Name: left coronary artery ligation: a surgical murine model of myocardial infarction
Uploaded: 2022-08-09T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av National Institute of Health tilskudd (R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 og R01DK129339), AHA Transformational Project Award (19TPA34910142), AHA Innovative Project Award (19IPLOI34760566), og ALA Innovation Project Award (IA-629694) (til PD).

Den nåværende studieprotokollen ble gjennomgått og godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) ved University of Pittsburgh. Åtte (sham n = 4 og MI n = 4) 1 år gamle kvinnelige C57BL/6J mus som veier 24-30 g ble brukt til disse forsøkene. Omtrent 100% og minst 80% av musene overlevde i henholdsvis de første 24 timene og 28 dagene.
1. Forberedelse og endotrakeal intubasjon av musene
<ol><li>Forvarm en perlesterilisator (se materialfortegnels...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254 (2021).</li><li>Mendis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=World+Health+Organization+definition+of+myocardial+infarction:+2008-09+revision.">World Health Organization definition of myocardial infarction: 2008-09 revision.</a> International Journal of Epidemiology. 40 (1), 139-146 (2011).</li><li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+myocardial+infarction.">Pathophysiology of myocardial infarction.</a> Comprehensive Physiology. 5 (4), 1841-1875 (2011).</li><li>Smit, M., Coetzee, A., Lochner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+myocardial+ischemia+and+perioperative+myocardial+infarction.">The pathophysiology of myocardial ischemia and perioperative myocardial infarction.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 34 (9), 2501-2512 (2020).</li><li>Johny, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+mediated+inflammation+in+coronary+artery+disease+with+Type+2+Diabetes+patients.">Platelet mediated inflammation in coronary artery disease with Type 2 Diabetes patients.</a> Journal of Inflammation Research. 14, 5131 (2021).</li><li>Martin, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+of+myocardial+infarction:+from+mechanism+to+translation.">Preclinical models of myocardial infarction: from mechanism to translation.</a> British Journal of Pharmacology. 179 (5), 770-791 (2022).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+of+hematopoietic+progenitor-derived+adipose+tissue-resident+macrophages+contributes+to+insulin+resistance+after+myocardial+infarction.">Apoptosis of hematopoietic progenitor-derived adipose tissue-resident macrophages contributes to insulin resistance after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (553), (2020).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57BL/6+mouse+strains:+implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>van Amerongen, M. J., Harmsen, M. C., Petersen, A. H., Popa, E. R., van Luyn, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryoinjury:+a+model+of+myocardial+regeneration.">Cryoinjury: a model of myocardial regeneration.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 23-31 (2008).</li><li>Lam, N. T., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+heart+regeneration:+comprehensive+literature+review.">Neonatal heart regeneration: comprehensive literature review.</a> Circulation. 138 (4), 412-423 (2018).</li><li>Heusch, G., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+acute+myocardial+infarction+and+strategies+of+protection+beyond+reperfusion:+a+continual+challenge.">The pathophysiology of acute myocardial infarction and strategies of protection beyond reperfusion: a continual challenge.</a> European Heart Journal. 38 (11), 774-784 (2017).</li><li>Srikanth, G., Prakash, P., Tripathy, N., Dikshit, M., Nityanand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+rat+model+of+myocardial+infarction+with+a+high+survival+rate:+A+suitable+model+for+evaluation+of+efficacy+of+stem+cell+therapy.">Establishment of a rat model of myocardial infarction with a high survival rate: A suitable model for evaluation of efficacy of stem cell therapy.</a> Journal of Stem Cells &amp; Regenerative Medicine. 5 (1), 30-36 (2009).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e59591 (2019).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52206 (2014).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (42), e2100 (2010).</li><li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging.">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101 (2016).</li><li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sympathetic+neuronal+activation+triggers+myeloid+progenitor+proliferation+and+differentiation.">Sympathetic neuronal activation triggers myeloid progenitor proliferation and differentiation.</a> Immunity. 49 (1), 93-106 (2018).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+an+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: an improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).</li><li>Alwardt, C. M., Redford, D., Larson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+anesthesia+in+cardiac+surgery:+a+review+of+drugs+and+practices.">General anesthesia in cardiac surgery: a review of drugs and practices.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (2), 227-235 (2005).</li><li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-ligation:+a+murine+model+of+myocardial+infarction.">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), e1438 (2009).</li><li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. -. H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction+in+rats.">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (48), e2464 (2011).</li><li>Kalogeris, T., Baines, C., Krenz, M., Korthuis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+six-cell+biology+of+ischemia/reperfusion+injury.">Chapter six-cell biology of ischemia/reperfusion injury.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. , 229-317 (2012).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54814 (2016).</li><li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction.">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li><li>Xu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+fentanyl+preconditioning+on+cardiomyocyte+apoptosis+induced+by+ischemia-reperfusion+in+rats.">Protective effects of fentanyl preconditioning on cardiomyocyte apoptosis induced by ischemia-reperfusion in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 50 (2), 5286 (2017).</li><li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+monocyte+kinetics+in+acute+myocardial+infarction+are+sustained+by+extramedullary+monocytopoiesis.">Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis.</a> Journal of Experimental Medicine. 209 (1), 123-137 (2012).</li><li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silencing+of+CCR2+in+myocarditis.">Silencing of CCR2 in myocarditis.</a> European Heart Journal. 36 (23), 1478-1488 (2015).</li><li>Dutta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-selectin+inhibition+mitigates+splenic+HSC+activation+and+myelopoiesis+in+hypercholesterolemic+mice+with+myocardial+infarction.">E-selectin inhibition mitigates splenic HSC activation and myelopoiesis in hypercholesterolemic mice with myocardial infarction.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (9), 1802-1808 (2016).</li><li>Jiang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+simple+method+for+induction+of+myocardial+infarction+in+mice.">A modified simple method for induction of myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (178), e63042 (2021).</li></ol>

MURINE modellen av MI blir stadig mer populær i kardiovaskulære forskningslaboratorier, og denne studien beskriver en reproduserbar og klinisk relevant MI-modell. Denne protokollen forbedrer LCA-ligeringsprosessen på flere måter. Til å begynne med unngås bruk av injiserbare preoperative anestetika som xylazin / ketamin eller natriumpentobarbital14,15. Bare isoflurananestesi ble brukt, noe som bidrar til å forbedre dyreoverlevelsen (>80% overlevelse 28 dage...

Kardiovaskulær sykdom er et stort folkehelseproblem som krever 17,9 millioner liv hvert år, og står for 31 prosent av global dødelighet1. Den mest utbredte typen kardiovaskulær anomali er koronar hjertesykdom, og hjerteinfarkt (MI) er en av de viktigste manifestasjonene av koronar hjertesykdom2. MI skyldes vanligvis trombotisk okklusjon av en koronararterie på grunn av ruptur av et sårbart plakk3. Den resulterende iskemi forårsaker dype ioniske og metabolske forandringer i det berørte myokardiet, samt en rask reduksjon i systolisk funksjon. MI resulterer i død av kardiomyocytter, noe som ytterligere kan føre til ventrikulær dysfunksjon og hjertesvikt4.
Forskning på MI hos pasienter er begrenset på grunn av mangel på vev oppnådd fra pasienter med MI5. Som sådan er murine modeller av MI nyttige både for å studere sykdomsmekanismer så vel som å utvikle potensielle terapeutiske mål. For tiden tilgjengelige murinmodeller av MI inkludererirreversible iskemimodeller (LCA og ablasjonsmetoder) og reperfusjonsmodeller (iskemi/reperfusjon, I/R)6. Permanent ligering av venstre koronararterie (LCA) hos mus er den mest brukte metoden, og den imiterer patofysiologien og immunologien til MI hos pasienter 7,8,9. Permanent hjerteinfarkt kan også induseres ved ablasjonsmetoder, som involverer elektrisk skade eller kryoskade. Ablasjonsmetoder er i stand til å generere ensartet infarkt på den nøyaktige plasseringen10. På den annen side kan arrdannelse, infarktmorfologi og molekylære signalmekanismer variere mellom ablasjonsmetodene10,11. Murine I/R-metoden er en annen viktig MI-modell, da den representerer det kliniske scenariet for reperfusjonsbehandling12. I/R-modellen er assosiert med utfordringer som variabel infarktstørrelse, vansker med å skille responser ved initial skade og reperfusjon6.
Selv om det er mye brukt, er LCA-ligeringsmetoder forbundet med lave overlevelsesrater og postoperativ smerte13. Denne protokollen demonstrerer murine kirurgisk MI-modell av LCA-ligering som involverer fremstilling og intubering av mus, LCA-ligering, postoperativ behandling og validering av MI. I stedet for å bruke en invasiv trakeotomi14, benytter denne metoden endotrakeal intubasjon. Dyret intuberes ved å belyse oropharynx ved hjelp av et laryngoskop, noe som gjør prosedyren enklere, sikrere og mindre traumatisk15. Musen holdes på respiratorstøtte og under isoflurananestesi gjennom hele prosedyren. Videre utføres ekkokardiografi og Massons trikrome farging for å evaluere henholdsvis hjertefunksjon og hjertefibrose etter MI. Samlet sett gir denne metoden en pålitelig og reproduserbar kirurgisk murinmodell av MI som kan brukes til å studere patofysiologi og inflammasjon etter MI.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>22 G catheter needle</td>
			<td>Exel INT</td>
			<td>26741</td>
			<td>Thoracentesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 G catheter needle</td>
			<td>Exel INT</td>
			<td>26746</td>
			<td>Endotracheal intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 nylon suture</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29263</td>
			<td>Suturing of muscles and skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 nylon suture</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>3192</td>
			<td>Ligation of LAD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic Vaporizers</td>
			<td>Vet equip</td>
			<td>VE-6047</td>
			<td>Anesthetic support</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal physiology monitor</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>VEVO 3100</td>
			<td>Monitor heart rate,respiration rate and body temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>PBS animal health</td>
			<td>11205</td>
			<td>Antispetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>55175</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disecting microscope</td>
			<td>OMANO</td>
			<td>OM2300S-V7</td>
			<td>Binocular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric razor</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>79300-1001M</td>
			<td>Shaving</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode gel</td>
			<td>Parker Laboratories</td>
			<td>W60698L</td>
			<td>Electrically conductive gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Laboratories</td>
			<td>22-032-601</td>
			<td>Disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11065-07</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Curity</td>
			<td>CAR-6339-PK</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp</td>
			<td>Satco</td>
			<td>S4998</td>
			<td>Post surgery care</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Kent scientific</td>
			<td>Surgi-M</td>
			<td>Temperature control</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot Bead sterilizer</td>
			<td>Germinator 500</td>
			<td>11503</td>
			<td>Sterilization of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29405</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masson&#8217;s trichrome staining kit</td>
			<td>Thermoscientific</td>
			<td>87019</td>
			<td>Measurement of cardiac Fibrosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Needle Holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>12500-12</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-02</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>Puralube Vet</td>
			<td>Sterile occular lubricant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Gel</td>
			<td>Parker Laboratories</td>
			<td>Aquasonic 100</td>
			<td>Aqueous ultrasound transmission gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14060-11</td>
			<td>Stainless Steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Laryngoscope</td>
			<td>Penn-Century</td>
			<td>Model LS-2-M</td>
			<td>Illuminating the oropharynx</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ventilator</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>557058</td>
			<td>Ventilator support</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical light</td>
			<td>Cole parmer</td>
			<td>41723</td>
			<td>Illuminator Width (in): 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 preclinical imaging platform</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>VEVO 3100</td>
			<td>Echocardiography</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VevoLAB software</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>VevoLAB 3.2.6</td>
			<td>Echocardiography data analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left coronary artery ligation: a surgical murine model of myocardial infarction

Iskemisk hjertesykdom og påfølgende hjerteinfarkt (MI) er en av de viktigste årsakene til dødelighet i USA og rundt om i verden. For å utforske de patofysiologiske endringene etter hjerteinfarkt og designe fremtidige behandlinger, er det nødvendig med forskningsmodeller av MI. Permanent ligering av venstre koronararterie (LCA) hos mus er en populær modell for å undersøke hjertefunksjon og ventrikulær remodellering etter MI. Her beskriver vi en mindre invasiv, pålitelig og reproduserbar kirurgisk murine MI-modell ved permanent ligering av LCA. Vår kirurgiske modell består av en lett reversibel narkose, endotrakeal intubasjon som ikke krever trakeotomi og torakotomi. Elektrokardiografi og troponinmåling bør utføres for å sikre MI. Ekkokardiografi på dag 28 etter MI vil skjelne hjertefunksjon og hjertesviktparametere. Graden av hjertefibrose kan evalueres ved Massons trikrome farging og hjerte-MR. Denne MI-modellen er nyttig for å studere de patofysiologiske og immunologiske endringene etter MI.

Figur 1 viser representative aktive EKG- og respirasjonssignaler under ekkokardiografisk evaluering av simulering (figur 1A) og MI (figur 1B) mus. Verifikasjon av aktivt EKG og respirasjonssignaler er viktig før innhenting av ekkokardiografiske data. Figur 2 viser ekkokardiografisk måling av hjertefunksjonsparametere etter 28 dager etter LCA-ligering. Figur 2</st...

Watch this Scientific Journal Video about Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction at JoVE.com

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Presentert her er en kirurgisk prosedyre for permanent ligering av venstre koronararterie hos mus. Denne modellen kan brukes til å undersøke patofysiologien og tilhørende inflammatorisk respons etter hjerteinfarkt.

Venstre koronararterieligering: En kirurgisk murinmodell av hjerteinfarkt

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...

Den kirurgiske modellen permanent ligering av venstre arterie hos mus kan brukes til å undersøke patofysiologien og tilhørende inflammatorisk respons etter hjerteinfarkt. Denne metoden gir en pålitelig og produserbar musemodell av MI, som er enkel, sikker og mindre invasiv. For å begynne, forvarm en perlesterilisator til 250 grader Celsius og plasser autoklaverte kirurgiske instrumenter i den i noen minutter.Sørg for dybden av anestesi i musen ved å sjekke responsen på en fast tåklemme. Vei musen for å estimere doseringen av det preoperative analgetiske legemidlet buprenorfin og injiser legemidlet intraperitonealt. Trim pelsen på venstre side av brystkassen ved hjelp av en elektrisk barberhøvel.Etter desinfisering av operasjonsstedet, plasser musen i liggende stilling på et skrått brett. Fest hodet og lemmer på musen ved hjelp av et elastisk bånd festet til henholdsvis øvre snitt og tape. Påfør sterilt oftalmisk smøremiddel til øynene for å forhindre tørrhet under anestesi.Åpne kjeven og trekk tungen forsiktig ut av munnhulen. Identifiser åpningen av strupehodet ved å belyse munnsvelget ved hjelp av et laryngoskop. Klipp av ca 0,5 centimeter fra en 24 gauge kateternål og sett den stumpe nålen inn i plastskjoldet.Rett den stumpe nålen med plastskjoldet inn i luftrøret. Ta ut nålen, og la plastskjoldet ligge i luftrøret. Sett ventilatoren til en respirasjonsfrekvens på 137 slag per minutt, optimalisert for musene som ble brukt i denne studien og tidevannsvolum 0,18 lukkekapasitet.Koble åndedrettsvernet til kateterskjoldet og bekreft korrekt intubasjon ved å se etter en synkronisert brystbevegelse med ventilatoren. Koble åndedrettsvernet fra kateterskjoldet og legg dyret i liggende stilling på et forvarmet temperaturkontrollert kirurgisk bord. Koble musen til ventilatoren igjen.Etter desinfisering av operasjonsstedet, løft huden forsiktig med en tang og lag et lite kutant tverrsnitt langs linjen mellom venstre pectoralis store og mindre muskler ved hjelp av en kirurgisk saks. Skill de underliggende pectoralis musklene med tang og dissekere saks. Etter å ha gjort et snitt i det tredje interkostalrommet, strekk forsiktig ribbeina fra hverandre ved hjelp av retractors for å avsløre venstre ventrikkel.Flytt perikardfettet til side og finn venstre koronararterie, som går fra kanten av venstre atrium mot hjertetoppen. Pass en 8-0 Nylonsutur under venstre koronararterie ved hjelp av en nåleholder. Legater venstre koronararterie med en dobbel knute etterfulgt av en annen knute.Fjern retractorene og sett en 22 gauge kateternål inn i brysthulen. Fjern nålen, og la spissen av plastskjoldet ligge i brysthulen. Lukk brystkassen med en 4-0 nylonsutur.Koble en sprøyte til plastskjoldet på 22 gauge og fjern sakte overflødig luft fanget i brysthulen ved å trykke forsiktig på brystet for å etablere et negativt lufttrykk. Fjern plastskjoldet. Slå av isofluran forsyningen og plasser musen på ventilatoren som leverer oksygen.En spontan pust av musen starter, slå av ventilatoren. Hold musen under en varmelampe og overvåk til den er våken. Dyret bør ikke etterlates uten tilsyn før det har gjenopprettet nok bevissthet til å opprettholde sternal recumbency.Overvåk musen daglig for tegn på smerte eller ubehag. Fortsett intraperitoneal injeksjon av buprenorfin hver 6. til 8. time i ytterligere to dager etter operasjonen. Aktivt EKG og respirasjonssignaler ble verifisert før innhenting av ekkokardiografiske data.Ekkokardiografisk måling av hjertefunksjonsparametre ble notert 28 dager etter venstre koronararterieligering. M-mode-bildene av det peroneale kortaksebildet av SHAM og MI-hjerter ble observert. MI-bildene viste defekt hjerteveggbevegelse etter venstre koronarligering.Indikatorer på hjertesvikt, som økt venstre ventrikkelmasse, redusert ejeksjonsfraksjon og redusert hjerteminuttvolum ble observert i MI-gruppen sammenlignet med SHAM-gruppen. Massons trikrome farging av nedre, midtre og øvre ventrikkelseksjoner viste økt kollagenfarging i infarkthjertet, noe som indikerer forstørret fibrose. I de fleste tilfeller er arterien ikke mulig.Imidlertid resulterer ligering av myokardvevet 2 til 4 millimeter under kanten av venstre atrium i effektiv ligering av arterien.

Research

JoVE Journal

Medicine

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Modifisert Teknikk for koronar hemorroider i Mus

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En murine modell av myokardiskemi-reperfusjon Injury gjennom Ligation av Left Anterior Synkende Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Minimal Invasive Kirurgisk prosedyre for å indusere hjerteinfarkt i Mus

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanent Ligation av Venstre Anterior Synkende Coronary Artery i Mus: En modell av Post-hjerteinfarkt Remodelling og hjertesvikt

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine Ekkokardiografi av Venstre Atrium, aorta, og lungearterien

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine venstre fremre synkende (LAD) koronar Binding: en forbedret og forenklet modell for hjerteinfarkt

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkte Re-implantasjon av Venstre koronar inn i aorta hos voksne med Anomalous opprinnelse Venstre koronar fra lungearterien (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Murine hjerteinfarkt modell bruker permanent ligation av venstre fremre synkende koronar

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

Intramyokarial transplantasjon av MSC-lasting injiserbare hydrogeler etter hjerteinfarkt i en Murine-modell

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...