Name: a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms
Uploaded: 2022-09-16T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Ramalingaswami-stipendet DBT-843-BIO (Institutt for bioteknologi, Indias regjering) og Early Career Research Award SER-1058-BIO (Science and Engineering Research Board, Indias regjering) til SR Forfatterne anerkjenner et ICMR-JRF-tilskudd til PC og DBT-JRF-tilskudd til PS. Forfatterne takker Dr. Ravikant Ranjan for forslag til manuskriptet og teknisk assistanse av Mr. Pradeep Singh Thakur under SEM.

BALB / c mus ble plassert i Small Animal Facility på IIT Roorkee. Alle dyrene ble vedlikeholdt i en 12 t: 12 h lys: mørk syklus ved 25 ° C og ble forsynt med pelletsdiett og vann ad libitum. Alle dyreprosedyrer ble godkjent av Institutional Animal Ethics Committee (IAEC) i IIT Roorkee.
1. Fremstilling av C. tropicalis
MERK: Soppen Candida tropicalis tilhører risikogruppe 2 patogener og er klassifisert som en BSL2 mikroor...

Svampinfeksjoner forårsaket av Candida-arter er forbundet med høy sykelighet og dødelighet over hele verden. Den økende trusselen om invasiv soppinfeksjon krever tidlig behandling av slike livstruende sykdommer. De fleste Candida-infeksjoner involverer dannelse av biofilmer, som holder seg til en rekke medisinske enheter og er ansvarlige for utholdenhet og tilbakefall av soppinfeksjoner i sykehusinnstillinger31. Biofilmer består av gjær- eller hyphalceller, og de utviser be...

Systemisk candidiasis er den fjerde hovedårsaken til nosokomiale infeksjoner, som er forbundet med høy sykelighet og dødelighet over hele verden. Globalt påvirker systemisk candidiasis ca. 700 000 individer1. Candida-arter, nemlig C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. glabrata og C. auris, er den vanligste årsaken til invasive Candida-infeksjoner 2. Candida-arter er opportunistiske patogener som produserer biofilmer3. Biofilmer er hovedsakelig assosiert med Candida virulens, og Candida tåler oksidative og osmotiske spenningsforhold ved å indusere biofilmdannelse4. Biofilmer modulerer videre uttrykket av virulensfaktorer og celleveggkomponenter og danner en eksopolymer beskyttelsesmatrise, som hjelper Candida til å tilpasse seg forskjellige vertsnisjer4. Biofilmer bidrar til gjærtilslutning på vertsvev og medisinske instrumenter5. Som sådan er biofilmdannelse forbundet med en fordel for gjær, da gjærceller i biofilmene kan unngå vertsimmunresponsen6. Biofilmdannelse beskytter også de patogene gjærene mot virkningen av antifungale stoffer5. Redusert følsomhet av C. albicans biofilmer til amfotericin B har blitt demonstrert av Pierce et al.7,8. Videre viser biofilmer antifungal stoffresistens mot flukonazol, noe som svekker effektiv behandling av systemisk candidiasis 9,10.
Mikrober har en iboende tendens til å feste seg til forskjellige biotiske og abiotiske overflater, noe som resulterer i biofilmdannelse. Candida albicans, som er en dimorf sopp, finnes i gjær- og hyphalformer, og biofilmdannelsen har blitt karakterisert i forskjellige in vitro og in vivo modellsystemer11. Trinnene i biofilmdannelse inkluderer adhesjon av Candida-celler til substratet, filamentasjon, proliferasjon og biofilmmodning11. I utgangspunktet holder gjærformen av C. albicans seg til substrater, inkludert medisinsk utstyr og humant vev, etterfulgt av filamentasjon og spredning av C. albicans i hyphal- og pseudohyphalformer, og til slutt modning av biofilmer innebygd i ekstracellulær matrise11. Biofilmdannelse bidrar i stor grad til C. albicans patogenesemekanismer12. Candida-arter danner stoffresistente biofilmer, noe som gjør utryddelsen utfordrende13. En liten delmengde av C. albicans biofilmproduserende populasjon har blitt beskrevet som svært motstandsdyktig mot antifungale legemidler amfotericin B og klorhexidin14. Det er verdt å merke seg at gjærceller i biofilm har høy motstand mot multimedikamentell behandling sammenlignet med gjærceller i planktonfasen og proliferasjonsfasen14. Det har blitt foreslått at gjærceller som finnes i biofilmer er svært tolerante mot antifungale stoffer, noe som bidrar til C. albicans overlevelse i biofilmer14. Disse eksisterende cellene ble rapportert å være fenotypiske varianter av C. albicans og ikke mutanter14. Videre er celler av Candida-biofilmer kjent som "persisterceller" tolerante overfor høye doser amfotericin-B-behandling og bidrar til Candida-overlevelse, og utgjør dermed en stor byrde av tilbakevendende systemiske Candida-infeksjoner hos høyrisikopersoner15.
Økningen i antifungal stoffresistens i Candida-stammer krever forskning for nye antifungale midler og immunterapier. Som det fremgår av de ovennevnte studiene, viser Candida biofilmer redusert følsomhet for antifungale stoffer. Derfor er det behov for forbedrede immunterapier for å kontrollere dannelsen av Candida biofilm. Tidligere studier har vist at CAGTA kan gi effektiv beskyttelse mot systemiske Candida-infeksjoner ved å hemme C. albicans biofilmdannelse in vitro16. En annen studie rapporterte at immunisering av mus med C. albicans rAls3-N-protein induserer høye antistofftitere som forstyrrer C. albicans biofilmdannelse in vitro17. Anti-Als3-N antistoffer utøvde også en hemmende effekt på C. albicans spredning fra biofilm17. NDV-3A-vaksine basert på C. albicans er for tiden under klinisk utprøving, og anti-NDV-3A sera ble også funnet å redusere C. auris biofilmdannelse18. En nylig studie identifiserte inhibering av biofilmdannelse av Sap2-antistoffer som en beskyttelsesmekanisme i en murinmodell av systemisk candidiasis19.
Dette papiret skisserer en detaljert in vitro-protokoll for å evaluere effekten av antigenspesifikke antistoffer tilstede i polyklonalt serum oppnådd fra forskjellige grupper av Sap2-vaksinerte mus på preformerte Candida tropicalis biofilmer. For å oppnå dette ble en metode basert på en XTT-reduksjonsanalyse optimalisert og utviklet i laboratoriet, som kan måle biofilmens levedyktighet på en rask, sensitiv og høy gjennomstrømningsmåte, i nærvær eller fravær av antistoffer.
XTT-analysen brukes til å måle cellulær metabolsk aktivitet som en indikator på cellens levedyktighet, cellulær proliferasjon og cytotoksisitet20. Denne kolorimetriske analysen er basert på reduksjonen av et gult tetrazoliumsalt, natrium 3'-[1-(fenylaminokarbonyl)-3,4-tetrazolium]-bis (4-metoksy-6-nitro) benzensulfonsyrehydrat (XTT) til et oransje formazanfargestoff av metabolsk aktive celler. Siden bare levedyktige celler kan redusere XTT, er mengden redusert XTT-formazan proporsjonal med intensiteten av farge og celle levedyktighet. Formazanfargestoffet som dannes er vannløselig og kvantifiseres direkte ved hjelp av en plateleser. På grunn av sin vannløselige natur tillater XTT-analysen studier av intakte biofilmer, samt undersøkelse av biofilmmedikamentfølsomhet, uten forstyrrelse av biofilmstruktur21. I tillegg er denne metoden implementert i Candida fungal levedyktighetsvurderinger på grunn av brukervennlighet, hastighet, nøyaktighet, høy gjennomstrømning og høy grad av reproduserbarhet 7,22.
I tillegg til XTT-reduksjonsanalysen er det også identifisert mange alternative teknikker for måling av biofilmmengde. Noen av disse inkluderer bruk av MTT-reduksjonsanalysen, krystallfiolettfarging, DNA-kvantifisering, kvantitativ PCR, proteinkvantifisering, tørrcellevektmåling og levedyktig kolonitelling. Disse prosedyrene varierer mye når det gjelder tids- og kostnadskrav. Taff og medarbeidere utførte en komparativ analyse av syv forskjellige Candida biofilmkvantifiseringsanalyser og fant at XTT-analysen ga den mest reproduserbare, nøyaktige og effektive metoden for kvantitativ estimering av C. albicans biofilmer23. Fargingsteknikker som krystallfiolett har visse begrensninger; Krystallfioletttesten bestemmer indirekte mengden biofilm ved å måle den optiske tettheten til den krystallfiolettfargede biofilmmatrisen og cellene. Selv om krystallfiolettanalysen gir et godt mål på biofilmmasse, gir den ikke et mål på biofilmens levedyktighet, da den flekker både mikrobielle celler og den ekstracellulære matrisen24. Dhale og medarbeidere rapporterte videre at XTT-reduksjonsanalysen var den mest følsomme, reproduserbare, nøyaktige, effektive og spesifikke metoden for å oppdage biofilmproduksjon sammenlignet med krystallfiolett analyse25. Litteraturrapporter har vist at XTT-analysen korrelerer godt med CFU / ml-parameteren i CFU-tellemetoden. Imidlertid, sammenlignet med XTT-analysen, er CFU-metoden arbeidsintensiv og langsom26. Videre kan det hende at fraksjonen av frittliggende levende celler ikke er representativ for den opprinnelige biofilmpopulasjonen27. Selv om XTT-reduksjonsanalysen virker som det beste tilgjengelige alternativet for å kvantifisere levedyktighet, er det noen begrensninger i denne teknikken. Mens XTT-metoden er nyttig for sammenligninger som involverer en soppstamme, kan bruken være begrenset når man sammenligner forskjellige soppstammer og arter. Interstrain sammenligninger kan være vanskelig i fravær av detaljert standardisering siden forskjellige stammer metaboliserer substrater med forskjellige evner21.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>NaCl : 4 g 
			KCl : 0.1 g 
			Na2HPO4:&#160; 0.72 g 
			KH2PO4 : 0.12 g 
			Water 500 mL. Adjust pH to 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plates</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>442404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Menadione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtiter Plate Reader</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multichannel pipette and tips</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Tarson</td>
			<td>460090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringers Lactate</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>sodium chloride 0.6 g sodium lactate 0.312 g potassium chloride 0.035 g calcium chloride 0.027 g Water 100 mL. Adjust to pH 7.0&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 MOPS</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>AT180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Agar</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Broth</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XTT&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>X6493</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms

Candida-arter er den fjerde vanligste årsaken til systemiske nosokomiale infeksjoner. Systemisk eller invasiv candidiasis involverer ofte biofilmdannelse på implanterte enheter eller katetre, som er forbundet med økt virulens og dødelighet. Biofilmer produsert av forskjellige Candida-arter utviser forbedret motstand mot ulike antifungale stoffer. Derfor er det behov for å utvikle effektive immunterapier eller tilleggsbehandlinger mot Candida biofilmer. Mens rollen som cellulær immunitet er godt etablert i anti-Candida-beskyttelse , har rollen som humoral immunitet blitt studert mindre.
Det har blitt antatt at hemming av biofilmdannelse og modning er en av hovedfunksjonene til beskyttende antistoffer, og Candida albicans bakterierørantistoffer (CAGTA) har vist seg å undertrykke in vitro vekst og biofilmdannelse av C. albicans tidligere. Dette papiret skisserer en detaljert protokoll for å evaluere rollen som antistoffer på biofilmer dannet av C. tropicalis. Metodikken for denne protokollen involverer C. tropicalis biofilmdannelse i 96-brønns mikrotiterplater, som deretter ble inkubert i nærvær eller fravær av antigenspesifikke antistoffer, etterfulgt av en 2,3-bis (2-metoksy-4-nitro-5-sulfofenyl) -5-karboksanilid-2H-tetrazolium (XTT) analyse for måling av metabolsk aktivitet av soppceller i biofilmen.
Spesifisiteten ble bekreftet ved bruk av egnede serumkontroller, inkludert Sap2-spesifikt antistoffutarmet serum. Resultatene viser at antistoffer tilstede i serum av immuniserte dyr kan hemme Candida biofilmmodning in vitro. Oppsummert gir denne artikkelen viktig innsikt i potensialet for antistoffer i utviklingen av nye immunterapier og synergistiske eller tilleggsbehandlinger mot biofilm under invasiv candidiasis. Denne in vitro-protokollen kan brukes til å kontrollere effekten av potensielle nye antifungale forbindelser på den metabolske aktiviteten til Candida-artsceller i biofilmer.

Candida tropicalis biofilmer ble dyrket i 96-brønns mikrotiterplater og avbildet ved 40x ved hjelp av et omvendt mikroskop (figur 1A). Biofilmen ble videre farget ved hjelp av krystallfiolett og observert ved 40x ved hjelp av et omvendt mikroskop (figur 1B). Scanning elektronmikroskopi viser et representativt bilde av C. tropicalis biofilm (figur 1C). For å utføre biofilmhemmingsanalysen ble 105 celle...

Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

En 96-brønns mikrotiterplatebasert protokoll ved bruk av en 2,3-bis (2-metoksy-4-nitro-5-sulfofenyl)-5-karboksanilid-2H-tetrazolium (XTT) reduksjonsanalyse er beskrevet her, for å studere antistoffers effekter på biofilmer dannet av C. tropicalis. Denne in vitro-protokollen kan brukes til å kontrollere effekten av potensielle nye antifungale forbindelser på den metabolske aktiviteten til Candida-artsceller i biofilmer.

En løselig tetrazoliumbasert reduksjonsanalyse for å evaluere effekten av antistoffer på candida tropicalis biofilmer

Candida species are the fourth-most common cause of systemic nosocomial infections. Systemic or invasive candidiasis frequently involves biofilm formation ...

Denne in vitro, 96-brønn-platebaserte protokollen kan brukes til å teste den hemmende effekten av antistoffer på nye antifungale midler på den metabolske aktiviteten til soppceller i Candida-biofilmer. Sammenlignet med andre metoder er dette en svært følsom, nøyaktig, høy gjennomstrømning, reproduserbar, brukervennlig og kostnadseffektiv teknikk for å evaluere effekten av antistoffer eller antifungale midler på utviklingen av Candida biofilmer. Denne analysen kan brukes til å vurdere effekten av nye legemiddelbaserte eller antistoffbaserte terapier, samt vaksinekandidater mot Candida-biofilmer, som er forbundet med alvorlighetsgraden av invasiv candidiasis.Denne metoden kan brukes til å teste effekten av nye antifungale midler eller antistoffer under biofilmdannelse eller modning i forskjellige innstillinger ved bruk av forskjellige soppstammer eller antistoffkilder. Demonstrere denne prosedyren vil være Mr.Pankaj Chandley, en PhD forsker som arbeider i laboratoriet mitt. Til å begynne med, legg til 100 mikroliter Candida tropicalis-kultur til en 96-brønns mikrotiterplate.Bruk en flerkanalspipette til å fylle de to siste kolonnene med 100 mikroliter RPMI 1640 MOPS medium alene. Dekk mikrotiterplaten med lokk og aluminiumsfolie og inkuber platen i 24 timer ved 37 grader Celsius under stasjonære forhold. Neste dag, aspirer mediet forsiktig ved hjelp av en flerkanals pipette.Snu platen forsiktig på blottingark og trykk for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Vask platen med 200 mikroliter 1X PBS ved hjelp av en flerkanals pipette. Aspirer PBS forsiktig med en flerkanalspipette, og vask to ganger med PBS.For å fjerne overflødig PBS, lufttørk platen i 30 minutter ved romtemperatur inne i et biologisk sikkerhetsskap. Klargjør seriefortynninger av varmeinaktiverte serumprøver i sterilt RPMI 1640 MOPS-medium. Tilsett 100 mikroliter av den valgte serumfortynningen til hver brønn i 96-brønns mikrotiterplaten.I kolonne 10 legger du bare til RPMI 1640 MOPS-medium for positiv kontroll med bare sopp. Tilsett en til 50 fortynning av serum til alle brønner i kolonne 11 for å tjene som ikke-sopp pluss serumnegativ kontroll. Etter å ha dekket platen med lokk og aluminiumsfolie, inkuber platen i 24 timer ved 37 grader Celsius.Neste dag, etter å ha aspirert serumet forsiktig ved hjelp av en flerkanalspipette, trykk forsiktig på den omvendte platen for å fjerne gjenværende serum. Gjenta PBS-vasken tre ganger, og lufttørk platen i 30 minutter ved romtemperatur inne i et biologisk sikkerhetsskap for å tørke overflødig PBS. Oppløs deretter 25 milligram XTT i 50 ml filtersterilisert Ringers laktat.Aliquot 10 milliliter i separate rør. Dekk den med aluminiumsfolie og oppbevar den ved minus 80 grader Celsius. Deretter oppløses 8, 6 milligram menadion i fem milliliter aceton.Og etter å ha distribuert 50 mikroliter i 100 separate mikrorør, lagre aliquots ved minus 80 grader Celsius. Ta 10 milliliter XTT og tilsett en mikroliter menadion for å oppnå en mikromolar arbeidsløsning. Tilsett 100 mikroliter av XTT-menadionoppløsningen per brønn på 96-brønns mikrotiterplaten.Deretter, etter å ha dekket platen med lokk og aluminiumsfolie, inkuberer platen i to timer ved 37 grader Celsius i mørket. Til slutt overfører du 80 mikroliter av den fargede supernatanten fra hver brønn til en fersk 96-brønnsplate, og leser platen på 490 nanometer. Serum fra Sap2-parapsilosis-immuniserte mus kan forhindre modning av preformed Candida tropicalis biofilmer med 65% sammenlignet med 45% i serum fra Sap2-albicans, og 55% i Sap2-tropicalis-immuniserte mus.Generelt var biofilmhemming av Sap2 immunserum signifikant høyere enn ved humbugimmunserum, som er 16% og 13% i preimmunt serum. Biofilmhemming var nær ubetydelig ved bruk av PBS og ingen serumkontroll. Ytterste forsiktighet bør utvises mens du utfører vasketrinnene for å forhindre forstyrrelser av biofilmer.XTT-oppløsningen skal tilberedes rett før bruk, og tilsettes platen umiddelbart. Etter denne prosedyren kan brukerne evaluere effekten av nye antifungale midler, vaksinekandidater eller antistoffer under Candida biofilmdannelse og modning i forskjellige forskningsinnstillinger ved hjelp av forskjellige soppstammer.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Bacterial biofilms have been associated with a number of different human diseases, but biofilm development has generally been studied on non-living ...

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

A Cell Free Assay System Estimating the Neutralizing Capacity of GM-CSF Antibody using Recombinant Soluble GM-CSF Receptor

BACKGROUNDS: Previously, we demonstrated that neutralizing capacity but not the concentration of GM-CSF autoantibody was correlated with the disease ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

Synergieffekten av synlig lys og Gentamycin på<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Mikroorganismer

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Ved hjelp Klikk kjemi å måle effekten av virusinfeksjon på Host-Cell RNA syntese

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro analysen å evaluere virkningen av immunoregulatory Pathways på HIV-spesifikke CD4 T Cell effektorfunksjon

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Bruk av en Monocyte ett lag Assay å evaluere Fcy Receptor-mediert Fagocytose

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

En High-throughput Kompatibel Assay å evaluere Drug Effekt mot macrophage passert<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Fluorescens-baserte Neuraminidase inhiberingsanalyse for å vurdere i hvilken grad influensavirus til neuraminidase Inhibitor Class of Antivirale

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

En roman In Vitro sår helbredelse analysen for å vurdere celle migrasjon

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...