Name: microengineering 3d collagen hydrogels with long-range fiber alignment
Uploaded: 2022-09-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microengineering 3D Collagen Hydrogels with Long-Range Fiber Alignment at JoVE.com

Detta arbete stöddes delvis av National Institute of Health under tilldelningsnummer R21GM143658 och av National Science Foundation under bidragsnummer 2150798. Innehållet är enbart författarnas ansvar och representerar inte nödvändigtvis finansiärernas officiella åsikter.

1. Tillverkning av den tvådelade kanalen och modulära plattformsbasen
OBS: Den mikrofluidiska kanalen är konstruerad med två delar - den mikrofluidiska kanalen "cutout", som är rakhyvel skuren från ett polydimetylsiloxan (PDMS) ark med definierad tjocklek och kanalkåpan, som reversibelt binder till utskärningen och bildar kanalen. Kanalen är omgiven av en poly(metylmetakrylat) (PMMA) ram som kommer att fungera som en mediereservoar (figur 1...

Protokoll för att generera COL1-matriser med inriktade fibrer har beskrivits med hjälp av magnetiska metoder, direkt tillämpning av mekanisk töjning och mikrofluidiska tekniker47. Mikrofluidiska metoder används ofta för att skapa mikrofysiologiska system på grund av deras väldefinierade flödes- och transportegenskaper, vilket möjliggör exakt kontroll över den biokemiska mikromiljön. Eftersom anpassade COL1-fibrer ger viktiga lärorika signaler under patofysiologiska processer som sår...

Celler finns i ett komplext 3D-fibröst nätverk som kallas extracellulär matris (ECM), varav huvuddelen består av det strukturella proteinet kollagen typ I (COL1)1,2. De biofysiska egenskaperna hos ECM ger vägledande ledtrådar till celler, och som svar omformar celler ECM-mikroarkitekturen 3,4,5. Dessa ömsesidiga cell-matrisinteraktioner kan ge upphov till anpassade COL1-fiberdomäner6 som främjar angiogenes och cellinvasion i tumörmiljön 7,8,9 och påverkar cellmorfologin 10,11,12, polarisering 13 och differentiering 14. Inriktade kollagenfibrer främjar också sårläkning 15, spelar en nyckelroll i vävnadsutveckling16 och bidrar till långväga cellkommunikation17,18. Därför är replikering av den ursprungliga COL1-fibermikroarkitekturen in vitro ett viktigt steg mot att utveckla strukturerade modeller för att studera cellsvar på anpassade mikromiljöer.
Mikrofluidiska cellodlingssystem har etablerats som en föredragen teknik för att utveckla mikrofysiologiska system (MPS)19,20,21,22,23. Genom att utnyttja gynnsamma skalningseffekter i mikroskala ger dessa system exakt kontroll över vätskeflöden, stöder kontrollerad införande av mekaniska krafter och definierar den biokemiska mikromiljön inom en mikrokanal 21,24,25,26,27. MPS-plattformar har använts för att modellera vävnadsspecifika mikromiljöer och studera interaktioner mellan flera organ28. Samtidigt har hydrogeler undersökts i stor utsträckning för att rekapitulera 3D-mekaniken och det biologiska inflytandet av ECM som observeras in vivo29,30. Med en växande tonvikt på att integrera 3D-kultur med mikrofluidiska plattformar kan många tillvägagångssätt kombinera COL1-hydrogeler i mikrofluidiska enheter31,32,33. Metoderna för att anpassa COL1-hydrogeler i mikrofluidiska kanaler har dock begränsats till tunna 2D-"mattor" (<40 μm i tjocklek) i kanaler <1 mm breda, vilket ger begränsad potential att modellera cellsvar i inriktade 3D-mikromiljöer31,34,35,36.
För att uppnå anpassade 3D COL1-hydrogeler i ett mikrofluidiskt system har det visats att när en självmonterande COL1-lösning utsätts för lokala förlängningsflöden (hastighetsförändring längs strömriktningen) uppvisar de resulterande COL1-hydrogelerna en grad av fiberinriktning som är direkt proportionell mot storleken på den förlängningstöjningshastighet de upplever37, 38. Mikrokanaldesignen i detta protokoll är unik på två sätt; För det första introducerar den segmenterade designen lokal förlängningsbelastning till COL1-lösningen, och för det andra tillåter dess "tvådelade" konstruktion användaren att rikta in COL1-fibrer och sedan demontera kanalen för att direkt komma åt de inriktade fibrerna i ett öppet format. Detta tillvägagångssätt kan vidare användas för att utveckla modulära mikrofluidiska plattformar som utvecklar mikrofysiologiska system med ordnade COL1-matriser. Följande protokoll beskriver processen för tillverkning av segmenterade mikrokanaler och beskriver användningen av kanalerna för att anpassa bovint atelo COL1. Detta protokoll ger också instruktioner för odling av celler på COL1 i ett öppet brunnsformat och diskuterar att lägga till funktionalitet till plattformen med hjälp av ett modulärt, magnetiskt baslager.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-Aminopropyl)triethoxysilane, 99% (APTES)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>440140-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 Gauge IT Series Angled Dispensing Tip</td>
			<td>Jensen Global</td>
			<td>JG-20-1.0-90</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3/16&#34; dia. x 1/16&#34; thick Nickel Plated Magnet</td>
			<td>KJ Magnetics</td>
			<td>D31</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3M (TC) 12X12-6-467MP</td>
			<td>DigiKey</td>
			<td>3M9726-ND</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACETONE ACS REAGENT &#8805;99.5%</td>
			<td>Signa Aldrich</td>
			<td>179124-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD-20AC LABORATORY CORONA TREATER</td>
			<td>Electro-Technic Products</td>
			<td>12051A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA), Fraction V, 98%, Reagent Grade, Alfa Aesar</td>
			<td>VWR</td>
			<td>AAJ64100-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear cast acrylic sheet</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>8560K181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 100 mL Trypsin 10x, 2.5% Trypsin in HBSS [-] calcium, magnesium, phenol red, Porcine Parvovirus Tested</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45000-666</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess II Automated Cell Counter</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>AMQAX1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CT-FIRE software</td>
			<td>LOCI - University of Wisconsin</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGM-2 Endothelial Cell Growth Medium-2 BulletKit, (CC-3156 &#38; CC-4176), Lonza CC-3162, 500 mL</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-3162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde 50% in aqueous solution, Reagent Grade, Packaging=HDPE Bottle, Size=100 mL</td>
			<td>VWR</td>
			<td>VWRV0875-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphtec CELITE-50</td>
			<td>Graphtec</td>
			<td>CE LITE-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15-630-080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Purity Silicone Rubber .010&#34; Thick, 6&#34; X 8&#34; Sheet, 55A Durometer</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>87315K62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Umbilical Vein Endothelial cells</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>C0035C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Invitrogen&#160;Trypan Blue Stain (0.4%)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>T10282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A4154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser cutter</td>
			<td>Full Spectrum</td>
			<td>20x12 H-series</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfluidics Syringe pump</td>
			<td>New Era Syringe Pumps</td>
			<td>NE-1002X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microman E Single Channel Pipettor, Gilson, Model M1000E</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FD10006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molecular Probes Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A12379</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molecular Probes Hoechst 33342, Trihydrochloride, Trihydrate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>H3570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nutragen Bovine Atelo Collagen</td>
			<td>Advanced BioMatrix</td>
			<td>5010-50ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pbs (10x), pH 7.4</td>
			<td>VWR</td>
			<td>70011044.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS pH 7.4</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10010049.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS, 10x), with Triton X-100</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>J63521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Replacement carrier sheet for graphtec craft ROBO CC330L-20</td>
			<td>USCUTTER</td>
			<td>GRPCARSHTN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restek Norm-Ject Plastic Syringe 1 mL Luer Slip</td>
			<td>Restek</td>
			<td>22766.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon wafer</td>
			<td>University wafer</td>
			<td>452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide, ACS, Packaging=Poly Bottle, Size=500 g</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9292-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184</td>
			<td>VWR</td>
			<td>102092-312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Pierce 20x PBS Tween 20</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>28352.00</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microengineering 3d collagen hydrogels with long-range fiber alignment

Justerade kollagen I (COL1) fibrer styr tumörcellens rörlighet, påverkar endotelcellmorfologi, kontrollerar stamcellsdifferentiering och är ett kännetecken för hjärt- och muskuloskeletala vävnader. För att studera cellrespons på anpassade mikromiljöer in vitro har flera protokoll utvecklats för att generera COL1-matriser med definierad fiberinriktning, inklusive magnetiska, mekaniska, cellbaserade och mikrofluidiska metoder. Av dessa erbjuder mikrofluidiska metoder avancerade funktioner som noggrann kontroll över vätskeflöden och den cellulära mikromiljön. De mikrofluidiska metoderna för att generera anpassade COL1-matriser för avancerade in vitro-odlingsplattformar har dock begränsats till tunna "mattor" (<40 μm i tjocklek) av COL1-fibrer som sträcker sig över avstånd mindre än 500 μm och inte bidrar till 3D-cellodlingsapplikationer. Här presenterar vi ett protokoll för att tillverka 3D COL1-matriser (130-250 μm i tjocklek) med millimeterskaleregioner med definierad fiberinriktning i en mikrofluidisk enhet. Denna plattform ger avancerade cellodlingsfunktioner för att modellera strukturerade vävnadsmikromiljöer genom att ge direkt tillgång till den mikrokonstruerade matrisen för cellodling.

När en självmonterande COL1-lösning strömmar genom en kanal med minskande tvärsnittsarea ökar COL1-lösningens strömvisa hastighet (v x) lokalt med en storlek, ∂v x, längs längden på förträngningen mellan de två segmenten (∂x), vilket resulterar i en förlängningstöjningshastighet (ε̇) där ε̇ = ∂v x / ∂x. Förlängningstöjningshastigheten kan beräknas från vätskehastigheten, som mäts med hjälp av partikelbildvelocimetri (PIV), som visas i <strong class="x...

Watch this Scientific Journal Video about Microengineering 3D Collagen Hydrogels with Long-Range Fiber Alignment at JoVE.com

Microengineering 3D Collagen Hydrogels with Long-Range Fiber Alignment (Video) | JoVE

Detta protokoll demonstrerar användningen av en mikrofluidisk kanal med förändrad geometri längs vätskeflödesriktningen för att generera förlängningstöjning (sträckning) för att justera fibrer i en 3D-kollagenhydrogel (<250 μm i tjocklek). Den resulterande inriktningen sträcker sig över flera millimeter och påverkas av förlängningstöjningshastigheten.

Microengineering 3D Collagen Hydrogels med långväga fiberinriktning

Aligned collagen I (COL1) fibers guide tumor cell motility, influence endothelial cell morphology, control stem cell differentiation, and are a hallmark ...

Denna metod gör det möjligt för oss att konstruera 3D-kollagenhydrogeler med kontrollerade nivåer av fiberinriktning för att modellera miljöer som finns i frisk och sjuk vävnad i kroppen. Denna teknik ger ett enkelt mikrofluidiskt tillvägagångssätt för att konstruera inriktade kollagenhydrogeler, introducera celler och kvantifiera hur celler beter sig i topografiskt definierade 3D-miljöer. Demonstrerar proceduren kommer att vara Neil Joshi, Mehran Mansouri, Ann Byerly och Justin Vidas för mitt laboratorium.För att börja, montera ett 250 mikrometer tjockt PDMS-ark på en plastbärare och rakhyvel skär den mikrofluidiska designen med en hantverksskärare på ett bladdjup på 0,5 millimeter, hastighet på en centimeter per sekund och hög kraft. Använd ett ultraljudsbad och rengör mikrofluidiska kanalutskärningar i fem minuter. Skölj de sonicated kanalerna i avjoniserat vatten och torka dem på en värmeplatta vid 100 grader Celsius i fem minuter.Förvara kanalerna i en ren, täckt petriskål tills de används. För att tillverka PDMS-täckskiktet och funktionalisera ytan för framtida modifiering, förbered en 2% aminopropyltrietoxisilanlösning i en glasbägare genom att tillsätta en milliliter aminopropyltrietoxisilan till 49 ml aceton. Späd sedan en 25% glutaraldehydlösning till 5% i avjoniserat vatten.Gör två milliliter lösning för varje 24 millimeter med 50 millimeter täckslip. Rengör locket i en badljudläkare i fem minuter med IPA. Skölj bort IPA från täckglasen med avjoniserat vatten.En slät film av vatten på täckglaset indikerar att IPA sköljs ordentligt. Torka locket glider på en värmeplatta i fem minuter vid 100 grader Celsius. Lägg det torkade locket i rena petriskålar, så att de inte överlappar varandra.Använd en koronaurladdningsstav och utsätt lockslipsarna för en koronaurladdning i en minut vardera. Ta bort lockslipsarna inom fem minuter efter koronaexponering och sänk ner varje täckslip i aminopropyltrietoxisilanlösningen i 10 sekunder, se till att täckplattan är nedsänkt Ta sedan bort lockslipsarna från aminopropyltrietoxisilanlösningen, sänk ner dem i aceton i 10 sekunder och torka dem med tryckluft. Lägg tillbaka det torra locket i petriskålen med den behandlade sidan uppåt.Pipettera en milliliter glutaraldehydlösning på ytan av varje täckglas. Täck så mycket yta som möjligt utan att låta lösningen spilla över kanten på täcket. Låt locket glida, sitta i kontakt med lösningen i 30 minuter och skölj sedan med avjoniserat vatten i 20 sekunder.Torka locket med tryckluft och lägg tillbaka dem i petriskålarna med den plasmabehandlade sidan uppåt För laserskärning av den modulära magnetiska basen, klipp ut konstruktionerna från PMMA-skiktet med lämpliga laserinställningar, såsom antal pass och effekt. Laserinställningarna bör justeras så att magneterna kan pressmonteras i PMMA-lagret. Tvätta den laserskurna delen med tvål och vatten för att ta bort skräp från laserskärningsprocessen.Använd inte lösningsmedel, eftersom de kan sprida mikrosprickor i de laserskurna kanterna. För att montera plattformen, tryck magneterna för hand i den laserskurna basen. Tjockleken på magneterna måste vara mindre än tjockleken på PMMA-basen för att säkerställa att magneterna är i linje med basens yta.Dra av baksidan från det tryckkänsliga limet eller PSA-arket och fäst basen på en glutaraldehydbehandlad täckslip med den funktionaliserade sidan uppåt. Placera försiktigt PDMS-kanalutskärningen i hålrummet som definieras av ramen. Tryck ner med pincett med bred spets för att ta bort luftbubblor och säkerställa konform kontakt.Placera bovint serumalbumin eller BSA-behandlat kanallock ovanpå kanalutskärningen med BSA-sidan nedåt. Se till att vätskeinlopps- och utloppsportarna är i linje med kanalen. Enheten är redo för kollagen I-injektionen.Placera en sprutpump, en kyld steril spruta, kylt neutraliserat kollagen I-lösning och en steril 20-gauge 90 graders vinkelspets luer lock nål i ett biosäkerhetsskåp. Fyll på kollagen I-lösningen i sprutan och undvik bubblor. Sätt fast nålspetsen på sprutan, ladda sprutan i sprutpumpen med nålen nedåt och fyll nålen med kollagen I-lösning.Ställ sprutpumpen till önskad flödeshastighet mellan 50 och 2 000 mikroliter per minut. Placera förberedda PDMS-kanaler på ett labbuttag och jämna med nålen. För in nålen i PDMS-kanalens inloppsport.Injicera kanalen tills en 30-mikroliters droppe kollagen jag samlar på utloppssidan. Sänk labuttaget och separera försiktigt nålen från den nyfyllda kanalen. Upprepa tills alla kanaler har fyllts med kollagen I-lösning.Ladda de fyllda kanalerna i petriskålarna tillsammans med en ren, luddfri torka mättad med avjoniserat vatten för att förhindra uttorkning av det nybildade kollagenet I gel. Täck petriskålen och placera de laddade kanalerna i inkubatorn i två timmar före avskalningssteget. För peel-off och mediajämvikt, börja med att lyfta av PDMS-locket med pincett för att exponera den polymeriserade kollagen I-gelen.Tillsätt 650 mikroliter endoteltillväxtmedia till brunnen. Alternativt kan du ansluta en annan modul för att introducera ett extra kollagenskikt eller tillhandahålla mediaperfusionsfunktioner. Lämna enheterna i inkubatorn i minst fyra timmar för att balansera gelén och mediet.Byt ut mediet före sådd med celler. Funktionalisering av glasluckans glidning möjliggjorde kanallyft och funktionalisering av PDMS-locket med BSA-förhindrat kollagen I-fäste. Kollagen I-fiberinriktningen förblev opåverkad efter att ha lyft av locket.Bilder av HUVECs odlade på det inriktade segmentet av matrisen visade ökad aktinfiberinriktning jämfört med HUVECs på segmentet med slumpmässiga fibrer. Vårt tillvägagångssätt gör det möjligt för oss att modellera tumörmikromiljön och kvantifiera hur olika celltyper svarar. Vi kan också införa flödeskanaler för att stödja långsiktiga experiment.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Microengineering 3D Collagen Hydrogels with Long-Range Fiber Alignment

Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization

Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization (Video) | JoVE

Electrospun nanofiber Ställningar med Graderingar i Fiber Organization

The goal of this protocol is to report a simple method for generating nanofiber scaffolds with gradations in fiber organization and test their possible ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration (Video) | JoVE

Ingenjörs 3D Cellularized kollagengeler för kärlvävnad Regeneration

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Planar Gradient Diffusion System to Investigate Chemotaxis in a 3D Collagen Matrix

Planar Gradient Diffusion System to Investigate Chemotaxis in a 3D Collagen Matrix (Video) | JoVE

Planar Gradient Diffusion System för att undersöka Chemotaxis i en 3D kollagenmatris

The importance of cell migration can be seen through the development of human life. When cells migrate, they generate forces and transfer these forces to ...

Engineered 3D Silk-collagen-based Model of Polarized Neural Tissue

Engineered 3D Silk-collagen-based Model of Polarized Neural Tissue (Video) | JoVE

Engineered 3D Silk-kollagenbaserad modell av polariserat Neural Tissue

Despite huge efforts to decipher the anatomy, composition and function of the brain, it remains the least understood organ of the human body. To gain a ...

Three-dimensional Biomimetic Technology: Novel Biorubber Creates Defined Micro- and Macro-scale Architectures in Collagen Hydrogels

Three-dimensional Biomimetic Technology: Novel Biorubber Creates Defined Micro- and Macro-scale Architectures in Collagen Hydrogels (Video) | JoVE

Tredimensionell Biomimetic Technology: Novel Biorubber Skapar Defined mikro- och makroskala arkitekturer i Collagen Hydrogeler

Tissue scaffolds play a crucial role in the tissue regeneration process. The ideal scaffold must fulfill several requirements such as having proper ...

Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions In Vivo

Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions In Vivo (Video) | JoVE

Beredning av 3D koUagengeler och mikro för studien av 3D interaktioner<em&gt; In Vivo</em

Historically, most cellular processes have been studied in only 2 dimensions.  While these studies have been informative about general cell signaling ...

Tunable Hydrogels from Pulmonary Extracellular Matrix for 3D Cell Culture

Tunable Hydrogels from Pulmonary Extracellular Matrix for 3D Cell Culture (Video) | JoVE

Avstämbar Hydrogeler från Lung Extracellulär Matrix för 3D Cell Culture

Here we present a method for establishing multiple component cell culture hydrogels for in vitro lung cell culture. Beginning with healthy en bloc lung ...

Synthesis of Hydrogels with Antifouling Properties As Membranes for Water Purification

Synthesis of Hydrogels with Antifouling Properties As Membranes for Water Purification (Video) | JoVE

Syntes av Hydrogeler med Antifouling egenskaper som Membran för vattenrening

Hydrogels have been widely utilized to enhance the surface hydrophilicity of membranes for water purification, increasing the antifouling properties and ...

Production of Elastin-like Protein Hydrogels for Encapsulation and Immunostaining of Cells in 3D

Production of Elastin-like Protein Hydrogels for Encapsulation and Immunostaining of Cells in 3D (Video) | JoVE

Produktionen av Elastin-liknande Protein hydrogeler för inkapsling och immunfärgning av celler i 3D

Two-dimensional (2D) tissue culture techniques have been essential for our understanding of fundamental cell biology. However, traditional 2D tissue ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels (Video) | JoVE

Mätning av globala Cellular Matrix metalloproteinas och metabolisk aktivitet i 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...