Name: cellular affinity of particle-stabilized emulsion to boost antigen internalization
Uploaded: 2022-09-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cellular Affinity of Particle-Stabilized Emulsion to Boost Antigen Internalization at JoVE.com

Bu çalışma, Çin Ulusal Anahtar Araştırma ve Geliştirme Programı (2021YFE020527, 2021YFC2302605, 2021YFC2300142), Çin Bilimler Akademisi Temel Sınır Bilimsel Araştırma Programı (ZDBS-LY-SLH040), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Yenilikçi Araştırma Grupları Vakfı (Hibe No. 21821005) tarafından desteklenen Proje tarafından desteklenmiştir.

Bu protokolde açıklanan tüm yöntemler, Çin Bilimler Akademisi Proses Mühendisliği Enstitüsü tarafından onaylanmıştır. Tüm hayvan deneyleri, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Yönetmeliği ve Hayvanların Etik İncelemesi Kılavuzu'na (Çin, GB/T35892-2018) sıkı sıkıya bağlı kalınarak gerçekleştirilmiştir.
1. PLGA nanopartiküllerinin hazırlanması ve karakterizasyonu
<ol><li>PLGA nanopartiküllerinin (PNP'ler) hazırlanması<ol><li>...

<ol>
	<li>Ma, G., Gu, Z., Wei, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+vaccine+delivery.">Advanced vaccine delivery.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 183, 114170 (2022).</li><li>Sharma, J., Carson, C. S., Douglas, T., Wilson, J. T., Joyce, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nano-particulate+platforms+for+vaccine+delivery+to+enhance+antigen-specific+cd8(+)+t-cell+response.">Nano-particulate platforms for vaccine delivery to enhance antigen-specific cd8(+) t-cell response.</a> Methods in Molecular Biology. 2412, 367-398 (2022).</li><li>Nguyen, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+immunogenicity+of+nanocovax,+a+sars-cov-2+recombinant+spike+protein+vaccine:+interim+results+of+a+double-blind,+randomised+controlled+phase+1+and+2+trial.">Safety and immunogenicity of nanocovax, a sars-cov-2 recombinant spike protein vaccine: interim results of a double-blind, randomised controlled phase 1 and 2 trial.</a> The Lancet Regional Health. Western Pacific. 24, 100474 (2022).</li><li>Coates, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+immunogenicity+of+a+trivalent+virus-like+particle+vaccine+against+western,+eastern,+and+venezuelan+equine+encephalitis+viruses:+a+phase+1,+open-label,+dose-escalation,+randomised+clinical+trial.">Safety and immunogenicity of a trivalent virus-like particle vaccine against western, eastern, and venezuelan equine encephalitis viruses: a phase 1, open-label, dose-escalation, randomised clinical trial.</a> The Lancet Infectious Diseases. 22 (8), 1210-1220 (2022).</li><li>Wei, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+a+nanoparticle+therapeutic+vaccine+in+patients+with+chronic+hepatitis+b:+a+randomized+clinical+trial.">Efficacy and safety of a nanoparticle therapeutic vaccine in patients with chronic hepatitis b: a randomized clinical trial.</a> Hepatology. 75 (1), 182-195 (2022).</li><li>Krishnan, R., Kim, J. O., Qadiri, S. S. N., Kim, J. O., Oh, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+viral+uptake+and+host-associated+immune+response+in+the+tissues+of+seven-band+grouper+following+a+bath+challenge+with+nervous+necrosis+virus.">Early viral uptake and host-associated immune response in the tissues of seven-band grouper following a bath challenge with nervous necrosis virus.</a> Fish &amp; Shellfish Immunology. 103, 454-463 (2020).</li><li>Mishra, D., Mishra, P. K., Dubey, V., Dabadghao, S., Jain, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+uptake+and+generation+of+immune+response+by+murine+dendritic+cells+pulsed+with+hepatitis+b+surface+antigen-loaded+elastic+liposomes.">Evaluation of uptake and generation of immune response by murine dendritic cells pulsed with hepatitis b surface antigen-loaded elastic liposomes.</a> Vaccine. 25 (39-40), 6939-6944 (2007).</li><li>Harwood, L. J., Gerber, H., Sobrino, F., Summerfield, A., Mccullough, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+internalization+of+foot-and-mouth+disease+virus:+influence+of+heparan+sulfate+binding+on+virus+uptake+and+induction+of+the+immune+response.">Dendritic cell internalization of foot-and-mouth disease virus: influence of heparan sulfate binding on virus uptake and induction of the immune response.</a> Journal of Virology. 82 (13), 6379-6394 (2008).</li><li>Jing, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+artificial+antigens+revealed+extended+membrane+networks+utilized+by+live+dendritic+cells+for+antigen+uptake.">Fluorescent artificial antigens revealed extended membrane networks utilized by live dendritic cells for antigen uptake.</a> Nano Letters. 22 (10), 4020-4027 (2022).</li><li>Meena, J., Goswami, D. G., Anish, C., Panda, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+uptake+of+polylactide+particles+induces+size+dependent+cytoskeletal+remodeling+in+antigen+presenting+cells.">Cellular uptake of polylactide particles induces size dependent cytoskeletal remodeling in antigen presenting cells.</a> Biomaterials Science. 9 (23), 7962-7976 (2021).</li><li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+via+cell+membrane+fusion+using+lipopeptide+modified+liposomes.">Drug delivery via cell membrane fusion using lipopeptide modified liposomes.</a> ACS Central Science. 2 (9), 621-630 (2016).</li><li>Rawle, R., Kasson, P., Boxer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disentangling+viral+membrane+fusion+from+receptor+binding+by+using+synthetic+dna-lipid+conjugates+totether+influenza+virus+to+model+lipid+membranes.">Disentangling viral membrane fusion from receptor binding by using synthetic dna-lipid conjugates totether influenza virus to model lipid membranes.</a> Biophysical Journal. 111 (1), 123-131 (2016).</li><li>Ha, H. K., Kim, J. W., Lee, M. R., Jun, W., Lee, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+uptake+and+cytotoxicity+of+&#946;-lactoglobulin+nanoparticles:+the+effects+of+particle+size+and+surface+charge.">Cellular uptake and cytotoxicity of &#946;-lactoglobulin nanoparticles: the effects of particle size and surface charge.</a> Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. 28 (3), 420-427 (2015).</li><li>Malara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+structure+and+nano-mechanics+determine+megakaryocyte+function.">Extracellular matrix structure and nano-mechanics determine megakaryocyte function.</a> Blood. 118 (16), 4449-4453 (2011).</li><li>Dankovich, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+remodeling+through+endocytosis+and+resurfacing+of+tenascin-r.">Extracellular matrix remodeling through endocytosis and resurfacing of tenascin-r.</a> Nature Communications. 12 (1), 7129 (2021).</li><li>Evans, E., Buxbaum, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affinity+of+red-blood-cell+membrane+for+particle+surfaces+measured+by+the+extent+of+particle+encapsulation.">Affinity of red-blood-cell membrane for particle surfaces measured by the extent of particle encapsulation.</a> Biophysical Journal. 34 (1), 1-12 (1981).</li><li>Rohner, N. A., Purdue, L. N., Von Recum, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affinity-based+polymers+provide+long-term+immunotherapeutic+drug+delivery+across+particle+size+ranges+optimal+for+macrophage+targeting.">Affinity-based polymers provide long-term immunotherapeutic drug delivery across particle size ranges optimal for macrophage targeting.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 110 (4), 1693-1700 (2021).</li><li>Zhou, X., Liu, Y., Wang, X. F., Li, X. M., Xiao, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+particle+size+on+the+cellular+uptake+and+anti-inflammatory+activity+of+oral+nanotherapeutics.">Effect of particle size on the cellular uptake and anti-inflammatory activity of oral nanotherapeutics.</a> Colloids and Surfaces B-Biointerfaces. 187, 110880 (2020).</li><li>Zhang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+morphology+and+surface+charge-dependent+cellular+uptake+efficiency+of+upconversion+nanostructures+revealed+by+single-particle+optical+microscopy.">The morphology and surface charge-dependent cellular uptake efficiency of upconversion nanostructures revealed by single-particle optical microscopy.</a> Chemical Science. 13 (12), 3610 (2022).</li><li>Xi, Y. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co2-responsive+pickering+emulsions+stabilized+by+soft+protein+particles+for+interfacial+biocatalysis.">Co2-responsive pickering emulsions stabilized by soft protein particles for interfacial biocatalysis.</a> Chemical Science. 13 (10), 2884-2890 (2022).</li><li>Trivedi, R. P., Klevets, I. I., Senyuk, B., Lee, T., Smalyukh, I. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconfigurable+interactions+and+three-dimensional+patterning+of+colloidal+particles+and+defects+in+lamellar+soft+media.">Reconfigurable interactions and three-dimensional patterning of colloidal particles and defects in lamellar soft media.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of United States of America. 109 (13), 4744-4749 (2012).</li><li>De Araujo, A. D., Hoang, H. N., Lim, J., Mak, J. Y. W., Fairlie, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tuning+electrostatic+and+hydrophobic+surfaces+of+aromatic+rings+to+enhance+membrane+association+and+cell+uptake+of+peptides.">Tuning electrostatic and hydrophobic surfaces of aromatic rings to enhance membrane association and cell uptake of peptides.</a> Angewandte Chemie. 61 (29), 03995 (2022).</li><li>Waku, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+the+hydrophilic-hydrophobic+balance+of+antigen-loaded+peptide+nanofibers+on+their+cellular+uptake,+cellular+toxicity,+and+immune+stimulatory+properties.">Effect of the hydrophilic-hydrophobic balance of antigen-loaded peptide nanofibers on their cellular uptake, cellular toxicity, and immune stimulatory properties.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (15), 3781 (2019).</li><li>Meng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+soft+pickering+emulsifier+made+from+chitosan+and+peptides+endows+stimuli-responsiveness,+bioactivity+and+biocompatibility+to+emulsion.">A soft pickering emulsifier made from chitosan and peptides endows stimuli-responsiveness, bioactivity and biocompatibility to emulsion.</a> Carbohydrate Polymers. 277, 118768 (2022).</li><li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+and+in+vitro/vivo+evaluation+of+drug+nanocrystals+self-stabilized+pickering+emulsion+for+oral+delivery+of+quercetin.">Fabrication and in vitro/vivo evaluation of drug nanocrystals self-stabilized pickering emulsion for oral delivery of quercetin.</a> Pharmaceutics. 14 (5), 897 (2022).</li><li>Ji, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Core-shell-structured+silica/polyacrylate+particles+prepared+by+pickering+emulsion:+influence+of+the+nucleation+model+on+particle+interfacial+organization+and+emulsion+stability.">Core-shell-structured silica/polyacrylate particles prepared by pickering emulsion: influence of the nucleation model on particle interfacial organization and emulsion stability.</a> Nanoscale Research Letters. 9 (1), 534 (2014).</li><li>Chen, l., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+evaluation+of+proteins+with+bicinchoninic+acid+(bca):+resonance+raman+and+surface-enhanced+resonance+raman+scattering-based+methods.">Quantitative evaluation of proteins with bicinchoninic acid (bca): resonance raman and surface-enhanced resonance raman scattering-based methods.</a> Analyst. 137 (24), 5834-5838 (2012).</li><li>Colino, J., Shen, Y., Snapper, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells+pulsed+with+intact+streptococcus+pneumoniae+elicit+both+protein-+and+polysaccharide-specific+immunoglobulin+isotype+responses+in+vivo+through+distinct+mechanisms.">Dendritic cells pulsed with intact streptococcus pneumoniae elicit both protein- and polysaccharide-specific immunoglobulin isotype responses in vivo through distinct mechanisms.</a> The Journal of Experimental Medicine. 195 (1), 1-13 (2002).</li><li>Zhang, Y., Wu, J., Zhang, H., Wei, J., Wu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles-mimetic+encapsulation+improves+oncolytic+viro-immunotherapy+in+tumors+with+low+coxsackie+and+adenovirus+receptor.">Extracellular vesicles-mimetic encapsulation improves oncolytic viro-immunotherapy in tumors with low coxsackie and adenovirus receptor.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 8, 574007 (2020).</li><li>Cappellano, G., Abreu, H., Casale, C., Dianzani, U., Chiocchetti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nano-microparticle+platforms+in+developing+next-generation+vaccines.">Nano-microparticle platforms in developing next-generation vaccines.</a> Vaccines. 9 (6), 606 (2021).</li><li>McClelland, R. D., Culp, T. N., Marchant, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+flow+cytometry+and+confocal+immunofluorescence+microscopy+of+virus-host+cell+interactions.">Imaging flow cytometry and confocal immunofluorescence microscopy of virus-host cell interactions.</a> Frontiers in Cellular Infection Microbiology. 11, 749039 (2021).</li><li>Konry, T., Sarkar, S., Sabhachandani, P., Cohen, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innovative+tools+and+technology+for+analysis+of+single+cells+and+cell-cell+interaction.">Innovative tools and technology for analysis of single cells and cell-cell interaction.</a> Annual Reviews of Biomedical Engineering. 18 (1), 259-284 (2016).</li><li>D'Aurelio, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+EIS+and+QCM+nanoMIP-based+sensors+for+morphine.">A comparison of EIS and QCM nanoMIP-based sensors for morphine.</a> Nanomaterials. 11 (12), 3360 (2021).</li><li>Li, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+exosomes+for+translational+nanomedicine.">Artificial exosomes for translational nanomedicine.</a> Journal of Nanobiotechnology. 19 (1), 242 (2021).</li><li>Rydell, G. E., Dahlin, A. B., Hook, F., Larson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=QCM-D+studies+of+human+norovirus+VLPs+binding+to+glycosphingolipids+in+supported+lipid+bilayers+reveal+strain-specific+characteristics.">QCM-D studies of human norovirus VLPs binding to glycosphingolipids in supported lipid bilayers reveal strain-specific characteristics.</a> Glycobiology. 19 (11), 1176-1184 (2009).</li></ol>

Gelişmiş antijen içselleştirme için bir dağıtım sistemi olarak PLGA nanopartikül stabilize yağ / su emülsiyonunu geliştirdik. Hazırlanan PNPE, iniş noktasını desteklemek için yoğun bir şekilde paketlenmiş bir yüzeye ve bağışıklık hücresi zarı ile güçlü hücresel temas için benzersiz yumuşaklık ve akışkanlığa sahipti. Ayrıca, yağ / su arayüzü yüksek içerikli antijen yüklemesi sundu ve amfifilik PLGA, antijenlerin bağışıklık hücrelerine taşınması için PNPE'ye yüksek s...

Epidemik, kronik ve bulaşıcı hastalıklarla mücadele etmek için, profilaktik ve terapötik aşılar için etkili adjuvanlar geliştirmek zorunludur 1,2. İdeal olarak, adjuvanlar mükemmel güvenlik ve immün aktivasyona sahip olmalıdır 3,4,5. Antijen sunan hücreler (APC'ler) tarafından antijenlerin etkin alımı ve işlenmesinin, aşağı akış sinyal kaskadlarında ve immün yanıtın başlatılmasında önemli bir aşama olduğu düşünülmektedir 6,7,8. Bu nedenle, bağışıklık hücrelerinin antijenlerle etkileşim mekanizmasını net bir şekilde anlamak ve içselleştirmeyi arttırmak için adjuvanlar tasarlamak, aşıların etkinliğini artırmak için etkili stratejilerdir.
Benzersiz özelliklere sahip mikro-/ nanopartiküller daha önce antijenlerin hücresel alımına ve patojenle ilişkili moleküler modellerle hücresel etkileşime aracılık etmek için antijen dağıtım sistemleri olarak araştırılmıştır 9,10. Hücrelerle temas ettikten sonra, dağıtım sistemleri hücre dışı matris ve hücre zarı ile etkileşime girmeye başlar, bu da içselleştirmeye ve ardından hücresel tepkilere yol açar11,12. Önceki çalışmalar, parçacıkların içselleştirilmesinin hücre zarı-parçacık yapışması13, ardından hücre zarının esnek deformasyonu ve reseptörün yüzey zarına difüzyonu14,15 yoluyla gerçekleştiğini ortaya koymuştur. Bu koşullar altında, dağıtım sisteminin özellikleri, APC'lere olan yakınlığa bağlıdır ve bu da daha sonra16,17 alım miktarını etkiler.
Gelişmiş bağışıklık tepkisi için dağıtım sisteminin tasarımı hakkında fikir edinmek için, parçacıkların özellikleri ile hücresel alım arasındaki ilişkinin araştırılmasına kapsamlı çabalar odaklanmıştır. Bu çalışma, çeşitli yüklere, boyutlara ve şekillere sahip katı mikro-/ nanopartiküllerin genellikle bu ışıkta incelendiği, akışkanlığın antijen içselleştirmedeki rolünün nadiren araştırıldığı gözleminden kaynaklanmıştır18,19. Aslında, yapışma sırasında, yumuşak parçacıklar, katı parçacıklar20,21 tarafından zorlukla çoğaltılabilen çok değerli etkileşimler için temas alanını arttırmak için dinamik eğrilik değişiklikleri ve yanal difüzyonlar gösterdi. Ek olarak, hücre zarları alım bölgesinde fosfolipid çift katmanlıdır (sfengolipidler veya kolesterol) ve hidrofobik maddeler lipitlerin konformasyonel entropisini değiştirebilir ve hücresel alım için gereken enerji miktarını azaltabilir22,23. Bu nedenle, hareketliliği arttırmak ve dağıtım sisteminin hidrofobikliğini teşvik etmek, bağışıklık tepkisini arttırmak için antijen içselleştirmesini güçlendirmek için etkili bir strateji olabilir.
İki karışmaz sıvı arasındaki arayüzde bir araya getirilen katı parçacıklar tarafından stabilize edilen Pickering emülsiyonu, biyolojik alanda yaygın olarak kullanılmaktadır24,25. Aslında, yağ / su arayüzündeki toplayıcı parçacıklar, çok seviyeli dağıtım sistemi-hücresel etkileşimleri teşvik eden çok seviyeli yapıların formülasyonunu belirler ve ilaç dağıtımında çok fonksiyonlu fizyokimyasal özellikleri daha da indükler. Deforme olmaları ve lateral hareketlilikleri nedeniyle, Pickering emülsiyonlarının immünositlerle çok değerli hücresel etkileşime girmesi ve membran proteinleri tarafından tanınması bekleniyordu26. Ek olarak, Pickering emülsiyonlarındaki yağlı misel çekirdekleri tamamen katı parçacıklarla kaplı olmadığından, Pickering emülsiyonları, yağ/su arayüzündeki parçacıklar arasında farklı boyutlarda boşluklara sahiptir ve bu da daha yüksek hidrofobikliğe neden olur. Bu nedenle, Pickering emülsiyonlarının APC'lere olan afinitesini araştırmak ve verimli adjuvanlar geliştirmek için sonraki içselleştirmeyi detaylandırmak çok önemlidir.
Bu düşüncelere dayanarak, PNPE'nin BMDC'lere ve hücresel içselleştirmeye olan yakınlığı konusunda değerli bilgiler edinmeye yardımcı olan bir akışkanlık aşısı dağıtım sistemi olarak PLGA nanopartikül stabilize Pickering emülsiyonunu (PNPE) tasarladık. Biyo-mimetik hücre dışı veziküllerin (bEV'ler; BMDC'lerin değiştirilmesi) PNPE'ye gerçek zamanlı yapışması, dağılım izlemeli (QCM-D) bir kuvars kristali mikro terazisi kullanılarak etiketsiz bir yöntemle izlendi . PNPE'nin BMDC'lere afinitesinin karakterizasyonunu takiben, antijen alımını belirlemek için konfokal lazer tarama mikroskobu (CLSM) kullanıldı. Sonuç, PNPE'nin BMDC'lere daha yüksek afinitesini ve antijenin verimli bir şekilde içselleştirilmesini göstermiştir. PNPE'nin APC'lere daha yüksek afinite göstereceğini ve bu da immün yanıtları arttırmak için antijenlerin içselleştirilmesini daha iyi uyarabileceğini tahmin ettik.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>AddVax</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>Vac-adx-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-70-CS</td>
			<td>70 &#956;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Laser Scanning Microscope (CLSM)</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>A1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cy3 NHS Ester</td>
			<td>YEASEN</td>
			<td>40777ES03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Staining Solution</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>C1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Phalloidin</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>CA1620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mastersizer 2000 Particle Size Analyzer</td>
			<td>Malvern</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro BCA protein Assay Kit</td>
			<td>Thermo Science</td>
			<td>23235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Membrane emulsification equipment</td>
			<td>Zhongke Senhui Microsphere Technology</td>
			<td></td>
			<td>FM0201/500M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-Extruder</td>
			<td>Avanti Polar Lipids, Inc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NANO ZS</td>
			<td>Malvern</td>
			<td></td>
			<td>JSM-6700F</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate membranes</td>
			<td>Avanti Polar Lipids, Inc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>26780-50-7</td>
			<td>Mw 7,000-17,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine Solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly (vinyl alcohol) (PVA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9002-89-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QSense Silicon dioxide sensor</td>
			<td>Biolin Scientific</td>
			<td>QSX 303</td>
			<td>Surface roughness &#60; 1 nm RMS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quartz Crystal Microbalance</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td></td>
			<td>Q-SENSE E4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI Medium 1640 basic</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C22400500BT</td>
			<td>L-Glutamine, 25 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscopy (SEM)</td>
			<td>JEOL</td>
			<td></td>
			<td>JSM-6700F</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Squalene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>111-02-4</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cellular affinity of particle-stabilized emulsion to boost antigen internalization

Mikro-/nanopartiküllerin hücresel afinitesi, ilaç dağıtımı ve immün yanıt için gerekli olan hücresel tanıma, hücresel alım ve aktivasyonun ön koşuludur. Bu çalışma, katı parçacıkların yükünün, boyutunun ve şeklinin hücre afinitesi üzerindeki etkilerinin genellikle göz önünde bulundurulduğu gözleminden kaynaklanmıştır, ancak yumuşaklığın, dinamik yeniden yapılanma fenomeninin ve karmaşık arayüz etkileşiminin hücresel afinitedeki temel rolünü nadiren fark ediyoruz. Burada, katı formların eksikliklerinin üstesinden gelen ve patojenlerin esnekliğini ve akışkanlığını simüle eden poli-laktik-ko-glikolik asit (PLGA) nanopartikül stabilize Pickering emülsiyonu (PNPE) geliştirdik. PNPE'nin hücre yüzeylerine afinitesini test etmek ve bağışıklık hücreleri tarafından daha sonra içselleştirilmesini detaylandırmak için bir yöntem oluşturulmuştur. PNPE'nin biyo-mimetik hücre dışı veziküllere (bEV'ler) olan afinitesi - kemik iliği dendritik hücrelerinin (BMDC'ler) yerini alır - hücre emülsiyon yapışmasının gerçek zamanlı izlenmesine izin veren dağılım izlemeli (QCM-D) bir kuvars kristali mikro dengesi kullanılarak belirlendi. Daha sonra, PNPE antijeni (ovalbümin, OVA) vermek için kullanıldı ve BMDC'ler tarafından antijenlerin alımı konfokal lazer tarama mikroskobu (CLSM) kullanılarak gözlendi. Temsili sonuçlar, PNPE'nin bEV'lerle karşılaştığında frekansı (ΔF) hemen azalttığını ve PNPE'nin BMDC'lere hızlı yapışmasını ve yüksek afinitesini gösterdiğini gösterdi. PNPE, PLGA mikropartiküllerinden (PMP'ler) ve AddaVax adjuvanından (yüzey aktif madde stabilize nano-emülsiyon [SSE] olarak belirtilen) hücre zarına önemli ölçüde daha güçlü bağlanma gösterdi. Ayrıca, dinamik eğrilik değişiklikleri ve lateral difüzyonlar yoluyla immünositlere hücresel afinitenin artması nedeniyle, antijen alımı daha sonra PMP'ler ve SSE ile karşılaştırıldığında artmıştır. Bu protokol, yüksek hücre afinitesi ve etkili antijen içselleştirmesi ile yeni formülasyonlar tasarlamak için içgörüler sağlar ve etkili aşıların geliştirilmesi için bir platform sağlar.

PNPE elde etmek için basit bir tek adımlı sonifikasyon kullanıldı. İlk olarak, katı stabilizatör olarak kullanılmak üzere üniform PNP'ler hazırladık (Şekil 1A). PNP'lerin morfolojisi SEM ile gözlendi ve çoğunlukla tekdüze ve küresel olduklarını gösterdi (Şekil 1B). Formülasyonların hidrodinamik boyutu ve zeta potansiyeli DLS ile tespit edildi. PNP'lerin çapı 187.7 ± 3.5 nm ve zeta potansiyeli -16.4 ± 0.4 mV idi (<strong clas...

Watch this Scientific Journal Video about Cellular Affinity of Particle-Stabilized Emulsion to Boost Antigen Internalization at JoVE.com

Cellular Affinity of Particle-Stabilized Emulsion to Boost Antigen Internalization

Verimli adjuvanları rasyonel olarak tasarlamak için, poli-laktik-ko-glikolik asit nanopartikül-stabilize Pickering emülsiyonu (PNPE) geliştirdik. PNPE, güçlü hücresel temas için benzersiz yumuşaklığa ve hidrofobik bir arayüze sahipti ve yüksek içerikli antijen yüklemesi sundu, dağıtım sisteminin antijen sunan hücrelere hücresel afinitesini artırdı ve antijenlerin verimli bir şekilde içselleştirilmesini sağladı.

Antijen İçselleştirmesini Artırmak için Parçacık Stabilize Emülsiyonun Hücresel Afinitesi

The cellular affinity of micro-/nanoparticles is the precondition for cellular recognition, cellular uptake, and activation, which are essential for drug ...

PLGA nanopartiküllerini stabilize edilmiş Pickering emülsiyonunu geliştirdik. Pickering emülsiyonu, antijen protein hücrelerine hücresel afiniteyi geliştirerek antijenlerin etkili bir şekilde içselleştirilmesini sağladı. Nanopartikül stabilize Pickering emülsiyonlarının hazırlanması ve antijenin verimli bir şekilde verilmesi kolaydı.Ek olarak, emülsiyonun hücreye afinitesini izlemek ve içselleştirmeyi detaylandırmak için bir yöntem kullanılmıştır. Bu protokol, etkili aşıların geliştirilmesi için bir platform sağlayan yüksek hücre verimliliği ve etkili antijen içselleştirme ile yeni formülasyonlar tasarlamak için içgörüler sağlar. Başlamak için, yağ fazı olarak hizmet etmek üzere 10 mililitre aseton ve etanol karışımına 100 miligram polilaktik-ko-glikolik asit ekleyin.Duman davlumbazının altına 20 mililitre PVA sulu çözelti yerleştirin ve dakikada 400 dönüşte manyetik olarak karıştırın. Bir şırınga pompası kullanarak PVA çözeltisine damla damla beş mililitre yağ fazı ekleyin. Daha sonra karışımı duman davlumbazında organik çözücüler tamamen buharlaşana kadar karıştırın.Organik çözücülerin uçuculaşmasından sonra, karışımı 15.000 G.'de santrifüj edin.Son yıkama suyu berrak ve şeffaf olana kadar üç veya daha fazla kez yıkayın. Yıkanmış PLGA nanopartiküllerini iki mililitre deiyonize suda tekrar askıya alın ve karışımı 24 saat boyunca 80 santigrat derecede dondurun. PLGA nanopartiküllerinin boyutunu ve zeta potansiyelini karakterize etmek için, seyreltici bir çözelti elde etmek ve seyreltici çözeltiyi bir DTS1070 hücresine aktarmak için bir mililitre deiyonize suya 10 mikrolitre PLGA nanopartikülleri ekleyin.Bilgisayarı ve dinamik ışık saçılma analizörünü açın. Ardından DTS1070 hücresini DLS sistemine yerleştirin. Zetasizer yazılımına tıklayın ve belirleme prosedürünü ayarlamak için yeni bir ölçüm dosyası oluşturun.Daha sonra partikül boyutunu ve zeta potansiyel dağılımını elde etmek için belirleme prosedürünü başlatın. PLGA nanopartikülleri stabilize Pickering emülsiyonu veya PNPE hazırlamak için, dondurularak kurutulmuş PLGA nanopartiküllerini mililitre başına dört miligram konsantrasyonda deiyonize suya ekleyin ve ardından yağ fazı olarak skualen ekleyin. PNPE'yi bir su banyosu sonikatöründe 100 watt'ta beş dakika boyunca tek adımlı sonikasyon yoluyla hazırlayın.20 mikrolitre PNPE ve bir mililitre deiyonize suyu seyreltin. Slayta 20 mikrolitre emülsiyon bırakın. Optik mikroskopi kullanarak emülsiyonun morfolojisini ve homojenliğini 40 kat büyütmede gözlemleyin ve fotoğraflar elde edin.Güç düğmesine basarak döndürme kaplayıcısını açın. Kontrol düğmesine basın ve kaplama süresini ve hızını ayarlayın. Azot borusunu spin kaplayıcıya bağlayın ve gaz silindirinin fraksiyonasyonunu 0,4 kilopaskal'a ayarlayın.Temiz çipi spin kaplayıcının vantuzuna yerleştirin. Silikon dioksit sensörünün merkezine damla damla 100 mikrolitre poli-l-lizin ekleyin ve spin kaplayıcının üst kapağını kapatın. Numuneyi kaplamaya başlamak ve bittiğinde makineyi durdurmak için başlat düğmesine basın.Vakum pompasını kapatın, güç ve kontrol düğmelerini kapatın ve poli-l-lizin modifiye silikon dioksit sensörünü çıkarın. Biyomimetik hücre dışı veziküllerin PNPE'ye yapışmasını belirlemek için bilgisayarı, elektronik üniteyi ve peristaltik pompayı açın ve ayarlanan sıcaklığın oda sıcaklığının yaklaşık bir santigrat derece altında olmasını sağlamak için yazılımda sağ alttaki sıcaklık kontrolünü etkinleştirin. Poli-l-lizin modifiye silikon dioksit sensörlerini çalışma talimatlarına göre akış hücresine yerleştirin ve ölçüm hattını akış hücresi ile akış pompası arasına bağlayın.Akış hücresini akış modülü sisteminin içine yerleştirin. Edinme araç çubuğuna tıklayın ve kullanılan kanalda çipin 1, 3, 5, 7, 9 ve 11 oktavını aramak için Kurulum Ölçümü'nü seçin. Taban çizgisini düzeltmek için, hava taban çizgisi pürüzsüz olana kadar havanın akış modülüne girmesine izin vermek için Ölçümü Başlat'a tıklayın.Çözelti temel dengesini tekrar sağlamak için deiyonize suyu 10 ila 15 dakika boyunca akıttıktan sonra, silikon dioksit sensörü üzerinde denge adsorpsiyonu elde etmek için hazırlanan PNPE çözeltisini dakikada 50 mikrolitre akış hızında akış modülüne pompalayın. PNPE yüzeyine bEV yapışma sürecini izlemek için hazırlanan biyomimetik hücre dışı vezikül çözeltisini dakikada 50 mikrolitre akış hızında akış modülüne pompalayın. Kemik iliği dendritik hücrelerini yedi gün boyunca 1640 tam ortam ile inkübe edin ve daha sonra bunları 37 santigrat derecede ve % 5'lik bir karbondioksit inkübatöründe gece boyunca kuyu başına 10 ila 6 oranında küçük konfokal lazer kaplarına tohumlayın.0.5 mililitre siyanin 5 etiketli ovalbümin, bir saat boyunca 0.5 mililitre PNPE ile karıştırın ve aşı formülasyonu geliştirmek için 20 dakika boyunca 5.000 G'de santrifüjleme ile akışkan antijeni çıkarın. 200 mikrolitre deiyonize su ile yeniden süspansiyondan sonra, altı saat boyunca kemik iliği dendritik hücrelerle süper temiz bir tezgah ve ortak kültür altındaki küçük konfokal lazer kaplarına 10 mikrolitre formülasyon ekleyin. Kültür sıvısını hücrelerden çıkardıktan sonra, önceden ısıtılmış fosfat tamponlu salin ile iki kez yıkayın.Hücreleri% 4 formaldehit çözeltisi ve PBS ile oda sıcaklığında 10 dakika sabitleyin. Hücreleri PBS ile oda sıcaklığında her biri 10 dakika boyunca iki veya üç kez yıkayın. Hücreleri oda sıcaklığında beş dakika boyunca 100 mikrolitre% 0.5 Triton X-100 çözeltisi ile geçirgenleştirin.Hücreleri PBS ile tekrar yıkadıktan sonra, küçük konfokal lazer kaplarının cam alt kabındaki hücreleri 200 mikrolitre floresein izotiyosiyanat konjuge falloidin çalışma çözeltisi ile örtün ve karanlıkta oda sıcaklığında 30 dakika boyunca inkübe edin. Hücreleri PBS ile her biri beş dakika boyunca üç kez yıkadıktan sonra, çekirdekleri yaklaşık 30 saniye boyunca 200 mikrolitre DAPI çözeltisi ile yeniden tutun. Görüntü analizi için, lazer, konfokal, mikroskop ve bilgisayar dahil olmak üzere konfokal mikroskop donanımını sırayla açın.Yazılımı tıklatın ve test sistemine girmek için Nikon Confocal öğesini seçin. Konfokal mikroskop sisteminde, çeşitli birimleri belirtilen sırayla açın. İlk olarak, FITC, DAPI ve Cy5 kanallarını kurun ve ilgili YG ve ofseti ayarlayın.Daha sonra 100 kez yağ lensini seçtikten ve mikroskop aşamasında lekeli kemik iliği dendritik hücreleri içeren küçük konfokal lazer kaplarını en üste bir damla sedir yağı koyduktan sonra. Tara düğmesini tıklatın. Floresan mikroskobu altında, x eksenini, y eksenini ve z eksenini hareket ettirerek ilgilenilen hücreleri bulun.Yüksek kaliteli konfokal görüntülerin taranmasını sağlamak için lazer yoğunluğunu, görüntü boyutunu ve diğer parametreleri ayarlayın. Son olarak, tıklayın Yakala düğmesine basın ve görüntüleri kaydedin. Biyomimetik hücre dışı veziküllerin PNPE'ye yapışması QCM-D kullanılarak izlendi.Frekansta ani bir azalma, karşılaşmadan sonra biyomimetik hücre dışı veziküllerin PNPE'ye hızlı bir şekilde yapıştığını gösterdi. Dahası, delta F, konsantrasyona bağımlı bir etkiyi yansıtan biyomimetik hücre dışı vezikül konsantrasyonunun artmasıyla azalmıştır. PLGA mikropartikülleri ve yüzey aktif madde stabilize nano emülsiyonu, mililitre başına 80 mikrogramlık yüksek konsantrasyonda bile, muhtemelen bağışıklık hücreleri ile temas bölgelerinin eksikliğinden kaynaklanan biyomimetik hücre dışı veziküllere zayıf bir şekilde bağlanmıştır.Siyanin-5 ovalbümin floresan sinyali, PNPE ile muamele edilen grupta, PLGA mikropartikülleri ve yüzey aktif madde stabilize nano emülsiyonla muamele edilen gruba kıyasla hücrelere içselleştirilen toplam antijen miktarının anlamlı derecede daha yüksek olduğunu göstermiştir. Hücresel alımın kantitatif analizi, PNPE ile tedavi edilen floresan ve kemik iliği dendritik hücrelerinin PLGA mikropartikülleri ve yüzey aktif madde stabilize nano emülsiyonu ile tedavi edilenlere göre önemli ölçüde daha yüksek bir göreceli yoğunluğu göstermiştir. Elde edilen sonuçlar, PNPE'nin antijen içselleştirmesini desteklediğini ve antijeni hücre içi olarak etkili bir şekilde verdiğini göstermiştir.Homojen emülsiyon elde etmek için, karışım sonikasyon sırasında sürekli çalkalanmalıdır.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Devirli Basınç Biyoreaktör Tasarım Ex vivo</emAort Kalp Vanalar> Eğitim

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Biyomühendislik

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Çoklu-spektral Görüntüleme Akım Sitometri tarafından Nanopartiküller ve Bakterilerin Hücresel İçselleştirilmesi Analizi

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

Models and Methods to Evaluate Transport of Drug Delivery Systems Across Cellular Barriers

Modelleri ve Hücresel Engeller Arasında İlaç Taşıyıcı Sistemlerin Transport Değerlendirmesinde Yöntemleri

Sub-micrometer carriers (nanocarriers; NCs) enhance efficacy of drugs by improving solubility, stability, circulation time, targeting, and release. ...

PLGA Nanoparticles Formed by Single- or Double-emulsion with Vitamin E-TPGS

Poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) is a biocompatible member of the aliphatic polyester family of biodegradable polymers. PLGA has long been a popular ...

Utilization of Microscale Silicon Cantilevers to Assess Cellular Contractile Function In Vitro

Utilization of Microscale Silicon Cantilevers to Assess Cellular Contractile Function In Vitro

Mikro Silikon konsolun Kullanımı Hücresel kasılma fonksiyonunu değerlendirmek için<em&gt; İn Vitro</em

The development of more predictive and biologically relevant in vitro assays is predicated on the advancement of versatile cell culture systems which ...

Double Emulsion Generation Using a Polydimethylsiloxane (PDMS) Co-axial Flow Focus Device

Double Emulsion Generation Using a Polydimethylsiloxane PDMS Co-axial Flow Focus Device

Bir Polidimetilsiloksan (PDMS) Koaksiyel Akış Odak Aygıtı Kullanma Çift Emülsiyon Üretimi

Double emulsions are useful in a number of biological and industrial applications in which it is important to have an aqueous carrier fluid. This paper ...

Calorespirometry: A Powerful, Noninvasive Approach to Investigate Cellular Energy Metabolism

Calorespirometry: Hücresel enerji metabolizması araştırmak için bir güçlü, invaziv olmayan bir yaklaşım

Many cell lines used in basic biological and biomedical research maintain energy homeostasis through a combination of both aerobic and anaerobic ...

3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients

Chemoattractant degradelere Multi-hücresel tepkiler 3D Analizi

Various limitations of 2D cell culture systems have sparked interest in 3D cell culture and analysis platforms, which would better mimic the spatial and ...

Preparing Protein Producing Synthetic Cells using Cell Free Bacterial Extracts, Liposomes and Emulsion Transfer

Hücre Serbest Bakteriyel Özler, Lipozomlar ve Emülsiyon Transferi Kullanarak Protein Üreten Sentetik Hücreler Hazırlama

The bottom-up assembly approach for construction of synthetic cells is an effective tool for isolating and investigating cellular processes in a cell ...

Using Magnetometry to Monitor Cellular Incorporation and Subsequent Biodegradation of Chemically Synthetized Iron Oxide Nanoparticles

Hücresel Kuruluş ve Daha Sonra Kimyasal Synthetized Demir Oksit Nanopartiküllerinin Biyobozunurluğunu İzlemek için ManyetometriNin Kullanılması

Magnetic nanoparticles, made of iron oxide, present a peculiar interest for a wide range of biomedical applications for which they are often internalized ...