Name: establishing 3d endometrial organoids from the mouse uterus
Uploaded: 2023-01-06T13:10:00
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ステファニー・パンガス博士とマーティン・M・マツク博士(M.M.M.)には、私たちの原稿を批判的に読み、編集していただき、ありがとうございます。研究は、 Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development Grants R00-HD096057 (D.M.), R01-HD105800 (D.M.)、R01-HD032067 (M.M.M.)、R01-HD110038 (M.M.M.)、およびNCI-P30 Cancer Center Support Grant(NCI-CA125123)の支援を受けた。ダイアナ・モンシバイス博士は、バロウズウェルカム基金から次世代妊娠賞を受賞しています。

マウスの取り扱いと実験的研究は、ベイラー医科大学の施設内動物管理使用委員会(IACUC)によって承認されたプロトコルと、実験動物の世話と使用のためのNIHガイドによって確立されたガイドラインの下で実施されました。
1.酵素的および機械的方法を用いたマウスからの子宮上皮の単離
注:このセクションでは、ゲルマトリックススキャ?...

ここでは、マウス子宮内膜から子宮内膜上皮オルガノイドを生成する方法と、それらのダウンストリーム分析に日常的に使用されているプロトコルについて説明します。子宮内膜オルガノイドは、子宮内膜症、子宮内膜がん、着床不全などの子宮内膜関連疾患を制御するメカニズムを研究するための強力なツールです。2017年に発表された画期的な研究では、マウスおよびヒト上皮由来の子宮...

子宮内膜 - 子宮腔の内層粘膜組織 - は、女性のリプロダクティブヘルスに重要な役割を果たすユニークで非常に動的な組織です。生殖寿命の間、子宮内膜は卵巣ホルモン - エストロゲンとプロゲステロンの協調作用によって調整されて、増殖、分化、および分解の数百サイクルを経験する可能性を秘めています。遺伝子操作マウスの研究により、ホルモンに対する子宮内膜の反応と、胚着床、間質細胞の脱落膜化、妊娠の制御を支える基本的な生物学的メカニズムが明らかになりました1。しかし、in vitro研究は、従来の2D細胞培養で形質転換されていない初代マウス子宮内膜組織を維持することが困難であるため、制限されていました2,3。3D臓器系(オルガノイド)としての子宮内膜組織の培養における最近の進歩は、子宮内膜細胞の再生と分化を制御する生物学的経路を研究する新しい機会を提供します。マウスおよびヒトの子宮内膜オルガノイドシステムは、さまざまなマトリックスに封入された純粋な子宮内膜上皮から開発されており4,5、ヒト子宮内膜は足場のない上皮/間質共培養6,7として、最近ではコラーゲンカプセル化された上皮/間質集合体として培養されています8。.上皮オルガノイド培養の成長と再生の可能性は、オルガノイドの成長と再生を最大化するように経験的に決定された成長因子と低分子阻害剤の定義されたカクテルによってサポートされています4、5、9。さらに、子宮内膜オルガノイドを凍結および解凍する能力により、将来の研究のためにマウスおよびヒト由来の子宮内膜オルガノイドの長期的なバンクが可能になります。
遺伝子操作マウスは、妊娠初期と脱落膜化を制御する複雑なシグナル伝達経路を明らかにし、妊娠喪失、子宮内膜がん、子宮内膜症のモデルとして使用されています。これらの遺伝学的研究は、女性の生殖組織で特異的に活性なcreリコンビナーゼを使用して、loxP隣接対立遺伝子(「floxed」)の細胞特異的欠失によって大部分達成されました。これらのマウスモデルには、広く使用されているプロゲステロン受容体-cre10(子宮内膜上皮組織および間質組織で強力なリコンビナーゼ活性を有する)、成体マウスにおいて子宮内膜上皮組換えを誘導するラクトフェリンi-cre11、またはミュラー管由来組織において上皮特異的欠失を引き起こすWnt7a-creが含まれる12。.遺伝子操作されたマウスモデルから子宮内膜組織を3Dオルガノイドとして培養することは、子宮内膜生物学を調査し、子宮内膜細胞の再生と分化を制御する成長因子とシグナル伝達経路の同定を容易にする絶好の機会を提供しました13,14。マウス子宮内膜組織の単離および培養のための方法は文献に記載されており、その後の子宮内膜上皮オルガノイドの培養のための子宮上皮の単離のための様々な酵素戦略の使用を報告している4。以前の文献は子宮内膜上皮オルガノイド培養プロトコル4,5,6の重要なフレームワークを提供しますが、この論文はこれらのオルガノイドを生成、維持、処理、および分析するための明確で包括的な方法を提供します。これらの技術の標準化は、女性の生殖生物学の分野における進歩を加速させるために重要です。ここでは、ゲルマトリックス足場での子宮内膜オルガノイドのその後の培養のためのマウス子宮内膜上皮組織の酵素的および機械的精製のための詳細な方法論を報告します。また、ゲルマトリックス封入マウス子宮内膜上皮オルガノイドの下流組織学的および分子学的解析の方法論についても説明します。

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	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Organoid Media Formulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Matrigel Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix, *LDEV-free</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin from Bovine Pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1426-1G</td>
			<td>1%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Advanced DMEM/F12</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12634010</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 supplement</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>17502048</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27&#8482; Supplement (50X), minus vitamin A</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12587010</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primocin</td>
			<td>Invivogen</td>
			<td>ant-pm-1</td>
			<td>100 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Acetyl-L-cysteine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A9165-5G</td>
			<td>1.25 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>25030024</td>
			<td>2 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>N0636-100G</td>
			<td>10 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ALK-4, -5, -7 inhibitor, A83-01</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human EGF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-100-15</td>
			<td>50 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human Rspondin-1</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-38</td>
			<td>500 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human FGF-10</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human HGF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-39</td>
			<td>50 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WNT3a</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>5036-WN</td>
			<td>200 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Other supplies and reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C0130-1G</td>
			<td>5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>DN25-100MG</td>
			<td>2 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS, no calcium, no magnesium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>14190-250</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS, no calcium, no magnesium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>14170112</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon&#160;Polystyrene Microplates (24-Well)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>#08-772-51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon&#160;Polystyrene Microplates (12-Well)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>#0877229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers, 40 &#181;m</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>#08-771-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Direct-zol RNA MiniPrep (50 &#181;g)</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>11-331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizol reagent</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15596026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12, HEPES, no phenol red</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11039021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum, Charcoal stripped</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F6765-500ML</td>
			<td>2%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Estratiol (E2)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E1024-1G</td>
			<td>10 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde 16% in aqueous solution, EM Grade</td>
			<td>VWR</td>
			<td>15710</td>
			<td>4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epredia Cassette 1 Slotted Tissue Cassettes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>1000961</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epredia Stainless-Steel Embedding Base Molds</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>64-010-15&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 200 proof (100%)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-032-601&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoclear</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>50-899-90147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount Mounting Medium</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>50-277-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epredia Nylon Biopsy Bags</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>6774010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HistoGel Specimen Processing Gel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>83009-992</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin solution Premium</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95057-844</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y (yellowish) solution Premium</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95057-848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBS Buffer, 20X, pH 7.4</td>
			<td>GenDEPORT</td>
			<td>T8054</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBST (10X), pH 7.4</td>
			<td>GenDEPORT</td>
			<td>T8056</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C0759-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate tribasic dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S4641-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP337-500&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A2153-100G</td>
			<td>3%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Solution (1 mg/mL)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>62248</td>
			<td>1:1000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>H-1000-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear Nail Polish</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1849418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand Superfrost Plus Microscope Slides</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22037246</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Micro Cover Glasses</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48393-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript VILO Master Mix</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11755050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Green PCR Master Mix</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4364346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Krt8 Antibody (TROMA-I)&#160;</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>TROMA-I&#160;</td>
			<td>1:50 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin Antobody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>5741S</td>
			<td>1:200 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-Rat IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary 
			Antibody, Alexa Fluor 594</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A-21209</td>
			<td>1:250 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-Rabbin IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary 
			Antibody, Alexa Fluor 488</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A-21206</td>
			<td>1:250 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEISS Stemi 508 Stereo Microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEISS Axio Vert.A1 Inverted Routine Microscope with digital camera</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primer Sequence</td>
			<td>Forward (5&#39;-3&#39;)</td>
			<td>Reverse (5&#39;-3&#39;)</td>
			<td>_</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipocalin 2 (Lcn2)</td>
			<td>GCAGGTGGTACGTTGTGGG</td>
			<td>CTCTTGTAGCTCATAGATGGTGC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactoferrin (Ltf)</td>
			<td>TGAGGCCCTTGGACTCTGT</td>
			<td>ACCCACTTTTCTCATCTCGTTC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone (Pgr)</td>
			<td>CCCACAGGAGTTTGTCAAGCTC</td>
			<td>TAACTTCAGACATCATTTCCGG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase (Gapdh)</td>
			<td>CAATGTGTCCGTCGTGGATCT</td>
			<td>GCCTGCTTCACCACCTTCTT</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishing 3d endometrial organoids from the mouse uterus

子宮内膜組織は子宮の内腔を裏打ちし、エストロゲンとプロゲステロンの周期的な制御下にあります。これは、管腔および腺上皮、間質コンパートメント、血管網、および複雑な免疫細胞集団で構成される組織です。マウスモデルは子宮内膜を研究するための強力なツールであり、着床、胎盤形成、および癌を制御する重要なメカニズムを明らかにしています。3D子宮内膜オルガノイド培養の最近の開発は、子宮内膜生物学の根底にあるシグナル伝達経路を解剖するための最先端のモデルを提示します。遺伝子操作されたマウスモデルから子宮内膜オルガノイドを確立し、それらのトランスクリプトームを解析し、単一細胞分解能でそれらの形態を視覚化することは、子宮内膜疾患の研究にとって重要なツールです。本論文では、マウスの子宮内膜上皮の3D培養を樹立する方法を概説し、遺伝子発現を定量化し、オルガノイドの組織像を解析する技術について説明します。目標は、子宮内膜上皮オルガノイドの遺伝子発現と形態学的特徴を確立、培養、および研究するために使用できるリソースを提供することです。

マウス子宮内膜オルガノイドの位相差画像 添付のプロトコルに記載されているように、WTマウス子宮内膜上皮からオルガノイドを樹立しました(図 1の図を参照)。マウス子宮内膜上皮の酵素的解離に続いて、上皮シートを子宮間質細胞から機械的に分離し、さらにコラゲナーゼで解離して単一細胞懸濁液を生成した。この上皮細胞と間質細胞分離の方法を?...

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Establishing 3D Endometrial Organoids from the Mouse Uterus

このプロトコルは、遺伝子発現および組織学的分析のためのマウス子宮内膜上皮オルガノイドを確立するための方法論を説明しています。

マウス子宮からの3D子宮内膜オルガノイドの確立

Endometrial tissue lines the inner cavity of the uterus and is under the cyclical control of estrogen and progesterone. It is a tissue that is composed of ...

このプロトコルは、子宮内膜オルガノイドの培養のためにマウスの子宮から高純度の子宮上皮を分離するための段階的な方法論を示すため、重要です。この方法は、酵素的および機械的解離を効率的に利用して子宮上皮を単離する。これらの技術は、単離された上皮に由来する子宮内膜上皮オルガノイドを確立、治療、および分析するために合理化されました。使用前にゲルマトリックスを氷上で約1〜2時間解凍することから始めます。次に、ハサミを使用して腹部を正中線切開し、皮膚をそっと剥がして下にある腹膜層を露出させることにより、安楽死させたマウスを解剖します。腹部脂肪パッドをそっと脇に動かして子宮角を見つけ、子宮頸管接合部で子宮角を保持してから、腸間膜脂肪に沿って切断します。マウスの子宮を解剖した後、小さなハサミで子宮角から脂肪組織を完全に取り除きます。完了したら、各子宮角をそれぞれ約4〜5ミリメートルの小さな断片に切ります。1つの子宮からのすべての子宮片を、0.5ミリリットルの1%トリプシンを含む24ウェルプレートの1ウェルに入れる。次に、24ウェルプレートを摂氏37度の加湿組織培養インキュベーターで約1時間インキュベートし、下にある間質から子宮内膜上皮を酵素的に分離します。インキュベーション後、子宮の破片を1ミリリットルのダルベッコリン酸緩衝溶液またはDPBSを含む35ミリメートルの組織培養プレートに移します。次に、子宮片片の一端を鉗子で保持し、ピペットチップを断片を縦方向に静かに走らせ、子宮管のもう一方の端から上皮を絞り出すことにより、解剖顕微鏡下で子宮上皮を子宮管から分離します。次に、子宮片から分離した上皮シートを解剖顕微鏡で観察します。次に、1ミリリットルのピペットを使用して、すべての上皮シートを同じ1.5ミリリットルのチューブに静かに移します。解離した上皮シートを375 x gで5分間遠心分離することによりペレット化した。細胞ペレットを乱すことなく上清を注意深く除去し、細胞ペレットを0.5ミリリットル/ミリリットルのコラゲナーゼと1ミリリットルあたり2ミリリットルのDNA溶液に再懸濁します。ピペットで上下に約10回、または単一細胞懸濁液が得られるまで行います。次に、0.5ミリリットルのDMEM F / 12と10%ウシ胎児血清またはFBSと抗生物質を加え、細胞を375 x gで5分間遠心分離します。上清を除去し、1ミリリットルのDMEM/F12と10%FBSと抗生物質で細胞を再懸濁し、細胞を遠心分離します。準備ができるまでゲルマトリックスを氷の上に置きます。次に、遠心分離機細胞から上清を取り除き、気泡を導入せずにゲルマトリックスの20倍の体積を用いて細胞ペレットを再懸濁した。ゲルマトリックス細胞懸濁液を室温で約10分間沈降させます。ゲルマトリックス細胞懸濁液が半固体ゲルになったら、先端が200マイクロリットルのワイドボアを有するP200マイクロピペットを使用し、25マイクロリットルのゲルマトリックス細胞懸濁液を穏やかに吸引します。12ウェルプレートのウェルあたり3つの別々の25マイクロリットルのドームを分注し、ゲルマトリックスを15分間硬化させ、摂氏37度の加湿組織培養インキュベーターで硬化させます。ゲルマトリックスが硬化した後、ゲルマトリックスドームを含む各ウェルに750マイクロリットルのオルガノイド培地を加え、加湿組織培養インキュベーター内で摂氏37度でインキュベーターします。マウス子宮内膜オルガノイドの位相差画像は、上皮細胞と間質細胞分離により、反対の細胞型の汚染が10%〜15%以下のサンプルが得られることを示しました。子宮内膜上皮細胞は、3〜4日以内にオルガノイドに組み立てられました。切片化したホルマリン固定パラフィン包埋子宮内膜オルガノイドをヘマトキシリン染色とエオジン染色で可視化し、オルガノイドの内腔である上皮と中空中心の単層を表示しました。蛍光顕微鏡イメージングは、オルガノイド中のすべての細胞がサイトケラチン8陽性であり、DAPIを含むことを示し、子宮内膜オルガノイドの固定、埋め込み、および処理が抗体ベースの免疫染色に適合することを示しています。リアルタイム定量PCRは、10ナノモルのエストラジオールによる刺激が上皮オルガノイドにおけるリポカリン2、ラクトフェリン、およびプロゲステロン受容体の発現を増加させることを示し、子宮内膜上皮オルガノイドを使用してエストラジオールに応答する遺伝子発現変化を測定することに成功したことを示しています。機械的解離ステップ中に子宮内膜上皮の明確な分離が得られるようにすることが重要です。子宮管から出てくる上皮を観察できるはずです。他の方法には、ゲルマトリックスへの封入による上皮オルガノイドの樹立が含まれる。必要に応じて、間質コンパートメントをさらに消化して、3D上皮間質共培養を作成することができます。この方法は、子宮内膜の再生を制御するシグナルに関する質問に答えるのに役立ちます。子宮内膜症、妊娠喪失、癌などの女性の病気の治療に役立つ可能性があります.

Research

JoVE Journal

Biology

Intravitreous Injection for Establishing Ocular Diseases Model

眼疾患モデルを確立するための硝子体内注射

Intravitreous injection is a widely used technique in visual sciences research. It can be used to establish animal models with ocular diseases or as ...

Establishing Primary Adult Fibroblast Cultures From Rodents

げっ歯類からプライマリ大人の線維芽細胞培養の確立

The importance of using primary cells, rather than cancer cell lines, for biological studies is becoming widely recognized.  Primary cells are preferred ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

人工多能性幹細胞に由来するマウスの作製

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

マウス膵臓からのRNAの単離：リボヌクレアーゼが豊富な組織

Isolation of high-quality RNA from ribonuclease-rich tissue such as mouse pancreas presents a challenge.  As a primary function of the pancreas is to aid ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

トランス内部細胞のキメリズム率が高いため、胚性幹細胞の大量注入

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

Ex Vivo Method for Assessing the Mouse Reproductive Tract Spontaneous Motility and a MATLAB-based Uterus Motion Tracking Algorithm for Data Analysis

マウス生殖管自発的運動性を評価するためのEx Vivo法とデータ解析のためのMATLABベースの子宮運動追跡アルゴリズム

Dysmenorrhea, or painful cramping, is the most common symptom associated with menses in females and its severity can hinder women&#39;s everyday lives. ...

3D Culturing of Organoids from the Intestinal Villi Epithelium Undergoing Dedifferentiation

腸内ビリ上皮によるオルガノイドの3D培養

Clonogenicity of organoids from the intestinal epithelium is attributed to the presence of stem cells therein. The mouse small intestinal epithelium is ...

Establishing Stable Binary Cultures of Symbiotic Saccharibacteria from the Oral Cavity

口腔から共生サッカリバクテリアの安定したバイナリ培養を確立する

Many bacterial species cannot be cultured in the laboratory using standard methods, posing a significant barrier to studying the majority of microbial ...

Multiplexed Fluorescent Immunohistochemical Staining of Four Endometrial Immune Cell Types in Recurrent Miscarriage

再発流産における4種類の子宮内膜免疫細胞型の多重化蛍光免疫物質化学的染色

Immunohistochemistry is the most commonly used method for the identification and visualization of tissue antigens in biological research and clinical ...

Establishing Human Lung Organoids and Proximal Differentiation to Generate Mature Airway Organoids

ヒト肺オルガノイドの確立と近位分化による成熟気道オルガノイドの生成

The lack of a robust in vitro model of the human respiratory epithelium hinders the understanding of the biology and pathology of the respiratory system. ...