Name: a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms
Uploaded: 2022-09-16T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

Bu çalışma, Ramalingaswami hibesi DBT-843-BIO (Hindistan Hükümeti Biyoteknoloji Bölümü) ve Erken Kariyer Araştırma Ödülü SER-1058-BIO (Bilim ve Mühendislik Araştırma Kurulu, Hindistan Hükümeti) tarafından S.R.'ye desteklenmiştir. Yazarlar, PS'ye ICMR-JRF hibesini ve PS'ye DBT-JRF hibesini kabul etmektedir. Yazarlar, Dr. Ravikant Ranjan'a, SEM sırasında Pradeep Singh Thakur'un el yazması ve teknik yardımı hakkındaki önerileri için teşekkür eder.

BALB / c fareleri, IIT Roorkee'deki Küçük Hayvan Tesisi'nde barındırıldı. Tüm hayvanlar 25 ° C'de 12 saat: 12 saat aydınlık: karanlık döngüde tutuldu ve bir pelet diyeti ve su ad libitum ile sağlandı. Tüm hayvan prosedürleri, IIT Roorkee'nin Kurumsal Hayvan Etiği Komitesi (IAEC) tarafından onaylanmıştır.
1. C. tropicalis'in hazırlanması
NOT: Candida tropicalis mantarı Risk Grubu 2 patojenlerine aitt...

Candida türlerinin neden olduğu mantar enfeksiyonları tüm dünyada yüksek morbidite ve mortalite oranları ile ilişkilidir. İnvaziv mantar enfeksiyonunun artan tehdidi, hayatı tehdit eden bu tür hastalıkların erken yönetimini gerektirir. Çoğu Candida enfeksiyonu, çeşitli tıbbi cihazlara yapışan ve hastane ortamlarında mantar enfeksiyonlarının kalıcılığından ve nüksünden sorumlu olan biyofilmlerin oluşumunu içerir31. Biyofilmler maya veya hifal hücr...

Sistemik kandidiyazis, tüm dünyada yüksek morbidite ve mortalite oranları ile ilişkili olan hastane enfeksiyonlarının dördüncü majör nedenidir. Küresel olarak, sistemik kandidiyaz yaklaşık 700.000 kişiyi etkilemektedir1. Candida türleri, yani C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. glabrata ve C. auris, invaziv Candida enfeksiyonlarının en yaygın nedenidir2. Candida türleri, biyofilm üreten fırsatçı patojenlerdir3. Biyofilmler ağırlıklı olarak Candida virülansı ile ilişkilidir ve Candida, biyofilm oluşumunu indükleyerek oksidatif ve ozmotik stres koşullarına dayanabilir4. Biyofilmler ayrıca virülans faktörlerinin ve hücre duvarı bileşenlerinin ekspresyonunu modüle eder ve Candida'nın farklı konakçı nişlerine uyum sağlamasına yardımcı olan ekzopolimerik koruyucu bir matris oluşturur4. Biyofilmler konakçı dokularda ve tıbbi aletlerde maya yapışmasına katkıda bulunur5. Bu nedenle, biyofilm oluşumu mayalara bir avantaj ile ilişkilidir, çünkü biyofilmlerdeki maya hücreleri konakçı bağışıklık tepkisinden kaçabilir6. Biyofilm oluşumu ayrıca patojenik mayaları antifungal ilaçların etkisinden korur5. C. albicans biyofilmlerinin amfoterisin B'ye duyarlılığının azalması Pierce ve ark.7,8 tarafından gösterilmiştir. Ayrıca, biyofilmler flukonazole karşı antifungal ilaç direnci gösterir ve bu da sistemik kandidiyazisin etkin yönetimini bozar 9,10.
Mikroplar, çeşitli biyotik ve abiyotik yüzeylere yapışma konusunda içsel bir eğilime sahiptir ve bu da biyofilm oluşumuna neden olur. Dimorfik bir mantar olan Candida albicans, maya ve hifal formlarında bulunur ve biyofilm oluşumu çeşitli in vitro ve in vivo model sistemlerde karakterize edilmiştir11. Biyofilm oluşumunun aşamaları, Candida hücrelerinin substrata yapışmasını, filamentasyonu, proliferasyonu ve biyofilm olgunlaşmasını içerir11. Başlangıçta, C. albicans'ın maya formu, tıbbi cihazlar ve insan dokusu da dahil olmak üzere substratlara yapışır, bunu C. albicans'ın hifal ve psödohifal formlara filamentasyonu ve çoğalması ve son olarak hücre dışı matris11'e gömülü biyofilmlerin olgunlaşması izler. Biyofilm oluşumu C. albicans patogenez mekanizmalarına büyük ölçüde katkıda bulunur12. Candida türleri ilaca dirençli biyofilmler oluşturur ve bu da eradikasyonlarını zorlaştırır13. C. albicans biyofilm üreten popülasyonun küçük bir alt kümesi, antifungal ilaçlar amfoterisin B ve klorheksidin14'e karşı oldukça dirençli olarak tanımlanmıştır. Biyofilmlerdeki maya hücreleri, planktonik faz ve proliferasyon fazı14'teki maya hücrelerine kıyasla çoklu ilaç tedavisine karşı yüksek direnç gösterir. Biyofilmlerde bulunan maya hücrelerinin, biyofilmlerde C. albicans'ın hayatta kalmasına katkıda bulunan antifungal ilaçlara karşı oldukça toleranslı olduğu öne sürülmüştür14. Bu mevcut hücrelerin mutantlar değil C. albicans'ın fenotipik varyantları olduğu bildirilmiştir14. Ayrıca, "kalıcı hücreler" olarak bilinen Candida biyofilmlerinin hücreleri, yüksek dozlarda amfoterisin-B tedavisine toleranslıdır ve Candida'nın hayatta kalmasına katkıda bulunur, böylece yüksek riskli bireylerde tekrarlayan sistemik Candida enfeksiyonlarının büyük bir yükünü oluşturur15. 
Candida suşlarında antifungal ilaç direncindeki artış, yeni antifungal ajanlar ve immünoterapiler için araştırma yapılmasını gerektirmektedir. Yukarıda belirtilen çalışmalardan da anlaşılacağı gibi, Candida biyofilmleri antifungal ilaçlara duyarlılığın azaldığını göstermektedir. Bu nedenle, Candida biyofilm oluşumunu kontrol etmek için geliştirilmiş immünoterapilere ihtiyaç vardır. Daha önceki çalışmalar, CAGTA'nın in vitro16 C. albicans biyofilm oluşumunu inhibe ederek sistemik Candida enfeksiyonlarına karşı etkili koruma sağlayabileceğini göstermiştir. Başka bir çalışma, farelerin C. albicans rAls3-N proteini ile bağışıklanmasının, in vitro17 C. albicans biyofilm oluşumuna müdahale eden yüksek antikor titrelerini indüklediğini bildirmiştir. Anti-Als3-N antikorları ayrıca biyofilmlerden C. albicans dispersiyonu üzerinde inhibitör bir etki göstermiştir17. C. albicans'a dayanan NDV-3A aşısı şu anda klinik deneme aşamasındadır ve anti-NDV-3A serumlarının da C. auris biyofilm oluşumunu azalttığı bulunmuştur18. Yakın zamanda yapılan bir çalışmada, sistemik kandidiyazis19'un murin modelinde bir koruma mekanizması olarak Sap2-antikorları tarafından biyofilm oluşumunun inhibisyonu tanımlanmıştır.
Bu yazıda, farklı Sap2 aşılı fare gruplarından elde edilen poliklonal serumda bulunan antijene özgü antikorların önceden oluşturulmuş Candida tropicalis biyofilmleri üzerindeki etkisini değerlendirmek için ayrıntılı bir in vitro protokol özetlenmiştir. Bunu başarmak için, laboratuvarda, antikorların varlığında veya yokluğunda biyofilm canlılığını hızlı, hassas ve yüksek verimli bir şekilde ölçebilen bir XTT indirgeme testine dayanan bir yöntem optimize edilmiş ve geliştirilmiştir.
XTT testi, hücre canlılığının, hücresel proliferasyonun ve sitotoksisitenin bir göstergesi olarak hücresel metabolik aktiviteyi ölçmek için kullanılır20. Bu kolorimetrik tahlil, sarı bir tetrazolyum tuzunun, sodyum 3'-[1-(fenilaminokarbonil)-3,4-tetrazolium]-bis (4-metoksi-6-nitro) benzen sülfonik asit hidratının (XTT) metabolik olarak aktif hücreler tarafından turuncu bir formazan boyasına indirgenmesine dayanmaktadır. Sadece canlı hücreler XTT'yi azaltabildiğinden, indirgenmiş XTT formazan miktarı, rengin yoğunluğu ve hücre canlılığı ile orantılıdır. Oluşan formazan boya suda çözünür ve bir plaka okuyucu kullanılarak doğrudan ölçülür. Suda çözünür doğası nedeniyle, XTT testi, biyofilm yapısının bozulmasından bozulmamış biyofilmlerin incelenmesine ve biyofilm ilaç duyarlılığının incelenmesine izin verir21. Ek olarak, bu yöntem kullanım kolaylığı, hızı, doğruluğu, yüksek verimi ve yüksek derecede tekrarlanabilirliği nedeniyle Candida mantar canlılığı değerlendirmelerinde uygulanır 7,22.
XTT indirgeme testine ek olarak, biyofilm miktarının ölçümü için çok sayıda alternatif teknik de tanımlanmıştır. Bunlardan bazıları MTT indirgeme testi, kristal menekşe boyama, DNA nicelleştirme, kantitatif PCR, protein miktarı, kuru hücre ağırlığı ölçümü ve canlı koloni sayımının kullanımını içerir. Bu prosedürler zaman ve maliyet gereksinimleri açısından büyük farklılıklar gösterir. Taff ve ark. yedi farklı Candida biyofilm kantitasyon testinin karşılaştırmalı bir analizini gerçekleştirdiler ve XTT testinin C. albicans biyofilmleri23'ün nicel tahmini için en tekrarlanabilir, doğru ve verimli yöntemi sağladığını buldular. Kristal menekşe gibi boyama tekniklerinin belirli sınırlamaları vardır; kristal menekşe testi, kristal menekşe boyalı biyofilm matrisinin ve hücrelerinin optik yoğunluğunu ölçerek dolaylı olarak biyofilm miktarını belirler. Kristal menekşe tahlili iyi bir biyofilm kütlesi ölçüsü sağlasa da, hem mikrobiyal hücreleri hem de hücre dışı matris24'ü boyadığı için biyofilm canlılığının bir ölçüsünü vermez. Dhale ve ark. ayrıca, XTT indirgeme testinin, kristal menekşe testi25'e kıyasla biyofilm üretimini tespit etmek için en hassas, tekrarlanabilir, doğru, verimli ve spesifik yöntem olduğunu bildirmiştir. Literatür raporları, XTT testinin CFU sayma yöntemindeki CFU / mL parametresi ile iyi ilişkili olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, XTT testi ile karşılaştırıldığında, CFU yöntemi emek yoğun ve yavaş26'dır. Ayrıca, ayrılmış canlı hücrelerin fraksiyonu, başlangıçtaki biyofilm popülasyonu27'yi temsil etmeyebilir. XTT indirgeme testi, uygulanabilirliği ölçmek için mevcut en iyi seçenek gibi görünse de, bu tekniğin birkaç sınırlaması vardır. XTT yöntemi, bir mantar suşunu içeren karşılaştırmalar için yararlı olsa da, farklı mantar suşlarını ve türlerini karşılaştırırken kullanımı sınırlı olabilir. Ayrıntılı standardizasyonun yokluğunda interstrain karşılaştırmaları zor olabilir, çünkü farklı suşlar farklı yeteneklere sahip substratları metabolize eder21.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>NaCl : 4 g 
			KCl : 0.1 g 
			Na2HPO4:&#160; 0.72 g 
			KH2PO4 : 0.12 g 
			Water 500 mL. Adjust pH to 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical centrifuge tubes</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>546041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plates</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>442404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Menadione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtiter Plate Reader</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multichannel pipette and tips</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Tarson</td>
			<td>460090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringers Lactate</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepared in lab</td>
			<td>sodium chloride 0.6 g sodium lactate 0.312 g potassium chloride 0.035 g calcium chloride 0.027 g Water 100 mL. Adjust to pH 7.0&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 MOPS</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>AT180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Agar</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose Broth</td>
			<td>SRL</td>
			<td>24835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XTT&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>X6493</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a soluble tetrazolium-based reduction assay to evaluate the effect of antibodies on candida tropicalis biofilms

Candida türleri sistemik hastane enfeksiyonlarının dördüncü en yaygın nedenidir. Sistemik veya invaziv kandidiyazis sıklıkla implante edilen cihazlarda veya kateterlerde biyofilm oluşumunu içerir ve bu da artmış virülans ve mortalite ile ilişkilidir. Farklı Candida türleri tarafından üretilen biyofilmler, çeşitli antifungal ilaçlara karşı gelişmiş direnç gösterir. Bu nedenle, Candida biyofilmlerine karşı etkili immünoterapiler veya yardımcı tedaviler geliştirmeye ihtiyaç vardır. Hücresel bağışıklığın rolü anti-Candida korumasında iyi kurulmuş olsa da, humoral bağışıklığın rolü daha az çalışılmıştır.
Biyofilm oluşumunun ve olgunlaşmasının inhibisyonunun koruyucu antikorların ana işlevlerinden biri olduğu ve Candida albicans germ tüpü antikorlarının (CAGTA) daha önce C. albicans'ın in vitro büyümesini ve biyofilm oluşumunu baskıladığı gösterilmiştir. Bu yazıda, antikorların C. tropicalis tarafından oluşturulan biyofilmler üzerindeki rolünü değerlendirmek için ayrıntılı bir protokol özetlenmiştir. Bu protokolün metodolojisi, 96 kuyucuklu mikrotitre plakalarında C. tropicalis biyofilm oluşumunu içerir, bunlar daha sonra antijene özgü antikorların varlığında veya yokluğunda inkübe edilir, ardından biyofilmdeki mantar hücrelerinin metabolik aktivitesini ölçmek için 2,3-bis (2-metoksi-4-nitro-5-sülfofenil)-5-karboksanilid-2H-tetrazolyum (XTT) testi yapılır.
Özgüllük, Sap2'ye özgü antikor tükenmiş serum da dahil olmak üzere uygun serum kontrolleri kullanılarak doğrulandı. Sonuçlar, bağışıklanmış hayvanların serumunda bulunan antikorların in vitro Candida biyofilm olgunlaşmasını inhibe edebileceğini göstermektedir. Özetle, bu yazıda invaziv kandidiyazis sırasında biyofilmlere karşı yeni immünoterapiler ve sinerjik veya yardımcı tedaviler geliştirmede antikorların potansiyeli hakkında önemli bilgiler verilmektedir. Bu in vitro protokol, potansiyel yeni antifungal bileşiklerin biyofilmlerdeki Candida türü hücrelerinin metabolik aktivitesi üzerindeki etkisini kontrol etmek için kullanılabilir.

Candida tropicalis biyofilmleri 96 kuyucuklu mikrotiter plakalarda yetiştirildi ve ters çevrilmiş bir mikroskop kullanılarak 40x'te görüntülendi (Şekil 1A). Biyofilm kristal menekşe kullanılarak daha da boyandı ve ters çevrilmiş bir mikroskop kullanılarak 40x'te gözlendi (Şekil 1B). Taramalı elektron mikroskobu, C. tropicalis biyofilminin temsili bir görüntüsünü göstermektedir (Şekil 1C). Bi...

Watch this Scientific Journal Video about A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms at JoVE.com

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

Antikorların C. tropicalis tarafından oluşturulan biyofilmler üzerindeki etkilerini incelemek için 2,3-bis (2-metoksi-4-nitro-5-sülfofenil)-5-karboksanil-2H-tetrazolyum (XTT) indirgeme testi kullanan 96 kuyucuklu mikrotitrek plaka bazlı bir protokol burada açıklanmıştır. Bu in vitro protokol, potansiyel yeni antifungal bileşiklerin biyofilmlerdeki Candida türü hücrelerinin metabolik aktivitesi üzerindeki etkisini kontrol etmek için kullanılabilir.

Antikorların Candida tropicalis Biyofilmleri Üzerindeki Etkisini Değerlendirmek için Çözünür Tetrazolyum Bazlı İndirgeme Testi

Candida species are the fourth-most common cause of systemic nosocomial infections. Systemic or invasive candidiasis frequently involves biofilm formation ...

Bu in vitro, 96 iyi plaka tabanlı protokol, antikorların Candida biyofilmlerinde mantar hücrelerinin metabolik aktivitesi üzerindeki yeni antifungal ajanlar üzerindeki inhibitör etkisini test etmek için kullanılabilir. Diğer yöntemlerle karşılaştırıldığında, bu, antikorların veya antifungallerin Candida biyofilmlerinin gelişimi üzerindeki etkisini değerlendirmek için oldukça hassas, doğru, yüksek verimli, tekrarlanabilir, kullanıcı dostu ve uygun maliyetli bir tekniktir. Bu test, yeni ilaç bazlı veya antikor bazlı terapötiklerin ve ayrıca invaziv kandidiyazisin şiddeti ile ilişkili Candida biyofilmlerine karşı aşı adaylarının etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir.Bu yöntem, biyofilm oluşumu veya olgunlaşması sırasında yeni antifungal ajanların veya antikorların farklı mantar suşları veya antikor kaynakları kullanılarak farklı ortamlarda etkisini test etmek için uygulanabilir. Bu prosedürü gösteren, laboratuvarımda çalışan bir doktora araştırma görevlisi olan Bay Pankaj Chandley olacaktır. Başlamak için, 96 kuyucuklu bir mikrotitre plakasına 100 mikrolitre Candida tropicalis kültürü ekleyin.Çok kanallı pipet kullanarak son iki sütunu yalnızca 100 mikrolitre RPMI 1640 MOPS ortamıyla doldurun. Mikrotitre plakasını bir kapak ve alüminyum folyo ile örtün ve plakayı sabit koşullar altında 37 santigrat derecede 24 saat boyunca inkübe edin. Ertesi gün, çok kanallı bir pipet kullanarak ortamı dikkatlice aspire edin.Plakayı hafifçe lekeleme tabakaları üzerinde ters çevirin ve artık ortamları çıkarmak için dokunun. Plakayı çok kanallı pipet kullanarak 200 mikrolitre 1X PBS ile yıkayın. Çok kanallı pipet kullanarak PBS'yi dikkatlice aspire edin ve PBS ile iki kez yıkayın.Fazla PBS'yi çıkarmak için, plakayı biyolojik bir güvenlik kabini içindeki oda sıcaklığında 30 dakika boyunca hava ile kurulayın. Isı etkisiyle inaktive edilmiş serum örneklerinin seri seyreltilerini steril RPMI 1640 MOPS ortamında hazırlayın. 96 delikli mikrotitre plakasının her bir kuyucuğuna seçilen serum seyreltmesinin 100 mikrolitresini ekleyin.Sütun 10'da, yalnızca mantar pozitif kontrolü için yalnızca RPMI 1640 MOPS ortamı ekleyin. Mantarsız artı serum negatif kontrolü olarak hizmet etmek için sütun 11'deki tüm kuyucuklara bir ila 50 serum seyreltmesi ekleyin. Plakayı bir kapak ve alüminyum folyo ile kapladıktan sonra, plakayı 37 santigrat derecede 24 saat boyunca inkübe edin.Ertesi gün, çok kanallı bir pipet kullanarak serumu dikkatlice aspire ettikten sonra, kalan serumu çıkarmak için ters çevrilmiş plakaya hafifçe dokunun. PBS yıkamayı üç kez tekrarlayın ve fazla PBS'yi kurutmak için plakayı biyolojik bir güvenlik dolabı içinde oda sıcaklığında 30 dakika boyunca hava ile kurulayın. Daha sonra, 25 miligram XTT'yi 50 mililitre filtre sterilize edilmiş Ringer laktatında çözün.Ayrı tüplerde Aliquot 10 mililitre. Alüminyum folyo ile örtün ve eksi 80 santigrat derecede saklayın. Daha sonra, 8.6 miligram menadionu beş mililitre asetonda çözün.Ve 50 mikrolitreyi 100 ayrı mikro tüpte dağıttıktan sonra, alikotları eksi 80 santigrat derecede saklayın. 10 mililitre XTT alın ve bir mikromolar çalışma çözeltisi elde etmek için bir mikrolitre menadion ekleyin. 96 delikli mikrotitre plakasının kuyucuğu başına 100 mikrolitre XTT menadion çözeltisi ekleyin.Daha sonra, plakayı bir kapak ve alüminyum folyo ile kapladıktan sonra, plakayı karanlıkta 37 santigrat derecede iki saat boyunca inkübe edin. Son olarak, her bir kuyucuktan 80 mikrolitre renkli süpernatantı taze bir 96 delikli plakaya aktarın ve plakayı 490 nanometrede okuyun. Sap2-parapsilazis-bağışıklanmış farelerden elde edilen serum, önceden oluşturulmuş Candida tropicalis biyofilmlerinin olgunlaşmasını önleyebilir, Sap2-albicans'tan alınan serumda% 45 ve Sap2-tropicalis ile aşılanmış farelerde% 55 karşılaştırıldığında.Genel olarak, Sap2 immün serumu tarafından biyofilm inhibisyonu, immün öncesi serumda% 16 ve% 13 olan sahte immün serumdan anlamlı derecede daha yüksekti. Biyofilm inhibisyonu PBS kullanımında ihmal edilebilir düzeydeydi ve serum kontrolü yoktu. Biyofilmlerin bozulmasını önlemek için yıkama adımları uygulanırken azami özen gösterilmelidir.XTT çözeltisi kullanımdan hemen önce hazırlanmalı ve hemen plakaya eklenmelidir. Bu prosedürü takiben, kullanıcılar farklı mantar suşları kullanarak farklı araştırma ortamlarında Candida biyofilm oluşumu ve olgunlaşması sırasında yeni antifungal ajanların, aşı adaylarının veya antikorların etkisini değerlendirebilirler.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Soluble Tetrazolium-Based Reduction Assay to Evaluate the Effect of Antibodies on Candida tropicalis Biofilms

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-kültür Modelleri Pseudomonas aeruginosa</emCanlı İnsan Havayolu Hücreler Yetiştirilen> Biyofilmler

Bacterial biofilms have been associated with a number of different human diseases, but biofilm development has generally been studied on non-living ...

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

İzleme Oluşumu ve Antifungal Duyarlılık Testi için 96 Şey microtiter Levha tabanlı Yöntemi Candida albicans Biyofilmler

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

A Cell Free Assay System Estimating the Neutralizing Capacity of GM-CSF Antibody using Recombinant Soluble GM-CSF Receptor

Rekombinant Çözünür GM-CSF Reseptör kullanarak GM-CSF Antikor Nötralizasyon Kapasitesi tahmin Hücre Testi Sistemi

BACKGROUNDS: Previously, we demonstrated that neutralizing capacity but not the concentration of GM-CSF autoantibody was correlated with the disease ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

Üzerinde görebilir Işık ve Gentamisin en Sinerjik Etkisi<em&gt; Pseudomona aeruginosa</em&gt; Mikroorganizmalar

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Ana-Hücre RNA sentezi üzerinde Viral Enfeksiyon Etkisi Tedbir tıklayın Kimya Kullanımı

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

Vitro Testi HIV-spesifik CD4 T hücre efektör işlevi üzerinde immünoregülatör yolları etkisini değerlendirmek için

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Bir Monosit Tek tabakalı Testi Kullanımı Fcy reseptör aracılı fagositoz değerlendirin

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

Bir Yüksek verim Uyumlu Deneyi Makrofaj, pasajlamaya karşı ilaç etkinliğini değerlendirmektir<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Floresans tabanlı Nöraminidaz İnhibisyonu Tahlili antivirallerin nöraminidaz inhibitörü Class Nezle Virüslerinden eğilimi değerlendirilebilir

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Roman Vitro hücre göç değerlendirmek için şifa tahlil yara

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...