Name: a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms
Uploaded: 2022-09-16T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

Detta arbete stöddes av Ramalingaswami-bidraget DBT-843-BIO (Department of Biotechnology, Government of India) och Early Career Research Award SER-1058-BIO (Science and Engineering Research Board, Indiens regering) till SR Författarna erkänner ett ICMR-JRF-bidrag till P.C och DBT-JRF-bidrag till P.S. Författarna tackar Dr. Ravikant Ranjan för förslag på manuskriptet och teknisk hjälp av Pradeep Singh Thakur under SEM.

BALB/c-möss inhystes i smådjursanläggningen vid IIT Roorkee. Alla djur hölls i en 12 h:12 h ljus:mörk cykel vid 25 °C och försågs med en pelletsdiet och vatten ad libitum. Alla djurförsök godkändes av IIT Roorkees institutionella djurförsöksetiska kommitté (IAEC).
1. Beredning av C. tropicalis
OBS: Svampen Candida tropicalis tillhör riskgrupp 2-patogener och klassificeras som en BSL2-mikroorganism. Använd all...

Svampinfektioner orsakade av Candida-arter är förknippade med hög sjuklighet och dödlighet över hela världen. Det växande hotet om invasiv svampinfektion kräver tidig hantering av sådana livshotande sjukdomar. De flesta Candida-infektioner involverar bildandet av biofilmer, som följer en mängd olika medicintekniska produkter och är ansvariga för uthållighet och återkommande svampinfektioner i sjukhusinställningar31. Biofilmer består av jäst- eller hyphalceller, ...

Systemisk candidiasis är den fjärde huvudorsaken till nosokomiala infektioner, som är förknippade med hög sjuklighet och dödlighet över hela världen. Globalt påverkar systemisk candidiasis cirka 700 000 individer1. Candida-arter, nämligen C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. glabrata och C. auris, är den vanligaste orsaken till invasiva Candida-infektioner 2. Candida-arter är opportunistiska patogener som producerar biofilmer3. Biofilmer är främst associerade med Candida virulens, och Candida kan motstå oxidativa och osmotiska stressförhållanden genom att inducera biofilmbildning4. Biofilmer modulerar ytterligare uttrycket av virulensfaktorer och cellväggskomponenter och bildar en exopolymer skyddsmatris, vilket hjälper Candida att anpassa sig till olika värdnischer4. Biofilmer bidrar till jästföljsamhet på värdvävnader och medicinska instrument5. Som sådan är biofilmbildning associerad med en fördel för jäst, eftersom jästceller i biofilmerna kan undvika värdens immunsvar6. Biofilmbildning skyddar också de patogena jästarna från verkan av svampdödande läkemedel5. Minskad känslighet för C. albicans biofilmer för amfotericin B har visats av Pierce et al.7,8. Dessutom visar biofilmer svampdödande läkemedelsresistens mot flukonazol, vilket försämrar effektiv hantering av systemisk candidiasis 9,10.
Mikrober har en inneboende tendens att fästa vid olika biotiska och abiotiska ytor, vilket resulterar i biofilmbildning. Candida albicans, som är en dimorf svamp, finns i jäst- och hyphalformer, och dess biofilmbildning har karakteriserats i olika in vitro- och in vivo-modellsystem 11. Stegen i biofilmbildning inkluderar vidhäftning av Candida-celler till substratet, filamentation, proliferation och biofilmmognad11. Ursprungligen fäster jästformen av C. albicans på substrat, inklusive medicintekniska produkter och mänsklig vävnad, följt av filamentation och proliferation av C. albicans i hyphal och pseudohyphal former, och slutligen mognad av biofilmer inbäddade i extracellulär matris11. Biofilmbildning bidrar till stor del till C. albicans patogenesmekanismer12. Candida-arter bildar läkemedelsresistenta biofilmer, vilket gör deras utrotning utmanande13. En liten delmängd av den C. albicans biofilmproducerande populationen har beskrivits som mycket resistent mot de svampdödande läkemedlen amfotericin B och klorhexidin14. Observera att jästceller i biofilmer uppvisar hög resistens mot multidrogterapi jämfört med jästceller i planktonfasen och proliferationsfas14. Det har föreslagits att jästceller som finns i biofilmer är mycket toleranta mot svampdödande läkemedel, vilket bidrar till C. albicans överlevnad i biofilmer14. Dessa befintliga celler rapporterades vara fenotypiska varianter av C. albicans och inte mutanter14. Dessutom är celler av Candida-biofilmer som kallas "persisterceller" toleranta mot höga doser av amfotericin-B-behandling och bidrar till Candida-överlevnad, vilket utgör en stor börda av återkommande systemiska Candida-infektioner hos högriskindivider 15.
Ökningen av svampdödande läkemedelsresistens i Candida-stammar kräver forskning för nya svampdödande medel och immunterapier. Som framgår av ovannämnda studier visar Candida biofilmer minskad mottaglighet för svampdödande läkemedel. Därför finns det ett behov av förbättrade immunterapier för att kontrollera Candida biofilmbildning. Tidigare studier har visat att CAGTA kan ge ett effektivt skydd mot systemiska Candidainfektioner genom att hämma C. albicans biofilmbildning in vitro16. En annan studie rapporterade att immunisering av möss med C. albicans rAls3-N-protein inducerar höga antikroppstitrar som stör C. albicans biofilmbildning in vitro17. Anti-Als3-N-antikroppar utövade också en hämmande effekt på C. albicans spridning från biofilmer17. NDV-3A-vaccin baserat på C. albicans är för närvarande under klinisk prövning och anti-NDV-3A-serum visade sig också minska C. auris biofilmbildning18. En nyligen genomförd studie identifierade hämning av biofilmbildning av Sap2-antikroppar som en skyddsmekanism i en murin modell av systemisk candidiasis19.
Detta dokument beskriver ett detaljerat in vitro-protokoll för utvärdering av effekten av antigenspecifika antikroppar närvarande i polyklonalt serum erhållet från olika grupper av Sap2-vaccinerade möss på förformade Candida tropicalis-biofilmer . För att uppnå detta optimerades och utvecklades en metod baserad på en XTT-reduktionsanalys i laboratoriet, som kan mäta biofilmens livskraft på ett snabbt, känsligt och högt genomströmningssätt, i närvaro eller frånvaro av antikroppar.
XTT-analysen används för att mäta cellulär metabolisk aktivitet som en indikator på cellviabilitet, cellulär proliferation och cytotoxicitet20. Denna kolorimetriska analys är baserad på reduktionen av ett gult tetrazoliumsalt, natrium 3'-[1-(fenylaminokarbonyl)-3,4-tetrazolium]-bis (4-metoxi-6-nitro) bensensulfonsyrahydrat (XTT) till ett orange formazanfärgämne av metaboliskt aktiva celler. Eftersom endast livskraftiga celler kan minska XTT är mängden reducerad XTT-formazan proportionell mot intensiteten av färg och cellviabilitet. Det formazanfärgade färgämnet som bildas är vattenlösligt och kvantifieras direkt med hjälp av en plattläsare. På grund av sin vattenlösliga natur tillåter XTT-analysen studier av intakta biofilmer, liksom undersökning av biofilmläkemedelskänslighet, utan störning av biofilmstruktur21. Dessutom implementeras denna metod i Candida svamp livskraft bedömningar på grund av dess användarvänlighet, hastighet, noggrannhet, hög genomströmning, och hög grad av reproducerbarhet 7,22.
Förutom XTT-reduktionsanalysen har många alternativa tekniker också identifierats för mätning av biofilmkvantitet. Några av dessa inkluderar användningen av MTT-reduktionsanalysen, kristallviolett färgning, DNA-kvantifiering, kvantitativ PCR, proteinkvantifiering, torrcellsviktmätning och livskraftig koloniräkning. Dessa förfaranden varierar mycket när det gäller deras tids- och kostnadskrav. utförde en jämförande analys av sju olika Candida-biofilmkvantifieringsanalyser och fann att XTT-analysen gav den mest reproducerbara, exakta och effektiva metoden för kvantitativ uppskattning av C. albicans biofilmer23. Färgningstekniker som kristallviolett har vissa begränsningar; Det kristallvioletta testet bestämmer indirekt mängden biofilm genom att mäta den optiska densiteten hos den kristallviolettfärgade biofilmmatrisen och cellerna. Även om den kristallvioletta analysen ger ett bra mått på biofilmmassa, ger den inte ett mått på biofilmens livskraft eftersom den fläckar både mikrobiella celler och den extracellulära matrisen24. rapporterade vidare att XTT-reduktionsanalysen var den mest känsliga, reproducerbara, exakta, effektiva och specifika metoden för att detektera biofilmproduktion jämfört med kristallviolett analys25. Litteraturrapporter har visat att XTT-analysen korrelerar väl med CFU/ml-parametern i CFU-räkningsmetoden. Men jämfört med XTT-analysen är CFU-metoden arbetsintensiv och långsam26. Dessutom kan det hända att andelen fristående levande celler inte är representativ för den ursprungliga biofilmpopulationen27. Även om XTT-reduktionsanalysen verkar vara det bästa tillgängliga alternativet för att kvantifiera lönsamheten, finns det några begränsningar med denna teknik. Medan XTT-metoden är användbar för jämförelser som involverar en svampstam, kan dess användning vara begränsad när man jämför olika svampstammar och arter. Interstrain jämförelser kan vara svåra i avsaknad av detaljerad standardisering eftersom olika stammar metaboliserar substrat med olika kapacitet21.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>NaCl : 4 g 
			KCl : 0.1 g 
			Na2HPO4:&#160; 0.72 g 
			KH2PO4 : 0.12 g 
			Water 500 mL. Adjust pH to 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plates</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>442404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Menadione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtiter Plate Reader</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multichannel pipette and tips</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Tarson</td>
			<td>460090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringers Lactate</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>sodium chloride 0.6 g sodium lactate 0.312 g potassium chloride 0.035 g calcium chloride 0.027 g Water 100 mL. Adjust to pH 7.0&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 MOPS</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>AT180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Agar</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Broth</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XTT&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>X6493</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms

Candida-arter är den fjärde vanligaste orsaken till systemiska nosokomiala infektioner. Systemisk eller invasiv candidiasis involverar ofta biofilmbildning på implanterade enheter eller katetrar, vilket är förknippat med ökad virulens och dödlighet. Biofilmer som produceras av olika Candida-arter uppvisar ökat motstånd mot olika svampdödande läkemedel. Därför finns det ett behov av att utveckla effektiva immunterapier eller tilläggsbehandlingar mot Candida-biofilmer . Medan rollen som cellulär immunitet är väl etablerad i anti-Candida-skydd , har rollen som humoral immunitet studerats mindre.
Det har antagits att hämning av biofilmbildning och mognad är en av de viktigaste funktionerna för skyddande antikroppar, och Candida albicans bakterierörsantikroppar (CAGTA) har visat sig undertrycka in vitro-tillväxt och biofilmbildning av C. albicans tidigare. Detta dokument beskriver ett detaljerat protokoll för utvärdering av antikroppars roll på biofilmer bildade av C. tropicalis. Metoden för detta protokoll involverar C. tropicalis biofilmbildning i 96-brunns mikrotiterplattor, som sedan inkuberades i närvaro eller frånvaro av antigenspecifika antikroppar, följt av en 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenyl)-5-karboxanilid-2H-tetrazolium (XTT) analys för mätning av den metaboliska aktiviteten hos svampceller i biofilmen.
Specificiteten bekräftades genom att använda lämpliga serumkontroller, inklusive Sap2-specifikt antikroppsutarmat serum. Resultaten visar att antikroppar som finns i serum hos immuniserade djur kan hämma Candida biofilmmognad in vitro. Sammanfattningsvis ger detta dokument viktiga insikter om antikroppars potential att utveckla nya immunterapier och synergistiska eller kompletterande behandlingar mot biofilmer under invasiv candidiasis. Detta in vitro-protokoll kan användas för att kontrollera effekten av potentiella nya svampdödande föreningar på den metaboliska aktiviteten hos Candida-artceller i biofilmer.

Candida tropicalis biofilmer odlades i 96-brunns mikrotiterplattor och avbildades vid 40x med hjälp av ett inverterat mikroskop (figur 1A). Biofilmen färgades vidare med kristallviolett och observerades vid 40x med hjälp av ett inverterat mikroskop (figur 1B). Svepelektronmikroskopi visar en representativ bild av C. tropicalis biofilm (figur 1C). För att utföra biofilmhämningsanalysen tillsattes 105</sup...

Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

Häri beskrivs ett 96-brunns mikrotiterplattbaserat protokoll som använder en 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenyl)-5-karboxanilid-2H-tetrazolium (XTT) reduktionsanalys för att studera antikroppars effekter på biofilmer bildade av C. tropicalis. Detta in vitro-protokoll kan användas för att kontrollera effekten av potentiella nya svampdödande föreningar på den metaboliska aktiviteten hos Candida-artceller i biofilmer.

En löslig tetrazoliumbaserad reduktionsanalys för att utvärdera effekten av antikroppar på Candida tropicalis-biofilmer

Candida species are the fourth-most common cause of systemic nosocomial infections. Systemic or invasive candidiasis frequently involves biofilm formation ...

Detta in vitro, 96-välplatta-baserade protokoll kan användas för att testa den hämmande effekten av antikroppar på nya svampdödande medel på den metaboliska aktiviteten hos svampceller i Candida-biofilmer. Jämfört med andra metoder är detta en mycket känslig, exakt, hög genomströmning, reproducerbar, användarvänlig och kostnadseffektiv teknik för att utvärdera effekten av antikroppar eller antifungaler på utvecklingen av Candida-biofilmer. Denna analys kan användas för att bedöma effekten av nya läkemedelsbaserade eller antikroppsbaserade terapier, liksom vaccinkandidater mot Candida-biofilmer, som är associerade med svårighetsgraden av invasiv candidiasis.Denna metod kan användas för att testa effekten av nya svampdödande medel eller antikroppar under biofilmbildning eller mognad i olika miljöer med hjälp av olika svampstammar eller antikroppskällor. Demonstrerar denna procedur kommer att vara Mr.Pankaj Chandley, en doktorandforskare som arbetar i mitt laboratorium. Till att börja med, tillsätt 100 mikroliter Candida tropicalis-kultur till en 96-brunns mikrotiterplatta.Använd en flerkanalig pipett och fyll de två sista kolumnerna med 100 mikroliter RPMI 1640 MOPS-medium ensam. Täck mikrotiterplattan med lock och aluminiumfolie och inkubera plattan i 24 timmar vid 37 grader Celsius under stationära förhållanden. Nästa dag, aspirera mediet försiktigt med en flerkanalig pipett.Vänd försiktigt plattan på blottningsark och tryck för att ta bort eventuellt kvarvarande medium. Tvätta plattan med 200 mikroliter 1X PBS med en flerkanalig pipett. Aspirera PBS försiktigt med en flerkanalig pipett och tvätta två gånger med PBS.För att ta bort överskott av PBS, lufttorka plattan i 30 minuter vid rumstemperatur inuti ett biologiskt säkerhetsskåp. Bered seriella utspädningar av värmeinaktiverade serumprover i sterilt RPMI 1640 MOPS-medium. Tillsätt 100 mikroliter av den valda serumutspädningen till varje brunn på 96-brunns mikrotiterplattan.I kolumn 10, lägg till endast RPMI 1640 MOPS-medium för den positiva kontrollen endast för svamp. Tillsätt en till 50 utspädning av serum till alla brunnar i kolumn 11 för att fungera som ingen svamp plus serumnegativ kontroll. Efter att ha täckt plattan med lock och aluminiumfolie, inkubera plattan i 24 timmar vid 37 grader Celsius.Nästa dag, efter att ha aspirerat serumet försiktigt med en flerkanalig pipett, knacka försiktigt på den inverterade plattan för att ta bort eventuellt kvarvarande serum. Upprepa PBS-tvätten tre gånger och lufttorka plattan i 30 minuter vid rumstemperatur inuti ett biologiskt säkerhetsskåp för att torka eventuellt överskott av PBS. Lös sedan upp 25 milligram XTT i 50 ml filtersteriliserat Ringers laktat.Alikvot 10 ml i separata rör. Täck den med aluminiumfolie och förvara den vid minus 80 grader Celsius. Lös sedan upp 8,6 milligram menadion i fem milliliter aceton.Och efter att ha fördelat 50 mikroliter i 100 separata mikrorör, lagra alikvoterna vid minus 80 grader Celsius. Ta 10 ml XTT och tillsätt en mikroliter menadion för att få en mikromolär arbetslösning. Tillsätt 100 mikroliter av XTT-menadionlösningen per brunn på 96-brunns mikrotiterplattan.Därefter, efter att ha täckt plattan med lock och aluminiumfolie, inkubera plattan i två timmar vid 37 grader Celsius i mörkret. Slutligen överför 80 mikroliter av den färgade supernatanten från varje brunn till en ny 96-brunnsplatta och läs plattan på 490 nanometer. Serum från Sap2-parapsilos-immuniserade möss kan förhindra mognad av förformade Candida tropicalis-biofilmer med 65% jämfört med 45% i serum från Sap2-albicans och 55% i Sap2-tropicalis-immuniserade möss.I allmänhet var biofilmhämning av Sap2-immunserum signifikant högre än för bluffimmunserum, vilket är 16% och 13% i pre-immunserum. Biofilmhämning var nära försumbar vid användning av PBS och ingen serumkontroll. Största försiktighet bör iakttas när tvättstegen utförs för att förhindra störningar i biofilmer.XTT-lösningen ska beredas strax före användning och tillsättas till plattan omedelbart. Efter denna procedur kan användare utvärdera effekten av nya svampdödande medel, vaccinkandidater eller antikroppar under Candida biofilmbildning och mognad i olika forskningsinställningar med olika svampstammar.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-kultur modeller av Pseudomonas aeruginosa Biofilmer odlas på levande mänskliga Airway Cells

Bacterial biofilms have been associated with a number of different human diseases, but biofilm development has generally been studied on non-living ...

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

En 96 Väl mikrotiterplatta-baserad metod för övervakning Bildning och svampdödande resistensbestämning av Candida albicans Biofilmer

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

A Cell Free Assay System Estimating the Neutralizing Capacity of GM-CSF Antibody using Recombinant Soluble GM-CSF Receptor

En cell gratis analyssystem uppskatta neutraliserande förmåga av GM-CSF antikroppar med hjälp av rekombinant Löslig GM-CSF-receptorn

BACKGROUNDS: Previously, we demonstrated that neutralizing capacity but not the concentration of GM-CSF autoantibody was correlated with the disease ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

Den synergistiska effekten av synligt ljus och Gentamycin på<em&gt; Pseudomona aeruginosa</em&gt; Mikroorganismer

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Använda klicka kemi för att mäta effekten av virusinfektion på Host-cell RNA-syntes

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In vitro-analys för att utvärdera effekten av immunPathWays på HIV-specifika CD4 T-cell effektorfunktion

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Användning av en monocyt Monolayer analys för att utvärdera Fcy-receptor-medierad fagocytos

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

En hög kapacitet Kompatibel analys för att utvärdera läkemedlets effektivitet mot makrofag passe<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Fluorescens-baserade neuraminidas Inhibition analys för att bedöma känsligheten hos influensavirus till The neuraminidashämmaren Class of Virushämmande

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

En roman In Vitro Wound Healing analys för att utvärdera cellmigration

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...