Name: a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms
Uploaded: 2022-09-16T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מענק Ramalingaswami DBT-843-BIO (המחלקה לביוטכנולוגיה, ממשלת הודו) ופרס מחקר קריירה מוקדמת SER-1058-BIO (מועצת המחקר למדע והנדסה, ממשלת הודו) ל- S.R. המחברים מכירים במענק ICMR-JRF ל-P.C ובמענק DBT-JRF ל-P.S. המחברים מודים לד"ר רביקאנט רנג'אן על ההצעות על כתב היד ועל הסיוע הטכני של מר פראדיפ סינג תאקור במהלך SEM.

עכברי BALB/c שוכנו במתקן החיות הקטן ב- IIT Roorkee. כל בעלי החיים הוחזקו במחזור אור:חושך של 12 שעות:12 שעות בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס וסופקו להם דיאטת גלולות ומים עד ליביטום. כל ההליכים למען בעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לאתיקה של בעלי חיים (IAEC) של IIT Roorkee.
1. הכנת C. tropica...

זיהומים פטרייתיים הנגרמים על ידי זני קנדידה קשורים לשיעורי תחלואה ותמותה גבוהים ברחבי העולם. האיום הגובר של זיהום פטרייתי פולשני מחייב ניהול מוקדם של מחלות מסכנות חיים כאלה. רוב זיהומי הקנדידה כרוכים בהיווצרות ביופילמים, אשר דבקים במגוון מכשירים רפואיים ואחראים להתמדה ולהישנו...

קנדידה מערכתית היא הגורם העיקרי הרביעי לזיהומים נוסוקומיאליים, הקשורים לשיעורי תחלואה ותמותה גבוהים ברחבי העולם. ברחבי העולם, קנדידה מערכתית משפיעה על כ 700,000 אנשים1. מיני קנדידה, כלומר C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. glabrata, ו- C. auris, הם הגורם השכיח ביותר לזיהומים פולשניים בקנדידה 2. מיני קנדידה הם פתוגנים אופורטוניסטיים המייצרים ביופילמים3. ביופילמים קשורים בעיקר לאלימות של קנדידה, וקנדידה יכולה לעמוד בתנאי עקה חמצוניים ואוסמוטיים על ידי גרימת היווצרות ביופילם4. ביופילמים מווסתים עוד יותר את הביטוי של גורמי אלימות ורכיבי דופן התא ויוצרים מטריצת הגנה אקסופולימרית, המסייעת לקנדידה להסתגל לנישות מארחות שונות4. ביופילמים תורמים להיצמדות השמרים ברקמות המארחות ובמכשירים רפואיים5. ככזה, יצירת ביופילם קשורה ליתרון לשמרים, שכן תאי שמרים בתוך הביופילמים יכולים לחמוק מהתגובה החיסונית של המארח6. היווצרות ביופילם גם מגנה על השמרים הפתוגניים מפני פעולה של תרופות אנטי פטרייתיות5. ירידה ברגישות של ביופילמים של C. albicans לאמפוטריצין B הודגמה על ידי Pierce et al.7,8. יתר על כן, ביופילמים מדגימים עמידות של תרופה אנטי-פטרייתית לפלוקונזול, מה שפוגע בניהול יעיל של קנדידה סיסטמית 9,10.
למיקרובים יש נטייה פנימית להיצמד למשטחים ביוטיים וא-ביוטיים שונים, מה שמביא להיווצרות ביופילם. קנדידה אלביקנס, שהיא פטרייה דימורפית, קיימת בצורות שמרים והיפאלים, והיווצרות הביופילם שלה אופיינה במערכות שונות במבחנה ובמודל in vivo 11. השלבים של היווצרות ביופילם כוללים הידבקות של תאי קנדידה למצע, נימה, שגשוג והבשלת ביופילם11. בתחילה, צורת השמרים של C. albicans נצמדת למצעים, כולל מכשירים רפואיים ורקמות אנושיות, ולאחר מכן נימה והתפשטות של C. albicans לצורות hyphal ו pseudohyphal, ולבסוף התבגרות של ביופילמים מוטבע מטריצה חוץ-תאית11. היווצרות ביופילם תורמת במידה רבה למנגנוני הפתוגנזה של C. albicans 12. מיני קנדידה יוצרים ביופילמים עמידים לתרופות, מה שהופך את חיסולם למאתגר13. תת-קבוצה קטנה של אוכלוסיית ייצור הביופילם C. albicans תוארה כבעלת עמידות גבוהה לתרופות האנטי-פטרייתיות אמפוטריצין B וכלורהקסידין14. יש לציין כי תאי שמרים בביופילמים מפגינים עמידות גבוהה לטיפול רב-תכליתי בהשוואה לתאי שמרים בשלב הפלנקטוני ובשלב ההתרבות14. הוצע כי תאי שמרים הקיימים בביופילמים עמידים מאוד לתרופות אנטי פטרייתיות, מה שתורם להישרדות C. albicans בביופילמים14. תאים קיימים אלה דווחו כגרסאות פנוטיפיות של C. albicans ולא מוטנטים14. יתר על כן, תאים של ביופילמים של קנדידה המכונים "תאים מתמידים" סובלניים למינונים גבוהים של טיפול באמפוטריצין-B ותורמים להישרדות הקנדידה, ובכך מהווים נטל גדול של זיהומי קנדידה סיסטמיים חוזרים ונשנים אצל אנשים בסיכון גבוה15.
העלייה בעמידות לתרופות אנטי-פטרייתיות בזני קנדידה מחייבת מחקר עבור חומרים אנטי-פטרייתיים ואימונותרפיות חדשים. כפי שניתן לראות מהמחקרים שהוזכרו לעיל, ביופילמים של קנדידה מראים ירידה ברגישות לתרופות אנטי פטרייתיות. לכן, יש צורך באימונותרפיות משופרות כדי לשלוט בהיווצרות הביופילם של קנדידה. מחקרים קודמים הראו כי CAGTA יכול לספק הגנה יעילה מפני זיהומים סיסטמיים של קנדידה על ידי עיכוב היווצרות ביופילם של C. albicans במבחנה16. מחקר אחר דיווח כי חיסון של עכברים עם חלבון C. albicans rAls3-N משרה רמות נוגדנים גבוהות שמפריעות להיווצרות ביופילם של C. albicans במבחנה17. נוגדנים נגד Als3-N הפעילו גם השפעה מעכבת על פיזור C. albicans מביופילמים17. חיסון NDV-3A המבוסס על C. albicans נמצא כעת בניסוי קליני ונגד NDV-3A sera נמצאו גם כמפחיתים את היווצרות הביופילם C. auris 18. מחקר שנערך לאחרונה זיהה עיכוב של היווצרות ביופילם על ידי נוגדנים Sap2 כמנגנון הגנה במודל מורין של קנדידה מערכתית19.
מאמר זה מתווה פרוטוקול מבחנה מפורט להערכת ההשפעה של נוגדנים ספציפיים לאנטיגן הנמצאים בסרום פוליקלונלי המתקבל מקבוצות שונות של עכברים מחוסנים ב-Sap2 על ביופילמים מוכנים מראש של קנדידה טרופיקליס . כדי להשיג זאת, שיטה המבוססת על בדיקת הפחתת XTT עברה אופטימיזציה ופותחה במעבדה, שיכולה למדוד את כדאיות הביופילם באופן מהיר, רגיש ובעל תפוקה גבוהה, בנוכחות או בהיעדר נוגדנים.
מבחן XTT משמש למדידת הפעילות המטבולית של התאים כאינדיקטור לכדאיות התאים, התפשטות התאים וציטוטוקסיות20. בדיקה קולורימטרית זו מבוססת על הפחתה של מלח טטרזוליום צהוב, נתרן 3'-[1-(פנילאמינוקרוניל)-3,4-טטרזוליום]-ביס (4-מתוקסי-6-ניטרו) בנזן חומצה סולפונית הידרט (XTT) לצבע פורמאזן כתום על ידי תאים פעילים מטבולית. מכיוון שרק תאים בני קיימא יכולים להפחית XTT, כמות הפורמאזן המופחתת של XTT פרופורציונלית לעוצמת הצבע ולכדאיות התא. הצבע הפורמזני שנוצר מסיס במים ומכמת אותו ישירות באמצעות קורא צלחות. בשל אופיו המסיס במים, מבחן XTT מאפשר לחקור ביופילמים שלמים, כמו גם בדיקה של רגישות לתרופות ביופילם, ללא הפרעה למבנה הביופילם21. בנוסף, שיטה זו מיושמת בהערכות כדאיות פטרייתיות של קנדידה בשל קלות השימוש, המהירות, הדיוק, התפוקה הגבוהה והרמה הגבוהה של יכולת השחזור 7,22.
בנוסף לבדיקת הפחתת XTT, זוהו גם טכניקות חלופיות רבות למדידת כמות הביופילם. חלקם כוללים שימוש בבדיקת הפחתת MTT, צביעת סגול גבישי, כימות DNA, PCR כמותי, כימות חלבונים, מדידת משקל תא יבש וספירת מושבות בת קיימא. נהלים אלה משתנים מאוד מבחינת דרישות הזמן והעלות שלהם. Taff et al. ביצעו ניתוח השוואתי של שבעה מבחני כמות שונים של קנדידה ביופילם ומצאו כי בדיקת XTT סיפקה את השיטה הניתנת לשחזור, מדויקת ויעילה ביותר להערכה כמותית של ביופילמים של C. albicans 23. טכניקות צביעה כגון סגול קריסטל יש מגבלות מסוימות; בדיקת סגול הגביש קובעת בעקיפין את כמות הביופילם על ידי מדידת הצפיפות האופטית של מטריצת הביופילם והתאים המוכתמים בסגול. אף על פי שהבדיקה הסגולה הגבישית מספקת מדידה טובה של מסת הביופילם, היא אינה נותנת מדד לכדאיות הביופילם מכיוון שהיא מכתימה הן את התאים המיקרוביאליים והן את המטריצה החוץ-תאית24. Dhale et al. דיווחו עוד כי בדיקת הפחתת XTT הייתה השיטה הרגישה, הניתנת לשחזור, המדויקת, היעילה והספציפית ביותר לזיהוי ייצור ביופילם בהשוואה למבחן סגול גבישי25. דוחות ספרות הראו כי בדיקת XTT מתואמת היטב עם פרמטר CFU/mL בשיטת ספירת CFU. עם זאת, בהשוואה למבחן XTT, שיטת CFU היא עתירת עבודה ואיטית26. יתר על כן, ייתכן שהחלק של תאים חיים מנותקים אינו מייצג את אוכלוסיית הביופילם הראשונית27. למרות שבדיקת הפחתת XTT נראית כאפשרות הטובה ביותר הזמינה לכימות הכדאיות, ישנן כמה מגבלות של טכניקה זו. בעוד ששיטת XTT שימושית להשוואות הכוללות זן פטרייתי אחד, השימוש בה עשוי להיות מוגבל כאשר משווים זנים ומינים פטרייתיים שונים. השוואות בין-גזעיות עשויות להיות קשות בהיעדר סטנדרטיזציה מפורטת מכיוון שזנים שונים מעכלים מצעים בעלי יכולות שונות21.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>NaCl : 4 g 
			KCl : 0.1 g 
			Na2HPO4:&#160; 0.72 g 
			KH2PO4 : 0.12 g 
			Water 500 mL. Adjust pH to 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plates</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>442404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Menadione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtiter Plate Reader</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multichannel pipette and tips</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Tarson</td>
			<td>460090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringers Lactate</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>sodium chloride 0.6 g sodium lactate 0.312 g potassium chloride 0.035 g calcium chloride 0.027 g Water 100 mL. Adjust to pH 7.0&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 MOPS</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>AT180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Agar</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Broth</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XTT&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>X6493</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms

מיני קנדידה הם הגורם הרביעי בשכיחותו לזיהומים נוסוקומיאליים מערכתיים. קנדידה מערכתית או פולשנית כרוכה לעתים קרובות בהיווצרות ביופילם במכשירים מושתלים או בצנתרים, הקשורה לעלייה באלימות ובתמותה. ביופילמים המיוצרים על ידי זני קנדידה שונים מפגינים עמידות משופרת נגד תרופות אנטי פטרייתיות שונות. לכן, יש צורך לפתח אימונותרפיות יעילות או טיפולים משלימים נגד ביופילמים של קנדידה. בעוד שתפקיד החסינות התאית מבוסס היטב בהגנה נגד קנדידה, תפקידה של חסינות הומורלית נחקר פחות.
הועלתה השערה כי עיכוב היווצרות ביופילם והבשלתו הוא אחד התפקידים העיקריים של נוגדנים מגנים, ונוגדנים של צינוריות חיידקים קנדידה אלביקנס (CAGTA) הוכחו כמדכאים צמיחה במבחנה והיווצרות ביופילם של C. albicans מוקדם יותר. מאמר זה מתווה פרוטוקול מפורט להערכת תפקידם של נוגדנים על ביופילמים שנוצרו על ידי C. tropicalis. המתודולוגיה של פרוטוקול זה כוללת היווצרות ביופילם C. tropicalis בלוחות מיקרוטיטרים בעלי 96 בארות, אשר לאחר מכן דוגרו בנוכחות או בהיעדר נוגדנים ספציפיים לאנטיגן, ולאחר מכן 2,3-ביס(2-מתוקסי-4-ניטרו-5-סולפופניל)-5-קרבוקסניליד-2H-tetrazolium (XTT) למדידת הפעילות המטבולית של תאים פטרייתיים בביופילם.
הספציפיות אושרה על ידי שימוש בבקרות מתאימות בסרום, כולל סרום מדולדל בנוגדנים ספציפיים ל-Sap2. התוצאות מראות כי נוגדנים הנמצאים בסרום של בעלי חיים מחוסנים יכולים לעכב את הבשלת הביופילם של קנדידה במבחנה. לסיכום, מאמר זה מספק תובנות חשובות לגבי הפוטנציאל של נוגדנים בפיתוח אימונותרפיות חדשניות וטיפולים סינרגטיים או משלימים נגד ביופילמים במהלך קנדידה פולשנית. ניתן להשתמש בפרוטוקול in vitro זה כדי לבדוק את ההשפעה של תרכובות אנטי-פטרייתיות חדשות פוטנציאליות על הפעילות המטבולית של תאי מין קנדידה בביופילמים.

הביופילמים של קנדידה טרופיקליס גודלו בלוחות מיקרוטיטרים של 96 בארות והצטלמו לפי 40 באמצעות מיקרוסקופ הפוך (איור 1A). הביופילם הוכתם עוד יותר באמצעות סיגלית גבישית ונצפה פי 40 באמצעות מיקרוסקופ הפוך (איור 1B). מיקרוסקופיית אלקטרונים סורקת מראה תמונה מייצגת ...

Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

פרוטוקול מבוסס צלחת מיקרוטיטר 96-well המשתמש ב-2,3-ביס(2-מתוקסי-4-ניטרו-5-סולפופניל)-5-קרבוקסילייד-2H-tetrazolium (XTT) מתואר כאן, כדי לחקור את השפעת הנוגדנים על ביופילמים שנוצרו על ידי C. tropicalis. ניתן להשתמש בפרוטוקול in vitro זה כדי לבדוק את ההשפעה של תרכובות אנטי-פטרייתיות חדשות פוטנציאליות על הפעילות המטבולית של תאי מין קנדידה בביופילמים.

בדיקת הפחתה מסיסה המבוססת על טטרזוליום להערכת השפעת נוגדנים על ביופילמים של קנדידה טרופיקליס

Candida species are the fourth-most common cause of systemic nosocomial infections. Systemic or invasive candidiasis frequently involves biofilm formation ...

פרוטוקול זה במבחנה, המבוסס על 96 צלחות היטב, יכול לשמש לבדיקת ההשפעה המעכבת של נוגדנים על חומרים אנטי-פטרייתיים חדשים על הפעילות המטבולית של תאים פטרייתיים בביופילמים של קנדידה. בהשוואה לשיטות אחרות, זוהי טכניקה רגישה מאוד, מדויקת, בעלת תפוקה גבוהה, ניתנת לשחזור, ידידותית למשתמש וחסכונית להערכת ההשפעה של נוגדנים או אנטי פטרייתיים על התפתחות ביופילמים של קנדידה. בדיקה זו יכולה לשמש להערכת היעילות של טיפולים חדשניים מבוססי תרופות או נוגדנים, כמו גם מועמדים לחיסון נגד ביופילמים של קנדידה, הקשורים לחומרת קנדידה פולשנית.שיטה זו יכולה להיות מיושמת לבדיקת ההשפעה של חומרים אנטי פטרייתיים חדשים או נוגדנים במהלך היווצרות ביופילם או התבגרות במסגרות שונות באמצעות זנים פטרייתיים שונים או מקורות נוגדנים. מי שידגים את ההליך הזה יהיה מר פנקאג' צ'נדלי, חוקר דוקטור שעובד במעבדה שלי. כדי להתחיל, הוסיפו 100 מיקרוליטרים של תרבית קנדידה טרופיקליס לצלחת מיקרוטיטר של 96 בארות.באמצעות פיפטה רב ערוצית, מלא את שני העמודים האחרונים עם 100 מיקרוליטר של RPMI 1640 MOPS בינוני לבד. מכסים את צלחת המיקרוטיטר במכסה ובנייר אלומיניום ודוגרים את הצלחת למשך 24 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בתנאים נייחים. למחרת, לשאוף את המדיום בזהירות באמצעות פיפטה רב ערוצית.הפוך את הצלחת בעדינות על יריעות הכתמה והקש כדי להסיר את שאריות המדיום. לשטוף את הצלחת עם 200 microliters של 1X PBS באמצעות פיפטה רב ערוצית. שאפו את ה-PBS בזהירות באמצעות פיפטה רב-ערוצית, וכבסו פעמיים עם PBS.כדי להסיר עודפי PBS, ייבשו את הצלחת באוויר למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר בתוך ארון בטיחות ביולוגי. הכן דילולים סדרתיים של דגימות סרום מומת חום במדיום RPMI 1640 MOPS סטרילי. הוסף 100 מיקרוליטרים של דילול הסרום שנבחר לכל באר של צלחת microtiter 96 באר.בעמודה 10, הוסף רק מדיום RPMI 1640 MOPS לשליטה חיובית בפטרייה בלבד. הוסיפו דילול של אחד ל-50 סרום לכל הבארות בעמודה 11 כדי לשמש כבקרה שלילית ללא פטריות פלוס בסרום. לאחר כיסוי הצלחת במכסה ובנייר אלומיניום, דגירה על הצלחת למשך 24 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.למחרת, לאחר שאיפת הסרום בזהירות באמצעות פיפטה רב ערוצית, הקש בעדינות על הצלחת ההפוכה כדי להסיר את שאריות הסרום. חזרו על שטיפת PBS שלוש פעמים, וייבשו את הצלחת באוויר למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר בתוך ארון בטיחות ביולוגי כדי לייבש כל PBS עודף. לאחר מכן, יש להמיס 25 מיליגרם של XTT ב-50 מיליליטר של לקטט רינגר מעוקר במסנן.Aliquot 10 מיליליטר בצינורות נפרדים. מכסים אותו ברדיד אלומיניום ומאחסנים אותו במינוס 80 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, להמיס 8.6 מיליגרם של מנדיון בחמישה מיליליטר של אצטון.ולאחר הפצת 50 microliters ב 100 צינורות מיקרו נפרדים, לאחסן את aliquots ב מינוס 80 מעלות צלזיוס. קח 10 מיליליטר של XTT והוסף מיקרוליטר אחד של מנדיון כדי לקבל פתרון עבודה מיקרומולרי אחד. הוסף 100 מיקרוליטרים של תמיסת XTT menadione לכל באר של צלחת microtiter 96 באר.לאחר מכן, לאחר כיסוי הצלחת עם מכסה רדיד אלומיניום, לדגור את הצלחת במשך שעתיים ב 37 מעלות צלזיוס בחושך. לבסוף, העבירו 80 מיקרוליטרים של הסופרנטנט הצבעוני מכל באר לצלחת טרייה של 96 בארות, וקראו את הצלחת בגודל 490 ננומטר. סרום מעכברים מחוסנים ב-Sap2-parapsilosis יכול למנוע את ההבשלה של ביופילמים מוכנים מראש של קנדידה טרופיקליס ב-65%, בהשוואה ל-45% בסרום מ-Sap2-אלביקנס, ו-55% בעכברים מחוסנים ב-Sap2-טרופיקליס.באופן כללי, עיכוב הביופילם על ידי סרום החיסון של Sap2 היה גבוה משמעותית מזה של סרום החיסון של Sham, שהוא 16% ו-13% בסרום טרום-חיסוני. עיכוב הביופילם היה קרוב לזניחות בשימוש ב-PBS וללא שליטה בסרום. יש לנקוט בזהירות מרבית בעת ביצוע שלבי הכביסה למניעת הפרעה לביופילמים.יש להכין את פתרון XTT ממש לפני השימוש, ולהוסיף לצלחת מיד. לאחר הליך זה, משתמשים יכולים להעריך את ההשפעה של חומרים אנטי פטרייתיים חדשים, מועמדים לחיסון או נוגדנים במהלך היווצרות ביופילם קנדידה והבשלתה במסגרות מחקר שונות תוך שימוש בזני פטריות שונים.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-מודלים של תרבות Pseudomonas aeruginosa Biofilms גדל על תאים חיים Airway האדם

Bacterial biofilms have been associated with a number of different human diseases, but biofilm development has generally been studied on non-living ...

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

96 microtiter ובכן פלייט מבוססי שיטה ליצירת ניטור ובדיקה של רגישות נגד פטריות קנדידה אלביקנס Biofilms

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

A Cell Free Assay System Estimating the Neutralizing Capacity of GM-CSF Antibody using Recombinant Soluble GM-CSF Receptor

Assay חינם Cell מערכת הערכת קיבולת נטרול של נוגדן GM-CSF באמצעות קולטן מסיס רקומביננטי GM-CSF

BACKGROUNDS: Previously, we demonstrated that neutralizing capacity but not the concentration of GM-CSF autoantibody was correlated with the disease ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

האפקט סינרגיסטי של אור וgentamycin הגלויים על<em&gt; Aeruginosa Pseudomona</em&gt; מיקרואורגניזמים

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

שימוש בכימיה לחץ כדי למדוד את ההשפעה של זיהום ויראלי בסינתזת RNA Host-Cell

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

במבחנה Assay כדי להעריך את ההשפעה של immunoregulatory מסלולים על פונקצית Effector הנייד HIV-ספציפית T מסוג CD4

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

שימוש Assay מונוציטים חד שכבתי להערכת Fcγ קולטן בתיווך Phagocytosis

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

Assay תואם תפוקה גבוהה כדי להעריך יעילות התרופה נגד Macrophage passaged<em&gt; שחפת Mycobacterium</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

קרינה המבוססת Assay Neuraminidase העיכוב להעריך את הרגישות של שפעת וירוסים אל Neuraminidase המונע המחלקה של תרופות אנטי-ויראליות

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

הרומן במבחנה פצע ריפוי הנועד להעריך את נדידת תאים

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...