Name: left coronary artery ligation: a surgical murine model of myocardial infarction
Uploaded: 2022-08-09T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af National Institute of Health-tilskud (R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 og R01DK129339), AHA Transformational Project Award (19TPA34910142), AHA Innovative Project Award (19IPLOI34760566) og ALA Innovation Project Award (IA-629694) (til PD).

Denne undersøgelsesprotokol blev gennemgået og godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) ved University of Pittsburgh. Otte (sham n = 4 og MI n = 4) 1-årige C57BL/6J hunmus, der vejer 24-30 g, blev brugt til disse forsøg. Ca. 100% og mindst 80% af musene overlevede i henholdsvis de første 24 timer og 28 dage.
1. Forberedelse og endotracheal intubation af musene
<ol><li>Forvarm en perlesterilisator (se materialetabel) til 250 °C og...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254 (2021).</li><li>Mendis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=World+Health+Organization+definition+of+myocardial+infarction:+2008-09+revision.">World Health Organization definition of myocardial infarction: 2008-09 revision.</a> International Journal of Epidemiology. 40 (1), 139-146 (2011).</li><li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+myocardial+infarction.">Pathophysiology of myocardial infarction.</a> Comprehensive Physiology. 5 (4), 1841-1875 (2011).</li><li>Smit, M., Coetzee, A., Lochner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+myocardial+ischemia+and+perioperative+myocardial+infarction.">The pathophysiology of myocardial ischemia and perioperative myocardial infarction.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 34 (9), 2501-2512 (2020).</li><li>Johny, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+mediated+inflammation+in+coronary+artery+disease+with+Type+2+Diabetes+patients.">Platelet mediated inflammation in coronary artery disease with Type 2 Diabetes patients.</a> Journal of Inflammation Research. 14, 5131 (2021).</li><li>Martin, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+of+myocardial+infarction:+from+mechanism+to+translation.">Preclinical models of myocardial infarction: from mechanism to translation.</a> British Journal of Pharmacology. 179 (5), 770-791 (2022).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+of+hematopoietic+progenitor-derived+adipose+tissue-resident+macrophages+contributes+to+insulin+resistance+after+myocardial+infarction.">Apoptosis of hematopoietic progenitor-derived adipose tissue-resident macrophages contributes to insulin resistance after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (553), (2020).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57BL/6+mouse+strains:+implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>van Amerongen, M. J., Harmsen, M. C., Petersen, A. H., Popa, E. R., van Luyn, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryoinjury:+a+model+of+myocardial+regeneration.">Cryoinjury: a model of myocardial regeneration.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 23-31 (2008).</li><li>Lam, N. T., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+heart+regeneration:+comprehensive+literature+review.">Neonatal heart regeneration: comprehensive literature review.</a> Circulation. 138 (4), 412-423 (2018).</li><li>Heusch, G., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+acute+myocardial+infarction+and+strategies+of+protection+beyond+reperfusion:+a+continual+challenge.">The pathophysiology of acute myocardial infarction and strategies of protection beyond reperfusion: a continual challenge.</a> European Heart Journal. 38 (11), 774-784 (2017).</li><li>Srikanth, G., Prakash, P., Tripathy, N., Dikshit, M., Nityanand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+rat+model+of+myocardial+infarction+with+a+high+survival+rate:+A+suitable+model+for+evaluation+of+efficacy+of+stem+cell+therapy.">Establishment of a rat model of myocardial infarction with a high survival rate: A suitable model for evaluation of efficacy of stem cell therapy.</a> Journal of Stem Cells &amp; Regenerative Medicine. 5 (1), 30-36 (2009).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e59591 (2019).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52206 (2014).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (42), e2100 (2010).</li><li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging.">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101 (2016).</li><li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sympathetic+neuronal+activation+triggers+myeloid+progenitor+proliferation+and+differentiation.">Sympathetic neuronal activation triggers myeloid progenitor proliferation and differentiation.</a> Immunity. 49 (1), 93-106 (2018).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+an+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: an improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).</li><li>Alwardt, C. M., Redford, D., Larson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+anesthesia+in+cardiac+surgery:+a+review+of+drugs+and+practices.">General anesthesia in cardiac surgery: a review of drugs and practices.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (2), 227-235 (2005).</li><li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-ligation:+a+murine+model+of+myocardial+infarction.">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), e1438 (2009).</li><li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. -. H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction+in+rats.">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (48), e2464 (2011).</li><li>Kalogeris, T., Baines, C., Krenz, M., Korthuis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+six-cell+biology+of+ischemia/reperfusion+injury.">Chapter six-cell biology of ischemia/reperfusion injury.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. , 229-317 (2012).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54814 (2016).</li><li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction.">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li><li>Xu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+fentanyl+preconditioning+on+cardiomyocyte+apoptosis+induced+by+ischemia-reperfusion+in+rats.">Protective effects of fentanyl preconditioning on cardiomyocyte apoptosis induced by ischemia-reperfusion in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 50 (2), 5286 (2017).</li><li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+monocyte+kinetics+in+acute+myocardial+infarction+are+sustained+by+extramedullary+monocytopoiesis.">Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis.</a> Journal of Experimental Medicine. 209 (1), 123-137 (2012).</li><li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silencing+of+CCR2+in+myocarditis.">Silencing of CCR2 in myocarditis.</a> European Heart Journal. 36 (23), 1478-1488 (2015).</li><li>Dutta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-selectin+inhibition+mitigates+splenic+HSC+activation+and+myelopoiesis+in+hypercholesterolemic+mice+with+myocardial+infarction.">E-selectin inhibition mitigates splenic HSC activation and myelopoiesis in hypercholesterolemic mice with myocardial infarction.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (9), 1802-1808 (2016).</li><li>Jiang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+simple+method+for+induction+of+myocardial+infarction+in+mice.">A modified simple method for induction of myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (178), e63042 (2021).</li></ol>

Murinmodellen af MI vinder popularitet i kardiovaskulære forskningslaboratorier, og denne undersøgelse beskriver en reproducerbar og klinisk relevant MI-model. Denne protokol forbedrer LCA-ligeringsprocessen på flere måder. Til at begynde med undgås brugen af injicerbare præoperative anæstetika, såsom xylazin / ketamin eller natriumpentobarbital14,15. Kun isofluranbedøvelse blev anvendt, hvilket hjælper med at forbedre dyreoverlevelsesraten (>80% overle...

Hjerte-kar-sygdomme er et stort folkesundhedsproblem, der kræver 17,9 millioner liv hvert år, hvilket tegner sig for 31 procent af den globale dødelighed1. Den mest udbredte type kardiovaskulær anomali er koronar hjertesygdom, og myokardieinfarkt (MI) er en af de største manifestationer af koronar hjertesygdom2. MI er normalt forårsaget af trombotisk okklusion af en koronararterie på grund af brud på en sårbar plak3. Den resulterende iskæmi forårsager dybe ioniske og metaboliske ændringer i det berørte myokardium såvel som et hurtigt fald i systolisk funktion. MI resulterer i død af kardiomyocytter, hvilket yderligere kan føre til ventrikulær dysfunktion og hjertesvigt4.
Forskning i MI hos patienter er begrænset på grund af knaphed på væv fra patienter med MI5. Som sådan er murine modeller af MI nyttige til både at studere sygdomsmekanismer samt udvikle potentielle terapeutiske mål. De aktuelt tilgængelige murine modeller af MI omfatter irreversible iskæmimodeller (LCA og ablationsmetoder) og reperfusionsmodeller (iskæmi/reperfusion, I/R)6. Permanent ligering af venstre koronararterie (LCA) hos mus er den mest anvendte metode, og den efterligner patofysiologien og immunologien af MI hos patienter 7,8,9. Permanent MI kan også induceres ved ablationsmetoder, som involverer elektrisk skade eller kryoskade. Ablationsmetoder er i stand til at generere infarkt af ensartet størrelse på det nøjagtige sted10. På den anden side kan ardannelse, infarktmorfologi og molekylære signalmekanismer variere mellem ablationsmetoderne10,11. Murine I / R-metoden er en anden vigtig MI-model, da den repræsenterer det kliniske scenario for reperfusionsterapi12. I/R-modellen er forbundet med udfordringer såsom en variabel infarktstørrelse, vanskeligheder med at skelne respons på indledende skade og reperfusion6.
Selvom LCA ligeringsmetoder er meget udbredt, er de forbundet med lave overlevelsesrater og postoperativ smerte13. Denne protokol demonstrerer den murinkirurgiske MI-model af LCA-ligation, der involverer forberedelse og intubation af mus, LCA-ligation, postoperativ pleje og validering af MI. I stedet for at bruge en invasiv trakeotomi14 anvender denne metode endotracheal intubation. Dyret intuberes ved at belyse oropharynx ved hjælp af et laryngoskop, hvilket gør proceduren lettere, sikrere og mindre traumatisk15. Musen holdes på respiratorstøtte og under isofluranbedøvelse under hele proceduren. Endvidere udføres ekkokardiografi og Massons trikromfarvning for at evaluere henholdsvis hjertefunktion og hjertefibrose efter MI. Samlet set giver denne metode en pålidelig og reproducerbar kirurgisk murinmodel af MI, der kan bruges til at studere patofysiologi og betændelse efter MI.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>22 G catheter needle</td>
			<td>Exel INT</td>
			<td>26741</td>
			<td>Thoracentesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 G catheter needle</td>
			<td>Exel INT</td>
			<td>26746</td>
			<td>Endotracheal intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 nylon suture</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29263</td>
			<td>Suturing of muscles and skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 nylon suture</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>3192</td>
			<td>Ligation of LAD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic Vaporizers</td>
			<td>Vet equip</td>
			<td>VE-6047</td>
			<td>Anesthetic support</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal physiology monitor</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>VEVO 3100</td>
			<td>Monitor heart rate,respiration rate and body temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>PBS animal health</td>
			<td>11205</td>
			<td>Antispetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>55175</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disecting microscope</td>
			<td>OMANO</td>
			<td>OM2300S-V7</td>
			<td>Binocular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric razor</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>79300-1001M</td>
			<td>Shaving</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode gel</td>
			<td>Parker Laboratories</td>
			<td>W60698L</td>
			<td>Electrically conductive gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Laboratories</td>
			<td>22-032-601</td>
			<td>Disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11065-07</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Curity</td>
			<td>CAR-6339-PK</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp</td>
			<td>Satco</td>
			<td>S4998</td>
			<td>Post surgery care</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Kent scientific</td>
			<td>Surgi-M</td>
			<td>Temperature control</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot Bead sterilizer</td>
			<td>Germinator 500</td>
			<td>11503</td>
			<td>Sterilization of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29405</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masson&#8217;s trichrome staining kit</td>
			<td>Thermoscientific</td>
			<td>87019</td>
			<td>Measurement of cardiac Fibrosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Needle Holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>12500-12</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-02</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>Puralube Vet</td>
			<td>Sterile occular lubricant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Gel</td>
			<td>Parker Laboratories</td>
			<td>Aquasonic 100</td>
			<td>Aqueous ultrasound transmission gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14060-11</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Laryngoscope</td>
			<td>Penn-Century</td>
			<td>Model LS-2-M</td>
			<td>Illuminating the oropharynx</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ventilator</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>557058</td>
			<td>Ventilator support</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical light</td>
			<td>Cole parmer</td>
			<td>41723</td>
			<td>Illuminator Width (in): 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 preclinical imaging platform</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>VEVO 3100</td>
			<td>Echocardiography</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VevoLAB software</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>VevoLAB 3.2.6</td>
			<td>Echocardiography data analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left coronary artery ligation: a surgical murine model of myocardial infarction

Iskæmisk hjertesygdom og efterfølgende myokardieinfarkt (MI) er en af de førende årsager til dødelighed i USA og rundt om i verden. For at udforske de patofysiologiske ændringer efter myokardieinfarkt og designe fremtidige behandlinger kræves forskningsmodeller af MI. Permanent ligering af venstre koronararterie (LCA) hos mus er en populær model til at undersøge hjertefunktion og ventrikulær remodellering efter MI. Her beskriver vi en mindre invasiv, pålidelig og reproducerbar kirurgisk murin MI-model ved permanent ligering af LCA. Vores kirurgiske model består af en let reversibel generel anæstesi, endotracheal intubation, der ikke kræver en trakeotomi, og en thoracotomi. Elektrokardiografi og troponinmåling bør udføres for at sikre MI. Ekkokardiografi på dag 28 efter MI vil skelne hjertefunktion og hjertesvigt parametre. Graden af hjertefibrose kan evalueres ved Massons trikromfarvning og hjerte-MR. Denne MI-model er nyttig til at studere de patofysiologiske og immunologiske ændringer efter MI.

Figur 1 viser de repræsentative aktive EKG- og respirationssignaler under den ekkokardiografiske evaluering af sham (figur 1A) og MI (figur 1B) mus. Verifikation af aktive EKG- og respirationssignaler er vigtige, før de ekkokardiografiske data erhverves. Figur 2 viser ekkokardiografisk måling af hjertefunktionsparametre efter 28 dage efter LCA-ligation. Figur 2<...

Watch this Scientific Journal Video about Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction at JoVE.com

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Præsenteret her er en kirurgisk procedure for permanent ligering af venstre koronararterie hos mus. Denne model kan bruges til at undersøge patofysiologien og tilhørende inflammatorisk respons efter myokardieinfarkt.

Venstre koronararterieligering: En kirurgisk murinmodel af myokardieinfarkt

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...

Den kirurgiske model permanent ligering af venstre arterie hos mus kan bruges til at undersøge patofysiologien og tilhørende inflammatorisk respons efter myokardieinfarkt. Denne metode giver en pålidelig og producerbar musemodel af MI, som er let, sikker og mindre invasiv. Til at begynde med forvarmes en perlesterilisator til 250 grader Celsius og placeres autoklaverede kirurgiske instrumenter i den i et par minutter.Sørg for dybden af anæstesi i musen ved at kontrollere svaret på en fast tåklemme. Væg musen for at estimere doseringen af det præoperative smertestillende lægemiddel buprenorphin og injicer lægemidlet intraperitonealt. Trim pelsen på venstre side af brystkassen ved hjælp af en elektrisk barbermaskine.Efter desinfektion af det kirurgiske sted skal du placere musen i liggende stilling på et skråt bord. Fastgør musens hoved og lemmer ved hjælp af et elastikbånd, der er fastgjort til henholdsvis de øvre forænder og klæbebånd. Påfør sterilt oftalmisk smøremiddel til øjnene for at forhindre tørhed under anæstesi.Åbn kæben og træk forsigtigt tungen ud af mundhulen. Identificer åbningen af strubehovedet ved at belyse det orale svælg ved hjælp af et laryngoskop. Skær ca. 0,5 centimeter af en 24 gauge kateternål og indsæt den stumpe nål i plastskærmen.Før den stumpe nål med plastskærmen ind i luftrøret. Tag nålen ud og efterlad plastskærmen i luftrøret. Indstil ventilatoren til en respirationsfrekvens på 137 slag i minuttet, optimeret til de mus, der blev brugt i denne undersøgelse, og tidevandsvolumen 0,18 lukkekapacitet.Tilslut åndedrætsrørene til kateterskjoldet, og bekræft korrekt intubation ved at kigge efter en synkroniseret brystbevægelse med ventilatoren. Afbryd åndedrætsrøret fra kateterskjoldet og placer dyret i liggende stilling på et forvarmet temperaturstyret kirurgisk bord. Tilslut musen til ventilatoren igen.Efter desinfektion af det kirurgiske sted løfter du forsigtigt huden ved hjælp af et par tang og lav et lille kutant tværgående snit langs linjen mellem venstre pectoralis major og minor muskler ved hjælp af et par kirurgiske saks. Adskil de underliggende pectoralis muskler med tang og dissekere saks. Efter at have lavet et snit i det tredje interkostale rum, skal du forsigtigt strække ribbenene fra hinanden ved hjælp af retraktorer for at udsætte venstre ventrikel.Flyt perikardiefedtet til side og find venstre koronararterie, der løber fra kanten af venstre atrium mod hjertets spids. Bestå en 8-0 nylonsutur under venstre koronararterie ved hjælp af en nåleholder. Legater venstre koronararterie med en dobbelt knude efterfulgt af en anden knude.Fjern retraktorerne og indsæt en 22 gauge kateternål i brysthulen. Fjern nålen, og lad spidsen af plastskærmen være i brysthulen. Luk brystkassen ved hjælp af en 4-0 nylonsutur.Tilslut en sprøjte til 22 gauge plastskjoldet, og fjern langsomt overskydende luft fanget i brysthulen ved forsigtigt at trykke på brystet for at etablere et negativt lufttryk. Fjern plastikskærmen. Sluk for isofluranforsyningen, og anbring musen på ventilatoren, der leverer ilt.En spontan vejrtrækning af musen starter, sluk for ventilatoren. Hold musen under en varmelampe og overvåg, indtil den er vågen. Dyret bør ikke efterlades uden opsyn, før det har genvundet tilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystliggende.Overvåg musen dagligt for tegn på smerte eller ubehag. Fortsæt intraperitoneal injektion af buprenorphin hver 6. til 8. time i yderligere to dage efter operationen. Aktive EKG- og respirationssignaler blev verificeret, før de ekkokardiografiske data blev erhvervet.Den ekkokardiografiske måling af hjertefunktionelle parametre blev noteret 28 dage efter venstre koronararterieligering. M-mode billederne af peroneal kort akse visning af SHAM og MI hjerter blev observeret. MI-billederne viste defekt hjertevægsbevægelse efter venstre koronararterieligering.Indikatorer for hjertesvigt, såsom øget venstre ventrikelmasse, nedsat uddrivningsfraktion og nedsat hjerteudgang blev observeret i MI-gruppen sammenlignet med SHAM-gruppen. Massons trikrome farvning af de nedre, midterste og øvre ventrikelsektioner viste øget kollagenfarvning i det infarkterede hjerte, hvilket indikerer forstærket fibrose. I de fleste tilfælde er arterien ikke mulig.Imidlertid resulterer ligering af myokardievævet 2 til 4 millimeter under kanten af venstre atrium i effektiv ligering af arterien.

Research

JoVE Journal

Medicine

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Modificeret Teknik for Koronararterie Ligering i mus

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En murin model af myokardieiskæmi-reperfusionsskade gennem æggelederne for Venstre Anterior Faldende Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Minimal Invasive Kirurgisk Procedure inducere myokardieinfarkt i mus

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanent ligering af venstre forreste nedadgående kranspulsåre i mus: En Model af Post-myokardieinfarkt Ombygning og hjertesvigt

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine ekkokardiografi af Venstre Atrium, Aorta, og lungepulsåren

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Muse Venstre Anterior Faldende (LAD) kranspulsåreombinding: En forbedret og forenklet model for myokardieinfarkt

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkte Re-implantation af venstre koronararterie i aorta i Voksne med Anomalous Oprindelse af venstre koronararterie fra lungepulsåren (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Murine myokardieinfarkt model ved hjælp af permanent ligation af venstre anterior faldende koronararterie

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

Intramyocardial Transplantation af MSC-Loading Injicerbare Hydrogels efter Myocardial Infarkt i en Murine Model

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...