Name: assessment of ex vivo murine biventricular function in a langendorff model
Uploaded: 2022-12-23T13:30:00
Duration: 7 min 54 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Ex Vivo Murine Biventricular Function in a Langendorff Model at JoVE.com

כל הניסויים בבעלי חיים בפרוטוקול זה אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת מישיגן, אן ארבור. כל העכברים שוכנו במחזור אור של 12:12 בחדרים נטולי פתוגנים. עיין בטבלת החומרים לקבלת פרטים הקשורים לכל החומרים, בעלי החיים והציוד המשמשים בפרוטוקול זה.
1. בניית צנתר בלון סיליקון
הערה: בלון הסיליקון מיוצר כמתואר קודם13.
<ol><li>הוסיפו 9.5 מ"ל מים מזוקקים, 14.2 מ"ל סירופ תירס בהיר ו-33.8 גרם סוכרוז לכוס של 100 מ"ל. מחממים ומערבבים את התמיסה עד שהסוכר מומס לחלוטין.</li>
	<li>מכינים את הבצק על ידי ערבוב 10 גרם קמח חיטה ו 5 גרם מים עד להשגת עקביות אחידה ולאפשר לו לנוח במשך 10 דקות.</li>
	<li>מעצבים חתיכת בצק קטנה לסגלגל - ה"ראש" - ומחברים אותה לקצה גדיל ספגטי יבש. לאחר מכן, טבלו את הראש בתמיסת הסוכר והסירו לאט מהתמיסה, מכיוון שהראש כעת מצופה לחלוטין. הערה: הבצק צריך להיות חלק ובעל מרקם אחיד. ניתן לשנות את גדלי הבצק ליצירת בלונים בגדלים שונים, החל מ-5 מ"מ (קוטר קצר) ועד 7 מ"מ (קוטר ארוך). נסו לכסות אותם בסרט דק של תמיסת סוכר.</li>
	<li>יש לתלות את גדיל הספגטי על גוש קצף פוליסטירן, או על מחזיקים אחרים, ליצירת כיסוי מבריק באופן אחיד מעל הראש ולייבש למשך הלילה.</li>
	<li>טובלים את התבנית בפיזור סיליקון (אלסטומר סיליקון מפוזר בקסילן). החזירו את גדיל הספגטי לגוש קצף הפוליסטירן בטמפרטורה של 37°C למשך שעתיים או עד לייבוש. חזור על שלב זה פעם אחת. הערה: חיוני למנוע מג'ל פיזור הסיליקון להתחמצן עקב חשיפה לאוויר, מכיוון שזה ייצור עובי בלון לא אחיד.</li>
	<li>הכניסו את התבנית למים כדי להפריד ולאסוף את הבלון. אחסנו את הבלון ב-0.02% נתרן אזיד.</li>
	<li>חותכים קצה שני קהה ממחט 22 גרם; הרכיבו קצה קהה אחד לבלון הסיליקון וקצה קהה נוסף לצינורות PE. השתמש 4-0 משי כדי לקשור את הבלון במקום על המחט. הערה: בדוק את שלמות הבלון על-ידי הזרקת מים לתוכו. לאחר מילוי הבלון, לחצו עליו ברכות כדי לבדוק אם הבלון שומר על מתח בפנים. השתמש בבלון חדש אם הוא דולף. ניתן לאחסן את הבלונים המותקנים לשימוש עתידי.</li>
</ol>2. הכנת מערכת זילוח הלב
<ol><li>צור 1 ליטר של חיץ זילוח קרבס-הנסלייט (KH) והעבר אותו למערכת מאגר המים לנגנדורף.</li>
	<li>חבר את צינור האוויר למאגר המים והפעל את זרימת האוויר כדי לאזן את מאגר KH עם 5% CO 2 ו- 95% O2 למשך 30 דקות לפחות.</li>
	<li>הגדר את אמבט המים על 41.5 מעלות צלזיוס והזרים את המים בשכבה החיצונית של מערכת לנגנדורף כדי לחמם את המערכת ואת חיץ KH. הערה: טמפרטורת אמבט המים דורשת אופטימיזציה עבור כל מערכת. עבור מערכת זו, טמפרטורת אמבט המים תשמור על KH ב 37-37.5 מעלות צלזיוס כאשר מחוררים לתוך הלב.</li>
</ol>3. בידוד, הרכבה ושימורים של לב העכבר
<ol><li>עבור נוגדי קרישה, adminster 200 יחידות של הפרין במי מלח על ידי הזרקה intraperitoneal (i.p.) לתוך הרביע הימני של C57/B6 בטן עכבר. שאפו את המזרק לפני ההזרקה כדי לאשר שהשיפוע של המחטים אינו נמצא בשלפוחית השתן או בלומן של מערכת העיכול. השתמש לפחות ארבעה עכברים בכל מצב ניסוי (אבל גם לשקול את גודל ההשפעה הטיפולית).<ol><li>לאחר 30 דקות, לתת 80 מ"ג / ק"ג קטמין ו 10 מ"ג / ק"ג של xylazine i.p. כדי להרדים את העכבר. בדוק אם העכבר המרדים מחוסר הכרה על ידי ביצוע צביטת בוהן ולוודא שלא נצפתה תגובה. ניתן להוסיף אצפרומזין 2 מ"ג/ק"ג לקוקטייל קט/קסיל אם זן העכברים המשומש אינו מגיע לרמה מספקת של הרדמה עם קט/קסיל בלבד.</li>
		<li>בצע חתך ממש מתחת לחזה. השתמש מספריים כדי לפתוח את החזה על ידי חיתוך הסרעפת והצלעות. קפלו את דופן בית החזה הקדמי כדי לחשוף את החזה במלואו. חותכים באבי העורקים היורד (סגור לקשת אבי העורקים). העבירו את הלב, הריאות ובלוטת התימוס של העכבר למאגר היסטידין-טריפטופן-קטוגלוטרט קר (HTK). בודדו את האיברים תחת חיץ HTK קר כקרח. לחשוף את אבי העורקים על ידי הסרת כל רקמות חיבור. הערה: הגדל את אורך אבי העורקים על-ידי הכללת אזור קשת אבי העורקים העולה וקשת אבי העורקים בכריתה כדי לאפשר מספיק מקום לחיבור למחט.</li>
	</ol></li>
	<li>מחברים את קצה אבי העורקים למחט 22 גרם, וקושרים בתפר משי 6-0. ודא שהצינורית נמצאת מעל שורש אבי העורקים כדי לא להפריע לשסתום אבי העורקים. מחוררים את אבי העורקים עם 10 מ"ל של חיץ HTK קר (4°C) במשך כ-10 דקות. הערה: זה לוקח פחות מ -15 דקות מהסרת הלב לקנולציה של אבי העורקים; עם זאת, חשוב לשמור על מהירות הזלוף ברמה המתאימה. זריקות מהירות ונמרצות מדי עלולות ליצור לחצים גבוהים ולגרום לנזק לכלי הדם/הלב.</li>
	<li>אחסנו את הלב בצינור של 50 מ"ל עם HTK קר כקרח למשך 8 שעות או בצעו מיד את הזילוח (אל תאחסנו את השליטה) והימנעו ממגע ישיר עם קרח. הערה: מגע ישיר של רקמת הלב עם קרח עלול להוביל לפגיעה בקור.</li>
	<li>חברו את הלב המורכב על המחט לצינורית במנגנון לנגנדורף וקשרו אותו בתפר משי. הערה: כדי לתקנן את ההליך, המתן בסך הכל 3 דקות לתהליך הקנולציה לפני הזילוח.</li>
	<li>התחל את הזילוח במצב זרימה קבועה במהירות של 3 מ"ל/דקה; לאחר מכן, שנה למצב לחץ קבוע ב 70-80 מ"מ כספית וכוונן את הלב ל~ 6 מ"ל / דקה. הערה: מישוש הלב ברכות יכול לעזור להאיץ את החייאת הלב. אם קצב זרימת הזילוח גבוה בהרבה מ-6 מ"ל/דקה במצב לחץ קבוע, ייתכן שיש דליפה בקנולציה או ששסתום אבי העורקים אינו פועל כראוי. התאם את החיבורים כדי לתקן את הדליפה. מצב הזרימה המתמדת מבטל את הוויסות העצמי של טונוס כלי הדם של הלב. מצב הלחץ המתמיד מאפשר ללב לווסת את זרימת הזילוח הכלילי שלו. לכן, מצב הלחץ המתמיד ימדוד במדויק את תפקוד הלב ואת איכות השימור של הלב.</li>
	<li>חברו בלון מנופח ומלא מים למתמר לחץ ולמזרק מלא מים באמצעות ברז תלת-כיווני. לאחר תקופת שיווי משקל של 15-20 דקות, חתכו את האטריום הימני (RA) והכניסו את הבלון לקרוואן דרך ה- RA. השתמשו בנייר דבק כדי להחזיק את הבלון בתוך הקרון. מזערו את השטח הפתוח של ה-RA כדי לעזור להגביל את הבלון בחדר (ראו איור 1 להתקנה). הערה: יש צורך בתקופה של שיווי משקל, שכן התכווצות הלב וההרפיה אינן יציבות בתחילתה, והמדד פחות מדויק ומייצג. אם צומת AV ניזוק במהלך פתיחת RA, הלב יציג הפרעות קצב תכופות.</li>
	<li>לאחר 20 דקות של איסוף נתונים פונקציונליים של RV, חתכו את האטריום השמאלי (LA) והכניסו בלון מלא מים מנופח ל- LV דרך לוס אנג'לס. השתמש בסרט הדבקה כדי להחזיק את הבלון בתוך ה- LV. הערה: הלב צריך לשמור על המודינמיקה יציבה במשך יותר מ 1.5 שעות.</li>
</ol>4. הקלטת נתונים פונקציונלית
<ol><li>כיול מתמר הלחץ<ol><li>ממלאים מזרק 10 מ"ל במי מלח חמים ומחברים את המזרק לכיפה דרך ברז משולש. פתחו את הברז ומלאו לאט את הכיפה במי מלח, ואז סגרו את כל הברזים והוציאו את המזרק. חבר את הכיפה המלאה למתמר; חבר את מד הלחץ לקצה השלישי של הברז התלת-כיווני.</li>
		<li>בתוכנת ההקלטה, בחר את גשר מגבר מהתפריט הנפתח של הערוץ המתחבר למתמר. שנה את שם הערוץ ללחץ מחורר. לחץ על אפס לאפס את המתמר.</li>
		<li>התחל את ההקלטה על ידי לחיצה על התחל כך שהמתמר קורא כעת 0 מ"מ כספית. לאחר מספר שניות של הקלטה, לדחוף לאט את המזרק ולהגדיל את הלחץ ל 100. לחץ על עצור כדי לעצור את ההקלטה.</li>
		<li>בתיבת הדו-שיח המרת יחידות, בחר אזור הקלטה עבור 0 מ"מ כספית ולחץ על החץ לנקודה 1 והקלד 0 מ"מ כספית. בחר אזור הקלטה עבור 100 מ"מ כספית, לחץ על החץ לנקודה 2 והקלד 100 מ"מ כספית. לחץ על אישור כדי לכייל את המתמר.</li>
	</ol></li>
	<li>שנה את שם התעלה המתאימה למתמר הלחץ עם הבלון כלחץ חדרי. התחל את ההקלטה כאשר הלב מחובר למערכת. לאחר החדרת הבלון לחדר, יש לכוונן את נפח המים בבלון באמצעות מזרק מיקרומטר דרך הברז התלת-כיווני כדי לשמור על הלחץ הדיאסטולי הסופי ב-5-10 מ"מ כספית. הערה: המדד הדיאסטולי הסופי עשוי לרדת במהלך המדידה, רצוי להתחיל קרוב ל-10 מ"מ כספית.</li>
	<li>שנה שם של ערוץ ריק כ- dP/dt. מהתפריט הנפתח, בחר נגזרת | ערוץ מקור כלחץ חדרי. התעלה תרשום את יחס שינוי הלחץ בחלל החדר במהלך תקופת ההתכווצות.</li>
	<li>בחר תקופת מדידה יציבה ולאחר מכן לחץ על הגדרה במודול לחץ הדם.<ol><li>בחר את לחץ החדר כערוץ הקלט ולחץ על בחירה לתקופת חישוב | בסדר.</li>
		<li>לחץ על תצוגת מסווג כדי להסיר את מחזור הלב החריג (לדוגמה, זמן מחזור חריג או לחץ).</li>
		<li>לחץ על תצוגת טבלה כדי ליצור את הטבלאות של הממוצע של dP/dt מרבי (התכווצות) ו- dP/dt מינימלי (הרפיה) עבור התקופה שנבחרה. הערה: אחסן את קובץ ההקלטה עבור כל דגימה ושמור את טבלת תפקוד הלב הממוצע לצורך ניתוח סטטיסטי.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol>
	<li>Kim, I. C., Youn, J. C., Kobashigawa, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+past,+present+and+future+of+heart+transplantation.">The past, present and future of heart transplantation.</a> Korean Circulation Journal. 48 (7), 565-590 (2018).</li><li>Gaffey, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+&amp;#34;high-risk&amp;#34;+donor+hearts:+Implications+for+infection.">Transplantation of &amp;#34;high-risk&amp;#34; donor hearts: Implications for infection.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 152 (1), 213-220 (2016).</li><li>Hsich, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matching+the+market+for+heart+transplantation.">Matching the market for heart transplantation.</a> Circulation: Heart Failure. 9 (4), 002679 (2016).</li><li>Piperata, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+transplantation+in+the+new+era+of+extended+donor+criteria.">Heart transplantation in the new era of extended donor criteria.</a> Journal of Cardiac Surgery. 36 (12), 4828-4829 (2021).</li><li>Huckaby, L. V., Hickey, G., Sultan, I., Kilic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+in+the+utilization+of+marginal+donors+for+orthotopic+heart+transplantation.">Trends in the utilization of marginal donors for orthotopic heart transplantation.</a> Journal of Cardiac Surgery. 36 (4), 1270-1276 (2021).</li><li>Singh, S. S. A., Dalzell, J. R., Berry, C., Al-Attar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+graft+dysfunction+after+heart+transplantation:+a+thorn+amongst+the+roses.">Primary graft dysfunction after heart transplantation: a thorn amongst the roses.</a> Heart Failure Reviews. 24 (5), 805-820 (2019).</li><li>Bell, R. M., Mocanu, M. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+heart+perfusion:+the+Langendorff+technique+of+isolated+heart+perfusion.">Retrograde heart perfusion: the Langendorff technique of isolated heart perfusion.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 50 (6), 940-950 (2011).</li><li>Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Langendorff+perfused+isolated+mouse+heart+model+of+global+ischemia-reperfusion+injury:+impact+of+ischemia+and+reperfusion+length+on+infarct+size+and+LDH+release.">Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).</li><li>Matsuura, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+inotropic+effects+of+ATP+released+via+the+maxi-anion+channel+in+Langendorff-perfused+mouse+hearts+subjected+to+ischemia-reperfusion.">Positive inotropic effects of ATP released via the maxi-anion channel in Langendorff-perfused mouse hearts subjected to ischemia-reperfusion.</a> Frontiers in Cell Development Biology. 9, 597997 (2021).</li><li>Tse, G., Hothi, S. S., Grace, A. A., Huang, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+arrhythmogenesis+following+slowed+conduction+in+heptanol-treated,+Langendorff-perfused+mouse+hearts.">Ventricular arrhythmogenesis following slowed conduction in heptanol-treated, Langendorff-perfused mouse hearts.</a> The Journal of Physiological Sciences. 62 (2), 79-92 (2012).</li><li>Kobashigawa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Report+from+a+consensus+conference+on+primary+graft+dysfunction+after+cardiac+transplantation.">Report from a consensus conference on primary graft dysfunction after cardiac transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (4), 327-340 (2014).</li><li>Lei, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+inflammatory+responses+of+the+native+left+and+right+ventricle+associated+with+donor+heart+preservation.">Differential inflammatory responses of the native left and right ventricle associated with donor heart preservation.</a> Physiological Reports. 9 (17), 15004 (2021).</li><li>Miller, A., Wright, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+murine+ventricular+balloons+for+the+Langendorff+heart+preparation.">Fabrication of murine ventricular balloons for the Langendorff heart preparation.</a> Journal of Biotechnology &amp; Biomaterials. 1 (101), (2011).</li><li>Madsen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+immunology+of+heart+transplantation.">Advances in the immunology of heart transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 36 (12), 1299-1305 (2017).</li><li>Voelkel, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+function+and+failure:+report+of+a+National+Heart,+Lung,+and+Blood+Institute+working+group+on+cellular+and+molecular+mechanisms+of+right+heart+failure.">Right ventricular function and failure: report of a National Heart, Lung, and Blood Institute working group on cellular and molecular mechanisms of right heart failure.</a> Circulation. 114 (17), 1883-1891 (2006).</li></ol>

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

פרוטוקול זה מתאר את שיטת Langendorff פרפוזיה מדרדרית באמצעות קנולציה אבי העורקים. טכניקה זו יכולה לשמש כדי להעריך את תפקוד LV ו- RV של לבבות מורין לאחר אחסון קר. התוצאות מראות כי אחסון קר ממושך של לבבות התורם מוביל לתפקוד לבבי מופחת הן ב- LV והן ב- RV באמצעות פרוטוקול זה. 
המחקרים על דחייה חריפה וכרונית לאחר השתלת לב מתמקדים באופן נרחב באימונוביולוגיה14. ההשפעות של תאים מקומיים על PGD במהלך אחסון קר נבדקות פחות טוב. PGD מתרחש ב~10%-20% מהשתלות הלב ומהווה 66% ממקרי המוות המוקדם תוך 30 יום לאחר ההשתלה. בפרט, שכיחות PGD המשפיעה על LV לעומת RV שונה לאחר ההשתלה11. ללא התרומה של תגובות תאיות מקבלות, שיטת ex vivo זו מתמקדת בתרומות של תאי לב מקומיים ל-PGD לאחר שימור קר של לבבות תורמים. מחקרים נוספים עשויים לשלב תגובות מושתלים במודל השתלת לב מורין. 
בפרוטוקול זה, זילוח לנגנדורף של לבבות תורמים שהשתמרו בקור התמקד בתגובות הלבביות הילידיות לזילוח גבישי חם מבלי לחדור לחסינות תאית. כדי להשיג תוצאות הניתנות לשחזור, תוקנו מספר שלבים קריטיים. לבבות העכבר נעצרו באמצעות תמיסת HTK ואוחסנו ב-HTK קר כקרח, בדומה לפרקטיקה הקלינית. נפח הזילוח וזמן העירוי של תמיסת HTK לכל לב היו במעקב צמוד עם טיימר. הלב התורם נשמר בצינורות מקוררים על קרח המכיל HTK בחדר של 4 מעלות צלזיוס. זמן הקנולציה השתנה ל~ 3 דקות לפני הזילוח. כל השלבים הללו הבטיחו כי משך שימור הקור היה המשתנה העיקרי במחקר. 
תקופה של התכווצות לב לא סדירה במשך ~20 דקות נראתה בדרך כלל בתחילת הזילוח. תקופת שיווי משקל והחלמה זו התאפשרה על ידי התחממות הדרגתית וחמצון של רקמות הלב. תקופה יציבה יחסית הייתה צפויה לאחר 20 הדקות הראשונות. הבלון הוחדר לחלל החדר ב~18 דקות לאחר תקופת שיווי המשקל הראשונית. התחלנו להקליט המודינמיקה לאחר שהלב היה יציב במשך ~25 דקות, לאחר החדרת הבלון. זילוח עם חיץ KH שמר על ביצועי לב יציבים במשך ~ 1.5-2 שעות. לכן בחרנו להקליט המודינמיקה במשך 20 דקות בכל אחד מהחדרים השמאלי והימני.
ישנן מספר מגבלות של זילוח מדרדר לחקר PGD של לבבות לאחר אחסון קר. ראשית, בשל גודל הבלון וחוסר מקום בכל חלל חדר (בפרט, ה-RV), החדרה בו זמנית של שני בלונים הן ל-LV והן לקרוואן היא מאתגרת מאוד. לפיכך, אנו מודדים את הפונקציה של RV ו- LV ברצף. חשוב לציין כי המחיצה הבין-חדרית תורמת באופן משמעותי לתפקוד החדר השמאלי והימני כאחד. המחיצה תורמת ל~50% מתפקוד החדר הימני, ולכן קיימת תלות בין-חדרית15. כמו כן, חשוב לציין כי בעוד שההליכים לזילוח מחדש של הלב המורין במכשיר לנגנדורף אורכים ~ 3 דקות, השתלה כירורגית של הלב האנושי בשדה הכירורגי החם יחסית אורכת ~ 45 דקות. לשם השוואה, הלב המורין במערכת לנגנדורף זו צובר פחות זמן איסכמי. יש לקחת זאת בחשבון כאשר שוקלים תרגום קליני.
מאחר שהשתמשנו במאגר KH כדי לחורר את הלב ללא דם, ייתכן שגם לזה תהיה פחות יעילות באספקת חמצן. עם זאת, תפקוד הלב יציב יחסית לאורך 1.5-2 שעות הזילוח הראשוניות, ובכך מאפשר מדידות המודינמיות אמינות. למרבה הצער, אין כיום מודלים מעשיים של זילוח לב עבור לבבות מורינים קטנים אלה, ולא ניתן להעריך את ההשפעה של עומס חדרי במערכת זו. למרות זאת, מערכת הזילוח היא מאוד ניתנת לשחזור ופחות דורשת עבודה וגוזלת זמן רב מאשר מודלים להשתלה. הוא גם זול יותר ממחקרי השתלות, מה שעשוי להפוך אותו למתאים יותר לבדיקת אפשרויות טיפוליות שונות ומסלולים מולקולריים שונים. עם שינויים בפתרונות שימור על ידי הוספת תרופות מועמדות, ניתן להשתמש בפלטפורמה זו כדי להעריך את ההשפעות של חומרים פרמקולוגיים על הפחתת PGD הן ב- LV והן ב- RV.

השתלת לב משפרת את ההישרדות ואת איכות החיים בחולים עם אי ספיקת לב סופנית1. למרבה הצער, המחסור בתורמי לב מגביל את מספר החולים שיכולים להפיק תועלת מטיפול זה ומגביל את יכולתם של הרופאים להתאים באופן אופטימלי בין תורמיםלמושתלים 2,3,4. יתר על כן, מערכת ההקצאה החדשה תרמה להארכת זמני האיסכמיה והגדילה משמעותית את השימוש בתורמים שוליים מאז 20185. כתוצאה מכך, הגיל הממוצע של תורמי הלב והזמן האיסכמי עולה עם הזמן, מה שמוביל לשיעור גבוה יותר של תפקוד לקוי של השתל הראשוני (PGD) למרות שיפורים משמעותיים באסטרטגיות לשימור לב 6.
PGD יכול להשפיע על החדר השמאלי, הימני או שניהם, ונשאר סיבוך מסכן חיים המייצג את הגורם המוביל למוות מוקדם לאחר השתלת לב. חקירת מנגנוני PDG ופיתוח אסטרטגיות לשימור לב טוב יותר הם שיקולים חשובים, בהתחשב בהשפעה הפוטנציאלית מצילת החיים על מושתלי לב. לכן, מודלים ניסיוניים המאפשרים הערכה חזקה ואמינה של תפקוד הלב התורם לאחר זמן אחסון ממושך חיוניים כדי להגביר את הבנתנו של PGD ולהקל על פיתוח טיפולים חדשניים. היכולת להעריך במדויק את תפקוד הלב בלב העכבר מאפשרת גישה לרפרטואר עצום של מודלים מורינים טרנסגניים שיכולים לזהות במדויק מנגנוני PGD.
במחקרים פיזיולוגיים ופרמקולוגיים, מודל הזילוח המדרדר של לנגנדורף נמצא בשימוש נרחב להערכת תפקוד הלב7. באופן ספציפי, ביצועי הלב מזוהים על ידי בלון סיליקון המחובר למתמר לחץ בתוך חלל החדר השמאלי (LV). מאפיין מרכזי של PGD הוא כיווץ והרפיה לא מספקים של שריר החדר. מחקרים קודמים של לנגנדורף התמקדו בשימוש בבלון LV כדי להפיק תוצאות אמינות וניתנות לשחזור בהערכה תפקודיתשל LV 8,9,10. עם זאת, השימוש בבלון תוך קוויטרי להערכת תפקוד החדר הימני (RV) באמצעות מערכת הבלון פחות מוכר.
בהינתן שיעור PGD משמעותי המערב את ה-RV לאחר השתלה11, שיטות ניסיוניות לחקר תפקוד LV ו-RV יסייעו לקבוע את המנגנונים המולקולריים והפיזיולוגיים התורמים ל-RV PGD. פרוטוקול זה מראה כי בלוני סיליקון תוך קוויטריים יכולים לספק הערכות אמינות של תפקוד LV ו- RV באותו לב מורין12. כדי להעריך את השימוש הפוטנציאלי במערכת לנגנדורף במחקר PGD, בחנו את תפקודי הלב עם תקופות אחסון שונות ומצאנו ירידה בתפקוד הלב בהתכווצות והרפיה עם אחסון קר ממושך של לבבות מורינים. מעניין, LV יש ירידה תפקודית גבוהה יותר מאשר RV. לסיכום, הפרוטוקול המתואר כאן יכול לשמש להערכת ההשפעה של תרופה מועמדת ומסלולים מולקולריים על תפקוד LV ו- RV כאחד. היכולת להשתמש בשיטה זו על לבבות מורין תקל על ביצוע מחקרים מכניסטיים מפורטים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>SUTS108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Silk suture</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>SUTS104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>All purpose flour</td>
			<td>Kroger</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD General Use and PrecisionGlide Hypodermic Needles 22 G</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>14-826-5A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Syringe with Luer-Lok Tips (Without Needle)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>14-823-16E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn Syrup</td>
			<td>Kroger</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custodiol HTK Solution</td>
			<td>Essential Pharmaceuticals LLC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Scissors&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14393/14394</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 50 mL conical tubes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>14-959-49A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt from porcine intestinal mucosa&#160;&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H4784</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Krebs Henseleit buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>K3753</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nusil silicone dispersions</td>
			<td>Avantor</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion system</td>
			<td>Radnoti</td>
			<td>130101BEZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>PL3508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium azide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X1126</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of ex vivo murine biventricular function in a langendorff model

תפקוד לקוי של השתל הראשוני (PGD) נותר הגורם המוביל למוות מוקדם לאחר השתלת לב. זמן איסכמי ממושך במהלך שימור קור הוא גורם סיכון חשוב עבור PGD, והערכה אמינה של תפקוד הלב חיונית כדי ללמוד את התגובות התפקודיות של הלב התורם לאחר שימור קור. הסרטון הנלווה מתאר טכניקה להערכת תפקוד החדר הימני והשמאלי באמצעות זילוח ex vivo המבוסס על מודל לנגנדורף לאחר שימור קור לפרקי זמן שונים. בקצרה, הלב מבודד ומאוחסן בתמיסת היסטידין-טריפטופן-קטוגלוטרט קרה (HTK). לאחר מכן, הלב מחורר עם חיץ Kreb במודל Langendorff במשך 60 דקות. בלון סיליקון מוחדר לחדר השמאלי והימני, ונרשמים פרמטרים תפקודיים לבביים (dP/dt, יחסי לחץ-נפח). פרוטוקול זה מאפשר הערכה אמינה של תפקוד הלב לאחר פרוטוקולים שונים לשימור הלב. חשוב לציין, טכניקה זו מאפשרת לחקור תגובות שימור לב במיוחד בתאי לב מקומיים. השימוש בלבבות מורין קטנים מאוד מאפשר גישה למגוון עצום של עכברים טרנסגניים כדי לחקור את המנגנונים של PGD.

לבבות עכבר C57Bl/6 בוגרים, בני 3 חודשים, נקטפו והותקנו על מערכת לנגנדורף. הלב התורם אוחסן ב- HTK במשך 0 ו -8 שעות, ולאחר מכן מחורר עם חיץ KH מחומצן. בלון סיליקון המתחבר למתמר לחץ שימש למדידת ההתכווצות וההרפיה של תפקוד LV ו-RV.
הלחצים האאורטליים נשמרו בטווח של 70-80 מ"מ כספית. הדופק היה דומה בלבבות עכברים עם 0 ו-8 שעות אחסון. תפקוד ה-LV וה-RV נבדקו על ידי מדידת לחץ סיסטולי ודיאסטולי. dP/dt, נגזרת לחישוב היחס בין שינוי הלחץ, חושבה כדי לקבוע את דינמיקת הלחץ. המספר המוחלט של dP/dt מקסימלי ומינימום dP/dt יכול לייצג את רמת התכווצות השרירים וההרפיה. ב-0 שעות אחסון, ה-LV היה בעל לחץ סיסטולי גבוה יותר בהשוואה ל-RV (איור 2C ואיור 3A). ה-LV הראה יותר כיווץ שרירים והרפייה מאשר ה-RV לאחר זילוח של 0 שעות אחסון (איור 2C ואיור 3B,C). אולם לאחר 8 שעות של אחסון קר, גם ה-LV וגם ה-RV הראו ירידה תפקודית משמעותית בהשוואה לקו בסיס של 0 שעות (איור 2A-D ואיור 3B,C). הירידות בהתכווצות הלב היו חמורות יותר ב- LV. לאחר 8 שעות אחסון, ההתכווצות וההרפיה של ה-LV היו 25.1% ו-30.7% מקו הבסיס של 0 שעות, בעוד של-RV היו 32.5% ו-29.1% תפקוד בהשוואה לקו הבסיס של 0 שעות (איור 3B,C). תוצאות אלה הראו כי PGD של LV לאחר אחסון ממושך היה ירידה משמעותית יותר בהתכווצות הלב מאשר RV.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64384/64384fig01.jpg"> איור 1: הרכבה וקנולציה של לב העכבר . (A) הגדרה כוללת של מערך הזלוף. 1. מאגר זילוח. 2. תא חמצון. 3. תא מלכודת אוויר. 4. חדר הלב. 5. מתג ערך לזרימה ולחץ קבועים. 6 ו-7. זרימת חמצן. (B) לבבות משומרים עם הקרוואן מלפנים. (ג) מיקום הקרוואן לחיתוך לצורך פתיחת חללו. (D) הקש על צינורית הבלון עם הצינורית. קיצור: RV = החדר הימני. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64384/64384fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64384/64384fig02.jpg"> איור 2: השוואת התפקוד של LV לעומת RV . (A) מעקב אחר רשומות של dP/dt מרבי ומינימלי בקרוואן ו-LV בלב התורם עם 0 שעות אחסון. (B) תיעוד של dP/dt מרבי ומינימלי בקרוואן ו-LV בלב התורם עם 8 שעות אחסון. (ג,ד) פרטים על dP/dt, לחץ LV, קצב לב ולחץ זילוח ב- LV ו- RV ב- 0 שעות ו- 8 שעות. קיצורים: RV = החדר הימני; LV = החדר השמאלי; dP/dt = יחסי לחץ-זמן. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64384/64384fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64384/64384fig03.jpg"> איור 3: השוואת תפקוד ה-LV לעומת ה-RV לאחר אחסון וזילוח. (A) לחץ סיסטולי ודיאסטולי של ה-LV וה-RV לאחר 0 שעות ו-8 שעות אחסון. (B) מקסימום dP/dt ו-(C) מינימום dP/dt של ה-LV וה-RV לאחר זילוח עם 0 שעות ו-8 שעות אחסון. נתון זה לקוח מתוך Lei et al.12. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64384/64384fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Ex Vivo Murine Biventricular Function in a Langendorff Model at JoVE.com

Assessment of Ex Vivo Murine Biventricular Function in a Langendorff Model

מוצג כאן פרוטוקול לכימות אמין של תפקוד החדר הימני והשמאלי של לבבות תורמים לאחר שימור קר באמצעות מערכת זילוח ex vivo .

הערכה של תפקוד דו-חדרי Ex Vivo Murine במודל לנגנדורף

Primary graft dysfunction (PGD) remains the leading cause of early death following heart transplantation. Prolonged ischemic time during cold preservation ...

בעזרת הפרוטוקול המתואר, אנו יכולים להשוות בין הלב התורם, החדר השמאלי ותפקוד החדר לאחר השימור, ואנו יכולים לבחון את ההבדל בביולוגיה של שימור בשני החדרים במהלך תהליך שימור זה. טכניקה זו משתמשת במערכת זילוח ex vivo כדי לבחון את תפקודי הלב לאחר השימור. הוא מספק כלים חזקים ואמינים לסינון טיפולים חדשים לשיפור תפקודי הלב של התורם לאחר השימור.מתחילים בהכנת בצק כמתואר בטקסט ומעצבים חתיכה קטנה מהבצק לצורה אליפסה כדי לקבל את הראש. חברו אותו לקצה גדיל ספגטי יבש. טובלים את הראש בתמיסת הסוכר שכבר מוכנה ומסירים אותה לאט ברגע שהיא מצופה היטב בסרט דק של התמיסה.לאחר מכן, השהו את גדיל הספגטי על גוש קצף פוליסטירן או על מחזיקים אחרים כדי לאפשר היווצרות כיסוי אחיד ומבריק מעל הראש וייבשו אותו למשך הלילה. למחרת, טובלים את התבנית באלסטומר סיליקון המפוזר בקסילן ומחזירים את גדיל הספגטי לגוש קצף הפוליסטירן בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך שעתיים או עד לייבוש. חזור על שלב זה פעם נוספת.לאחר מכן, הכניסו את התבנית למים כדי להפריד ולאסוף את הבלון. אחסנו את הבלון ב-0.02% נתרן אזיד. כעת, חתכו קצה קהה של שני קהות ממחט של 22 מד והרכיבו קצה קהה אחד לבלון הסיליקון ואילו הקצה השני קהה לצינור PE.השתמש בתפר משי 4-0 כדי לקשור את הבלון במקומו על המחט. קח את העכבר C57Black/6 והזריק תוך צפקית 200 יחידות של הפרין לתוך הבטן של החיה עבור נוגדי קרישה. לאחר אישור הרדמה תקינה עם צביטת בוהן, לבצע חתך ממש מתחת עצם החזה.ובאמצעות מספריים, לפתוח את החזה על ידי חיתוך הסרעפת בצלעות. לאחר מכן, קפלו את דופן החזה הקדמית כדי לחשוף את החזה במלואו לפני ביצוע חתך באבי העורקים היורד קרוב לקשת אבי העורקים. כעת, העבירו את הלב, הריאות ובלוטת התימוס של העכבר להיסטידין-טריפטופן-קטוגלוטרט קר כקרח, או מאגר HTK, כדי לבודד את האיברים.חשוף את אבי העורקים על ידי הסרת כל רקמת חיבור. חברו את קצה אבי העורקים למחט בעלת 22 מד וקשרו אותה בתפר משי 6-0. ודא שהצינורית נמצאת מעל שורש אבי העורקים, כדי לא להפריע לשסתום אבי העורקים.מחוררים את אבי העורקים למשך כ-10 דקות עם 10 מיליליטר של חיץ HTK, מקורר מראש לארבע מעלות צלזיוס. בהתאם לסוג הניסוי, או לאחסן את הלב בצינור 50 מיליליטר עם HTK קר כקרח במשך שמונה שעות או מיד לבצע את השפע. כדי לבצע שפע, חבר את הלב המורכב על המחט לצינורית במנגנון לנגנדורף וקשר אותו בתפר משי.התחל את השפע במצב זרימה קבועה בשלושה מיליליטר לדקה, ולאחר מכן לאחר שינוי למצב לחץ קבוע ב 70 עד 80 מילימטר כספית, להתאים את קצב הזלוף לכשישה מיליליטר לדקה. לאחר מכן, חברו בלון סיליקון מנופח מלא מים למתמר לחץ ולמזרק מלא מים באמצעות ברז תלת-כיווני. לאחר 15 עד 20 דקות של תקופת שיווי משקל לאחר הזילוח הקודם, חתכו את האטריום הימני, או RA, והכניסו את הבלון לחדר הימני, או RV, דרך RA. השתמש בסרט כדי להחזיק את הבלון בתוך הקרוואן ולמזער את השטח הפתוח של RA כדי לעזור להגביל את הבלון בחדר.לאחר 20 דקות של איסוף נתונים פונקציונליים עבור הקרוואנים, חתכו את האטריום השמאלי, או LA, והכניסו בלון מלא מים מנופח לחדר השמאלי, או LV, דרך לוס אנג'לס. השתמשו בנייר דבק כדי להחזיק את הבלון בתוך LV.To לכייל את מתמר הלחץ, מלאו תחילה מזרק 10 מיליליטר במי מלח חמים וחברו את המזרק לכיפה דרך ברז משולש. פתחו את הברז ומלאו לאט את הכיפה במי מלח לפני סגירת כל הברזים והוצאת המזרק. לאחר מכן, חבר את הכיפה המלאה למתמר על ידי חיבור מד הלחץ לקצה השלישי של הברז התלת-כיווני.בתוכנת ההקלטה, מהתפריט הנפתח של הערוץ המתחבר למתמר, בחר באפשרות של גשר אמפר. לחץ על 0 לפני תחילת ההקלטה כדי להגדיר את קריאת המתמר לאפס מילימטרים של כספית. לאחר מספר שניות של הקלטה, לדחוף לאט את המזרק ולהגדיל את הלחץ ל 100.לחץ על תפסיק כדי לסיים את ההקלטה. בתיבת הדו-שיח המרת יחידות, בחר את אזור ההקלטה עבור אפס מילימטרים של כספית ולחץ על החץ ל- 1 לפני הקלדת אפס מילימטרים של כספית. באופן דומה, בחר את אזור ההקלטה עבור 100 מ"מ כספית.לחץ על החץ ל- 2 והקלד 100 מילימטרים של כספית. כעת, לחץ על אישור כדי לכייל את המתמר. לאחר סיום הכיול, שנו את שם התעלה המתאימה למתמר הלחץ עם הבלון כלחץ חדרי, או לחץ LV, והתחילו להקליט כאשר הלב מחובר למערכת.לאחר החדרת הבלון לחדר, התאימו את נפח המים בבלון באמצעות מזרק מיקרומטר דרך הברז התלת-כיווני כדי לשמור על הלחץ הדיאסטולי הסופי בחמישה עד 10 מילימטרים של כספית. לאחר מכן, שנה את שם הערוץ הריק כ- dP/dt ושמור על ערוץ המקור הנגזרת כלחץ חדרי. תעלה זו רושמת את יחס שינוי הלחץ בחלל החדר במהלך התכווצות.בחר את תקופת המדידה היציבה לפני שתגדיר את מודול לחץ הדם. לאחר מכן, בחר את לחץ LV כערוץ הקלט ולחץ על בחירה לפני לחיצה על אישור. כעת, לחץ על תצוגת מסווג כדי להסיר מחזור לב חריג ועל תצוגת טבלה כדי ליצור את הטבלאות עבור הממוצע של dP/dt מרבי ו- dP/dt מינימלי עבור התקופה שנבחרה. כאשר לב העכבר אוחסן במאגר HTK במשך אפס שעות לפני הזילוח, לחץ סיסטולי גבוה יותר נרשם עבור LV בהשוואה ל- RV. בנוסף, בהשוואה ל-RV, ה-LV הציג גם התכווצות שרירים משמעותית יותר, כמו גם הרפיה.עם זאת, כאשר בוצע זילוח על הלב לאחר שחשף אותו לשמונה שעות של אחסון קר, הן ה- LV והן ה- RV הראו ירידה תפקודית משמעותית בהשוואה לשלב שעת האפס. הירידות נצפו חמורות יותר ב-LV בהשוואה ל-RV. ההתכווצות וההרפיה של ה-LV לאחר אחסון של שמונה שעות היו 25.1% ו-30.7% מהפונקציה המתאימה לאחסון שעות אפס, בעוד שה-RV הציג 32.5% ו-29.1% של תפקוד, בהשוואה לקו הבסיס של שעת אפס. ציון תפקוד לקוי ראשוני של LV לאחר אחסון ממושך היה משמעותי יותר מזה של RV. איכות השימור תלויה במידה רבה בזילוח של HTK.חשוב לוודא שהזילוח עקבי כדי להשוות במדויק בין טיפולים שונים. עם מדידה מדויקת של תפקוד הלב התורם של שימור, שיטה זו יכולה בקלות להסתגל לתרופות סינון שיכולות לשפר את תפקוד הלב התורם ולאחר מכן לאמת עוד יותר באמצעות מודל השתלה הטרוטופית.

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Ex Vivo Murine Biventricular Function in a Langendorff Model

A Human Ex Vivo Atherosclerotic Plaque Model to Study Lesion Biology

A Human Ex Vivo Atherosclerotic Plaque Model to Study Lesion Biology

אדם<em&gt; Ex Vivo</em&gt; טרשת רובד מודל ללמוד ביולוגיה נגע

Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of the vasculature. There are various methods to study the inflammatory compound in atherosclerotic ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

הערכה של קרישה בפלסמה על רקמת הכבד במודל חיה גדולה In Vivo

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

מודל בעלי חיים קטנים של זלוף הכבד Normothermic Vivo לשעבר

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

ההשפעה של נוירונים Intracardiac על הלב אלקטרופיזיולוגיה, Arrhythmogenesis במערכת Langendorff Vivo לשעבר

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum ...

Normothermic Ex Situ Heart Perfusion in Working Mode: Assessment of Cardiac Function and Metabolism

Normothermic לשעבר זלוף באתרו הלב בעבודה מצב: הערכה של תפקוד הלב ואת חילוף החומרים

The current standard method for organ preservation (cold storage, CS), exposes the heart to a period of cold ischemia that limits the safe preservation ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

הערכה בלתי פולשני של תפקוד השרירים Dorsiflexor בעכברים

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...

A Computerized Functional Skills Assessment and Training Program Targeting Technology Based Everyday Functional Skills

מיומנות פונקציונלית הערכה והדרכה תוכנית מיקוד הטכנולוגיה מבוסס מיומנויות פונקציונלי יומיומי

Today, many functional skills are technology-based, so development of a technology-based training program has broad importance. Here we present a ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

אופקרדיוגרפיה ולימודי אלקטרופיזיולוגיה של לשעבר Vivo נגדורף

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

מורנה דיוק-גזור פרוסות הכבד כמודל Vivo Ex של ביולוגיה של הכבד

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...