Name: using a combination of indirect calorimetry, infrared thermography, and blood glucose levels to measure brown adipose tissue thermogenesis in humans
Uploaded: 2023-06-02T13:30:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using a Combination of Indirect Calorimetry, Infrared Thermography, and Blood Glucose Levels to Measure Brown Adipose Tissue Thermogenesis in Humans at JoVE.c

نود أن نشكر جميع المتطوعين في الدراسة على مشاركتهم في دراستنا. تم دعم هذا العمل من قبل مبادرة أبحاث هولسورث ، وجامعة لا تروب ، ومعهد علوم الدفاع (DSI ، أستراليا).

قدم جميع المشاركين (ن = 8) موافقة خطية مستنيرة ، وتمت الموافقة على جميع التجارب من قبل لجنة أخلاقيات الإنسان بالجامعة ؛ تم اشتقاق البيانات من Van Schaik et al.27.
1. تركيب المعدات والبرامج
<ol><li>قم بقياس كتلة الدهون عن طريق قياس امتصاص الأشعة السينية ثنائي الطاقة (DXA) وفقا ل Van Schaik et al.27.</li>
	<li>تقدير استخدام الركيزة ونفقات الطاقة من الغاز منتهي الصلاحية ؛ قم بقياس ذلك باستخدام محلل غازات الجهاز التنفسي وفقا لإرشادات الشركة المصنعة.</li>
	<li>جمع عينات الدم عن طريق ثقب الإصبع (الشعري) ، وتحديد مستويات الجلوكوز في الدم باستخدام جهاز قياس السكر وفقا لإرشادات الشركة المصنعة.</li>
	<li>استخدم مقياس حرارة بالأشعة تحت الحمراء غير ملامس لتحديد قياسات درجة حرارة الجسم الأساسية وفقا لإرشادات الشركة المصنعة (خطأ هذا الجهاز هو ±0.2 درجة مئوية).</li>
</ol>2. الإجراءات قبل زيارات المشاركين
<ol><li>فحص جميع المشاركين لحالتهم الصحية.</li>
	<li>قم بتعيين معايير الاستبعاد التالية: مؤشر كتلة الجسم >30 كجم / م2 (بسبب ارتباط نشاط BAT عكسيا بالسمنة34,35 ، والمشاركين الذين يستخدمون الأدوية الموصوفة ، ومرض السكري.</li>
	<li>قبل أو بعد جلسة الاختبار ، تأكد من خضوع المشاركين لفحص DXA لقياس كتلة الدهون لديهم ، حيث يرتبط نشاط BAT عكسيا بالسمنة34,35.</li>
	<li>لمدة 24 ساعة قبل الوصول للدراسة ، تأكد من أن المشاركين يمتنعون عن أي تمرين أو نشاط شاق ويتم صيامهم لمدة 10 ساعات قبل الوصول إلى المختبر.</li>
</ol>3. الإجراءات في اليوم الدراسي
<ol><li>تأكد من ضبط درجة حرارة الغرفة التي يتم جمع البيانات عليها على درجة حرارة ثابتة لتقليل الارتباك الخارجي بسبب الاختلافات في درجة حرارة الغرفة. ملاحظة: يمكن أن يؤدي هذا إلى قياسات حرارية أو أيضية غير صحيحة. لأغراض هذه التجربة ، تم استخدام غرفة يتم التحكم في درجة حرارتها عند 22 درجة مئوية في ظل ظروف محايدة حراريا.</li>
	<li>اطلب من المشاركين الوصول إلى المختبر في الساعة 08:00 صباحا لحساب إيقاعات الهرمونات اليومية.</li>
	<li>قياس طول المشاركين ووزنهم.</li>
	<li>اطلب من المشاركين الاستلقاء على قاعدة لمدة لا تقل عن 30 دقيقة قبل أخذ قياسات خط الأساس.</li>
	<li>على مدى فترة 120 دقيقة ، قم بقياس IRT للمشاركين ، وقياس السعرات الحرارية غير المباشرة ، ونسبة الجلوكوز في الدم ، ودرجة الحرارة الأساسية كل 15 دقيقة بعد أخذ عينات O2و CO 2 منتهية الصلاحية (الشكل 1).</li>
	<li>باتباع القياسات الأساسية ، تأكد من أن المشاركين محملون بالكربوهيدرات من خلال استهلاك ثلاثة مواد هلامية من الكربوهيدرات (90 جم جلوكوز لكل منهما) بين النقاط الزمنية 0 دقيقة و 15 دقيقة.</li>
	<li>تأكد من أن المشاركين يتناولون العلاج بعد 45 دقيقة من حمل الكربوهيدرات. لمتابعة هذا البروتوكول ، استخدم 100 ملغ من كبسولات الكافيين كتدخل27. ملاحظة: مطلوب فترة غسل من 7 أيام بين التدخل والدواء الوهمي ، وهذا يعني أن فترة 7 أيام مطلوبة بين الكافيين والعلاج الوهمي.</li>
</ol>4. قياس السعرات الحرارية غير المباشرة
<ol><li>تقدير نفقات الطاقة وقيم استخدام الركيزة من الغاز منتهي الصلاحية ، كما تم قياسها باستخدام محلل غازات الجهاز التنفسي. أكمل معايرة محلل الغازات التنفسية باتباع تعليمات الشركة المصنعة.</li>
	<li>قم بتركيب قناع السيليكون المعقم على البارد للمشارك للسماح بتوصيل هواء الغرفة والحصول على بيانات التمثيل الغذائي. تأكد من أن القناع مزود بصمام معقم مسبقا غير قابل لإعادة التنفس (صمام ثنائي الاتجاه غير قابل لإعادة التنفس) وقم بتثبيته على وجه المشارك بمرفق شبكي وتحقق من وجود تسربات.</li>
	<li>تأكد من توصيل أنابيب الشهيق والزفير.</li>
	<li>تصدير ملف البيانات الرقمية بتنسيق جدول بيانات.</li>
	<li>عينة منتهية الصلاحيةO 2 و CO2بمتوسط 5 ثوان. يقيس هذا الإنفاق على الطاقة ونسبة التبادل التنفسي (الشكل 1). قم بإزالة قناع الوجه لإكمال الإجراءات الإضافية.</li>
	<li>احسب معدلات أكسدة الركيزة (أكسدة الكربوهيدرات والدهون) وإجمالي نفقات الطاقة باستخدام معادلات وير غير البروتينية 1-331,36: معدل أكسدة الدهون (جم / دقيقة −1) = (1.695 VO 2) - (1.701 VCO2) (1) معدل أكسدة الكربوهيدرات (جم / دقيقة −1) = (4.585 VCO 2) - (3.226 VO 2) (2) نفقات الطاقة (كيلو كالوري / دقيقة) = (3.94 × VO 2) + (1.1 × VCO2) (3)</li>
</ol>5. قياسات الجلوكوز في الدم في البلازما
<ol><li>قم بإجراء قراءات الجلوكوز في الدم عن طريق وخز الإصبع ومقياس السكر بعد كل جولة من قياسات الغازات منتهية الصلاحية (الشكل 2).</li>
</ol>6. درجة الحرارة الأساسية
<ol><li>سجل درجة الحرارة الأساسية (Tcore) بعد كل جولة من قياسات الغاز منتهية الصلاحية. من الناحية المثالية ، قم بقياس درجة الحرارة الأساسية إما عن طريق المستقيم أو داخل الأذن (الشكل 2). ملاحظة: نظرا للممارسات الآمنة ل COVID-19 ، قلل من الاتصال الشخصي.</li>
	<li>تأكد من أن المشاركين مستلقون وأن رؤوسهم في وضع محايد. قم بتوجيه مقياس الحرارة غير الملامس باستمرار نحو مركز جبين المشارك.</li>
</ol>7. التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء
<ol><li>قم بإجراء IRT بعد كل جولة من قياسات الغاز منتهية الصلاحية (الشكل 2).</li>
	<li>اطلب من المشاركين الجلوس في وضع مستقيم بالنظر إلى الأمام مباشرة ، مع كشف منطقة الصدر إلى منطقة الرقبة (الشكل 3).</li>
	<li>استخدم كاميرا التصوير الحراري للحصول على صور الأشعة تحت الحمراء للرقبة الأمامية ومنطقة الصدر العلوية.<ol><li>ضع الكاميرا على حامل ثلاثي القوائم على مستوى الرقبة على بعد 1 متر من وجه الهدف (الشكل 4D). استخدم الإعدادات التالية: نوع الكاشف = ميكروبولومتر غير مبرد ؛ درجة الكاشف = 17 ميكرومتر ؛ النطاق الطيفي للكاميرا = 7.5-14.0 ميكرومتر ؛ الحساسية الحرارية = 20 مللي كلفن عند 30 درجة مئوية ؛ العدسات = 36 مم ؛ الدقة = 1,024 بكسل × 768 بكسل.</li>
		<li>قم بتشغيل الكاميرا.</li>
		<li>اضبط تركيز الكاميرا عن طريق تدوير حلقة التركيز البؤري. ملاحظة: من المهم جدا ضبط التركيز بشكل صحيح. يؤثر ضبط التركيز غير الصحيح على قياس درجة الحرارة.</li>
		<li>وجه مؤشر الليزر إلى خط الوسط لعنق المشارك.</li>
		<li>التقط الصورة. ملاحظة: سيتم حفظ الصورة تلقائيا في حالة استخدام بطاقة ذاكرة.</li>
	</ol></li>
</ol>8. تحليل الصور
<ol><li>اختر ثلاث مناطق من الصدر الأمامي والرقبة لتحليل درجة حرارة السطح: ثنائيا الجلد الذي يغطي BAT في الحفرة فوق الترقوة (SCF) والمنطقة الجانبية من الرقبة ، مع اعتبار منطقة القص نقطة مرجعية للتحكم (Tref) ، لأن هذه المنطقة لا تحتوي على BAT (الشكل 4A-C).</li>
	<li>ضع مناطق الاهتمام المثلثة (ROIs) في مناطق SCF اليمنى واليسرى وعائد استثمار دائري فوق المنطقة القصية.</li>
	<li>عندما يتم تحديد موقع المناطق المطلوبة ، تأكد من أن البرنامج يعرض متوسط الانحراف المعياري لدرجة الحرارة لكل منطقة محددة.</li>
</ol>9. تحليل البيانات
<ol><li>استخدم نهجا مزدوج التعمية لتحليل التدخلات باستخدام التقنيات الموصوفة. اطلب من باحث غير مشارك في جمع البيانات أو تحليل ترميز التدخلات بشكل عام.</li>
	<li>إجراء التحليل الإحصائي.<ol><li>احسب متوسطات بيانات IRT ودرجة الحرارة الأساسية وجلوكوز الدم من النقطة الزمنية الواحدة المقاسة.</li>
		<li>احسب متوسطات RER وأكسدة الدهون وأكسدة الكربوهيدرات وإنفاق الطاقة في 10 دقائق من العهود.</li>
		<li>بالنسبة لإنفاق الطاقة ، اجمع معدل إنفاق الطاقة لكل مجموعة ، وافصله إلى تدخل قبلي وبعدي. ملاحظة: راجع Van Shaik et al. للاختبارات الإحصائية لتحليل البيانات27.</li>
	</ol></li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

الطريقة التي أظهرناها هنا هي بروتوكول بسيط تقنيا وآمن وفعال من حيث التكلفة لقياس التوليد الحراري BAT في البشر. يعالج البروتوكول المخاوف المتعلقة بموثوقية استخدام IRT بمفرده للتمييز بين الاحترار المحلي بسبب تغير تدفق الدم في الجلد والاحترار الأعمق بسبب توليد الحرارة من خلال ربط IRT بكل من مقاييس إنفاق الطاقة (EE) واستخدام الركيزة. نظرا لأن هذه التقنية لا تستخدم الإشعاعات المؤينة ، فإنها تسمح بتحليل المقاييس المتكررة ، وهو أمر غير ممكن مع تقنيات التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني. أخيرا ، في حين أن تقنيات التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني يمكنها تحديد تنشيط أفضل التقنيات المتاحة ، إلا أنها لا تبلغ عن النتائج الفسيولوجية (زيادة درجة الحرارة وكفاءة الطاقة) التي يقيسها هذا البروتوكول.
تكمن قوة البروتوكول الموصوف هنا في أن هناك أربعة خطوط من الأدلة التي تدعم استنتاج التوليد الحراري ل BAT المثار: (1) زيادة Tscf المقاسة ، بالتوازي مع درجة الحرارة الأساسية غير المتغيرة ودرجة حرارة الجلد المستقرة فوق المنطقة المرجعية المجاورة. (2) زيادة نفقات الطاقة ؛ (3) تغيير في استخدام الركيزة ؛ و (4) انخفاض في مستويات الجلوكوز في الدم. تتوافق جميع الملاحظات المتقاربة مع النتائج المتوقعة للتوليد الحراري ل BAT. الجزء الأساسي من البروتوكول هو تحميل الكربوهيدرات للمشاركين لضمان استقلاب الكربوهيدرات قبل التدخل. يحول التوليد الحراري BAT استقلاب الركيزة من الكربوهيدرات إلى الأحماض الدهنية الحرة ، كما يتضح من الانخفاض في RER. في حين أن الركيزة المفضلة لتوليد الحرارة BAT هي الأحماض الدهنية الحرة ، فإن الامتصاص الكبير للجلوكوز في BAT النشط راسخ5،6،7. لذلك ، نلاحظ انخفاضا في مستويات الجلوكوز في الدم بالتزامن مع توليد الحرارة BAT. لن يكون من الممكن ملاحظة التحول المتبادل في استخدام الركيزة (RER) وانخفاض مستويات الجلوكوز في الدم في حالة الصيام.
وقد خلصت الدراسات السابقة إلى أن زيادة Tscf (المقاسة بواسطة IRT) كافية لاستنتاج توليد الحرارة BAT. ومع ذلك ، فإن هذا الاستنتاج مؤكد فقط إذا تجاوز Tscf درجة الحرارة الأساسية. إذا كان Tscf أقل من أو يساوي درجة الحرارة الأساسية ، فلا يمكن استبعاد التغير المحلي في درجة الحرارة بسبب زيادة تدفق الدم في الجلد. خلصت مراجعة منهجية إلى أن IRT وحده غير قادر على تحديد ما إذا كانت الزيادات في درجة حرارة الجلد فوق الترقوة ناتجة عن التوليد الحراريBAT 37. لاحظت المراجعة أن الطريقة الأكثر شيوعا (18F-FDG PET / CT) تقيس امتصاص الجلوكوز في BAT37. ومع ذلك ، فإن الركيزة المفضلة لتوليد الحرارة BAT هي الأحماض الدهنية13. تمنع هذه المشكلة المنهجية أي مقارنة ذات مغزى بين بيانات PET / CT في التحقق من صحة بيانات IRT ، حيث أن أيا من هذه المقاييس وحدها ليست مقياسا مناسبا للنشاط الأيضي الحقيقي ل BAT لأنها لا يمكن أن تشير إلى التغيير في نفقات الطاقة واستخدام الركيزة بسبب التوليد الحراري BAT. ومع ذلك ، مع البروتوكول الموضح هنا ، لا يمكننا فقط تحديد التغير في درجة الحرارة ، ولكن يمكننا أيضا تأكيد زيادة في إنفاق الطاقة - وهي نتيجة فسيولوجية رئيسية لتوليد الحرارة BAT. IRT هي طريقة غير ملامسة وغير جراحية وغير مكلفة نسبيا لقياس تغيرات درجة الحرارة ودرجة الحرارة المرتبطة بالتوليد الحراري BAT. في المقابل ، فإن PET-CT مكلف ويعرض الأفراد للإشعاع المؤين ، مما يحد من إمكانية تطبيق هذه الطريقة على التحليلات الاستعادية الصغيرة لدراسات التصوير السريري. سيكون تطبيق البروتوكول الحالي على التجارب السريرية العشوائية واسعة النطاق بسيطا نسبيا وفعالا من حيث التكلفة.
من المهم ملاحظة أن الانخفاض في أكسدة الكربوهيدرات بعد تدخل الكافيين يمكن تفسيره من خلال التبديل في استخدام الركيزة نتيجة لزيادة توليد الحرارة BAT بسبب التدخل. إن مقاييس إشارات الأنسولين ستجعل نتائج هذه الدراسة أكثر قوة. ومع ذلك ، ليس من الواضح بناء على نتائج هذه الدراسة ما إذا كان الكافيين سيؤثر على إشارات الأنسولين من خلال العمل على BAT أو ما إذا كان الانخفاض في نسبة الجلوكوز في الدم نتيجة لامتصاص BAT لمزيد من ركائز الطاقة.
تحتوي طريقة 18F-FDG PET / CT على العديد من القيود المتأصلة عند استخدامها لتحديد وقياس النشاط الفسيولوجي لأفضل التقنيات المتاحة ، خاصة عند التحقيق في تأثير العناصر الغذائية أو المكونات الغذائية على نشاط BAT. تتطلب طريقة 18F-FDG PET / CT صيام الأشخاص لتجنب الزيادات التي يسببها التغذية في امتصاص الجلوكوز من قبل الأنسجة العضلية ، والتي يمكن أن تقلل بشكل كبير من اكتشاف كل من وظيفة BAT وBAT 38. علاوة على ذلك ، لا يمكن لهذه التقنية وحدها قياس التأثير الفسيولوجي أو مدى تنشيط BAT. بالإضافة إلى ذلك ، يعد استخدام الإشعاع المؤين في دراسات التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني عقبة أخلاقية وصحية وأمنية لتصميم الدراسات المتقاطعة ذات التدابير المتكررة. بالإضافة إلى ذلك ، يمثل 18F-FDG امتصاص الجلوكوز فقط ، وهو ليس مثل قياس استقلاب الجلوكوز. تسمح لنا طريقة تحميل الكربوهيدرات هذه قبل قياس درجة حرارة BAT والجمع بين مستويات الجلوكوز في الدم وقياس السعرات الحرارية غير المباشر بقياس التأثير الفسيولوجي لتوليد الحرارة واستخدام الركيزة المتغيرة بدقة ، والتي لن تكون متاحة في حالة الصيام.
نقاط القوة والقيود هذا البروتوكول له آثار أوسع من مجرد دراسة أفضل التقنيات المتاحة. من خلال المشاركين الذين يقومون بتحميل الكربوهيدرات قبل التدخل ، يمكن ملاحظة تذبذب مستويات الجلوكوز في الدم استجابة لكل من تحميل الكربوهيدرات وتدخل الكافيين ، وكذلك التغيرات في استخدام الركيزة. لذلك ، يمكن استخدام هذه التقنية لتحسين دراسات قياس السعرات الحرارية البشرية غير المباشرة والتدابير الأيضية. لم يعرف بعد ما إذا كان يمكن تكرار نتائج هذه الدراسة بعد تدخلات أخرى ، مثل التعرض للبرد أو التحفيز الأدرينالي. ومع ذلك ، فقد تم تكرار نتائج هذه الدراسة بعد التدخل بمكون غذائي مختلف ، وهو الفليفلة السنوية27. يمكن الحصول على مزيد من الدقة والثقة في النتائج باستخدام نهج مزدوج التعمية لتحليل التدخلات باستخدام التقنيات الموصوفة ، ويمكن تنفيذ ذلك بسهولة27.
الخلط المحتمل لدرجة حرارة الغرفة المتنوعة غير ذي صلة في هذا البروتوكول ، حيث تم الحفاظ على درجة حرارة الغرفة مستقرة من مشارك إلى مشارك. بالإضافة إلى ذلك ، تم أخذ الرطوبة في الاعتبار أثناء معايرة محلل غازات الجهاز التنفسي. يتم الاستدلال على ذلك في إعداد هذه القطعة من المعدات ، حيث يتم الانتهاء من المعايرة وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.
تم تحديد الفترات الزمنية للقياس والعلاج بعد دراسة تجريبية صغيرة تم فيها إجراء استكشاف الأخطاء وإصلاحها للبروتوكول. بشكل أساسي ، تم تحديد الفترات الزمنية للقياس بناء على الوقت اللازم للباحث لإجراء القياسات ولراحة المشارك. تم تحديد وقت التدخل بناء على الوقت المستغرق لحدوث استقلاب الكربوهيدرات بعد حمل الكربوهيدرات للتحقق مما إذا كان التدخل قد زاد من أكسدة الأحماض الدهنية الحرة (أي التوليد الحراري BAT) وخفض أكسدة الكربوهيدرات.
والجدير بالذكر أن هناك اختلافات بين مستويات الجلوكوز الشعري والوريدي39. ومع ذلك ، في سياق الرعاية خارج المستشفى ، فإن الطريقة الأكثر شيوعا لقياس مستويات الجلوكوز في الدم هي عن طريق عينة دم من أصل شعري تم تحليلها بواسطة جهاز قياس السكر في نقطة الرعاية40. بالإضافة إلى ذلك ، في الأفراد الأصحاء (على غرار تلك المدرجة في هذا البروتوكول) في بيئة غير سريرية ، هناك فرق ذو دلالة إحصائية ، ولكن ليس ذا دلالة سريرية ، بين مستويات الجلوكوز في الدم الشعري والوريدي عند قياسه باستخدام مقياس السكر القائم على الشعيرات الدموية في نقطة الرعاية41. في هذا السياق ، سيظل أخذ العينات الشعرية هو النهج الأمثل نظرا لحقيقة أن معظم أجهزة قياس السكر في نقاط الرعاية المتوفرة في السوق مصممة لتحليل عينات الدم الشعرية41. من منظور سريري ، يمكن القول أن جلوكوز الدم الوريدي هو الطريقة الأفضل للتحليل. ومع ذلك ، فإن أخذ عينات الدم الوريدي ليس مكلفا فحسب ويتطلب معدات متخصصة (المرجع نفسه) ، ولكنه أيضا غازي. يجب موازنة الاعتبارات الأخلاقية لزيادة خطر الأحداث الضائرة أثناء البروتوكول مع الأدبيات المبلغ عنها التي تظهر الارتباط العالي والموثوقية لجلوكوز الدم الشعري كمقياس بديل لجلوكوز الدم الوريدي42. المفتاح هنا ، بالطبع ، هو أننا لم نشرع في تشخيص مرض السكري ولكن لقياس التغيرات في مستويات الجلوكوز في الدم ، والتي تعد مراقبة نسبة الجلوكوز في الدم الشعرية أكثر من بروتوكول مناسب لها.
يمكن أن يحفز الجلوكوز توليد الحرارة ، ويمكن للوجبات الفردية تنشيط BAT43. ومع ذلك ، والأهم من ذلك ، أن البيانات المدرجة في هذه المخطوطة لا تظهر أي تأثير كبير لتحميل الجلوكوز في مجموعة التدخل أو مجموعة الدواء الوهمي. علاوة على ذلك ، تم اشتقاق البيانات المدرجة في المخطوطة من نتائج Van Schaik et al. ، والتي تضمنت تدخلا ثالثا (الفليفلة السنوية) ، ولم ينتج عن حمل الجلوكوز تأثير كبير على التدابير27.
وتجدر الإشارة إلى أن هذا البروتوكول قد استخدم فقط في المشاركين الذكور الذين يعانون من انخفاض الدهون في الجسم و BAT النشطة (لتقليل عدد المتغيرات التي يمكن التحكم فيها ، تم استبعاد الإناث من الدراسة). هناك علاقة عكسية معروفة بين السمنة وكتلة BAT في البشر44. بالإضافة إلى ذلك ، من المعروف أن الأشخاص الذين يعانون من السمنة المفرطة سابقا والذين فقدوا الوزن من خلال النظام الغذائي وممارسة الرياضة لديهم معدل أيض أساسي أقل ويجب أن يستهلكوا وجبات منخفضة السعرات الحرارية للحفاظ على الوزن الطبيعي45,46. علاوة على ذلك ، يمكن أن يحفز نشاط أفضل التقنيات المتاحة نمو أفضلالتقنيات المتاحة 8. ستسمح الطريقة الموضحة هنا بإجراء دراسات طويلة الأجل للتحقيق في التغيرات في نشاط BAT المرتبط بأمراض التمثيل الغذائي بطريقة لا توفرها التقنيات الأخرى.
استنتاج في الختام ، نوضح نهج قياس لقياس نشاط الأنسجة الدهنية البنية البشرية باستخدام IRT وقياس السعرات الحرارية غير المباشرة بعد حمل الكربوهيدرات. تشمل الخطوات الحاسمة 1) تحميل الكربوهيدرات للمشاركين الذين هم في حالة صيام قبل قياس درجة حرارة BAT مع الجمع بين قياس السعرات الحرارية غير المباشرة ومستويات الجلوكوز في الدم للسماح بالقياس الكمي للمدى الفسيولوجي للتوليد الحراري BAT واستخدام الركيزة المتغيرة. 2) تقييم مستودعات IRT BAT ذات الصلة ودرجات الحرارة من نقطة مرجعية ودرجة الحرارة الأساسية لإثبات أي زيادة في Tscf من شأنها أن تكون مؤشرا على تنشيط BAT بناء على الموقع التشريحي. نعتقد أن هذه القياسات الكمية تسمح بإجراء تقييم أكثر دقة لمساهمة BAT في استقلاب الطاقة البشرية للبالغين والتنظيم الحراري. يجب استخدام هذا النهج الشامل من قبل الباحثين لدراسة فسيولوجيا BAT والعمل كمعيار جديد لتطوير مناهج تنشيط BAT البشرية في المستقبل.

تختلف الأنسجة الدهنية البنية (BAT) بشكل ملحوظ عن الأنسجة الدهنية البيضاء (WAT) في محتواها من الميتوكوندريا ، والتعصيب الودي ، وقطرات الدهون متعددة العينين ، والقدرة على توليد الحرارة ، والتوزيع التشريحي. تم اعتبار BAT موجودا فقط عند الرضع والثدييات الصغيرة حتى تأكيد وجوده في البالغين من البشر في عام 20091،2،3. وهكذا ، حتى وقت قريب نسبيا ، كان دور BAT في علم وظائف الأعضاء البشرية والتوازن الأيضي غير مفهوم بشكل جيد. أظهرت الدراسات المكثفة التي أجريت على الحيوانات الصغيرة أنه أثناء التعرض للبرد ، يرجع أكثر من نصف عملية التمثيل الغذائي إلى القدرة الحرارية غير المرتعشة ل BAT4. أظهرت العديد من الدراسات أنه عند التعرض للبرد المعتدل (17-18 درجة مئوية) ، ترتبط الزيادات في إنفاق الطاقة وامتصاص الجلوكوز في BAT ارتباطا وثيقا بتوليد الحرارة BAT في البشر5،6،7. علاوة على ذلك ، يمكن أن يساهم التوليد الحراري BAT بما يصل إلى 10٪ من نفقات الطاقة أثناء الراحة لدى البشر أثناء التعرض للبرد (للمراجعة ، انظر Van Schaik et al.8). إن دراسة فسيولوجيا وتأثير أفضل التقنيات المتاحة على صحة الإنسان والمرض مقيدة حاليا بقيود البروتوكول. لذلك ، من الضروري أن يكون لديك طريقة دقيقة لقياس التأثير الأيضي الحقيقي ل BAT لفهم تأثير التوليد الحراري ل BAT بشكل أفضل على السمنة ومضاعفاتها الأيضية لدى البشر.
إن التوزيع التشريحي لأفضل التقنيات المتاحة للإنسان يجعل الحصول على قياسات دقيقة لأفضل التقنيات المتاحة أمرا صعبا. داخل البشر ، يتم توزيع BAT داخل مستودعات WAT في البطن والصدر ، وعلى الأخص الرقبة9. تم استخدام تشريح الجثة ودراسات الجثة لتوصيف BAT تشريحيا10,11 ، لكن هذه الطرق لا يمكنها توفير معلومات وظيفية. من الصعب التمييز بين BAT باستخدام تقنيات التصوير التقليدية بسبب الكثافات المماثلة ل WAT و BAT8. هناك مشكلة أخرى مربكة وهي أن مستودعات الدهون البيج تقع أيضا داخل نفس الطبقات الضيقة من اللفافة أو في مستودعات معينة مع WAT8 ، مما يجعل من الصعب التمييز باستخدام تقنيات التصوير التقليدية.
للتغلب على هذه المشكلة ، يتم قياس حجم BAT عادة من خلال الجمع بين التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET) والتصوير المقطعي المحوسب (CT). يعد الجلوكوز التناظري 18 F-fluourodeoxyglucose (18F-FDG) هو المقتفي الأكثر شيوعا المستخدم لدراسة BAT 12. ومع ذلك ، فإنه يعاني من العديد من القيود ، مثل تعريض الأشخاص للإشعاع المؤين وكونه غازيا ومكلفا. بالإضافة إلى ذلك ، فإن أكبر قيد على 18F-FDG المقتفي هو أنه يقيس امتصاص نظير الجلوكوز ، وهو ليس مثاليا نظرا لأن الأحماض الدهنية الحرة هي الركائز المفضلة لتوليد الحرارةBAT 13. لا تقيس تقنية 18F-FDG PET / CT امتصاص الأحماض الدهنية الحرة كركيزة للتوليد الحراري ، وبالتالي لا تقيس الأهمية الفسيولوجية لتوليد الحرارة BAT. هناك تقنيات بديلة تستخدم لتقييم BAT البشري ، والتي تشمل قياس امتصاص الماء المسمى بالأكسجين -15 (15 O-O2) 14,11 C-acetate 15 ، وهو حمض دهني طويل السلسلة (18 F-fluoro-6-thia-heptadecanoic acid)16 ، أو adenosine 17 ، بالإضافة إلى التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي 18 والتصوير بالرنين المغناطيسي 19، لكنها لا تزال باهظة الثمن وتعرض الأشخاص للإشعاع المؤين. لذلك ، لا يوجد معيار ذهبي موثوق به وغير مكلف ، والأهم من ذلك ، آمن لتحديد كمية أفضل التقنيات المتاحة البشرية.
التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء (IRT) هو تقنية تصوير بديلة غير جراحية20,21 تقيس درجة حرارة الجلد التي تغطي مستودع BAT المعروف. في حين أن هذا يشير إلى زيادة إنفاق الطاقة ، إذا كانت درجة الحرارة المقاسة لا تتجاوز درجة الحرارة الأساسية ، فلا يمكن تحديد ما إذا كان التغير المقاس في درجة الحرارة هو ببساطة نتيجة لتغير تدفق الدم. علاوة على ذلك ، لا توفر الزيادة المقاسة في درجة الحرارة المحلية قيما لنفقات الطاقة المتغيرة ، والتي غالبا ما تكون نقطة النهاية المرغوبة. استخدم عدد من المجموعات البحثية IRT لقياس الزيادة في درجة الحرارة في مستودعات أفضل التقنيات المتاحة البشرية بعد تدخل الكافيين أو التحفيز البارد. هذا المستودع هو الحفرة فوق الترقوة22،23،24،25،26،27.
ومع ذلك ، ليس من الواضح ما إذا كان عمل الكافيين على BAT مباشرا أم بوساطة عبر الدوائر العصبية. هناك أدلة على أن الكافيين يحفز ميزات اللون البني في الخلايا الشحمية في المختبر22 ، وقد أظهر العمل السابق أن الكافيين (100 ملغ) يزيد من تقلب معدل ضربات القلب ، والذي قد يكون مؤشرا على زيادة في محرك العصب الودي بشكل منهجي في الجسم27. هذا يتماشى مع الأدلة في القوارض ، حيث يزيد الكافيين عبر الجهاز العصبي المركزي من توليد الحرارة دون تأثير ديناميكي ضارعلى القلب 28.
نظرا لأن الركيزة المفضلة للتوليد الحراري BAT هي الأحماض الدهنية الحرة المشتقة من الدهون الثلاثية13 ، وعزل BAT النشط الذي يدور الدهون للحفاظ على توليد الحرارة29 ، فإن مقاييس استخدام الركيزة مهمة في تقييم التنشيط الفسيولوجي ل BAT. نسبة التبادل التنفسي (RER) هي نسبة حجم الأكسجين المستهلك (V̇O 2) وثاني أكسيد الكربون المنتج (V̇CO2)30. يشير RER البالغ 0.7 إلى استقلاب الأحماض الدهنية ، ويشير RER البالغ 1.0 إلى استقلاب الكربوهيدرات31. لذلك ، فإن الدليل على تفضيل استخدام الأحماض الدهنية على زيادة نفقات الطاقة هو ارتباط رئيسي لتوليد الحرارة BAT.
بالإضافة إلى ذلك ، بالنظر إلى أن امتصاص الجلوكوز هو ارتباط معروف بنشاط BAT (انظر أعلاه) ، فإن انخفاض نسبة الجلوكوز في الدم بالتوازي مع التغير في استخدام الركيزة هي ارتباطات رئيسية لتوليد الحرارة BAT. أفادت الدراسات السابقة التي تستخدم القياس الحراري غير المباشر وحده ، أو مع تسجيل درجة الحرارة لدى الأفراد الصائمين ، عن تغيير طفيف أو معدوم في استخدام الركيزة32,33. نظرا لأن هذا من المحتمل أن يتم إخفاءه من خلال حالة الصيام (حيث يفضل التمثيل الغذائي قبل الامتصاص استخدام الدهون) ، فإننا نقترح الجمع بين IRT وقياس السعرات الحرارية غير المباشرة مع تحميل الكربوهيدرات.
تهدف هذه المقالة إلى توفير نهج خطوة بخطوة يمكن للباحثين السريريين استخدامه لتحديد الأهمية الفسيولوجية لأفضل التقنيات المتاحة في البشر بشكل موثوق ، والأهم من ذلك ، بأمان من خلال الجمع بين IRT وقياس السعرات الحرارية غير المباشر ومستويات الجلوكوز في الدم. من الأفضل استخدام هذه التقنية بعد أن يكون الأشخاص محملين بالكربوهيدرات ويتعرضوا إما لعوامل BAT الدوائية أو المحفزات البيئية. يمكن استخدام نتائج هذا النهج لدراسة نشاط أفضل التقنيات المتاحة ، واستخدام الركيزة ، وإنفاق الطاقة بعد تنشيط أفضل التقنيات المتاحة في موضوعات الدراسةالفردية 27.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Automated Sphygmomanometer</td>
			<td>Omron SEM-2 advanced, Omron, Kyoto, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual-energy X-ray absorptiometry scanner&#160;</td>
			<td>Hologic Horizon, Hologic Inc., Bedford, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECG electrodes</td>
			<td>Ambu Blue Sensor R, Malaysia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Five lead ECG</td>
			<td>Medilog AR12 plus; Schiller, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLIR E60 camera</td>
			<td>FLIR Systems Australia, Melbourne , Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLIR Research Studio Professional Edition</td>
			<td>FLIR Systems Australia, Melbourne , Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freestyle Optium Xceed</td>
			<td>Abbott Diabetes Care, Alameda, Canada</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose Gel</td>
			<td>Winners Sports Nutrition, Mt Martha, Victoria, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MaskA cold-sterilized silicone mask</td>
			<td>7400 series Oro-Nasal Mask, Hans Rudolph</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medilog Darwin2 software</td>
			<td>Professional; Schiller, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-contact Infrared Thermometer&#160;</td>
			<td>Berrcom, JXB-178, Guangdong, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optium Glucose Strip Xceed</td>
			<td>Abbott Diabetes Care, Alameda, Canada</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ParvoMedics TrueOne 2400 respiratory gas analyser</td>
			<td>ParvoMedics Inc, East Sandy, UT, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pre-sterilized Non-rebreathing Valve</td>
			<td>Two-way non-rebreathing valve T-Shape configuration, 2600 Medium or 2700 Large, Hans Rudolph</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using a combination of indirect calorimetry, infrared thermography, and blood glucose levels to measure brown adipose tissue thermogenesis in humans

في الثدييات ، يتم تنشيط الأنسجة الدهنية البنية (BAT) بسرعة استجابة للبرد من أجل الحفاظ على درجة حرارة الجسم. على الرغم من أن BAT قد تمت دراسته بشكل كبير في الحيوانات الصغيرة ، إلا أنه من الصعب قياس نشاط BAT في البشر. لذلك ، لا يعرف سوى القليل عن قدرة توليد الحرارة والأهمية الفسيولوجية لأفضل التقنيات المتاحة في البشر ، بما في ذلك الدرجة التي يمكن بها لمكونات النظام الغذائي تنشيط BAT. ويرجع ذلك إلى القيود المفروضة في الطريقة الأكثر استخداما حاليا لتقييم تنشيط الجلوكوز الموسوم إشعاعيا ل BAT (fluorodeoxyglucose أو 18FDG) الذي تم قياسه بواسطة التصوير المقطعي المحوسب بالإصدار البوزيتروني (PET-CT).
عادة ما يتم تنفيذ هذه الطريقة في الأشخاص الصائمين ، حيث تؤدي التغذية إلى امتصاص العضلات للجلوكوز ، مما قد يخفي امتصاص الجلوكوز في أفضل التقنيات المتاحة. تصف هذه الورقة بروتوكولا مفصلا لتحديد نفقات الطاقة البشرية في الجسم الكلي واستخدام الركيزة من التوليد الحراري ل BAT من خلال الجمع بين القياس الحراري غير المباشر والتصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء ومراقبة نسبة الجلوكوز في الدم لدى الذكور البالغين المحملين بالكربوهيدرات. لتوصيف الأهمية الفسيولوجية لأفضل التقنيات المتاحة ، فإن مقاييس تأثير نشاط أفضل التقنيات المتاحة على صحة الإنسان أمر بالغ الأهمية. نوضح بروتوكولا لتحقيق ذلك من خلال الجمع بين تحميل الكربوهيدرات وقياس السعرات الحرارية غير المباشرة مع قياسات التغيرات فوق الترقوة في درجة الحرارة. سيساعد هذا النهج الجديد على فهم فسيولوجيا وعلم الأدوية لتوليد الحرارة BAT في البشر.

يقدم الشكل 1 والشكل 2 مخططا انسيابيا لتصميم الدراسة. يتم تمثيل صور إعداد البروتوكول في الشكل 3. يمكن العثور على خصائص المشاركين في الجدول 1. يتم عرض أمثلة تمثيلية ل IRT لصور أحد المشاركين ، بما في ذلك خط الأساس (الشكل 4 أ) ، وحمل ما بعد الكربوهيدرات (الشكل 4 ب) ، و 60 دقيقة بعد مكملات الكافيين (الشكل 4 ج) ، مع صورة تمثيلية لإعداد الكاميرا ، في الشكل 4D. والجدير بالذكر أن الشكل 4A-C يقدم تمثيلا مرئيا للتغيرات في درجة حرارة الحفرة فوق الترقوة (Tscf) بعد التدخل. الاختلافات في درجة الحرارة ملحوظة بشكل خاص بين الشكل 4B والشكل 4C.
في الشكل 5A-C ، تظهر النتائج من Van Schaik et al. Tscf (الشكل 5A) ، درجة حرارة نقطة مرجعية (Tref; الشكل 5C) ، ودرجة الحرارة الأساسية (Tcore ؛ الشكل 5 ب) من خط الأساس (0 دقيقة) إلى الانتهاء من جمع البيانات (120 دقيقة). تظهر البيانات تدخلا للكافيين مقارنة بالدواءالوهمي 27. النتائج الموصوفة في هذه المخطوطة تمثل تماما هذه الورقة المنشورة. بالإضافة إلى ذلك، لا تظهر البيانات الموجودة على Tscf تأثير مجموعة. يمكن العثور على الإحصاءات في البيانات التكميلية ل Van Schaik et al.27.
تتزامن الزيادة الملحوظة في درجة الحرارة فوق الترقوة مع التغيرات في استخدام الركيزة والانخفاض السريع في مستويات الجلوكوز في الدم بعد التدخل ، كما هو موضح في الشكل 6. هذه النتائج ، جنبا إلى جنب مع عدم وجود تغير في درجة الحرارة لدرجات حرارة Tref و Tcore (الشكل 5B ، C) تدل على توليد الحرارة BAT. بالإضافة إلى ذلك ، مع زيادة نفقات الطاقة (الشكل 6E) ، ينخفض RER (الشكل 6A) ، والذي يتزامن مع زيادة أكسدة الدهون (الشكل 6B) بعد التدخل.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig01.jpg"> الشكل 1: رسم تخطيطي للمقاييس مع وقت لإكمالها في كل فترة 15 دقيقة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig01large.jpg" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig02.jpg"> الشكل 2: مخطط التدفق التخطيطي لتصميم الدراسة. عملية تجريبية. مربع أسود = وقت تحميل الكربوهيدرات ؛ الدائرة السوداء = وقت التدخل. الاختصارات: IRT = التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء ؛ BGL = مستويات الجلوكوز في الدم. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig02large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig03.jpg"> الشكل 3: صور تمثيلية للبروتوكول. (أ) الإعداد دون حضور المشارك؛ (ب) جمع بيانات المشاركين عند خط الأساس؛ (ج) حاسوب قياس السعرات الحرارية غير المباشرة؛ (د) مشارك يستهلك حمولة الكربوهيدرات بعد مقاييس خط الأساس. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig03large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig04.jpg"> الشكل 4: أمثلة تمثيلية لإعداد IRT والكاميرا. صور حرارية من أحد المشاركين ، عند (أ) خط الأساس ، (ب) بعد حمل الكربوهيدرات ، و (ج) 60 دقيقة بعد تدخل الكافيين ، مع (د) صورة تمثيلية لإعداد الكاميرا. اختصار: IRT = التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig04large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig05.jpg"> الشكل 5: آثار التدخل على مقاييس درجة الحرارة. التغيرات في درجة الحرارة الخام الأساسية ل (A) Tscf و (B) Tcore و (C) Tref في المشاركين بعد حمل الكربوهيدرات (النقطة الزمنية = 0) وإدارة تدخل الكافيين أو كبسولة الدواء الوهمي (الوقت = 45 دقيقة إلى 120 دقيقة)27. تم تعديل هذا الرقم من Van Schaik et al.27. (أ-ج) مربع رمادي فاتح 1 = وقت تحميل الكربوهيدرات ؛ الإطار 2 = ما قبل التدخل ؛ المربع الرمادي الداكن 3 = بعد التدخل ؛ الدوائر الزرقاء = تدخل الكافيين. مثلثات سوداء = تدخل الدواء الوهمي. يتم التعبير عن البيانات على أنها الحد الأدنى إلى الحد الأقصى ، مع عرض جميع النقاط في المربع ومخططات الشارب . يتم التعبير عن الفرق كمتوسط ± SD ، n = 8 لكل تدخل ؛ * يمثل تأثير تفاعل الكافيين (* p < 0.05). تم تحليل قيم البيانات باستخدام تحليل ثلاثي الاتجاهات للقياسات المتكررة للتباين. الاختصارات: Tscf = درجة الحرارة في الحفرة فوق الترقوة. Tcore = درجة الحرارة الأساسية ؛ Tref = نقطة مرجعية للتحكم. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig05large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig06.jpg"> الشكل 6: آثار التدخل على التدابير الأيضية. التغييرات في (أ) RER ، (ب) معدل أكسدة الدهون ، (ج) معدل أكسدة الكربوهيدرات ، (د) مستويات الجلوكوز في الدم ، و (ه) إنفاق الطاقة لدى المشاركين بعد حمل الكربوهيدرات (الوقت = 0) وإدارة كبسولة الكافيين أو كبسولة الدواء الوهمي (الوقت = 45 دقيقة إلى 120 دقيقة). مربع رمادي فاتح 1 = وقت تحميل الكربوهيدرات ؛ الإطار 2 = ما قبل التدخل ؛ المربع الرمادي الداكن 3 = بعد التدخل ؛ الدوائر الزرقاء = تدخل الكافيين. مثلثات سوداء = تدخل الدواء الوهمي. يتم التعبير عن البيانات على أنها الحد الأدنى إلى الحد الأقصى ، مع عرض جميع النقاط في المربع ومخططات الشارب . (ه) الإدارة السابقة واللاحقة للتدخلات؛ شريط رمادي = تدخل الدواء الوهمي ؛ الشريط الأزرق = تدخل الكافيين. يتم التعبير عن الفرق كمتوسط ± SD ، n = 8 لكل تدخل ؛ * يمثل تأثير تفاعل الكافيين (* p < 0.05). تم تحليل قيم البيانات باستخدام تحليل ثلاثي الاتجاهات للقياسات المتكررة للتباين. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig06large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td>
			<td>جميع المشاركين</td>
		</tr><tr><td>n</td>
			<td>8</td>
		</tr><tr><td>العمر ، سنوات</td>
			<td>22 ± 2</td>
		</tr><tr><td>الطول ، سم</td>
			<td>176 ± 5</td>
		</tr><tr><td>الوزن ، كجم</td>
			<td>74 ± 8</td>
		</tr><tr><td>مؤشر كتلة الجسم ، كجم / م2 </td>
			<td>23 ± 2</td>
		</tr><tr><td>الدهون في الجسم،٪</td>
			<td>20 ± 8</td>
		</tr></tbody></table>الجدول 1: التركيبة السكانية للمشاركين. القيم هي وسائل ± SD ما لم يذكر خلاف ذلك. هذا الجدول مأخوذ من Van Schaik et al.27.

Watch this Scientific Journal Video about Using a Combination of Indirect Calorimetry, Infrared Thermography, and Blood Glucose Levels to Measure Brown Adipose Tissue Thermogenesis in Humans at JoVE.c

Using a Combination of Indirect Calorimetry, Infrared Thermography, and Blood Glucose Levels to Measure Brown Adipose Tissue Thermogenesis in Humans

هنا ، نقدم بروتوكولا لتحديد الأهمية الفسيولوجية لتأثير نشاط الأنسجة الدهنية البنية (BAT) على التمثيل الغذائي البشري. يتم تحقيق ذلك من خلال الجمع بين تحميل الكربوهيدرات وقياس السعرات الحرارية غير المباشرة مع قياسات التغيرات فوق الترقوة في درجة الحرارة. يمكن أن يساعد هذا النهج الجديد في تطوير هدف دوائي للتوليد الحراري BAT في البشر.

استخدام مزيج من القياس الحراري غير المباشر والتصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء ومستويات الجلوكوز في الدم لقياس التوليد الحراري للأنسجة الدهنية البنية في البشر

In mammals, brown adipose tissue (BAT) is activated rapidly in response to cold in order to maintain body temperature. Although BAT has been studied ...

يحدد هذا البروتوكول الأهمية الفسيولوجية لنشاط الأنسجة الدهنية البنية البشرية من خلال الجمع بين تحميل الكربوهيدرات وقياس السعرات الحرارية غير المباشر والتغيرات في درجة الحرارة فوق الترقوة. هذا البروتوكول لا يعرض المشاركين للإشعاع المؤين. يكتشف التغيرات في درجة الحرارة فوق الترقوة المقاسة ، جنبا إلى جنب مع درجة الحرارة الأساسية ودرجة حرارة المنطقة المرجعية.في يوم الدراسة ، ابدأ بقياس طول ووزن المشاركين. اطلب من المشاركين الاستلقاء على قاعدة. بعد 30 دقيقة ، سجل معلمات خط الأساس الخاصة بهم.بعد ذلك ، اسمح للمشاركين باستهلاك ثلاثة تدريبات كربوهيدرات كل منها 90 جراما بين صفر إلى 15 دقيقة. بعد 45 دقيقة من تحميل الكربوهيدرات ، اسمح للمشاركين بتناول 100 ملليغرام من كبسولات علاج الكافيين. لإجراء قياس السعرات الحرارية غير المباشرة ، استخدم محلل غازات الجهاز التنفسي المعاير.قم بتركيب قناع السيليكون المعقم على البارد المجهز بصمام غير معقم مسبقا غير قابل لإعادة التنفس على المشارك لتوصيل هواء الغرفة. قم بإصلاحه على وجه المشارك باستخدام مرفق شبكي وتحقق من وجود تسريبات. تأكد من توصيل أنابيب الشهيق والزفير.بعد أخذ عينات من الغازات منتهية الصلاحية ، قم بإزالة القناع لإكمال القياسات الإضافية وقياس معدلات أكسدة الركيزة كما هو موضح في مخطوطة النص. بعد كل جولة من قياسات الغازات منتهية الصلاحية ، استخدم جهاز قياس السكر لقياس مستويات الجلوكوز في الدم. وجه مقياس حرارة غير ملامس نحو مركز جبين المشارك.لإجراء التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء ، اجعل المشاركين يجلسون في وضع مستقيم ينظرون إلى الأمام مباشرة مع كشف رقبتهم إلى منطقة الصدر. ضع كاميرا التصوير الحراري على حامل ثلاثي القوائم على مستوى الرقبة على بعد متر واحد من وجه الهدف. بعد تشغيل الكاميرا ، اضبط التركيز عن طريق تدوير حلقة التركيز.وجه مؤشر ليزر إلى خط الوسط من رقبة المشارك. وانقر فوق صورة. لتحليل صور الأشعة تحت الحمراء ، قم بتقييم درجات حرارة سطح منطقة الصدر التي تحتوي على أنسجة دهنية بنية عن طريق وضع مناطق مثلثة ذات أهمية في الحفرة فوق الترقوة ومنطقة دائرية ذات أهمية على القص.ضع في اعتبارك المنطقة القصية كنقطة مرجعية للتحكم ، لأن هذه المنطقة لا تحتوي على أنسجة دهنية بنية. بمجرد تحديد موقع المناطق ، احصل على متوسط الانحراف المعياري لدرجة الحرارة لكل منطقة باستخدام البرنامج. آثار تدخل الكافيين على مقاييس درجة الحرارة في منطقة الحفرة الأساسية وفوق الترقوة تدل على توليد حرارة الأنسجة الدهنية البنية.أظهر التدخل تأثيرا ملحوظا في التدابير الأيضية مع زيادة درجة الحرارة فوق الترقوة والانخفاض السريع في مستويات الجلوكوز في الدم. تشير هذه النتائج ، جنبا إلى جنب مع عدم وجود تغيرات في درجات الحرارة في درجة حرارة المنطقة الأساسية والمرجعية ، إلى توليد حرارة الأنسجة الدهنية البنية. أدت زيادة إنفاق الطاقة إلى انخفاض نسبة التبادل التنفسي وزيادة أكسدة الدهون من قبيل الصدفة.من المهم التأكد من الحفاظ على درجة حرارة الغرفة ثابتة ؛ تم تركيب قناع السيليكون بشكل صحيح ؛ وكاميرا التصوير الحراري على مستوى الرقبة ، على بعد متر واحد على الأقل من المشارك. سيكون من المستحسن قياس علامات الدم للأنسولين. تشير العودة السريعة لمستويات الجلوكوز في الدم بعد التدخل إلى أن التدخل نفسه قد يحسن إشارات الأنسولين.تسمح هذه التقنية بتحليل المقاييس المتكررة. هذا شيء لا يمكن القيام به مع دراسات التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني. يمكن الآن تقييم مدى تأثير المكونات الغذائية والعوامل الدوائية على نشاط الأنسجة الدهنية البنية لدى البشر بطريقة آمنة ويمكن الوصول إليها.

Research

JoVE Journal

Medicine

Spectral Karyotyping to Study Chromosome Abnormalities in Humans and Mice with Polycystic Kidney Disease

الطيفية Karyotyping إلى دراسة حالة شذوذ الكروموسومات في البشر والفئران مع مرض الكلى المتعدد الكيسات

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being ...

Cerenkov Luminescence Imaging of Interscapular Brown Adipose Tissue

كيرينكوف التلألؤ التصوير من الأنسجة الدهنية بين الكتفين براون

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely ...

Human Brown Adipose Tissue Depots Automatically Segmented by Positron Emission Tomography/Computed Tomography and Registered Magnetic Resonance Images

الإنسان براون الدهنية مستودعات الأنسجة مجزأة تلقائيا من قبل البوزيترون البوزيتروني / التصوير المقطعي والرنين المغناطيسي مسجل صور

Reliably differentiating brown adipose tissue (BAT) from other tissues using a non-invasive imaging method is an important step toward studying BAT in ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

القياس عن بعد داخل الرحم لقياس ماوس مقلص الضغط<em&gt; في فيفو</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

الأوكسجين الجلوكوز الحرمان وعودة التأكسج باعتبارها<em&gt; في المختبر</em&gt; الإسكيمية-ضخه من الإصابات نموذج لدراسة الدم في الدماغ الحاجز الجنسي لدى الرجال

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

A Model to Simulate Clinically Relevant Hypoxia in Humans

نموذج لمحاكاة نقص الأكسجة ذات الصلة سريريا في البشر

In case of apnea, arterial partial pressure of oxygen (pO2) decreases, while partial pressure of carbon dioxide (pCO2) increases. To avoid damage to ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

تقييم الدالة Microvascular الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام فيديوميكروسكوبي

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Characterization of Immune Cells in Human Adipose Tissue by Using Flow Cytometry

تحديد خصائص الخلايا المناعية في الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام التدفق الخلوي

Infiltration of immune cells in the subcutaneous and visceral adipose tissue (AT) deposits leads to a low-grade inflammation contributing to the ...

Conducting Maximal and Submaximal Endurance Exercise Testing to Measure Physiological and Biological Responses to Acute Exercise in Humans

إجراء عملية التحمل القصوى وسوبماكسيمال الاختبار لقياس الاستجابات الفسيولوجية والبيولوجية لممارسة الحادة في البشر

Regular physical activity has a positive effect on human health, but the mechanisms controlling these effects remain unclear. The physiologic and biologic ...

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

الجسم كله والإقليمية الكمي لنشاط الإنسان براون الأنسجة الدهنية باستخدام 18وفدج PET/CT

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to ...