Name: a high-throughput platform for culture and 3d imaging of organoids
Uploaded: 2022-10-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A High-Throughput Platform for Culture and 3D Imaging of Organoids at JoVE.com

该研究得到了新加坡总理办公室国家研究基金会在其卓越研究和技术企业校园（CREATE）计划下支持的CALIPSO项目的支持。V.V.感谢NRF调查员NRF-NRFI2018-07，教育部3级MOE2016-T3-1-005，MBI种子资金和ANR ADGastrulo的支持。A.B.和G.G.感谢MBI核心资金的支持。A.B.感谢Andor Technologies借用BC43显微镜。

注意：本协议的第一部分详细介绍了细胞培养装置的微细加工。带有金字塔形空腔的原始主模具可以在内部生产 - 如果有微加工设施 - 或外包给外部公司。这项工作中使用的主要模具是内部生产的，制造工艺步骤在其他地方描述11，13。模具微细加工的基本协议可在 补充文件1中找到。关键：步骤 1 到 6 中的操作需要在无尘环境中进行。层流...

<ol>
	<li>Kim, J., Koo, B. -. K., Knoblich, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+organoids:+model+systems+for+human+biology+and+medicine.">Human organoids: model systems for human biology and medicine.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 21 (10), 571-584 (2020).</li><li>Takebe, T., Wells James, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+by+design.">Organoids by design.</a> Science. 364 (6444), 956-959 (2019).</li><li>Kratochvil, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+materials+for+organoid+systems.">Engineered materials for organoid systems.</a> Nature Reviews Materials. 4 (9), 606-622 (2019).</li><li>Rossi, G., Manfrin, A., Lutolf, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+and+potential+in+organoid+research.">Progress and potential in organoid research.</a> Nature Reviews Genetics. 19 (11), 671-687 (2018).</li><li>O'Connell, L., Winter, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+past+learning+and+future+directions.">Organoids: past learning and future directions.</a> Stem Cells and Development. 29 (5), 281-289 (2020).</li><li>Vives, J., Batlle-Morera, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+challenge+of+developing+human+3D+organoids+into+medicines.">The challenge of developing human 3D organoids into medicines.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 11 (1), 72 (2020).</li><li>Busslinger, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+and+challenges+of+patient-derived+organoids+in+guiding+the+multimodality+treatment+of+upper+gastrointestinal+malignancies.">The potential and challenges of patient-derived organoids in guiding the multimodality treatment of upper gastrointestinal malignancies.</a> Open Biology. 10 (4), 190274 (2020).</li><li>Lukonin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+landscape+of+intestinal+organoid+regeneration.">Phenotypic landscape of intestinal organoid regeneration.</a> Nature. 586 (7828), 275-280 (2020).</li><li>Rios, A. C., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+organoids:+a+bright+future+ahead.">Imaging organoids: a bright future ahead.</a> Nature Methods. 15 (1), 24-26 (2018).</li><li>Dekkers, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+3D+imaging+of+fixed+and+cleared+organoids.">High-resolution 3D imaging of fixed and cleared organoids.</a> Nature Protocols. 14 (6), 1756-1771 (2019).</li><li>Galland, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+high-+and+super-resolution+imaging+using+single-objective+SPIM.">3D high- and super-resolution imaging using single-objective SPIM.</a> Nature Methods. 12 (7), 641-644 (2015).</li><li>Beghin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+content+3D+imaging+method+for+quantitative+characterization+of+organoid+development+and+phenotype.">High content 3D imaging method for quantitative characterization of organoid development and phenotype.</a> bioRxiv. , (2021).</li><li>Beghin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+high-speed+3D+imaging+of+organoid+cultures+with+multi-scale+phenotypic+quantification.">Automated high-speed 3D imaging of organoid cultures with multi-scale phenotypic quantification.</a> Nature Methods. 19 (7), 881-892 (2022).</li></ol>

本文描述了微孔培养皿的制备方法，该培养皿允许高密度类器官培养和分化。由于微腔的几何形状和排列，可以在单个板中长时间（数周或更长时间）培养和染色数千个球体，几乎没有材料损失。相比之下，细胞培养板上4 mm x 2 mm的区域可以包含与单个384孔板一样多的球状体，面积为12 cm x 8 cm。 
微腔的规律分布和用作基质的扁平标准盖玻片能够以 3D 方式监测数千个活的或固?...

在器官型3D细胞培养物（以下简称类器官）中，干细胞分化并自组织成与真实器官具有强烈形态和功能相似性的空间结构。类器官为研究人类生物学和体外发育提供了有价值的模型1，2，3。越来越多的模型正在开发中，这些模型可以模仿肝脏，大脑，肾脏，肺和许多其他器官2，4，5。类器官的分化是通过在精确的时间序列中添加可溶性生长因子和细胞外基质来指导的。然而，与器官形成鲜明对比的是，类器官的发育是相当异质的。
除了众多生物学挑战6，7之外，类器官培养在细胞培养方法、转录组学表征和成像方面也带来了技术挑战。体内器官发育发生在生物环境中，导致细胞排列的高度刻板的自组织。任何表型改变都可以用作诊断患病状态的代理。相比之下，类器官在与细胞培养条件兼容的最小受控微环境中体外发育，导致每个个体类器官的发育路径和形状形成存在很大差异。
最近的一项研究8表明，类器官形状（表型描述符）的定量成像与一些遗传标记的评估相结合，可以定义表型发育景观。可以说，将类器官中基因组表达的多样性与其表型行为联系起来的能力是释放器官型培养物全部潜力的重要一步。因此，它乞求开发专用的高内涵成像方法，允许在3D9，10中表征亚细胞，多细胞和全类器官尺度的类器官特征。
我们开发了一种多功能高内涵筛选（HCS）平台，允许简化类器官培养（从分离的人胚胎干细胞[hESCs]，人诱导多能干细胞[hIPSC]或原代细胞到3D，多细胞，分化的类器官）和快速，非侵入性的3D成像。它集成了下一代微型化3D细胞培养设备，称为JeWells芯片（以下简称 芯片 ），其中包含数千个排列良好的微孔，两侧是45°镜，可通过单物镜光片显微镜进行快速，3D，高分辨率成像11。该系统与任何标准的商用倒置显微镜兼容，可在 <1 小时内以亚细胞分辨率对 300 个类器官进行 3D 成像。
细胞培养装置的微细加工从现有的微结构模具开始，该模具包含数百个微金字塔（图1A），其方形底座和相对于底座45°的侧壁。 图1C 显示了这种结构的电子显微镜（EM）图像。模具本身由聚（二甲基硅氧烷）（PDMS）制成，可以使用标准的软光刻程序制成具有相应特征（作为型腔）的主模具（此处未显示）的复制铸件。主模具可以通过不同的程序生产。用于该协议的协议是使用硅湿法蚀刻制成的，如Galland等人所报道的那样。11;主模具的制造程序对于该协议并不重要。金字塔排列成方形阵列，X 和 Y 方向的间距相同（在这种情况下，间距为 350 μm）。
作为例证，发表了概念验证实验12 ，以证明该芯片允许长期培养（数月）和分化方案，同时精确定义孔中初始细胞的数量。使用标准明场和3D光片荧光显微镜可以自动实时监测大量类器官的个体发育。此外，可以检索类器官以进行进一步的生物学研究（例如，转录组学分析）。本文概述了细胞培养盖玻片制造的详细方案、荧光显微镜的接种和染色程序以及类器官的检索。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-Propanol</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>AA19397K7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>AA19392K7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BC43 Benchtop Confocal Microscope</td>
			<td>Andor Technology</td>
			<td></td>
			<td>spinning disk confocal microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin&#160;</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>37525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffered oxide etching solution</td>
			<td>Merck</td>
			<td>901621-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CEE Spin Coater</td>
			<td>Brewer Science</td>
			<td>200X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Developer AZ400K</td>
			<td>Merck</td>
			<td>18441223164</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DI Milliq water</td>
			<td>Millipore</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10082147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass coverslips</td>
			<td>Marienfled</td>
			<td>117650</td>
			<td>1.5H, round 25 mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hepes</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15630080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris software</td>
			<td>BitPlane</td>
			<td></td>
			<td>image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted Transmission optical microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>TSF100-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labsonic M</td>
			<td>Sartorius Stedium Biotech</td>
			<td></td>
			<td>Ultrasonic homogenizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipidure</td>
			<td>NOF America</td>
			<td>CM5206</td>
			<td>bio-mimetic copolymer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOA73</td>
			<td>Norland Products</td>
			<td>17-345</td>
			<td>UV curable adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin</td>
			<td>Thermofisher scientific&#160;</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Alexa Fluor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Solution</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>10010023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photo Resist AZ5214E</td>
			<td>Merck</td>
			<td>14744719710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pico Plasma tool</td>
			<td>Diener Electronic GmbH + Co. KG</td>
			<td>Pico Plasma</td>
			<td>For O2 plasma treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RapiClear 1.52</td>
			<td>Sunjin lab</td>
			<td>RC 152001</td>
			<td>water-soluble clearing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RCT Hot Plate/Stirrer</td>
			<td>IKA (MY)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reactive Ion Etching tool</td>
			<td>Samco Inc. (JPN)</td>
			<td>RIE-10NR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11875093</td>
			<td>culture medium for HCT116 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>4019862</td>
			<td>Polydimethylsiloxane or in short, PDMS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloro(1H,1H,2H,2H-perfluorooctyl)silane</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>448931-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T9284</td>
			<td>surfactant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>15400054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic Cleaner</td>
			<td>Bransonic</td>
			<td>CPX2800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV-KUB 2</td>
			<td>KLOE</td>
			<td></td>
			<td>UV-LED light source, 365 nm wavelength, 35 mW/cm2 power density</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV mask aligner</td>
			<td>SUSS Microtec Semiconductor (DE)</td>
			<td>MJB4</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a high-throughput platform for culture and 3d imaging of organoids

目前，不同分辨率尺度的大量三维（3D）器官型培养物（类器官）的表征受到标准成像方法的限制。该协议描述了一种制备微加工类器官培养芯片的方法，该方法可在用户友好的仪器上实现多尺度，3D实时成像，需要最少的操作，并且能够达到300个类器官/ h的成像通量。这些培养芯片与空气物镜和浸没物镜（空气、水、油和硅）以及各种常见显微镜（例如转盘、点扫描仪共聚焦、广视场和明场）兼容。此外，它们可以与光片模式一起使用，例如单物镜、单平面照明显微镜（SPIM）技术（soSPIM）。 
此处描述的方案给出了制备微加工培养芯片以及类器官培养和染色的详细步骤。只需要很短的时间就可以熟悉，消耗品和设备可以在正常的生物实验室中轻松找到。在这里，3D成像功能将仅使用商业标准显微镜（例如，用于3D重建的转盘和用于常规监测的宽视场显微镜）进行演示。

图8F 显示了成功制造后细胞培养盖玻片的典型方面。紫外光固化的粘合剂层看起来很平坦，并且很好地粘附在盖玻片上。如果盖玻片上的粘合层过度固化，或者如果平坦的PDMS基材的去除不正确（如图 8G，H所示），则盖玻片上的粘合剂层的转移可能会失败。在这两种情况下，故障都是显而易见的，因为没有纹理薄膜转移到盖玻片上。
<p c...

Watch this Scientific Journal Video about A High-Throughput Platform for Culture and 3D Imaging of Organoids at JoVE.com

A High-Throughput Platform for Culture and 3D Imaging of Organoids

本文提出了一种新型培养基质的制造方案，每mm2具有数百个微容器，其中可以使用高分辨率显微镜培养和观察类器官。还详细介绍了细胞接种和免疫染色方案。

用于类器官培养和 3D 成像的高通量平台

The characterization of a large number of three-dimensional (3D) organotypic cultures (organoids) at different resolution scales is currently limited by ...

该协议展示了一种微质构细胞培养皿，专为数百种具有材料知识并与显微镜完全兼容的类器官的生长而设计。我们的技术可以有效地生成数千个类器官，与长期成像和长期细胞培养完全兼容。该协议对生物医学应用（如药物筛选管道和癌症研究领域）具有浓厚的兴趣。该协议中介绍的技术在具有实验室程序和光学显微镜经验的任何人尝试几次后都很容易掌握。首先，将PDMS模具的一小部分切割成最终设备所需的尺寸。平行于阵列的 XY 方向切割它们。将准备好的PDMS模具骰子之一面朝下放在平面PDMS部分上。然后使用移液器在模具的一侧加入约0.1至0.2毫升紫外线固化粘合剂。使用倒置光学显微镜在10X放大倍率下跟踪腔内液体的进展。将粘合剂暴露在紫外线下以固化。根据文本手稿中所述的紫外线源的功率密度调整曝光时间。在一边缘使用过量的粘合剂，用手指轻轻按压将固化的粘合剂固定在平坦的PDMS基材上。同时，使用镊子将模具的一角捏住被压住的同一边缘，然后慢慢剥落模具，同时确保纹理薄膜不被抬起。使用剃须刀片修剪多余的粘合剂和 PDMS 基材，使固化、纹理和粘合剂层平放在 PDMS 上，多余的基材仅在一个边缘上。用短氧等离子体工艺处理干净的盖玻片，以提高其亲水性。等离子活化后，通过将盖玻片放在标准旋涂机的真空卡盘上并在盖玻片的中心倒入一小滴粘合剂，对薄层的UV固化粘合剂进行旋转涂覆。按照文本手稿中的说明运行旋涂工艺。如果没有旋涂，请使用移液管将大约 0.1 毫升紫外线固化粘合剂滴在干净的盖玻片上。取第二张盖玻片并将其放在第一张盖玻片的顶部，使液体粘合剂均匀地散布在两个盖玻片之间。一旦粘合剂到达盖玻片的边缘，通过将一个滑过另一个来轻轻地将它们分开。分离后，两个盖玻片将完全涂上一层薄薄的液体粘合剂。旋涂后，通过暴露于紫外线对粘合剂进行预固化。根据所用紫外线源的功率密度调整曝光时间。取其中一层带纹理的薄膜，并将其与涂有粘合剂的盖玻片接触。确保部分固化的粘合剂和纹理薄膜之间的接触尽可能均匀。在这个阶段，盖玻片上的粘合剂应足够牢固，以避免再流，并且可以通过轻轻按压盖玻片来优化接触。将盖玻片暴露在紫外线下，直到涂层粘合剂层完全固化。这将密封盖玻片上的纹理薄膜，并在周边空腔之间提供防漏隔离。然后使用镊子将PDMS捏在修剪后留下多余材料的边缘，并剥离PDMS平坦的基板。此步骤使带纹理的薄膜层能够粘附在盖玻片上，并在顶部开放通道以进行细胞接种。在细胞接种之前，在手稿中所述的用生物识别共聚物钝化的设备上，将一毫升无菌PBS分配到35毫米细胞培养培养皿中。使用真空室用无菌PBS对培养皿进行脱气10分钟，然后进行几轮移液以去除所有气泡。用无菌培养基替换PBS，并在细胞培养罩下用紫外线对板进行30分钟的灭菌。按照文本手稿中所述的针对目标细胞的胰蛋白酶消化或细胞悬液制备建议制备细胞悬液。在推荐的细胞培养基中计数并将细胞浓度调整至每毫升500， 000个细胞。从35毫米细胞培养皿中取出PBS缓冲液，然后分配一毫升调整后的细胞悬液。将细胞培养皿放回细胞培养箱中10分钟。大约 80 到 100 个细胞将进入每个周边腔。孵育约10分钟后，从培养箱中回收细胞培养皿并轻轻吸出细胞悬液以去除未捕获的细胞。向培养皿中加入一毫升培养基，然后将其放回细胞培养箱中。或者，要在类器官在孔中生长后取回类器官，请使用镊子将纹理粘合剂层捏在切割边缘，然后将其从玻璃盖玻片上轻轻剥离，但将其浸入培养基中。增加生物识别共聚物的浓度增加了涂层厚度。细胞培养皿的完全脱气对于去除困在周边腔中的气泡至关重要。类器官在培养的第2天和第15天后形成。旋转盘共聚焦显微镜显示了类器官的代表性图像和3D重建。在准备培养皿时，重要的是要注意模具或基材堆叠的组装，并确保纹理薄膜和盖玻片之间的良好接触。我们的微腔提供的遏制和没有材料损失引起了有兴趣研究微重力对类器官稳态影响的空间生物学研究人员的注意。

Research

JoVE Journal

Biology

A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform

一个多室中枢神经系统的神经胶质细胞共培养的微流体平台

We present a novel multi-compartment neuron co-culture microsystem platform for in vitro CNS axon-glia interaction research, capable of conducting up to ...

科研

生物学

Lensless On-chip Imaging of Cells Provides a New Tool for High-throughput Cell-Biology and Medical Diagnostics

无透镜片上的细胞成像提供了一种高通量细胞生物学和医疗诊断的新工具

Conventional optical microscopes image cells by use of objective lenses that work together with other lenses and optical components. While quite ...

A High Throughput Screen for Biomining Cellulase Activity from Metagenomic Libraries

一个Biomining从宏基因组库的纤维素酶的活性高通量筛选

Cellulose, the most abundant source of organic carbon on the planet, has wide-ranging industrial applications with increasing emphasis on biofuel ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

生化和高通量的微观评估的脂肪含量<em&gt;秀丽隐杆线虫</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

High Throughput Microinjections of Sea Urchin Zygotes

海胆受精卵的高通量显微注射

Microinjection into cells and embryos is a common technique that is used to study a wide range of biological processes. In this method a small amount of ...

High-throughput Image Analysis of Tumor Spheroids: A User-friendly Software Application to Measure the Size of Spheroids Automatically and Accurately

肿瘤细胞球体的高通量图像分析：一个用户友好的软件应用来测量球体的大小自动准确

The increasing number of applications of three-dimensional (3D) tumor spheroids as an in vitro model for drug discovery requires their adaptation to ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

恢复成年斑马鱼的心脏的高通量应用

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

High-throughput Screening for Chemical Modulators of Post-transcriptionally Regulated Genes

高通量筛选转录后调控基因的化学调节剂

Both transcriptional and post-transcriptional regulation have a profound impact on genes expression. However, commonly adopted cell-based screening assays ...

qPCRTag Analysis - A High Throughput, Real Time PCR Assay for Sc2.0 Genotyping

qPCRTag分析 - 高通量，实时定量PCR检测方法的基因分型Sc2.0

The Synthetic Yeast Genome Project (Sc2.0) aims to build 16 designer yeast chromosomes and combine them into a single yeast cell. To date one synthetic ...