Name: an in-house-built and light-emitting-diode-based photodynamic therapy device for enhancing verteporfin cytotoxicity in a 2d cell culture model
Uploaded: 2023-01-13T12:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In-House-Built and Light-Emitting-Diode-Based Photodynamic Therapy Device for Enhancing Verteporfin Cytotoxicity in a 2D Cell Culture Model at JoVE.com

हम आर्थर हेनरिक गोम्स डी ओलिवेरा और लुकास जूलियन क्रूज़ गोम्स को फिल्मांकन प्रक्रिया में मदद करने के लिए धन्यवाद देते हैं। इस परियोजना को ब्राजील के अनुसंधान परिषद (सीएनपीक्यू, अनुदान संख्या 400953/2016-1-404286/2021-6) और फंडाको अरौकारिया-पीपीएसयूएस 2020/2021 (एसयूएस 2020131000003) द्वारा समर्थित किया गया था। इस अध्ययन को कूर्डेनाको डी एपर्फीकोआमेंटो डी पेस्सोअल डी निवेल सुपीरियर-ब्रासिल (सीएपीएस)-वित्त कोड 001 द्वारा भी वित्तपोषित किया गया था।

नोट: इस प्रोटोकॉल में उपयोग की जाने वाली सभी सामग्रियों, अभिकर्मकों और सॉफ़्टवेयर से संबंधित विवरण के लिए सामग्री की तालिका देखें।
1. डिवाइस निर्माण
<ol><li>चित्रा 1 ए में ...

<ol>
	<li>Ferlay, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+agency+for+research+on+cancer.">International agency for research on cancer.</a> Global Cancer Observatory: Cancer Today. 23 (7), 323-326 (2018).</li><li>Gottesman, M. M., Fojo, T., Bates, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidrug+resistance+in+cancer:+role+of+Atp-dependent+transporters.">Multidrug resistance in cancer: role of Atp-dependent transporters.</a> Nature Reviews Cancer. 2 (1), 48-58 (2002).</li><li>Szakacs, G., Paterson, J. K., Ludwig, J. A., Boothe-Genthe, C., Gottesman, G. 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R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+for+cancer:+what's+past+is+prologue.">Photodynamic therapy for cancer: what's past is prologue.</a> Photochemistry and Photobiology. 96 (3), 506-516 (2020).</li><li>Barr, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contrasting+mechanisms+of+colonic+collagen+damage+between+photodynamic+therapy+and+thermal+injury.">The contrasting mechanisms of colonic collagen damage between photodynamic therapy and thermal injury.</a> Photochem Photobiol. 46 (5), 795-800 (1987).</li><li>Algorri, J. F., Ochoa, M., Rold&#225;n-Varona, P., Rodr&#237;guez-Cobo, L., L&#243;pez-Higuera, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy:+A+compendium+of+latest+reviews.">Photodynamic therapy: A compendium of latest reviews.</a> Cancers. 13 (17), 4447 (2021).</li><li>Aniogo, E. C., Plackal, B., George, B. P. A., Abrahamse, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+photodynamic+therapy+on+multidrug+resistant+breast+cancer.">The role of photodynamic therapy on multidrug resistant breast cancer.</a> Cancer Cell International. 19, 91 (2019).</li><li>Spring, B. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+treatment+with+benzoporphyrin+derivative+monoacid+ring+A+produces+protein+tyrosine+phosphorylation+events+and+DNA+fragmentation+in+murine+P815+cells.">Photodynamic treatment with benzoporphyrin derivative monoacid ring A produces protein tyrosine phosphorylation events and DNA fragmentation in murine P815 cells.</a> Photochemistry and Photobiology. 67 (3), 358-362 (1998).</li><li>Castano, A. P., Demidova, T. N., Hamblin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+in+photodynamic+therapy:+part+two+-+cellular+signaling,+cell+metabolism+and+modes+of+cell+death.">Mechanisms in photodynamic therapy: part two - cellular signaling, cell metabolism and modes of cell death.</a> Photodiagnosis Photodynamic Therapy. 2 (1), 1-23 (2014).</li><li>Detty, M. R., Gibson, S. L., Wagner, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+clinical+and+preclinical+photosensitizers+for+use+in+photodynamic+therapy.">Current clinical and preclinical photosensitizers for use in photodynamic therapy.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 47 (16), 3897-3915 (2004).</li><li>Allison, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy:+oncologic+horizons.">Photodynamic therapy: oncologic horizons.</a> Future Oncology. 10 (1), 123-142 (2014).</li><li>Chepurna, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+with+laser+scanning+mode+of+tumor+irradiation.">Photodynamic therapy with laser scanning mode of tumor irradiation.</a> Optical Fibers and Their Applications 2015. 9816, 323-326 (2015).</li><li>Huang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+progress+in+clinical+photodynamic+therapy.">A review of progress in clinical photodynamic therapy.</a> Technology in Cancer Research and Treatment. 4 (3), 283-293 (2005).</li><li>Chepurna, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LED-based+portable+light+source+for+photodynamic+therapy.">LED-based portable light source for photodynamic therapy.</a> Optics in Health Care and Biomedical Optics. 11190, 109-115 (2019).</li><li>Hasson, O., Wishkerman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CultureLED:+A+3D+printer-based+LED+illumination+cultivation+system+for+multi-well+culture+plates.">CultureLED: A 3D printer-based LED illumination cultivation system for multi-well culture plates.</a> HardwareX. 12, 00323 (2022).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localised+light+delivery+on+melanoma+cells+using+optical+microneedles.">Localised light delivery on melanoma cells using optical microneedles.</a> Biomedical Optics Express. 13 (2), 1045-1060 (2022).</li><li>Erkiert-Polguj, A., Halbina, A., Polak-Pacholczyk, I., Rotsztejn, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-emitting+diodes+in+photodynamic+therapy+in+non-melanoma+skin+cancers-own+observations+and+literature+review.">Light-emitting diodes in photodynamic therapy in non-melanoma skin cancers-own observations and literature review.</a> Journal of Cosmetic and Laser Therapy. 18 (2), 105-110 (2016).</li><li>Neupane, J., Ghimire, S., Shakya, S., Chaudhary, L., Shrivastava, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+light+emitting+diodes+in+the+photodynamic+therapy+of+rheumatoid+arthritis.">Effect of light emitting diodes in the photodynamic therapy of rheumatoid arthritis.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 7 (1), 44-49 (2010).</li><li>Lins, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+785-nm+laser+diode-based+system+for+standardization+of+cell+culture+irradiation.">A novel 785-nm laser diode-based system for standardization of cell culture irradiation.</a> Photomedicine and Laser Surgery. 31 (10), 466-473 (2013).</li><li>Hopkins, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+In+vitro+cell+irradiation+protocol+for+testing+photopharmaceuticals+and+the+effect+of+blue,+green,+and+red+light+on+human+cancer+cell+lines.">An In vitro cell irradiation protocol for testing photopharmaceuticals and the effect of blue, green, and red light on human cancer cell lines.</a> Photochemical and Photobiological Sciences. 15 (5), 644-653 (2016).</li><li>Zhang, K., Waguespack, M., Kercher, E. M., Spring, B. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+and+stable+LED+array+illumination+system+for+multiwell+plate+cell+culture+photodynamic+therapy+experiments.">An automated and stable LED array illumination system for multiwell plate cell culture photodynamic therapy experiments.</a> Research Square. , 1-18 (2022).</li><li>G&#225;lvez, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+and+evaluation+of+the+operational+characteristics+of+a+new+photodynamic+therapy+device.">Analysis and evaluation of the operational characteristics of a new photodynamic therapy device.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 37, 102719 (2022).</li><li>Bretin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+activity+of+new+human+colorectal+cancer.">Photodynamic therapy activity of new human colorectal cancer.</a> Cancers. 11 (10), 1474 (2019).</li><li>. T. SketchUp Available from: <a target="_blank" href="https://www.sketchup.com/">https://www.sketchup.com/</a> (2022)</li><li>LCDR PhotoDynamic Therapy (PDT) Equipment Repository. GitHub, Inc Available from: <a target="_blank" href="https://github.com/PhotoDynamicTherapy">https://github.com/PhotoDynamicTherapy</a> (2022)</li><li>W3C CSS Color Module Level 3. W3C, Inc Available from: <a target="_blank" href="https://www.w3.org/TR/css-color-3/#SRGB">https://www.w3.org/TR/css-color-3/#SRGB</a> (2022)</li></ol>

अंतिम फोटोएसीटी डिवाइस $ 50 से कम की कुल लागत पर व्यावसायिक रूप से उपलब्ध, कम लागत वाले घटकों के साथ निर्माण करने के लिए सुविधाजनक था। अतिरिक्त लाभों में कम रखरखाव की मांग, कई प्रकार की संस्कृति प्लेटों क?...

सबसे घातक गैर-संचारी रोगों में से, कैंसर समय से पहले मृत्यु का एक वैश्विक प्रमुख कारण का प्रतिनिधित्व करता है। यह 2020 में लगभग 10 मिलियन मौतों के लिए जिम्मेदार था, जो दुनिया भर में छह मौतों में से लगभग एक का प्रतिनिधित्व करताहै। इसके अतिरिक्त, मल्टीड्रग प्रतिरोध (एमडीआर) घटना एक जबरदस्त सार्वजनिक स्वास्थ्य खतरे का प्रतिनिधित्व करती है, क्योंकि अनुमोदित कीमोथेरेपी प्रोटोकॉल इस नैदानिक स्थिति 2 के लिए छूट चरणों तक पहुंचने में विफलरहते हैं। कैंसर कोशिकाएं कई तंत्रों के माध्यम से कीमोथेरेपी के लिए प्रतिरोध विकसित कर सकती हैं; हालांकि, कुछ एटीपी-बाइंडिंग कैसेट (एबीसी) ट्रांसपोर्टर्स - एटीपी-निर्भर एफ्लक्स पंप - के ओवरएक्प्रेशन को ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट3 के भीतर एमडीआर विकास का मुख्य कारण माना जाता है। एमडीआर के अलावा, अन्य कैंसर जटिलताओं, जैसे पुनरावृत्ति और मेटास्टेसिस, इस ऑन्कोलॉजिकल चुनौती को दूर करने के लिए चिकित्सीय दृष्टिकोण विकसित करने और सुधारने की तत्काल मांग को मजबूत करते हैं।
प्रकाश के उपचारात्मक उपयोग का अभ्यास सदियोंसे किया गया है, और फोटोडायनामिक थेरेपी (पीडीटी) ठोस ट्यूमर के लिए नैदानिक रूप से अनुमोदित चिकित्सीय दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करती है। पीडीटी ट्यूमर कोशिकाओं में चयनात्मक साइटोटॉक्सिसिटी को लागू करने के लिए प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) उत्पन्न करने के लिए प्रकाश विकिरण के बाद एक फोटोसेंसिटाइज़र (पीएस) के प्रशासन को जोड़ती है। यह चिकित्सीय दृष्टिकोण सर्जरी, विकिरणऔर कीमोथेरेपी सहित पारंपरिक तरीकों से बेहतर है; यह एक न्यूनतम इनवेसिव तकनीक है जो संयोजी ऊतकों में कम साइटोटॉक्सिसिटी दिखातीहै। ट्यूमर या इसके माइक्रोएन्वायरमेंट में सीधे प्रकाश अनुप्रयोग और पीएस संचय सटीक लक्ष्यीकरण सुनिश्चित करते हैं और परिणामस्वरूप, मामूली, अवांछनीय प्रणालीगत दुष्प्रभाव7 और एक ही साइट पर बार-बार उपचार की संभावना होती है। इसके अलावा, लागत अन्य दृष्टिकोणों की तुलना में कम है। इसकी आशाजनक विशेषताओं के कारण, पीडीटी को एकल दोनों के लिए एक उपयुक्त विकल्प माना जा सकता है, विशेष रूप से निष्क्रिय ट्यूमर, या सहायक कैंसर उपचार7 के मामले में, और कीमोथेरेपी 8,9 से संबंधित एमडीआर के लिए एक विकल्प का प्रतिनिधित्व करता है।
पीडीटी का उपयोग करके उच्च उद्देश्य प्रतिक्रिया दर दिखाने वाली पहली रिपोर्ट 1975 में माउस और चूहे मॉडल10 में वर्णित की गई थी। तब से, 2 डी सेल कल्चर11,12 में मानव ट्यूमर सेललाइनों के साथ विवो और इन विट्रो दोनों में सकारात्मक परिणामों के साथ पीडीटी का उपयोग करके अध्ययन किए गए हैं। नैदानिक रूप से अनुमोदित पीएस की व्यापक प्रयोज्यता को ध्यान में रखते हुए, उनके विशिष्ट संचय मार्गों और अवशोषण चोटियों की तरंग दैर्ध्य सीमाओं की परवाह किए बिना, सामान्य प्रक्रिया निम्नानुसार है: (i) पीएस अपटेक, (ii) ट्यूमर या उसके माइक्रोएन्वायरमेंट में पीएस एकाग्रता का चरम, (iii) प्रकाश अनुप्रयोग, (iv) पीएस-लाइट इंटरैक्शन, (वी) पीएस उत्तेजित-अवस्था ऊर्जा का ऊतक सब्सट्रेट या आसपास के ऑक्सीजन अणुओं में स्थानांतरण, (vi) आरओएस उत्पादन जिसमें एकल ऑक्सीजन या सुपरऑक्साइड आयन शामिलहैं, (vii) अनिवार्य रूप से, नेक्रोसिस या एपोप्टोसिस (प्रत्यक्ष मृत्यु), ऑटोफैगी (साइटोप्रोटेक्टिव तंत्र), ऊतक इस्किमिया (संवहनी क्षति), प्रतिरक्षा मॉड्यूलेशन, या इन तंत्रों के ओवरलैप के माध्यम से ट्यूमर कोशिका मृत्यु। इस अंतिम चरण में, एक विशिष्ट कोशिका मृत्यु मार्ग का सक्रियण कई कारकों पर निर्भर करता है, जैसे सेल विशेषताओं, प्रयोगात्मक डिजाइन और, सबसे महत्वपूर्ण बात, पीएस इंट्रासेल्युलर स्थानीयकरण और पीडीटी से संबंधित लक्षित क्षति13।
वर्टेपोरफिन एक दूसरी पीढ़ी का पीएस है, जिसे नॉर्वे और चीन में नैदानिक उपयोग के लिए नियामक एजेंसियों द्वारा उम्र से संबंधित मैकुलर अपघटन 7 के इलाज के लिए अनुमोदितकिया गया है। खुराक वितरण के बाद, इस प्रोड्रग को आंशिक रूप से माइटोकॉन्ड्रिया14 में जमा होने और सेलुलर प्रोटीन टायरोसिन फॉस्फोराइलेशन और डीएनए विखंडन को प्रेरित करने की सूचना मिली, जिससे ट्यूमर सेल एपोप्टोसिस15,16 हो गया। वर्टेपोरफिन आंतरिककरण के लिए 24 घंटे इनक्यूबेशन के बाद, 690 एनएम तरंगदैर्ध्य सेटअप का उपयोग करके एक पीडीटी प्रोटोकॉल को आसन्न अणुओं7,17 में विद्युत चुम्बकीय विकिरण हस्तांतरण के प्रभावी स्तर को प्राप्त करने की सिफारिश की जाती है।
पीडीटी के लिए प्रकाश स्रोत के बारे में, शास्त्रीय डायोड लेजर सिस्टम आमतौर पर महंगे, तकनीकी रूप से जटिल, ओवरसाइज़्ड होते हैं, और इस प्रकार18,19। इसकी एकल-तरंग दैर्ध्य प्रोफ़ाइल के परिणामस्वरूप, जिसे एलईडी-आधारित पीडीटी उपकरणों में भी देखा जा सकता है, प्रत्येक फोटोसेंसिटाइज़र एप्लिकेशन के लिए स्वतंत्र इकाइयों की मांग डायोड लेजर सिस्टम के उपयोग को और भी जटिल और आर्थिक रूपसे अव्यावहारिक बनाती है। इसलिए, एलईडी मशीनरी के उपयोग को न केवल लागतऔर रखरखाव के मुद्दों को हल करने के लिए सबसे आशाजनक विकल्प माना जाता है, बल्कि उच्च शक्ति उत्पादन और कम हानिकारक23 और व्यापक रोशन क्षमता 24,25,26,27 प्रदान करने के लिए भी माना जाता है।
संभावित योगदान के बावजूद जो एलईडी-आधारित उपकरण पीडीटी प्रयोगों28 को पेश कर सकते हैं, अधिकांश वाणिज्यिक विकल्पों में अभी भी पोर्टेबिलिटी की कमी, उच्च लागत और जटिल निर्माण परियोजनाओं और संचालन29 जैसी कमियां हैं। इस काम का मुख्य उद्देश्य इन विट्रो पीडीटी परख के लिए एक सरल और विश्वसनीय उपकरण प्रदान करना था। यह पेपर फोटोएसीटी का वर्णन करता है, जो एक इन-हाउस-निर्मित एलईडी-आधारित पीडीटी डिवाइस है, जो सस्ती, उपयोगकर्ता के अनुकूल और पोर्टेबल है। अवधारणा के प्रमाण के रूप में, इस उपकरण को 2 डी सेल कल्चर मॉडल में वर्टेपोरफिन की साइटोटॉक्सिसिटी को बढ़ाने के लिए दिखाया गया है और इसलिए, पीडीटी प्रयोगों में एक शोध उपकरण के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5% Trypsin-EDTA (10x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15400054</td>
			<td>Mammalian cell culture dissociation reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D printer</td>
			<td>Flashforge</td>
			<td></td>
			<td>Finder model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Non-sterile, polystyrene, and high-binding surface plates with flat bottom wells used for 2D cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arduino</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brightness sensor</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>TSL2561 model with 0.1-40.000+ lux detection levels and I2C interface</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buttons</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buzzer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture Flasks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile, polystyrene, rectangular bottom flask with Tissue Culture (TC)-treated surface, canted neck and vent cap (sizes)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile, polypropylene tubes with 15/50 mL capacity used for cell culture dilution at seeding step of the assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Controller board</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>ESP32</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Design Software</td>
			<td>Trimble</td>
			<td></td>
			<td>SketchUp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM High Glucose</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965092</td>
			<td>DMEM (Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium) is a widely used basal medium for supporting the growth of many different mammalian cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D4540-500ML</td>
			<td>Dimethyl sulfoxide, &#8805;99.5% (GC), suitable for plant cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12657029</td>
			<td>FBS provides the best value by delivering consistency of cell growth over time and passages.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin (50 mg/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15750060</td>
			<td>Water-soluble antibiotic drug originally purified from the fungus&#160;Micromonospora purpurea. Gentamicin acts by preventing cell culture contamination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Neubauer patterned chamber used for cell counting at seeding step of the assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted Laboratory Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>DM IL LED</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Cabin designed to protect the working environment from contaminants by maintaining a constant, unidirectional flow of HEPA-filtered air over the work area. Used at several steps of cell cultivation and treatment procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LCD display</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED RGB WS2812</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>5050 RGB SMD model with a built-in processor. Tape with 30 LEDs, 1 meter length and 9 watts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MDF fiberboards</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3mm thickness medium-density fiberboards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge Tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile, polypropylene tubes with safety lid and 1.5/2.0 mL capacity. Convenient tools for manipulating small volumes at treatment step of the assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate reader</td>
			<td>ThermoFischer</td>
			<td></td>
			<td>Multiskan FC Microplate Photometer designed to detect a broad wavelength range of absorbance (340-850 nm). The equipment was used to evaluate cell viability after MTT incubation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT Reagent</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>M6494</td>
			<td>3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide. Used for cell viability assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operational System</td>
			<td>Real Time Engineers ltd.</td>
			<td></td>
			<td>FreeRTOS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P10 micripipette</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Non-electronic, single-channel, 1-10 &#956;L capacity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P1000 micropipette</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Non-electronic, single-channel, 10-1000 &#956;L capacity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P200 micropipette</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Non-electronic, single-channel, 20-200 &#956;L capacity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDT Equipment</td>
			<td>LumaCare</td>
			<td></td>
			<td>Model LC-122</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-Buffered Saline pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010031</td>
			<td>Balanced salt formulation used for washing cells during cultivation and assay procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potentiometers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Non-sterile, universal fit, 10/200/1000 &#956;L maximum volumes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Verteporfin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SML0534-5MG</td>
			<td>Verteporfin, &#8805;94% (HPLC)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in-house-built and light-emitting-diode-based photodynamic therapy device for enhancing verteporfin cytotoxicity in a 2d cell culture model

यह पेपर इन विट्रो फोटोडायनामिक थेरेपी (पीडीटी) परख करने के लिए एक उपन्यास, सरल और कम लागत वाले उपकरण का वर्णन करता है, जिसका नाम फोटोएसीटी है। डिवाइस को पारंपरिक प्रोग्राम करने योग्य प्रकाश उत्सर्जक डायोड (एलईडी), एक तरल क्रिस्टल डिस्प्ले (एलसीडी) मॉड्यूल और एक वाणिज्यिक माइक्रोकंट्रोलर बोर्ड से जुड़े एक प्रकाश सेंसर के एक सेट का उपयोग करके बनाया गया था। प्रोटोटाइप की बॉक्स-आधारित संरचना मध्यम घनत्व फाइबरबोर्ड (एमडीएफ) के साथ बनाई गई थी। आंतरिक डिब्बे एक साथ चार सेल कल्चर मल्टीवेल माइक्रोप्लेट आवंटित कर सकते हैं।
अवधारणा के प्रमाण के रूप में, हमने दो आयामी (2 डी) संस्कृति में हेला सेल लाइन के खिलाफ फोटोसेंसिटाइज़र (पीएस) वर्टेपोरफिन के साइटोटोक्सिक प्रभाव का अध्ययन किया। हेला कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए वर्टेपोरफिन की बढ़ती सांद्रता के साथ इलाज किया गया था। दवा युक्त सुपरनैटेंट माध्यम को छोड़ दिया गया था, अनुयायी कोशिकाओं को फॉस्फेट-बफर्ड सेलाइन (पीबीएस) के साथ धोया गया था, और दवा-मुक्त माध्यम जोड़ा गया था। इस अध्ययन में, कोशिकाओं पर वर्टेपोरफिन के प्रभाव की जांच या तो प्रकाश जोखिम के बिना या 255, 255 और 255 के लाल-हरे-नीले (आरजीबी) मूल्यों का उपयोग करके प्रकाश के लिए 1 घंटे के संपर्क के बाद की गई थी (49.1 ± 0.6 जे / सेमी2 की औसत समृद्धि)। 24 घंटे के बाद, सेल व्यवहार्यता का मूल्यांकन 3-(4,5-डाइमिथाइल-2-थियाज़ोलिल)-2,5-डिफेनिलटेट्राज़ोलियम ब्रोमाइड (एमटीटी) परख द्वारा किया गया था।
प्रायोगिक परिणामों से पता चला है कि डिवाइस से प्रकाश के लिए वर्टेपोरफिन के साथ इलाज की गई कोशिकाओं के संपर्क में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) द्वारा मध्यस्थ तंत्र के माध्यम से दवा के साइटोटोक्सिक प्रभाव को बढ़ाता है। इसके अलावा, इस काम में वर्णित प्रोटोटाइप का उपयोग एक वाणिज्यिक पीडीटी डिवाइस के साथ परिणामों की तुलना करके मान्य किया गया था। इस प्रकार, यह एलईडी-आधारित फोटोडायनामिक थेरेपी प्रोटोटाइप पीडीटी के इन विट्रो अध्ययनों के लिए एक अच्छा विकल्प का प्रतिनिधित्व करता है।

फोटोएक्ट नामक अंतिम पीडीटी डिवाइस में चार मल्टीवेल माइक्रोप्लेट आवंटित करने के लिए एक अंधेरा कक्ष शामिल था, जिसकी ऊपरी आंतरिक सतह दृश्य प्रकाश के अलग-अलग स्पेक्ट्रम का उत्सर्जन करने के लिए प्रोग्राम...

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An In-House-Built and Light-Emitting-Diode-Based Photodynamic Therapy Device for Enhancing Verteporfin Cytotoxicity in a 2D Cell Culture Model

यहां, हम एक फोटोसेंसिटाइज़र के रूप में दो-आयामी हेला सेल संस्कृति और वर्टेपोरफिन का उपयोग करके इन विट्रो फोटोडायनामिक थेरेपी (पीडीटी) परख को सफलतापूर्वक करने के लिए एक उपन्यास, सरल और कम लागत वाले उपकरण का वर्णन करते हैं।

2 डी सेल कल्चर मॉडल में वर्टेपोरफिन साइटोटॉक्सिसिटी को बढ़ाने के लिए एक इन-हाउस-बिल्ट और लाइट-एमिटिंग-डायोड-आधारित फोटोडायनामिक थेरेपी डिवाइस

This paper describes a novel, simple, and low-cost device to perform in vitro photodynamic therapy (PDT) assays, named the PhotoACT. The device was built ...

फोटोडायनामिक थेरेपी, पीडीटी, कैंसर के उपचार के लिए कई लाभ प्रदान करता है, और इसकी प्रभावकारिता फोटोसेंसिटाइज़र को सक्रिय करने के लिए प्रकाश स्रोत पर निर्भर करती है। हालांकि क्षेत्र में हालिया प्रगति, इन विट्रो मॉडल के लिए पीटीडी के लिए एक महंगे और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य डिवाइस तक पहुंच की कमी है। इस मांग को प्राप्त करने के लिए, यह काम सेल संस्कृतियों पर पीडीटी परख करने के लिए एक उपन्यास, सरल और कम लागत वाले उपकरण का वर्णन करता है, जिसका नाम फोटोएक्ट है।निर्माण शुरू करने के लिए, निम्नलिखित आयामों के साथ टुकड़े प्राप्त करने के लिए तीन मिलीमीटर मोटाई मध्यम घनत्व फाइबर बोर्ड, एमडीएफ देखा। निम्न आयामों के साथ दो बक्से बनाएँ। बैरल जैक कनेक्टर स्थापित करने के लिए बड़े बॉक्स के पीछे ड्रिल करें।इलेक्ट्रिक केबलों के लिए एक मार्ग प्रदान करने के लिए बड़े बॉक्स के शीर्ष, छोटे बॉक्स के शीर्ष और निचले हिस्से को भी ड्रिल करें। सजातीय प्रकाश घटनाओं को बढ़ावा देने के लिए काली स्याही के साथ सभी आंतरिक सतहों को पेंट करें। छोटे बॉक्स की ऊपरी आंतरिक सतह पर प्रत्येक में 10 एलईडी के साथ समानांतर तीन एलईडी टेप संलग्न करें।इसके अतिरिक्त, छोटे बॉक्स के निचले आंतरिक सतह के केंद्र में एक चमक सेंसर स्थापित करें। पूरक 3 डी प्रिंटिंग फ़ाइल का उपयोग करके नियंत्रण इकाई की संरचना मुद्रित करें। सभी घटकों, पावर बटन, पोटेंशियोमीटर, टाइम स्टार्ट टचपैड, एलईडी, ब्राइटनेस सेंसर, एलसीडी, बजर और बिजली की आपूर्ति, और नियंत्रण इकाई इंटीरियर में लगे ईएसपी -32 नियंत्रक बोर्ड के कुछ हिस्सों को स्थापित करें।पूरक फ़ाइल पर उपलब्ध प्रोग्रामिंग कोड अपलोड करें, और यह जांचने के लिए एक परीक्षण चलाएं कि सभी कनेक्शन काम कर रहे हैं। बक्से को इकट्ठा करें और अंतराल और परिणामस्वरूप बाहरी प्रकाश हस्तक्षेप और तत्काल प्रकाश हानि से बचने के लिए उन्हें एक साथ ठीक करें। प्रोटोटाइप के शीर्ष पर ड्रिल किए गए क्षेत्र में माउंटेड कंट्रोल यूनिट संलग्न करें।निम्नलिखित आयामों में एक ही सामग्री का एक सामने का दरवाजा बनाएं, और कक्ष बंद और निर्बाध परख सुनिश्चित करने के लिए इसे बाहरी बॉक्स पर टिका और वेल्क्रो टेप के साथ ठीक करें। आसानी और सटीकता के साथ सामने के दरवाजे में हेरफेर करने के लिए एक हैंडल भी स्थापित करें। संचालन के दौरान अधिक स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए प्रोटोटाइप के निचले भाग में चार रबर फुट पैड संलग्न करें।डलबेको के मॉडिफाइड ईगल मीडियम में हेला सेल लाइन की खेती करें जिसमें 10% भ्रूण गोजातीय सीरम और 1% जेंटामाइसिन के साथ कम ग्लूकोज होता है। कल्चर फ्लास्क को 5% कार्बन डाइऑक्साइड और 37 सेल्सियस डिग्री पर रखें। संगम के 80 से 90% तक पहुंचने तक सेल संस्कृति का प्रबंधन और निरीक्षण करें।सीडिंग प्रक्रिया के साथ सेल व्यवहार्यता प्रोटोकॉल शुरू करें। फ्लास्क से माध्यम को कॉन्फ्लुएंट हेला सेल कल्चर के साथ हटा दें। फ्लास्क को फॉस्फेट बफर सेलाइन, पीबीएस के साथ धोएं, और ट्रिप्सिन के साथ संस्कृति को अलग करें।हेमोसाइटोमीटर के साथ पुन: निलंबित कोशिकाओं की गणना करें और उन्हें प्रति कुएं 20,000 कोशिकाओं की एकाग्रता पर एक बहु-अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट में बीज दें। उपचार की अंधेरे और हल्की स्थितियों के लिए दो प्लेटें तैयार करें और उन्हें सेल अटैचमेंट के लिए 24 घंटे तक इनक्यूबेट करें। फोटोसेंसिटाइज़र के साथ उपचार के साथ आगे बढ़ने के लिए, दोनों प्लेटों से माध्यम को हटा दें और वर्टेपोरफिन की बढ़ती सांद्रता के 100 माइक्रोलीटर के साथ कोशिकाओं का इलाज करें।वर्टेपोरफिन आंतरिककरण की अनुमति देने के लिए कोशिकाओं को 24 घंटे तक उपचार में रखें। इनक्यूबेशन बाद, उपचार को हटा दें, पीबीएस के साथ कोशिकाओं को धोएं और दवा मुक्त माध्यम जोड़ें। इसे हल्के जोखिम से बचाने के लिए एल्यूमीनियम पन्नी के साथ एक माइक्रोप्लेट को कवर करें और इसे 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।यह माइक्रोप्लेट पीडीटी परिणामों के आगे के विश्लेषण के लिए नियंत्रण डेटा प्रदान करेगा। अन्य माइक्रोप्लेट का उपयोग फोटोएक्ट में प्रकाश एक्सपोजर की स्थिति पर किया जाएगा। उपकरण को संचालित करने के लिए, इसे आउटलेट में प्लग करें और पावर बटन दबाते हुए इसे चालू करें।पीडीटी कक्ष में मल्टी-वेल माइक्रोप्लेट रखें और साइड वेल्क्रो टेप के साथ फ्रंटल दरवाजे को बांधकर उपकरण को बंद करें। उपकरण स्थापित करने के लिए, प्रकाश उत्सर्जन के आरजीबी कॉन्फ़िगरेशन को समायोजित करने के लिए पोटेंशियोमीटर का उपयोग करें। समय कॉन्फ़िगरेशन समायोजित करने और परख अवधि सेट करने के लिए प्लस / माइनस टचपैड दबाएं।जांचें कि परख के बारे में सही जानकारी डिस्प्ले पर दिखाई गई है या नहीं और यदि आवश्यक हो तो अंतिम समायोजन करें। परख शुरू करने के लिए स्टार्ट टचपैड दबाएं। प्रयोग की शुरुआत में एक-बीप बजर सुना जाना चाहिए।प्रयोग के दौरान, प्रदर्शन पर प्रगति की जानकारी देखी जा सकती है, जैसे कि विकिरण और बचा हुआ समय। पीडीटी परख के दौरान सामने का दरवाजा न खोलें या कोई कॉन्फ़िगरेशन न बदलें। परख के अंत में, एक चार-बीप बजर सुना जाना चाहिए और इलेक्ट्रॉनिक सिस्टम सभी एलईडी को बंद कर देगा।एक समाप्त संदेश और प्रयोग के दौरान विस्तारित ऊर्जा की अंतिम मात्रा को प्रदर्शन पर देखा जा सकता है। फ्लुएंस अंतिम मूल्य की गणना हाइलाइट किए गए समीकरण के अनुसार की जाती है। प्रकाश जोखिम का सामना करने वाले माइक्रोप्लेट को कवर करें और 24 घंटे की इनक्यूबेशन के साथ आगे बढ़ें।इनक्यूबेशन अवधि के बाद, दोनों प्लेटों से माध्यम निकालें, पीबीएस के साथ कोशिकाओं के मोनोलेयर को धोएं, और एमटीटी समाधान जोड़ें। फॉर्माज़ान क्रिस्टल के गठन की अनुमति देने के लिए चार घंटे के लिए अंधेरे और प्रकाश की स्थिति दोनों प्लेटों को इनक्यूबेट करें। एमटीटी समाधान को सावधानी से हटा दें और बैंगनी क्रिस्टल को डीएमएसओ और इथेनॉल समाधान के साथ भंग करें।पूर्ण क्रिस्टल विघटन के बाद, 595 नैनोमीटर पर माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करके अवशोषण माप करें। अंतिम उत्पाद में एक अंधेरा कक्ष होता है जिसकी ऊपरी आंतरिक सतह 30 बिखरे हुए प्रकाश उत्सर्जक डायोड, एलईडी के एक सेट से लैस होती है, जो दृश्य प्रकाश के अलग-अलग स्पेक्ट्रम का उत्सर्जन करने के लिए प्रोग्राम की जाती है। आंतरिक सतहों की कम परावर्तकता और एलईडी विन्यास के समान वितरण के कारण एक सजातीय प्रकाश घटना स्थापित की जाती है।सेटअप इंटरफ़ेस उपयोगकर्ता के अनुकूल है और तय प्रयोगात्मक स्थिति प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य थी। अवधारणा के प्रमाण के रूप में, डिवाइस का उपयोग प्रकाश जोखिम के बाद 2 डी हेला सेल संस्कृति में वर्टेपोरफिन के साइटोटोक्सिक प्रभाव को बढ़ाने के लिए किया गया था। जैसा कि आंकड़े में दिखाया गया है, जीआई 50 मान प्रकाश की स्थिति के लिए 3.1 माइक्रोमोलर था।और अंधेरे की स्थिति के लिए 13.8 माइक्रोमोलर इसलिए, शर्तों की तुलना में दक्षता में चार गुना से अधिक की वृद्धि फोटोसेंसिटाइज़र के रूप में वर्टेपोरफिन के उपयोग और पीडीटी परख पर फोटोएक्ट की प्रयोज्यता की पुष्टि करती है। इस काम में वर्णित प्रोटोटाइप के उपयोग को मान्य करने के लिए, एक वाणिज्यिक पीडीटी डिवाइस का उपयोग उसी प्रयोगात्मक परिस्थितियों के तहत किया गया था, जिसमें फोटोसेंसिटाइज़र, कोशिकाएं और समृद्धि शामिल थी, और परिणामों की तुलना की गई थी। जैसा कि आंकड़े में दिखाया गया है, दोनों डिवाइस समान रूप से फोटोएक्टिवेट वर्टेपोरफिन को सक्रिय करते हैं, साइटोटोक्सिक प्रभाव को बढ़ाते हैं।अंत में, प्रकाश जोखिम के बाद वर्टेपोरफिन द्वारा ट्रिगर आरओएस-मध्यस्थता कोशिका मृत्यु की पुष्टि डीसीएफडीए परख का उपयोग करके फ्लो साइटोमेट्री द्वारा की गई थी। सारांश में, डिवाइस को 50 से कम की कुल लागत के साथ व्यावसायिक रूप से उपलब्ध कम लागत वाले घटकों के साथ आसानी से बनाया गया था। डिवाइस के मुख्य अन्य लाभ में पोर्टेबिलिटी, कम रखरखाव की मांग, कई प्रकार की संस्कृति प्लेटों को विकिरणित करने की क्षमता, प्रति परख चार इकाइयों तक का एक साथ उपयोग, सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विकिरण, उपयोगकर्ता के अनुकूल और सरल सेटअप इंटरफ़ेस शामिल हैं जिन्हें कंप्यूटर या अन्य मशीनों से कनेक्शन की आवश्यकता नहीं होती है।इसके अलावा, ऑपरेशन के दौरान समस्याओं या त्रुटियों को खोजने और सही करने के लिए एक व्यवस्थित समस्या-समाधान दृष्टिकोण प्रदान करने के लिए एक निर्णय प्रवाह चार्ट प्रस्तुत किया जाता है। ये निष्कर्ष वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए पीडीटी की सुविधा के लिए फोटोएक्ट के लाभों का विस्तार करने की अनुमति देते हैं, फोटोसेंसिटाइज़र और उनके नैदानिक अनुप्रयोगों की कार्रवाई के तंत्र की खोज करते हैं।

Research

JoVE Journal

Biochemistry

An Efficient Method for the Isolation of Highly Purified RNA from Seeds for Use in Quantitative Transcriptome Analysis

मात्रात्मक Transcriptome विश्लेषण में उपयोग के लिए बीज से उच्च शुद्ध शाही सेना के अलगाव के लिए एक कारगर तरीका

Plant seeds accumulate large amounts of storage reserves comprising biodegradable organic matter. Humans rely on seed storage reserves for food and as ...

Time-resolved ElectroSpray Ionization Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry for Studying Protein Structure and Dynamics

प्रोटीन संरचना और गतिशीलता के अध्ययन के लिए समय का समाधान electrospray ionization हाइड्रोजन-ड्यूटेरियम एक्सचेंज मास स्पेक्ट्रोमेट्री

Intrinsically disordered proteins (IDPs) have long been a challenge to structural biologists due to their lack of stable secondary structure elements. ...

Easy Manipulation of Architectures in Protein-based Hydrogels for Cell Culture Applications

प्रोटीन-आधारित Hydrogels में आर्किटेक्चर का आसान हेरफेर सेल संस्कृति अनुप्रयोगों के लिए

Hydrogels are recognized as promising materials for cell culture applications due to their ability to provide highly hydrated cell environments. The field ...

Sample Preparation for Mass Spectrometry-based Identification of RNA-binding Regions

आरएनए-बाइंडिंग क्षेत्रों की सामूहिक स्पेक्ट्रोमेट्री-आधारित पहचान के लिए नमूना तैयारी

Noncoding RNAs play important roles in several nuclear processes, including regulating gene expression, chromatin structure, and DNA repair. In most ...

Study on the Metabolism of Six Systemic Insecticides in a Newly Established Cell Suspension Culture Derived from Tea (Camellia Sinensis L.) Leaves

Study on the Metabolism of Six Systemic Insecticides in a Newly Established Cell Suspension Culture Derived from Tea Camellia Sinensis L. Leaves

चाय से व्युत्पन्न एक नव स्थापित सेल निलंबन संस्कृति में छह प्रणालीगत कीटनाशक के चयापचय पर अध्ययन(कैमेलिया Sinensis एल.) पत्ते

A platform for studying insecticide metabolism using in vitro tissues of tea plant was developed. Leaves from sterile tea plantlets were induced to form ...

Enhancing the Engraftment of Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Cardiomyocytes via a Transient Inhibition of Rho Kinase Activity

Rho Kinase गतिविधि के एक क्षणिक निषेध के माध्यम से मानव प्रेरित Pluripotent स्टेम सेल व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स के Engraftment बढ़ाना

A crucial factor in improving cellular therapy effectiveness for myocardial regeneration is to safely and efficiently increase the cell engraftment rate. ...

Cell Culture on Silicon Nitride Membranes and Cryopreparation for Synchrotron X-ray Fluorescence Nano-analysis

सिलिकॉन नाइट्राइड झिल्ली और सिंक्रोट्रॉन एक्स-रे फ्लोरेसेंस नैनो-विश्लेषण के लिए क्रायोतैयारी पर सेल कल्चर

Very little is known about the distribution of metal ions at the subcellular level. However, those chemical elements have essential regulatory functions ...

Ultra-High-Speed Western Blot using Immunoreaction Enhancing Technology

इम्यूनोरेक्शन बढ़ाने वाली तकनीक का उपयोग करके अल्ट्रा-हाई-स्पीड वेस्टर्न ब्लॉट

A western blot (also known as an immunoblot) is a canonical method for biomedical research. It is commonly used to determine the relative size and ...

Continuous Fluorescence-Based Endonuclease-Coupled DNA Methylation Assay to Screen for DNA Methyltransferase Inhibitors

डीएनए मेथिलट्रांसफेरेज़ इनहिबिटर के लिए स्क्रीन करने के लिए निरंतर फ्लोरेसेंस-आधारित एंडोन्यूक्लिज़-युग्मित डीएनए मिथाइलेशन परख

DNA methylation, a form of epigenetic gene regulation, is important for normal cellular function. In cells, proteins called DNA methyltransferases (DNMTs) ...

Deciphering Molecular Mechanism of Histone Assembly by DNA Curtain Technique

Chromatin is a higher-order structure that packages eukaryotic DNA. Chromatin undergoes dynamic alterations according to the cell cycle phase and in ...