doğru kolayca dışa doğru çalışın. Betadine fırçalamasını benzer şekilde yapılan bir alkollü ovma ile takip edin. Uygun cilt dezenfeksiyonunu sağlamak için bu işlemi üç kez tekrarlayın.Fareyi cerrahi örtü ile örtün. Cildi kavrayın ve yaklaşık 1 ila 1 1/2 santimetre uzunluğunda bir orta hat kesisi yapın. Cildin kesik sınırını kavrayarak, cildi alttaki dokudan ayırmak için künt uçlu bir alet kullanın.Bunu insizyonun lateral, üst ve alt sınırlarında yapmak için zaman ayırın. Ardından, cilt kesisini doğrudan üstüne gelecek şekilde kaydırarak bir testisi izole edin. Testisi çevreleyen ince, şeffaf kremaster kasını kavramak için bir çift forseps kullanın.Doğru dokunun tanımlanması, şeffaflığı ve içinde bulunan alttaki dokulardan bağımsız olarak hareket etme yeteneği ile doğrulanabilir. Ardından, dokunun tepesine bir kesi yaparak kremaster kasını kesin. Doku üzerindeki gerginliği korumak için kesilen kremaster kasının arka sınırına bir kilitleme kelepçesi yerleştirin.Testisi kavramak ve kremaster kılıfından çıkarmak için bir çift forseps kullanın. Testis dışarı çıktıktan sonra, dokuyu yanal olarak yuvarlayın ve kremaster kasını testislere ve testisin arka tarafındaki epididime bağlayan kremaster yerleştirme noktasını lokalize edin. Bu bağlantıyı kesmek için bu dokuyu kelepçeleyin ve yırtın.Kasık yağ yastığını yavaşça dışarı çekerek dışını dışa doğru çekin. Bunu yaparken kanama belirtilerine dikkat edin ve bu süreçte kan damarlarının hiçbirine zarar vermediğinizden emin olun. Ardından, spermatik kordonu ve kan damarlarını klemplemek için bir çift kilitli hemostat kullanın.Testis üzerinde hafif bir gerginlik tutarken, hemostat klempinin distalindeki spermatik kordon ve kan damarlarını koterize edin. Kanama durdurucuyu yavaşça serbest bırakın ve doku kütüğünün iyi hemostaz olduğundan ve kanamaya devam etmediğinden emin olun. Cremaster kasına hafif bir dışa doğru baskı uygulamak, bu doku kütüğünün vücut boşluğuna geri çekilmesini sağlayacaktır.Cremaster kasının iki tarafını bir araya getirin. 4-0 veya 5-0 emilebilir sütürler kullanarak, kremaster kasının iki ucunu birleştirecek bir dikiş yerleştirin. Dikiş bittikten sonra, dikiş malzemesinin uçlarını 1/2 santimetre uzunluğunda olacak şekilde kesin.Deri kesisini diğer tarafın üstüne kaydırarak bu işlemi diğer testis için tekrarlayın ve ilk testisi çıkarmak için kullanılan adımların aynısını izleyin. Her iki testis de çıkarıldıktan ve kremasterin her iki tarafı dikildikten sonra, cildi yukarı doğru çekin ve bölgeye bir yara klipsi uygulamaya hazırlanın. Dikiş uçlarının yara klipsine takılmayacağından emin olun.Fare artık ameliyat sonrası izlemeye devam etmeye hazırdır. Murin ovariektomiye hazırlanmak için dişi bir fareyi tartın ve kurumsal yönergelerinize göre ağrı kesici ilaç ve anestezi uygulayın. Kayganlaştırıcı göz jeli uygulayın ve farenin ayak parmağını sıkıştırma tepkisi olmadığından emin olmak için kontrol edin.Ameliyat bölgesini hazırlamak için farenin sırtının dorsolateral bölgelerini tıraş edin. Pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak, traş edilen bölgeye bir kat tüy dökücü tüy dökücü krem uygulayın. 30 saniye sonra kremi temiz bir gazlı bezle çıkarın.Fareyi bir cerrahi mata aktarın ve bir ısı kaynağının mevcut olduğundan emin olun. Cildi Betadine solüsyonu ile ovalayın, merkezden başlayın ve traş edilen alanın sınırına doğru kolayca dışa doğru çalışın. Bunu, cildi benzer şekilde uygulanan% 70 alkol solüsyonu ile ovalayarak takip edin.Uygun cilt dezenfeksiyonunu sağlamak için bu işlemi toplam üç kez tekrarlayın. Ameliyat kesisini yazılı protokolde detaylandırıldığı gibi planlayın. Farenin cerrahi bölgesinin üzerine cerrahi bir örtü yerleştirin.Cildi forseps ile kavrayın ve cildi bir santimetrelik bir kesi ile kesin. Cildi alttaki dokudan ayırmak için künt uçlu bir alet veya düz bir çift hemostat kullanın. Bunu insizyonun lateral, üst ve alt sınırlarında yapmak için zaman ayırın.Karın duvarını kavrayın ve 1/2 santimetrelik bir kesi ile kesin. Yumurtalığı kesi içinde bulmak için bir çift forseps kullanın ve dışını çıkarmak için çekin. Dokular tanımlandıktan sonra, distal uterus boynuzunu kelepçelemek ve ezmek için bir çift hemostat kullanın.İlk kelepçenin hemen distalini kelepçelemek için ikinci bir çift hemostat veya bir çift forseps kullanın. Alt hemostatı sabit tutarak, distal uterin boynuzu ezmek ve yırtmak için üst kelepçeyi yukarı ve vücuttan uzağa çekin. Kanama durdurucuyu yavaşça serbest bırakın ve ameliyat bölgesinden aşırı kanama olmadığından emin olmak için izleyin.Karın duvarının iki tarafını bir araya getirin ve 4-0 emilebilir dikiş materyali ile tek bir dikiş kullanarak kesiyi kapatın. Dikiş sabitlendikten sonra, dikiş malzemesinin uçlarını 1/2 santimetre uzunluğunda olacak şekilde kesin. Cildin iki tarafını tekrar bir araya getirin ve bir yara klipsi yerleştirmeye hazırlanın.Cildi temizlerken, kesi bölgesinin üzerine bir yara klipsi yerleştirin. Fare artık ameliyat sonrası izlemeye devam etmeye hazırdır. Prosedür tarihini ve saatini ve analjezik uygulamasını kurumsal yönergelerinize göre belgeleyin.Bir fare cerrahi orşiektomi veya ovariektomi geçirdikten sonra, onları temiz, ısıtılmış bir kafese aktarın. Bir fare sternal yaslanma özelliğini yeniden kazandığında, onları temiz bir kafese koyun ve nemli yemek ve su sağlayın. İyileşmeleri sırasında, farenin cerrahi bölgesini sık sık kontrol edin ve herhangi bir enfeksiyon veya kanama belirtisi olup olmadığına bakın.Yara klipsinin zarar görmesini önlemek için, ameliyattan sonraki bir hafta boyunca ovariektomi faresinin kafesinden kemirgen iglo habitatlarını çıkarın. 14 gün sonra, yara klipslerini farenin derisinden çıkarın. Gösterilen protokol, cinsiyet hormonu tükenmiş bir model oluşturmak için bir farede orşiektomi ve ovariektominin nasıl gerçekleştirileceğini detaylandırıyor.Bu, testislerin skrotumdaki orta hat kesisinden çıkarılmasını, ardından testislerin dıştan çıkarılmasını ve kan damarlarındaki spermatik kordun kesilmesini içerir, bu da testis, epididim ve kasık yağ yastıkçıklarının çıkarılmasıyla sonuçlanır. Cerrahi ovariektomi, dorsuma dorsolateral bir kesi yapılarak yumurtalık, yumurta kanalı ve distal uterin boynuzun dıştan dışa açılmasıyla gerçekleştirilebilir. Bunu distal uterin boynuzun kesilmesi takip eder, bu da yumurtalık ve yumurta kanalının çıkarılmasına yol açar.Dikkatli cerrahi teknik ve uygun postoperatif bakım, cerrahi bölgelerin iyi iyileşmesine neden olacaktır. Bu cerrahi prosedürler, orşiektomiden bir hafta sonra fare serum örneklerinde hormon seviyeleri analiz edilerek daha da doğrulanabilir. Yumurtalık, yumurtalıkların çıkarılmasını takiben uterus atrofisinin gözlemlenmesiyle doğrulanabilir.Bu protokol, cinsiyet hormonu tükenmiş bir model oluşturmak için farelerden yumurtalıkların ve testislerin hızlı ve etkili bir şekilde cerrahi olarak çıkarılmasını sağlar. Bunun, bu hormonların tükenmesinin çeşitli organları ve fizyolojik süreçleri nasıl etkilediğini incelemek için birçok kullanımı olabilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Ambliyopi içinde Bastırma Ölçme ve Tedavisi

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Bir Biyoassay olarak Sığır Mezenterik Arter ve Ven Bölüm yalıtma ve kullanma İnce Barsak vazoaktiviteye için Test

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

Bir<em&gt; Ex vivo</em&gt; Model İnsan Meme Hormon Eylem Eğitim için

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Prostat İğne Biyopsisi Zamanında at Povidon İyot Rektal Hazırlama Usul Enfeksiyon Riskini Azaltmak için basit ve tekrarlanabilir araçlar olduğunu

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Bir sıçan modelinde kısmi kolektomi sonra kaçağı azaltmak için Yağ dokusundan elde edilen kök hücre sayfasının nakli

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Parenteral Beslenme için Zeytinyağı Bazlı Üç Odalı Poşetlerin Güvenliğini, Etkinliğini ve Teslimini Değerlendiren Klinik Bir Çalışma

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

Gut hormonu salgılanması izole kullanarak temel mekanizmaları fare bağırsağı periosteum

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

Atriyal Fibrilasyon Tedavisinde Sol Atriyal Ablasyon Sırasında Özofagusun Azaltılması veya Isınması

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Ağ Farmakolojisi Akciğer Adenokarsinomuna Karşı Trikosantiz-Fritillaria Thunbergii Etki Mekanizmasının Tahmini ve Deneysel Validasyonu

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Modifiye Otolog Şartlandırılmış Serum Üretimi ve Murin Kornea Epitelinde İyileşme Potansiyelinin Ex Vivo Değerlendirilmesi

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...