Name: investigating long-distance transport of perfluoroalkyl acids in wheat via a split-root exposure technique
Uploaded: 2022-09-28T14:05:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Investigating Long-Distance Transport of Perfluoroalkyl Acids in Wheat via a Split-Root Exposure Technique at JoVE.com

Riconosciamo con gratitudine il sostegno finanziario della Natural Science Foundation of China (NSFC 21737003), del Chinese Universities Scientific Fund (n. 2452021103) e della Chinese Postdoctoral Science Foundation (n. 2021M692651, 2021M702680).

I semi di grano, Triticum aestivum L., sono stati acquistati (vedi tabella dei materiali) e utilizzati per il presente studio.
1. Germinazione della piantina di grano e coltura idroponica
<ol><li>Selezionare semi di grano di dimensioni simili e disinfettarli per 15 minuti con una soluzione di perossido di idrogeno all'8% (p/p).</li>
	<li>Risciacquare accuratamente i semi disinfettati con acqua deionizzata, quindi metterli su carta da filtro umida al...

<ol>
	<li>Lindstrom, A. B., Strynar, M. J., Libelo, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyfluorinated+compounds:+Past,+present,+and+future.">Polyfluorinated compounds: Past, present, and future.</a> Environmental Science &amp; Technology. 45 (19), 7954-7961 (2011).</li><li>Kannan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perfluoroalkyl+and+polyfluoroalkyl+substances:+Current+and+future+perspectives.">Perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances: Current and future perspectives.</a> Environmental Chemistry. 8 (4), 333-338 (2011).</li><li>Cui, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occurrence+and+tissue+distribution+of+novel+perfluoroether+carboxylic+and+sulfonic+acids+and+legacy+per/polyfluoroalkyl+substances+in+black-spotted+frog+(Pelophylax+nigromaculatus).">Occurrence and tissue distribution of novel perfluoroether carboxylic and sulfonic acids and legacy per/polyfluoroalkyl substances in black-spotted frog (Pelophylax nigromaculatus).</a> Environmental Science &amp; Technology. 52 (3), 982-990 (2018).</li><li>Negri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+PFOA+and+PFOS+and+fetal+growth:+a+critical+merging+of+toxicological+and+epidemiological+data.">Exposure to PFOA and PFOS and fetal growth: a critical merging of toxicological and epidemiological data.</a> Critical Reviews in Toxicology. 47 (6), 489-515 (2017).</li><li>Chi, Q., Li, Z., Huang, J., Ma, J., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+of+perfluorooctanoic+acid+and+perfluorooctanesulfonic+acid+with+serum+albumins+by+native+mass+spectrometry,+fluorescence+and+molecular+docking.">Interactions of perfluorooctanoic acid and perfluorooctanesulfonic acid with serum albumins by native mass spectrometry, fluorescence and molecular docking.</a> Chemosphere. 198, 442-449 (2018).</li><li>Zhang, X., Chen, L., Fei, X. C., Ma, Y. S., Gao, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Binding+of+PFOS+to+serum+albumin+and+DNA:+insight+into+the+molecular+toxicity+of+perfluorochemicals.">Binding of PFOS to serum albumin and DNA: insight into the molecular toxicity of perfluorochemicals.</a> Bmc Molecular Biology. 10, 16 (2009).</li><li>Pan, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+distribution+of+novel+perfluoroether+carboxylic+and+sulfonic+acids+in+surface+water.">Worldwide distribution of novel perfluoroether carboxylic and sulfonic acids in surface water.</a> Environmental Science &amp; Technology. 52 (14), 7621-7629 (2018).</li><li>Knight, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+investigation+into+the+long-term+binding+and+uptake+of+PFOS,+PFOA+and+PFHxS+in+soil+-+plant+systems.">An investigation into the long-term binding and uptake of PFOS, PFOA and PFHxS in soil - plant systems.</a> Journal of Hazardous Materials. 404, 124065 (2021).</li><li>Liu, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crop+bioaccumulation+and+human+exposure+of+perfluoroalkyl+acids+through+multi-media+transport+from+a+mega+fluorochemical+industrial+park,+China.">Crop bioaccumulation and human exposure of perfluoroalkyl acids through multi-media transport from a mega fluorochemical industrial park, China.</a> Environment International. 106, 37-47 (2017).</li><li>Mei, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Per-+and+polyfluoroalkyl+substances+(PFASs)+in+the+soil-plant+system:+Sorption,+root+uptake,+and+translocation.">Per- and polyfluoroalkyl substances (PFASs) in the soil-plant system: Sorption, root uptake, and translocation.</a> Environment International. 156, 106642 (2021).</li><li>Wang, W., Rhodes, G., Ge, J., Yu, X., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake+and+accumulation+of+per-+and+polyfluoroalkyl+substances+in+plants.">Uptake and accumulation of per- and polyfluoroalkyl substances in plants.</a> Chemosphere. 261, 127584 (2020).</li><li>Lu, J., Wu, J., Stoffella, P. J., Wilson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+bisphenol+A,+nonylphenol,+and+natural+estrogens+in+vegetables+and+fruits+using+gas+chromatography-tandem+mass+spectrometry.">Analysis of bisphenol A, nonylphenol, and natural estrogens in vegetables and fruits using gas chromatography-tandem mass spectrometry.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 61 (1), 84-89 (2013).</li><li>Herschbach, C., Gessler, A., Rennenberg, H., Luttge, U., Beyschlag, W., Budel, B., Francis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+Distance+Transport+and+Plant+Internal+Cycling+of+N-+and+S-Compounds.">Long Distance Transport and Plant Internal Cycling of N- and S-Compounds.</a> Progress in Botany 73. , 161-188 (2012).</li><li>Liu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake+kinetics,+accumulation,+and+long-distance+transport+of+organophosphate+esters+in+plants:+Impacts+of+chemical+and+plant+properties.">Uptake kinetics, accumulation, and long-distance transport of organophosphate esters in plants: Impacts of chemical and plant properties.</a> Environmental Science &amp; Technology. 53 (9), 4940-4947 (2019).</li><li>Wang, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xylem-+and+phloem-based+transport+of+CuO+nanoparticles+in+maize+(Zea+mays+L.).">Xylem- and phloem-based transport of CuO nanoparticles in maize (Zea mays L.).</a> Environmental Science &amp; Technology. 46 (8), 4434-4441 (2012).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake,+accumulation,+and+translocation+mechanisms+of+steroid+estrogens+in+plants.">Uptake, accumulation, and translocation mechanisms of steroid estrogens in plants.</a> Science of the Total Environment. 753, 141979 (2021).</li><li>Felizeter, S., McLachlan, M. S., de Voogt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake+of+perfluorinated+alkyl+acids+by+hydroponically+grown+lettuce+(Lactuca+sativa).">Uptake of perfluorinated alkyl acids by hydroponically grown lettuce (Lactuca sativa).</a> Environmental Science &amp; Technology. 46 (21), 11735-11743 (2012).</li><li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+uptake,+translocation,+and+transformation+mechanisms+of+perfluorophosphinates+and+perfluorophosphonates+in+wheat+(Triticum+aestivum+L.).">Insights into uptake, translocation, and transformation mechanisms of perfluorophosphinates and perfluorophosphonates in wheat (Triticum aestivum L.).</a> Environmental Science &amp; Technology. 54 (1), 276-285 (2020).</li></ol>

Per garantire l'accuratezza di questo metodo, è necessario operare con attenzione per garantire che la soluzione a spillo nel tubo B non contamini la soluzione non chiodata nel tubo A. La concentrazione data di PFAA target nel presente studio era relativamente superiore alla loro concentrazione nell'ambiente reale, garantendo di monitorare i PFAA target nel grano e nella soluzione senza punte utilizzando LC-MS/MS. 
Ci sono limitazioni a questo metodo. Poiché in ciascun gruppo di trattamento ...

Gli acidi perfluoroalchilici (PFAA) sono ampiamente utilizzati in vari prodotti commerciali e industriali grazie alle loro eccellenti proprietà fisico-chimiche, tra cui l'attività superficiale e la stabilità termica e chimica 1,2,3. L'acido perfluorottano solfonico (PFOS) e l'acido perfluorottano (PFOA) sono i due PFAA più importanti utilizzati in tutto il mondo 4,5,6, sebbene questi composti siano stati elencati nella Convenzione internazionale di Stoccolma rispettivamente 7,8 nel 2009 e nel 2019. A causa della loro persistenza e dell'uso diffuso, PFOS e PFOA sono stati ampiamente rilevati in varie matrici ambientali. Le concentrazioni di PFOA e PFOS nelle acque superficiali di diversi fiumi e laghi mondiali sono rispettivamente 0,15-52,8 ng / L e 0,09-29,7 ng / L,9. A causa dell'uso di acque sotterranee o di acque depurate per l'irrigazione e anche utilizzando biosolidi come fertilizzanti, PFOA e PFOS sono ampiamente presenti nel terreno, compresi tra 0,01-123 μg / kg e 0,003-162 μg / kg, rispettivamente10, che potrebbero introdurre una grande quantità di PFAA nelle piante e comportare potenziali rischi per la salute umana. Le concentrazioni di PFAA (C4-C8) nel suolo agricolo e nei cereali (grano e mais) mostrano una correlazione lineare positiva11. Pertanto, è imperativo studiare l'accumulo e la traslocazione di PFAA all'interno delle piante.
La traslocazione dei PFAA nelle piante avviene in primo luogo dalle radici ai tessuti fuori terra, e la traslocazione dei PFAA dalle radici ai tessuti commestibili è considerata come trasporto a lunga distanza12,13. Studi precedenti hanno rilevato bisfenolo A, nonilfenolo ed estrogeni naturali in frutta e verdura14, il che implica che queste sostanze chimiche potrebbero migrare attraverso il floema. Pertanto, scoprire la traslocazione di PFAA nelle piante è importante per valutare il loro potenziale rischio. Tuttavia, l'accumulo e la traslocazione dei PFAA sono influenzati dalla loro biodisponibilità nel suolo, quindi non è facile valutare la capacità di traslocazione dei PFAA bersaglio nelle piante. Inoltre, gli esperimenti idroponici sono generalmente limitati da diversi fattori, rendendo più difficile acquisire i tessuti commestibili delle piante. Tipicamente, il floema è stato raccolto direttamente dalle piante per osservare la traslocazione di composti organici attraverso lunghe distanze nelle piante, mentre è difficile acquisire floemi da piantine di piante15. Quindi, è stato introdotto un metodo semplice ed efficace, la tecnica della radice divisa, per studiare la traslocazione di PFAA nelle piante durante un'esposizione relativamente a breve termine. Per quanto riguarda l'indagine a radice divisa, le radici in una piantina di piante sono separate in due parti; una parte viene inserita nella soluzione nutritiva contenente PFAA bersaglio (tubo A) e l'altra viene posta nella soluzione nutritiva in assenza di PFAA (tubo B). Dopo esposizione per diversi giorni, i PFAA nel tubo B vengono misurati mediante LC-MS/MS. La concentrazione di PFAA nel tubo B rivela il potenziale di traslocazione dei PFAA attraverso il floema all'interno delle piante16,17,18.
L'esperimento split-root è stato riportato per studiare la traslocazione a lunga distanza di molti composti nelle piante, come le nanoparticelle CuO17, gli estrogeni steroidei 18 e gli esteri organofosfati16. Questi studi hanno fornito la prova che questi composti potrebbero trasferirsi attraverso il floema alle parti commestibili delle piante. Tuttavia, è necessario esplorare ulteriormente se i PFAA possano aiutare nella traslocazione nelle piante e l'impatto delle proprietà dei composti. Sulla base di questi rapporti, l'esperimento split-root è stato condotto nel presente studio per rivelare il trasporto a lunga distanza di PFAA nel grano.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ACQUITY UPLC BEH C18 column</td>
			<td>Waters, Milford, MA</td>
			<td></td>
			<td>Liquid chromatographic column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cleanert PEP cartridge</td>
			<td>Bonna- Angel Technologies, China</td>
			<td></td>
			<td>Solid phase extraction column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clearnert Pesticarb cartridge</td>
			<td>Bonna- Angel Technologies, China</td>
			<td></td>
			<td>Solid phase extraction column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LC-MS/MS(Waters Acquity UPLC i-Class Coupled to Xevo TQ-S)</td>
			<td>Waters, Milford, MA</td>
			<td></td>
			<td>Liquid chromatography and mass spectrometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lyophilizer&#160;</td>
			<td>Boyikang Instrument Ltd., Beijing, China</td>
			<td>FD-1A50</td>
			<td>Freeze-dried sample</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masslynx</td>
			<td>Waters, Milford, MA</td>
			<td></td>
			<td>data analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl tert-butyl ether</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, US)</td>
			<td></td>
			<td>use for extracting target compounds from plant tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MPFAC-MXA</td>
			<td>Wellington Laboratories (Ontario, Canada)</td>
			<td>PFACMXA0518</td>
			<td>the internal standards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFAC-MXB</td>
			<td>Wellington Laboratories (Ontario, Canada)</td>
			<td>PFACMXB0219</td>
			<td>mixture of PFAA calibration standards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFOA</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, US)</td>
			<td>335-67-1</td>
			<td>a represent PFAAs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFOS</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, US)</td>
			<td>2795-39-3</td>
			<td>a represent PFAAs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium carbonate buffer</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, US)</td>
			<td></td>
			<td>use for extracting target compounds from plant tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrabutylammonium hydrogen sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, US)</td>
			<td></td>
			<td>use for extracting target compounds from plant tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wheat seeds</td>
			<td>Chinese Academy of Agricultural Sciences (Beijing,China)&#160;</td>
			<td></td>
			<td>Triticum aestivum L.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

investigating long-distance transport of perfluoroalkyl acids in wheat via a split-root exposure technique

Grandi quantità di acidi perfluoroalchilici (PFAA) sono stati introdotti nel suolo e accumulati dalle piante, ponendo potenziali rischi per la salute umana. È imperativo studiare l'accumulo e la traslocazione di PFAA all'interno delle piante. Il trasporto a lunga distanza è un percorso importante per i PFAA trasferiti dalle foglie della pianta ai tessuti commestibili attraverso il floema. Tuttavia, in precedenza era difficile valutare il potenziale di traslocazione della contaminazione organica in un periodo di esposizione a breve termine. L'esperimento a radice divisa fornisce una soluzione per scoprire efficacemente la traslocazione a lunga distanza di PFAA utilizzando un esperimento idroponico, che, in questo studio, è stato condotto in due provette da centrifuga da 50 ml (A e B), di cui la provetta A della centrifuga aveva 50 ml di soluzione nutritiva sterile Hoagland a un quarto di resistenza, mentre la provetta della centrifuga B aveva la stessa quantità di concentrazione di nutrienti, e i PFAA bersaglio (acido perfluorottano solfonico, PFOS e acido perfluorottano, PFOA) aggiunti a una data concentrazione. Una radice di grano integrale è stata separata manualmente in due parti e inserita con cura nei tubi A e B. La concentrazione di PFAA nelle radici, nei germogli di grano e nelle soluzioni nei tubi A e B sono stati valutati utilizzando rispettivamente LC-MS / MS, dopo essere stati coltivati in un'incubatrice per 7 giorni e raccolti. I risultati hanno suggerito che PFOA e PFOS sperimentano un simile processo di trasporto a lunga distanza attraverso il floema dal germoglio alla radice e potrebbero essere rilasciati nell'ambiente ambientale. Pertanto, la tecnica split-root può essere utilizzata per valutare il trasporto a lunga distanza di diverse sostanze chimiche.

L'esperimento split-root ha studiato il trasporto a lunga distanza di PFAA nel grano. Come mostrato nella figura 2A,C, sia il PFOA che il PFOS potrebbero essere assorbiti dalla radice di grano e trasferiti al germoglio. PFOS e PFOA non sono stati rilevati nella radice di grano e nella soluzione nel tubo A del controllo in bianco. È stato riscontrato che PFOS e PFOA sono stati rilevati nelle radici di grano coltivate nella soluzione senza punte, con una concentrazione di 0,2...

Watch this Scientific Journal Video about Investigating Long-Distance Transport of Perfluoroalkyl Acids in Wheat via a Split-Root Exposure Technique at JoVE.com

Investigating Long-Distance Transport of Perfluoroalkyl Acids in Wheat via a Split-Root Exposure Technique

Il presente protocollo descrive un metodo semplice ed efficace per il trasporto a lunga distanza degli acidi perfluoroalchilici nel grano.

Studio del trasporto a lunga distanza di acidi perfluoroalchilici nel grano mediante una tecnica di esposizione a radice divisa

Large amounts of perfluoroalkyl acids (PFAAs) have been introduced into the soil and accumulated by plants, posing potential risks to human health. It is ...

Il floema è stato raccolto direttamente dalle piante per osservare la traslocazione di composti organici attraverso lunghe distanze, mentre è difficile acquisire floema da piantine vegetali. Un metodo semplice ed efficace, la tecnica della radice divisa, è stato introdotto per studiare la traslocazione dei PFAA nelle piante, durante un'esposizione relativamente a breve termine. Questo metodo può anche rivelare il trasporto a lunga distanza di diversi composti nelle piante.La concentrazione data di PFAA bersaglio deve essere relativamente superiore alla loro concentrazione nell'ambiente reale, garantendo il monitoraggio dei PFAA bersaglio nel frumento in soluzione non appuntita. Inizia selezionando il Triticum aestivum di dimensioni simili, o semi di grano, e disinfettali per 15 minuti con una soluzione di perossido di idrogeno all'8%. Risciacquare accuratamente i semi disinfettati con acqua deionizzata.Mettere i semi sulla carta da filtro umida al buio a temperatura ambiente per 5 giorni per la germinazione. Selezionare circa 9 piantine germinate, di dimensioni uniformi, e trasferirle in bicchieri di plastica con 250 millilitri di 1/4 di forza della soluzione di Hoagland. Prima del trattamento, coltivare le piantine in camere di crescita per 7 giorni con un ciclo di 14 ore a 22 gradi Celsius e 10 ore a 27 gradi Celsius.Per la coltivazione della piantina, preparare 2 provette da centrifuga, A e B, ciascuna contenente 50 millilitri di 1/4 di forza della soluzione di Hoagland. Sciogliere l'acido perfluorottano commerciale, o PFOA, e l'acido perfluoroottansolfonico, o PFOS, in metanolo e diluirlo con la soluzione nutritiva sterile come soluzione madre, quindi aggiungere la soluzione madre al tubo B a 100 microgrammi per litro di PFOA e PFOS. Quindi, separare le radici intere di una piantina di grano in 2 parti uguali usando una pinzetta con le radici collegate allo stesso germoglio, quindi inserirle rispettivamente nei tubi A e B.Sigillare i 2 tubi con un foglio di alluminio prima di coltivarli in un'incubatrice per 7 giorni con un ciclo di 14 ore a 22 gradi Celsius e 10 ore a 27 gradi Celsius. Dopo 7 giorni, raccogliere le piantine di grano e separarle in 3 parti usando le forbici, come germogli e radici coltivate nella soluzione a spillo di acidi perfluoroacilici, o PFAA, in soluzione senza spillo. Liofilizzare i campioni di piante in un liofilizzatore a meno 55 gradi Celsius per 48 ore.Dopo 2 giorni, omogeneizzare. Pesare la radice e sparare campioni. Raccogliere i campioni di soluzione con e senza spiked.In un tubo di polipropilene da 15 millilitri, aggiungere 2 millilitri di tampone carbonato di sodio, 1 millilitro di tetrabutilammonio idrogeno solfato, 5 millilitri di metil tert-butil etere e la radice omogeneizzata o germogliare. Al termine, agitare il tubo a 250 RPM per 20 minuti, prima di centrifugare a 2000 g per 10 minuti a temperatura ambiente per ottenere la fase organica surnatante . Dopo la seconda estrazione, raggruppare gli estratti di trattamento simili e vaporizzarli fino all'essiccazione in un flusso di azoto delicato, quindi ricostituirli con 5 millilitri di metanolo e vortice, mantenendo la stessa velocità per circa 30 secondi.Condizionare la cartuccia PestiCarb con 5 millilitri di idrossido di ammonio allo 0,1% in metanolo, 5 millilitri di acqua e 5 millilitri di metanolo. Aggiungere 5 millilitri di soluzione di metanolo attraverso la cartuccia PestiCarb per rimuovere il pigmento. Eluire la cartuccia con 5 millilitri di metanolo e raccogliere nelle provette.Far evaporare i 10 millilitri di soluzione di metanolo raccolti fino all'essiccazione e ricostituire con 200 microlitri di metanolo prima del vortice, quindi centrifugare il campione a 10.000 g per 20 minuti a temperatura ambiente. Condizionare la cartuccia di estrazione polimerica potenziata polarmente con 5 millilitri di metanolo e 5 millilitri di acqua per attivare. Aggiungere 1 millilitro della soluzione a spillo o 50 millilitri dei campioni di soluzione senza spillo attraverso la cartuccia.Eludere i PFAA target con 10 millilitri di metanolo. Far evaporare l'estratto con un flusso di azoto delicato e quindi ricostituire l'estratto evaporato con 200 microlitri di metanolo per l'analisi. L'esperimento split-root ha studiato il trasporto a lunga distanza di PFAA nel grano.È stato osservato che PFOA e PFOS sono stati assorbiti dalla radice di grano con una concentrazione di 11,94 nanogrammi per grammo e 30,67 nanogrammi per grammo di peso secco in soluzione a spillo rispettivamente, e sono stati trasferiti ai germogli con una concentrazione di 5,01 nanogrammi per grammo e 4,17 nanogrammi per grammo di peso secco. È stato riscontrato che PFOA e PFOS sono stati rilevati nelle radici di grano coltivate nella soluzione senza spig con una concentrazione di 0,26 nanogrammi per grammo e 0,64 nanogrammi per grammo di peso secco rispettivamente. Ha suggerito che PFOA e PFOS potrebbero sperimentare il trasporto a lunga distanza attraverso il floema dal germoglio alla radice.È stato notato che PFOA e PFOS sono stati trovati anche nella soluzione nutritiva senza punte con una concentrazione di 17,8 nanogrammi per litro e 28,5 nanogrammi per litro rispettivamente, suggerendo che PFOA e PFOS potrebbero passare attraverso la striscia caspariana della radice. Devono essere prese precauzioni per garantire che la soluzione a spillo nel tubo B non contamini la soluzione senza spiga nel tubo A. La dimostrazione visiva di questo metodo può fornire una semplice operazione per rivelare il trasporto a lunga distanza di PFAA nel frumento.

Research

JoVE Journal

Environment

Investigating Long-Distance Transport of Perfluoroalkyl Acids in Wheat via a Split-Root Exposure Technique

Optimize Flue Gas Settings to Promote Microalgae Growth in Photobioreactors via Computer Simulations

Ottimizzare le impostazioni dei gas di scarico per promuovere la crescita di microalghe in fotobioreattori tramite simulazioni al computer

Flue gas from power plants can promote algal cultivation and reduce greenhouse gas emissions1. Microalgae not only capture solar energy more efficiently ...

Ricerca

Ambiente

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

Metodo EPA 1615. Misura di Enterovirus e Norovirus Evento in acqua per la cultura e RT-qPCR. I. Raccolta di campioni di virus

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

A Whole Cell Bioreporter Approach to Assess Transport and Bioavailability of Organic Contaminants in Water Unsaturated Systems

A Whole marcatura già cellulare approccio per valutare i trasporti e la biodisponibilità di contaminanti organici in acqua insaturi Sistemi

Bioavailability of contaminants is a prerequisite for their effective biodegradation in soil. The average bulk concentration of a contaminant, however, is ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. II. Total Culturable Virus Assay

Metodo EPA 1615. Misura di Enterovirus e Norovirus Presenza in Water di cultura e RT-qPCR. II. Totale coltivabili Virus Assay

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

Metodo EPA 1615. Misura di Enterovirus e Norovirus Presenza in Water di Cultura e RT-qPCR. Parte III. Rilevamento virus mediante RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Extraction and Analysis of Microbial Phospholipid Fatty Acids in Soils

Estrazione e l&#39;analisi delle microbica fosfolipidi acidi grassi nei terreni

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about ...

Implementation of Portable Emissions Measurement Systems (PEMS) for the Real-driving Emissions (RDE) Regulation in Europe

Implementation of Portable Emissions Measurement Systems PEMS for the Real-driving Emissions RDE Regulation in Europe

Implementazione di sistemi di misura portatili (PEMS) per il regolamento delle emissioni Real-guida (RDE) in Europa

Vehicles are tested in controlled and relatively narrow laboratory conditions to determine their official emission values and reference fuel consumption. ...

A Flow-through Exposure System for Evaluating Suspended Sediments Effects on Aquatic Life

Un sistema di esposizione di flusso-through per valutare sospeso Sedimenti Effetti sulla vita acquatica

This paper describes the Fish Larvae and Egg Exposure System (FLEES). The flow-through exposure system is used to investigate the effects of suspended ...

Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

Tecniche per lo studio dell'anatomia del sistema visivo Ant

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

Isolation and Analysis of Microbial Communities in Soil, Rhizosphere, and Roots in Perennial Grass Experiments

Isolamento ed analisi di comunità microbiche nel suolo, rizosfera e radici negli esperimenti di erba perenne

Plant and soil microbiome studies are becoming increasingly important for understanding the roles microorganisms play in agricultural productivity. The ...