Name: a high-throughput platform for culture and 3d imaging of organoids
Uploaded: 2022-10-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A High-Throughput Platform for Culture and 3D Imaging of Organoids at JoVE.com

Исследование поддерживается проектом CALIPSO, поддерживаемым Национальным исследовательским фондом, канцелярией премьер-министра Сингапура, в рамках его программы Campus for Research Excellence and Technological Enterprise (CREATE). V.V. признает поддержку исследователя NRF NRF-NRFI2018-07, MOE Tier 3 MOE2016-T3-1-005, начального финансирования MBI и ANR ADGastrulo. A.B. и G.G. признают поддержку со стороны основного финансирования MBI. A.B. выражает признательность Andor Technologies за предоставление в аренду микроскопа BC43.

ПРИМЕЧАНИЕ: В первой части этого протокола подробно описывается микропроизводство устройства для культивирования клеток. Оригинальная первичная форма с пирамидальными полостями может быть изготовлена собственными силами, если имеются микроизготовительные установки, или передана н...

<ol>
	<li>Kim, J., Koo, B. -. K., Knoblich, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+organoids:+model+systems+for+human+biology+and+medicine.">Human organoids: model systems for human biology and medicine.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 21 (10), 571-584 (2020).</li><li>Takebe, T., Wells James, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+by+design.">Organoids by design.</a> Science. 364 (6444), 956-959 (2019).</li><li>Kratochvil, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+materials+for+organoid+systems.">Engineered materials for organoid systems.</a> Nature Reviews Materials. 4 (9), 606-622 (2019).</li><li>Rossi, G., Manfrin, A., Lutolf, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+and+potential+in+organoid+research.">Progress and potential in organoid research.</a> Nature Reviews Genetics. 19 (11), 671-687 (2018).</li><li>O'Connell, L., Winter, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+past+learning+and+future+directions.">Organoids: past learning and future directions.</a> Stem Cells and Development. 29 (5), 281-289 (2020).</li><li>Vives, J., Batlle-Morera, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+challenge+of+developing+human+3D+organoids+into+medicines.">The challenge of developing human 3D organoids into medicines.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 11 (1), 72 (2020).</li><li>Busslinger, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+and+challenges+of+patient-derived+organoids+in+guiding+the+multimodality+treatment+of+upper+gastrointestinal+malignancies.">The potential and challenges of patient-derived organoids in guiding the multimodality treatment of upper gastrointestinal malignancies.</a> Open Biology. 10 (4), 190274 (2020).</li><li>Lukonin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+landscape+of+intestinal+organoid+regeneration.">Phenotypic landscape of intestinal organoid regeneration.</a> Nature. 586 (7828), 275-280 (2020).</li><li>Rios, A. C., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+organoids:+a+bright+future+ahead.">Imaging organoids: a bright future ahead.</a> Nature Methods. 15 (1), 24-26 (2018).</li><li>Dekkers, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+3D+imaging+of+fixed+and+cleared+organoids.">High-resolution 3D imaging of fixed and cleared organoids.</a> Nature Protocols. 14 (6), 1756-1771 (2019).</li><li>Galland, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+high-+and+super-resolution+imaging+using+single-objective+SPIM.">3D high- and super-resolution imaging using single-objective SPIM.</a> Nature Methods. 12 (7), 641-644 (2015).</li><li>Beghin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+content+3D+imaging+method+for+quantitative+characterization+of+organoid+development+and+phenotype.">High content 3D imaging method for quantitative characterization of organoid development and phenotype.</a> bioRxiv. , (2021).</li><li>Beghin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+high-speed+3D+imaging+of+organoid+cultures+with+multi-scale+phenotypic+quantification.">Automated high-speed 3D imaging of organoid cultures with multi-scale phenotypic quantification.</a> Nature Methods. 19 (7), 881-892 (2022).</li></ol>

В данной работе описана процедура изготовления чашки для микроскважинной культуры, которая позволяет культивировать и дифференцировать органоиды высокой плотности. Благодаря геометрии и расположению микрополот, тысячи сфероидов могут быть культивированы и окрашены в одну пластину ...

В органотипических 3D-клеточных культурах, далее называемых органоидами, стволовые клетки дифференцируются и самоорганизуются в пространственные структуры, которые имеют сильное морфологическое и функциональное сходство с реальными органами. Органоиды предлагают ценные модели для изучения биологии человека и развития вне организма 1,2,3. Все большее число моделей разрабатывается, которые имитируют печень, мозг, почки, легкие и многие другие органы 2,4,5. Дифференцировка в органоидах направляется добавлением растворимых факторов роста и внеклеточного матрикса в точной временной последовательности. Однако в отличие от органов, развитие органоидов довольно неоднородно.
Помимо многочисленных биологических проблем 6,7, органоидные культуры также создают технологические проблемы с точки зрения методов культивирования клеток, характеристики транскриптомики и визуализации. Развитие органов in vivo происходит в биологической среде, что приводит к крайне стереотипной самоорганизации клеточных устройств. Любое фенотипическое изменение может быть использовано в качестве прокси для диагностики болезненного состояния. Напротив, органоиды развиваются in vitro в минимально контролируемых микросредах, совместимых с условиями клеточной культуры, что приводит к большой изменчивости пути развития и формирования формы для каждого отдельного органоида.
Недавнее исследование8 показало, что количественная визуализация органоидной формы (дескрипторы фенотипа) в сочетании с оценкой нескольких генетических маркеров позволяет определить фенотипические ландшафты развития. Можно утверждать, что способность соотносить разнообразие геномной экспрессии в органоидах с их фенотипическим поведением является важным шагом на пути к раскрытию всего потенциала органотипических культур. Таким образом, это требует разработки специализированных подходов к визуализации с высоким содержанием, позволяющих характеризовать органоидные особенности в субклеточных, многоклеточных и цельноорганоидных масштабах в 3D 9,10.
Мы разработали универсальную платформу скрининга с высоким содержанием (HCS), позволяющую оптимизировать органоидную культуру (от изолированных эмбриональных стволовых клеток человека [hESCs], индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток [hIPSC] или первичных клеток до 3D, многоклеточных, дифференцированных органоидов) и быструю, неинвазивную 3D-визуализацию. Он интегрирует миниатюрное устройство 3D-культуры клеток следующего поколения, называемое чипом JeWells ( чип ниже), которое содержит тысячи хорошо расположенных микролунок, окруженных зеркалами 45°, которые позволяют быстро получать 3D-изображения с высоким разрешением с помощью однообъективной световой листовой микроскопии11. Совместимая с любым стандартным, коммерческим, инвертированным микроскопом, эта система позволяет визуализировать 300 органоидов в 3D с субклеточным разрешением за <1 ч.
Микропроизводство устройства для культивирования клеток начинается с существующей микроструктурированной формы, которая содержит сотни микропирамид (рисунок 1А) с квадратным основанием и боковыми стенками под углом 45° по отношению к основанию. На рисунке 1С показаны изображения таких структур в электронном микроскопе (ЭМ). Сама форма изготовлена из поли(диметилсилоксана) (PDMS) и может быть изготовлена в виде реплики отливки первичной формы (не показана здесь) с соответствующими характеристиками (в виде полостей) с использованием стандартных мягко-литографических процедур. Первичная форма может быть изготовлена различными процедурами. Тот, который использовался для этого протокола, был сделан с использованием кремниевого влажного травления, как сообщалось в Galland et al. 11; процедура изготовления первичной формы не является критической для этого протокола. Пирамиды расположены в квадратном массиве, с одинаковым шагом для направлений X и Y (в этом случае шаг составляет 350 мкм).
В качестве иллюстрации были опубликованы экспериментальные эксперименты12 , чтобы продемонстрировать, что чип допускает долгосрочную культуру (месяцы) и протоколы дифференцировки, точно определяя количество начальных ячеек в скважинах. Индивидуальное развитие большого количества органоидов может автоматически контролироваться в режиме реального времени с помощью стандартных ярко-полевых и 3D-флуоресцентных микроскопов. Кроме того, органоиды могут быть извлечены для выполнения дальнейших биологических исследований (например, транскриптомного анализа). В этой статье описываются подробные протоколы изготовления покровных пластинок клеточной культуры, процедура посева и окрашивания для флуоресцентной микроскопии, а также извлечение органоидов.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-Propanol</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>AA19397K7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>AA19392K7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BC43 Benchtop Confocal Microscope</td>
			<td>Andor Technology</td>
			<td></td>
			<td>spinning disk confocal microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin&#160;</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>37525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffered oxide etching solution</td>
			<td>Merck</td>
			<td>901621-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CEE Spin Coater</td>
			<td>Brewer Science</td>
			<td>200X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Developer AZ400K</td>
			<td>Merck</td>
			<td>18441223164</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DI Milliq water</td>
			<td>Millipore</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10082147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass coverslips</td>
			<td>Marienfled</td>
			<td>117650</td>
			<td>1.5H, round 25 mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hepes</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15630080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris software</td>
			<td>BitPlane</td>
			<td></td>
			<td>image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted Transmission optical microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>TSF100-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labsonic M</td>
			<td>Sartorius Stedium Biotech</td>
			<td></td>
			<td>Ultrasonic homogenizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipidure</td>
			<td>NOF America</td>
			<td>CM5206</td>
			<td>bio-mimetic copolymer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOA73</td>
			<td>Norland Products</td>
			<td>17-345</td>
			<td>UV curable adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin</td>
			<td>Thermofisher scientific&#160;</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Alexa Fluor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Solution</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>10010023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photo Resist AZ5214E</td>
			<td>Merck</td>
			<td>14744719710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pico Plasma tool</td>
			<td>Diener Electronic GmbH + Co. KG</td>
			<td>Pico Plasma</td>
			<td>For O2 plasma treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RapiClear 1.52</td>
			<td>Sunjin lab</td>
			<td>RC 152001</td>
			<td>water-soluble clearing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RCT Hot Plate/Stirrer</td>
			<td>IKA (MY)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reactive Ion Etching tool</td>
			<td>Samco Inc. (JPN)</td>
			<td>RIE-10NR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11875093</td>
			<td>culture medium for HCT116 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>4019862</td>
			<td>Polydimethylsiloxane or in short, PDMS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloro(1H,1H,2H,2H-perfluorooctyl)silane</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>448931-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T9284</td>
			<td>surfactant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA</td>
			<td>Thermofisher scientific</td>
			<td>15400054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic Cleaner</td>
			<td>Bransonic</td>
			<td>CPX2800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV-KUB 2</td>
			<td>KLOE</td>
			<td></td>
			<td>UV-LED light source, 365 nm wavelength, 35 mW/cm2 power density</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV mask aligner</td>
			<td>SUSS Microtec Semiconductor (DE)</td>
			<td>MJB4</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a high-throughput platform for culture and 3d imaging of organoids

Характеристика большого количества трехмерных (3D) оловоорганических культур (органоидов) в различных масштабах разрешения в настоящее время ограничена стандартными подходами к визуализации. Этот протокол описывает способ подготовки микрофабрикированных чипов органоидных культур, которые обеспечивают многомасштабную 3D-визуализацию в реальном времени на удобном для пользователя инструменте, требующем минимальных манипуляций и способном к пропускной способности до 300 органоидов в час. Эти микросхемы культуры совместимы как с воздушными, так и с погружными объективами (воздух, вода, масло и силикон) и широким спектром распространенных микроскопов (например, вращающийся диск, конфокальный точечный сканер, широкое поле и яркое поле). Кроме того, они могут использоваться с модальностями светового листа, такими как технология однообъективной одноплоскостной микроскопии освещения (SPIM) (soSPIM). 
Протокол, описанный здесь, дает подробные этапы для приготовления микрофабрикированных чипов культуры, а также культивирования и окрашивания органоидов. Для ознакомления требуется лишь небольшой промежуток времени, а расходные материалы и оборудование можно легко найти в обычных биолабораториях. Здесь возможности 3D-визуализации будут продемонстрированы только с помощью коммерческих стандартных микроскопов (например, вращающийся диск для 3D-реконструкции и широкоугольная микроскопия для рутинного мониторинга).

На рисунке 8F показан типичный аспект покрова клеточной культуры после успешного изготовления. УФ-отверждаемый клейкий слой выглядит плоским и хорошо прилипает к крышке. Перенос клеевого слоя на крышке может завершиться, если слой на крышке затвердел или если удаление ?...

Watch this Scientific Journal Video about A High-Throughput Platform for Culture and 3D Imaging of Organoids at JoVE.com

A High-Throughput Platform for Culture and 3D Imaging of Organoids

В этой статье представлен протокол изготовления нового типа культуральной подложки с сотнями микроконтейнеров намм2, в котором органоиды можно культивировать и наблюдать с помощью микроскопии высокого разрешения. Протоколы посева клеток и иммуноокрашивания также детализированы.

Высокопроизводительная платформа для культуры и 3D-визуализации органоидов

The characterization of a large number of three-dimensional (3D) organotypic cultures (organoids) at different resolution scales is currently limited by ...

Этот протокол демонстрирует микротекстурную чашку для культуры клеток, разработанную для роста сотен органоидов со знанием материала и полностью совместимую с микроскопией. Наша методика эффективно позволяет генерировать тысячи органоидов, полностью совместимых с долгосрочной визуализацией и долгосрочной клеточной культурой. Этот протокол представляет большой интерес для биомедицинских приложений, таких как конвейер скрининга лекарств и области исследований рака.Методика, представленная в этом протоколе, легко освоить после нескольких попыток любого, кто имеет опыт работы с лабораторными процедурами и оптической микроскопией. Для начала отрежьте небольшие участки формы PDMS до размера, необходимого для конечного устройства. Вырежьте их параллельно направлениям XY массива.Поместите один из подготовленных кубиков формы PDMS лицевой стороной вниз на плоскую секцию PDMS. Затем, используя пипетку, добавьте примерно от 0,1 до 0,2 миллилитров УФ-отверждаемого клея на одну сторону формы. Следите за прогрессированием жидкости внутри полости с помощью перевернутого оптического микроскопа при 10-кратном увеличении.Подвергайте клей воздействию ультрафиолетового света, чтобы вылечить его. Отрегулируйте время экспозиции в зависимости от плотности мощности УФ-источника, как описано в тексте рукописи. Используя избыточное количество клея на одном краю, удерживайте отвержденный клей на плоской подложке PDMS, осторожно надавливая на нее пальцем.Между тем, используя пинцет, зажмите один угол формы рядом с тем же удерживаемым краем и медленно отклейте форму, гарантируя, что текстурированная пленка не будет поднята. Обрежьте избыток клея и подложки PDMS с помощью лезвия бритвы, чтобы оставить отвержденный, текстурированный и клеевой слой плоским на PDMS с избыточной подложкой только на одном краю. Обработайте чистый покров коротким процессом кислородной плазмы, чтобы улучшить его гидрофильность.После плазменной активации отжим покройте тонкий слой УФ-отверждаемого клея, поместив крышку на вакуумный патрон стандартного спин-коатера и вылив небольшую каплю клея в центр крышки. Запустите процесс спинового покрытия, как описано в текстовой рукописи. Если спиновое покрытие недоступно, опустите примерно 0,1 миллилитра УФ-отверждаемого клея на чистый покров с помощью пипетки.Возьмите вторую крышку и поместите ее поверх первой, чтобы жидкий клей равномерно распределился между двумя крышками. Как только клей достигнет края обшивки, аккуратно отделите их, скользя один над другим. После разделения оба покрова будут полностью покрыты тонким слоем жидкого клея.После спинового покрытия предварительно отверждайте клей воздействием ультрафиолета. Отрегулируйте время воздействия в зависимости от плотности мощности используемого УФ-источника. Возьмите одну из текстурированных пленок и поместите ее в контакт с клейким покрытием. Убедитесь, что контакт между частично отвержденным клеем и текстурированной пленкой максимально равномерным.На этом этапе клей на крышке должен быть достаточно твердым, чтобы избежать повторного перетекания, а контакт можно оптимизировать, осторожно надавливая на крышку. Подвергайте крышки воздействию ультрафиолетового излучения до полного отверждения слоя клея с покрытием. Это запечатает текстурированную пленку на крышке и обеспечит герметичную изоляцию между полостями периметра.Затем, используя пинцет, зажмите PDMS на краю, где после обрезки остался лишний материал, и отклейте плоскую подложку PDMS. Этот шаг позволяет текстурированному слою пленки прилипать к крышке с открытым доступом в верхней части для посева клеток. Перед посевом клеток на устройстве, пассивированном биометрическим сополимером, как описано в рукописи, дозируют один миллилитр стерильного PBS в 35-миллиметровую клеточную культуру чашки Петри.Дегазируйте блюдо со стерильным PBS с помощью вакуумной камеры в течение 10 минут, после чего следует несколько раундов пипетки, чтобы удалить все пузырьки. Замените PBS стерильной питательной средой и стерилизуйте пластину ультрафиолетовым светом в течение 30 минут под капюшоном клеточной культуры. Приготовьте клеточную суспензию, следуя рекомендациям по трипсинизации или клеточной суспензии для интересующих клеток, как описано в текстовой рукописи.Подсчитайте и отрегулируйте концентрацию клеток до 500 000 клеток на миллилитр в рекомендуемой среде культивирования клеток. Извлеките буфер PBS из 35-миллиметровой чашки для культивирования клеток, а затем дозируйте один миллилитр отрегулированной клеточной суспензии. Поместите чашку для посева клеток обратно в клеточный инкубатор на 10 минут.Примерно от 80 до 100 ячеек войдут в каждую полость периметра. Примерно через 10 минут инкубации извлеките чашку для культивирования клеток из инкубатора и осторожно аспирируйте клеточную суспензию, чтобы удалить непопадающие клетки. Добавьте один миллилитр питательной среды в чашку для культивирования и поместите его обратно в клеточный инкубатор.По желанию, чтобы извлечь органоиды после того, как они выросли в колодцах, зажмите текстурированный клеевой слой на кромке среза с помощью пинцета и аккуратно отклейте его от стеклянной крышки, но держите его погруженным в среду. Увеличение концентрации биометрического сополимера увеличивало толщину покрытия. Полная дегазация посуды для клеточных культур была необходима для удаления пузырьков воздуха, захваченных в полостях периметра.Органоиды образовались после второго и 15 дней культивирования. Конфокальная микроскопия вращающегося диска показала репрезентативные изображения органоидов и 3D-реконструкцию. При приготовлении блюда для культуры важно обращать внимание на сборку формы или стопки подложки и обеспечивать хороший контакт между текстурированной пленкой и крышкой.Сдерживание, обеспечиваемое нашими микрополитами, и отсутствие потери материала привлекли внимание исследователей космической биологии, заинтересованных в изучении влияния микрогравитации на органоидный гомеостаз.

Research

JoVE Journal

Biology

A Multi-compartment CNS Neuron-glia Co-culture Microfluidic Platform

Multi-купе ЦНС Нейрон-глии сотрудничеству культуры микрожидкостных платформы

We present a novel multi-compartment neuron co-culture microsystem platform for in vitro CNS axon-glia interaction research, capable of conducting up to ...

Lensless On-chip Imaging of Cells Provides a New Tool for High-throughput Cell-Biology and Medical Diagnostics

Безлинзовой на кристалле изображений клеток обеспечивает новый инструмент для высокой пропускной Cell-биологии и медицинской диагностики

Conventional optical microscopes image cells by use of objective lenses that work together with other lenses and optical components. While quite ...

A High Throughput Screen for Biomining Cellulase Activity from Metagenomic Libraries

Экран с высоким Пропускная Biomining Целлюлаза активность метагеномных из библиотеки

Cellulose, the most abundant source of organic carbon on the planet, has wide-ranging industrial applications with increasing emphasis on biofuel ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Биохимические и высокая пропускная способность Микроскопическая оценка жировой массы в<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

High Throughput Microinjections of Sea Urchin Zygotes

Высокая пропускная Микроинъекции из морского ежа зиготы

Microinjection into cells and embryos is a common technique that is used to study a wide range of biological processes. In this method a small amount of ...

High-throughput Image Analysis of Tumor Spheroids: A User-friendly Software Application to Measure the Size of Spheroids Automatically and Accurately

Высокая пропускная анализ изображений опухолевых сфероидов: Программное обеспечение удобное приложение для измерения размера сфероидов автоматически и точно

The increasing number of applications of three-dimensional (3D) tumor spheroids as an in vitro model for drug discovery requires their adaptation to ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

Восстановление взрослых данио сердца для высокой пропускной приложений

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

High-throughput Screening for Chemical Modulators of Post-transcriptionally Regulated Genes

Высокопроизводительный скрининг для химических модуляторов посттранскрипционно регулируемых генов

Both transcriptional and post-transcriptional regulation have a profound impact on genes expression. However, commonly adopted cell-based screening assays ...

qPCRTag Analysis - A High Throughput, Real Time PCR Assay for Sc2.0 Genotyping

qPCRTag анализ - Высокая пропускная способность, ПЦР в реальном времени Анализ на Sc2.0 Генотипирование

The Synthetic Yeast Genome Project (Sc2.0) aims to build 16 designer yeast chromosomes and combine them into a single yeast cell. To date one synthetic ...