Name: extraction, labeling, and purification of lineage-specific cells from human antral follicles
Uploaded: 2022-11-30T13:40:00
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著者らは、クイニー・ビクトリーナ・ネリ研究奨学生賞(D.J.)と劉鴻慶研究奨学生賞(L.M.)からの支援を認めています。N.L.Gは、NYSTEM幹細胞および再生医療ポスドクトレーニング助成金によってサポートされています。

マウスを含むすべての手順は、ワイルコーネル医学の施設動物管理および使用委員会(IACUC)によって承認されました。卵巣組織を用いたすべての異種移植実験は、関連するガイドラインおよび規制に従って実施された。両方の卵巣は、放射線/化学療法の病歴がなく、内分泌または生殖状態の病歴が記録されていない14歳の脳死臓器提供者から分離されました。ワイルコーネル医学の治験審査委...

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	<li>Aghadavod, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+granulosa+cells+from+follicular+fluid;+Applications+in+biomedical+and+molecular+biology+experiments.">Isolation of granulosa cells from follicular fluid; Applications in biomedical and molecular biology experiments.</a> Advanced Biomedical Research. 4, 250 (2015).</li><li>Man, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+human+antral+follicles+of+xenograft+versus+ovarian+origin+reveals+disparate+molecular+signatures.">Comparison of human antral follicles of xenograft versus ovarian origin reveals disparate molecular signatures.</a> Cell Reports. 32 (6), 108027 (2020).</li><li>Schmidt, K. L., Ernst, E., Byskov, A. G., Nyboe Andersen, A., Yding Andersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+primordial+follicles+following+prolonged+transportation+of+ovarian+tissue+prior+to+cryopreservation.">Survival of primordial follicles following prolonged transportation of ovarian tissue prior to cryopreservation.</a> Human Reproduction. 18 (12), 2654-2659 (2003).</li><li>Jensen, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+of+transplantations+of+cryopreserved+ovarian+tissue+to+41+women+in+Denmark.">Outcomes of transplantations of cryopreserved ovarian tissue to 41 women in Denmark.</a> Human Reproduction. 30 (12), 2838-2845 (2015).</li><li>Newton, H., Aubard, Y., Rutherford, A., Sharma, V., Gosden, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+temperature+storage+and+grafting+of+human+ovarian+tissue.">Low temperature storage and grafting of human ovarian tissue.</a> Human Reproduction. 11 (7), 1487-1491 (1996).</li><li>Man, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+superphysiologic+AMH+promotes+premature+luteinization+of+antral+follicles+in+human+ovarian+xenografts.">Chronic superphysiologic AMH promotes premature luteinization of antral follicles in human ovarian xenografts.</a> Science Advances. 8 (9), 7315 (2022).</li><li>Gougeon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+follicular+growth+in+the+human:+A+model+from+preliminary+results.">Dynamics of follicular growth in the human: A model from preliminary results.</a> Human Reproduction. 1 (2), 81-87 (1986).</li><li>Richards, J. S., Ren, Y. A., Candelaria, N., Adams, J. E., Rajkovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+follicular+theca+cell+recruitment,+differentiation,+and+impact+on+fertility:+2017+update.">Ovarian follicular theca cell recruitment, differentiation, and impact on fertility: 2017 update.</a> Endocr Rev. 39 (1), 1-20 (2018).</li><li>Asiabi, P., Dolmans, M. M., Ambroise, J., Camboni, A., Amorim, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+differentiation+of+theca+cells+from+ovarian+cells+isolated+from+postmenopausal+women.">In vitro differentiation of theca cells from ovarian cells isolated from postmenopausal women.</a> Human Reproduction. 35 (12), 2793-2807 (2020).</li><li>Dalman, A., Totonchi, M., Valojerdi, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+characterization+of+human+theca+stem+cells+and+their+differentiation+into+theca+progenitor+cells.">Establishment and characterization of human theca stem cells and their differentiation into theca progenitor cells.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 119 (12), 9853-9865 (2018).</li></ol>

卵巣卵胞内の細胞多様性のより良い分解能は、いくつかの理由で臨床的に重要です。上記のプロトコルを、胞状期の卵胞内に存在する固有の表現型サブタイプの分離に適用する際には、いくつかの要因を考慮する必要があります。第一に、胞状卵胞の由来となる卵巣組織の健全性と生存率は、細胞の品質と下流への適用の成功を決定する上で重要です。これは、虚血間隔を最小限に抑え、迅?...

ヒト卵巣の主要な機能要素は卵胞であり、卵母細胞の成長と発達を支配する。卵胞細胞を単離するためのプロトコルは、 体外 受精の文脈で十分に確立されていますが、これらは卵母細胞回収の時点で黄体化卵胞から細胞を収集する場合にのみ適切です1。私たちは、天然の卵巣または異種移植された卵巣組織から生じるさまざまな発生段階で、胞状卵胞から離散細胞集団を分離できるようにするプロトコルを開発しました2。卵母細胞の培養に対する卵胞常在細胞の寄与が非常に重要であるというコンセンサスがありますが、胞期卵胞に存在する固有の表現型サブタイプを前向きに特定して抽出した研究はほとんどありません。異なる発生段階における特殊細胞間の分化階層とシグナル伝達のより深い理解は、恒常性および病理学的条件下での卵巣生理学の理解を広げる可能性があります。さらに、個別の細胞サブタイプと卵胞の成長/成熟へのそれらの分子的寄与の識別は、卵母細胞の成熟を促進し、および/または内分泌機能障害を治療するために卵巣機能を再構築する ex vivo 代理を生成する手段を提供する可能性があります。 
卵巣内のそれぞれのユニークな細胞型は、卵胞の複雑な機能に寄与し、卵胞に含まれる卵母細胞の成長と成熟を促進するための個別のミニ器官として効果的に機能します。卵胞の中心である卵母細胞は、顆粒膜細胞(GC)の連続層に直接包まれており、テカ細胞(TC)は卵母細胞およびGCと結合して卵胞単位を構成する細胞の二次層を形成します。GCとTCは2つのグループに分類されますが、多数のサブタイプが含まれています。GCは卵胞内の位置に従って分類されます。卵母細胞を囲むGCと基底膜に隣接するGCは、それぞれ卵母性GCと壁状GCとして指定され、これらのサブタイプは固有のトランスクリプトームシグネチャを示します。TCには、ステロイド産生性、代謝性、および構造的サポートを提供するように機能する多数のサブタイプがあります。内皮細胞、血管周囲細胞、および免疫細胞は、正常な卵巣生理機能を維持する上で中心的な役割を果たします。卵巣間質は、卵胞の成長の基質として機能するだけでなく、TCを生じさせる前駆細胞の供給源を提供する可能性があります。卵巣内の細胞サブタイプのこの多層複合体は、内分泌器官と生殖器官の両方としての機能を可能にするものです。
この論文は、胞状卵胞からの顆粒膜、テカ、間質、内皮、および造血細胞の同定と精製のためのプロトコルを提示します。このプロトコルを利用して、これらの卵巣細胞を分離し、シングルセルシーケンシングを使用して分析し、その後、さまざまな発生段階の卵胞で特異的染色を行いました。このプロトコルは、複製可能な簡単な方法論を提供し、卵巣の生理学と病理学の両方の高解像度分析を可能にします。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chemicals, reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic-Antimycotic 100x</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15240062</td>
			<td>Anti-Anti</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antifade Mountant solution</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>&#160;P36930</td>
			<td>ProLong Gold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase from&#160;Clostridium histolyticum</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C 2674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase II, powder</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>17105041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>D 2650</td>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS, no calcium, no magnesium</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>14190144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enzyme Cell Detachment Medium&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>00-4555-56</td>
			<td>Accutase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum, heat-inactivated</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10438026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hanks&#8242; Balanced Salt solution</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>14175079</td>
			<td>no calcium, no magnesium, no phenol red</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#8217;s L-15 medium&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11415064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Saline</td>
			<td>Quality Biological</td>
			<td>114-055-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>S 1888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezing Medium (100 mL, filtered through a 0.2 micron filter)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>- 69.64 mL of Leibovitz&#39;s L-15</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>- 17.66 mL of fetal bovine serum</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>- 3.42 g of sucrose</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>- 10.65 mL of DMSO</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>- 1 mL of antibiotic-antimycotic</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Plasticware and Supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well Clear Flat Bottom Not Treated&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>351146</td>
			<td>Falcon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer 100 &#181;m</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>352360</td>
			<td>Corning, Falcon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryovials</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>377267</td>
			<td>CryoTube 1.8 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish, D x H 150 mm x 25 mm&#160;</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>CLS430599</td>
			<td>60EA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round-Bottom Polystyrene Test Tubes with Cell Strainer Snap Cap, 5 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>352235</td>
			<td>Corning, Falcon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Filter/Storage Bottle System, 0.22 &#181;m</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibodies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ANPEP</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>301703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD34</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>FAB7227A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>304019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD55</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>311306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD 99</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>371308</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVRL</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>340404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>long forceps (~150 mm length)</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-000-128</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>medium forceps (~110 mm length)</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-000-157</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>number 21 scalpel</td>
			<td>Andwin Scientific&#160;</td>
			<td>EF7281H</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>number 11 scalpel</td>
			<td>Andwin Scientific</td>
			<td>&#160;FH/CX7281A</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sharp fine curved scissors</td>
			<td>Roboz Surgical</td>
			<td>RS-5881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSJazz Flourescence activated cell sorter</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 710 META Confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction, labeling, and purification of lineage-specific cells from human antral follicles

卵母細胞の活性化、成長、発達、および成熟は、卵巣の複数の細胞タイプ間だけでなく、視床下部/下垂体/卵巣回路内の複数の制御ポイント間で調整される複雑なプロセスです。卵巣内では、複数の特殊な細胞型が卵巣卵胞内の卵母細胞と密接に関連して成長します。これらの細胞の生物学は、生殖補助医療の副産物として容易に回収される後の段階でよく説明されています。しかし、卵巣から直接分離された小さな胞状卵胞の詳細な分析は、ヒト卵巣組織の不足と生殖補助治療を受けている患者の卵巣へのアクセスの制限のために一般的に行われていません。 
皮質ストリップの凍結保存のために卵巣全体を処理し、卵巣常在細胞を同時に同定/分離するこれらの方法は、胞状卵胞発生の初期段階の高解像度分析を可能にします。胞状卵胞を酵素的に処理し、顆粒膜細胞、テカ細胞、内皮細胞、造血細胞、間質細胞を分離することにより、個別の細胞タイプを分離するためのプロトコルを示します。胞状卵胞からさまざまなサイズと発生段階で細胞を分離することで、卵胞の成長と卵巣生理機能を促進する細胞および分子メカニズムの包括的な分析が可能になり、卵胞の微小環境を再現するために in vitro で培養できる生存細胞の供給源が提供されます。

卵巣表面から卵胞を分離し、酵素処理してGCと胞状腔周囲のテカ細胞と間質細胞を分離しました。細胞を回収し、細胞画分を胞状卵胞(直径0.5 mmから4 mmの範囲)からFACSによって純度>95%まで選別しました(図1)。
ヒト胞状卵胞内のユニークな細胞画分を標識および精製するために、酵素消化とフローサイトメトリーソーティングを組み合わせました。我?...

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Extraction, Labeling, and Purification of Lineage-Specific Cells from Human Antral Follicles

ここでは、胞状卵胞からの卵巣細胞の同定と精製のためのプロトコルを提示します。皮質ストリップの凍結保存のために卵巣全体を処理すると同時に、顆粒膜、テカ、内皮、造血、間質細胞など、複数の卵胞常在細胞タイプを遊離させるために酵素的に処理される無傷の胞状卵胞を採取する方法について詳しく説明しています。

ヒト胞状卵胞からの系統特異的細胞の抽出、標識、精製

The activation, growth, development, and maturation of oocytes is a complex process that is coordinated not just between multiple cell types of the ovary ...

ここで示すプロトコルは、胞状の初期段階から卵巣卵胞に存在する特定の細胞系譜の標識と単離を可能にし、それによって高分解能の分析と培養を可能にします。この非常に正確なアプローチでは、蛍光色素標識抗体の組み合わせを利用して、個別の顆粒膜、間質、およびλ骨系統の間で堅牢かつ特異的に発現する細胞表面マーカーを標的としています。卵巣を滅菌ペトリ皿に入れることから始め、冷やした培地を注ぎ、組織を水和させ、卵巣が培地に半分沈んでいることを確認します。縫合糸やその他の材料を取り除き、残っている周囲の組織を卵巣から解剖します。胞状卵胞を分離するには、個々の卵胞を識別し、健康な卵胞を選択します。血液で満たされた、暗い、または非対称の卵胞を除外します。メスを使用して卵巣から選択した胞状卵胞を分離し、前庭を無傷に保ち、卵胞を囲む皮質組織を切除します。摘出した無傷の胞状卵胞をそれぞれ6ウェルプレートの1ウェルに入れる。皿の下に置かれた定規を使用して、説明のために卵胞の直径を決定します。メスを使用して、無傷の胞状卵胞を二等分して胞状腔を評価し、6ミリリットルの酵素細胞剥離培地を加えてから、プレートを加湿インキュベーターで10分間インキュベートします。インキュベーション後、20%ウシ胎児血清(FBS)を含む6ミリリットルの利用可能な培地を加え、P-1000マイクロピペットで二分した卵胞上で激しいピペッティングを繰り返して培地で洗い流します。次に、培地を集めて100ミリメートルのフィルターに通します。ろ過した上清を300G、摂氏4度で3分間遠心分離してから、上清を吸引します。残りの組織を、30分間のインキュベーション前に、1ミリリットル当たり100単位のコラゲナーゼと100リットル当たり1単位のディスパーゼの混合物に入れ、平衡生理食塩水で希釈した。10分後と20分後に2回、粉砕して激しくピペッティングすることにより、組織を機械的に破壊します。完了したら、組織を回収し、ピペッティング、P-1000マイクロピペットチップ、および100ミリリットルのフィルターで濾します。ひずみのある組織を300 G、摂氏4度で3分間遠心分離してから、テカ細胞と間質細胞が濃縮された細胞ペレットを氷上に置いて標識とFACSを行います。顆粒膜細胞およびtheca細胞を同定するには、細胞ペレットを直接結合抗体を含むブロッキング溶液に再懸濁し、摂氏4度で10分間インキュベートします。細胞を洗浄および遠心分離した後、4-6ジアミジノ-2-フェニルインドール(DAPI)を含むFACSバッファーに細胞を再懸濁し、細胞懸濁液をFACS機器に通して、ゲーティング用の蛍光色素標識抗体の蛍光強度を使用して、細胞の小さな集団を捕捉します。卵巣の残りの部分を二等分します。湾曲した細かいハサミとメスを使用して髄質を切除し、卵巣皮質への損傷を避けます。最小限の髄質が残るまで穏やかに掻き取ることによって卵巣皮質の処理と菲薄化を続けます。皮質組織を卵巣の長さに沿って幅2〜3ミリメートルのストリップに分割します。卵巣組織を凍結する場合は、凍結溶液を含む各冷却極低温バイアルに1つの皮質ストリップを配置します。皮質ストリップを含む極低温バイアルを回転プレート上で摂氏4度で20分間振とうする。液体窒素に短時間浸した綿の先端で各クライオバイアルに触れることにより、核氷結晶を形成します。卵巣細胞を回収し、細胞画分を胞状卵胞FACSから純度95%以上に選別した。PVRL1またはネクチンで特異的に標識されたCD99顆粒膜細胞は、胞状卵胞のサイズが大きくなるにつれて、卵胞顆粒膜細胞コンパートメントにますます局在しました。エンドグリンまたはCD55に対する抗体がすべての間質細胞およびテカ細胞を特異的に画定し、アラニンアミノペプチダーゼがアンドロゲンテカ細胞によって特異的に発現することが見られた。細胞をCD99に対する抗体で標識して顆粒膜細胞を同定し、CD45に対する抗体を用いて造血細胞を除外した。PVRL1に対する抗体は、顆粒膜細胞集団を卵胞および壁コンパートメントに分離した。コラゲナーゼディスパーゼによる酵素消化後、CD55、CD34、およびアラニンアミノペプチダーゼに対する抗体で標識された細胞調製物は、テカ細胞集団から内皮細胞を除外して、すべての間質細胞またはテカ細胞またはアンドロゲンテカ細胞の捕捉を可能にしました。最初の卵胞の分離中に卵胞の境界の周りの安全なマージン内で切断することにより、卵胞の前庭を乱さないように特に注意してください。この手順の下流では、細胞を分子分析または診断分析に利用したり、毒物学研究、実験分析、または卵胞微小環境の再現のためにin vitroで培養したりすることができます。今日まで、これらの方法は、卵巣が関与する内分泌障害をモデル化し、卵胞関連細胞の新しい亜集団を特定するために使用されていました。

Research

JoVE Journal

Biology

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Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

クーマシー有機溶媒および酢酸のないG - 250でゲル中のタンパク質の染色

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Purification of Mitochondria from Yeast Cells

酵母細胞からミトコンドリアの精製

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

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ヒトおよびサル毛髪から抽出およびコルチゾールの分析

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Efficient Production and Purification of Recombinant Murine Kindlin-3 from Insect Cells for Biophysical Studies

生物物理学研究のための昆虫細胞からの効率的な生産と組換えマウスKindlin-3の精製

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Visualization and Quantification of Mesenchymal Cell Adipogenic Differentiation Potential with a Lineage Specific Marker

可視化と系統特異的マーカーと間葉系細胞脂肪細胞の微分の潜在性の定量化

Several dyes are currently available for use in detecting differentiation of mesenchymal cells into adipocytes. Dyes, such as Oil Red O, are cheap, easy ...

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Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Scalable Isolation and Purification of Extracellular Vesicles from Escherichia coli and Other Bacteria

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大腸菌およびその他の細菌からの細胞外小胞のスケーラブルな単離および精製(英語)

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