Name: a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability
Uploaded: 2022-10-28T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

تم دعم هذه الدراسة من قبل برنامج المنح الدراسية لحكومة مقاطعة جيانغسو وتطوير البرنامج الأكاديمي ذي الأولوية لمؤسسات التعليم العالي في جيانغسو (PAPD).

تم إجراء جميع الدراسات على وفقا للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام المختبر وتمت الموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام بجامعة سوشو.
1. العمليات الجراحية
<ol><li>قسم ذكور الفئران C57BL / 6 البالغة من العمر 21 أسبوعا إلى ثلاث مجموعات: الرباط العنقي المستعرض و...

<ol>
	<li>Waterman, B. R., Belmont, P. J., Cameron, K. L., Deberardino, T. M., Owens, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprain+at+the+United+States+Military+Academy.">Epidemiology of ankle sprain at the United States Military Academy.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 797-803 (2010).</li><li>Fong, D. T., Chan, Y. Y., Mok, K. M., Yung, P. S., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+acute+ankle+ligamentous+sprain+injury+in+sports.">Understanding acute ankle ligamentous sprain injury in sports.</a> Sports Medicine Arthroscopy Rehabilitation Therapy &amp; Technology. 1 (1), 14 (2009).</li><li>Herzog, M. M., Kerr, Z. Y., Marshall, S. W., Wikstrom, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprains+and+chronic+ankle+instability.">Epidemiology of ankle sprains and chronic ankle instability.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 603-610 (2019).</li><li>Medina McKeon, J. M., Hoch, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ankle-joint+complex:+A+kinesiologic+approach+to+lateral+ankle+sprains.">The ankle-joint complex: A kinesiologic approach to lateral ankle sprains.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 589-602 (2019).</li><li>Jones, M. H., Amendola, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+treatment+of+inversion+ankle+sprains:+immobilization+versus+functional+treatment.">Acute treatment of inversion ankle sprains: immobilization versus functional treatment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 455 (463), 169-172 (2007).</li><li>Anandacoomarasamy, A., Barnsley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+term+outcomes+of+inversion+ankle+injuries.">Long term outcomes of inversion ankle injuries.</a> British Association of Sport and Medicine. 39 (3), 14 (2005).</li><li>Ringleb, S. I., Dhakal, A., Anderson, C. D., Bawab, S., Paranjape, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+lateral+ligament+sectioning+on+the+stability+of+the+ankle+and+subtalar+joint.">Effects of lateral ligament sectioning on the stability of the ankle and subtalar joint.</a> Journal of Orthopaedic Research. 29 (10), 1459-1464 (2011).</li><li>Mittlmeier, T., Wichelhaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+joint+instability.">Subtalar joint instability.</a> European Journal of Trauma and Emergency Surgery. 41 (6), 623-629 (2015).</li><li>Barg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+instability:+Diagnosis+and+treatment.">Subtalar instability: Diagnosis and treatment.</a> Foot &amp; Ankle International. 33 (02), 151-160 (2012).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+ankle-subtalar+joint+complex+instability+induced+post-traumatic+osteoarthritis.">A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 16 (1), 541 (2021).</li><li>Lui, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+arthroscopic+Brostrom+procedure+with+bone+tunnels.">Modified arthroscopic Brostrom procedure with bone tunnels.</a> Arthroscopy Techniques. 5 (4), 775-780 (2016).</li><li>Wang, W., Xu, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allograft+tendon+reconstruction+of+the+anterior+talofibular+ligament+and+calcaneofibular+Ligament+in+the+treatment+of+chronic+ankle+instability.">Allograft tendon reconstruction of the anterior talofibular ligament and calcaneofibular Ligament in the treatment of chronic ankle instability.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 18 (1), 150 (2017).</li><li>Yang, N., Waddington, G., Adams, R., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+proprioception+of+the+ankle+complex+across+the+lifespan.">Age-related changes in proprioception of the ankle complex across the lifespan.</a> Journal of Sport and Health Science. 8 (6), 548-554 (2019).</li><li>Michels, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+consensus+in+the+approach+to+patients+with+chronic+lateral+ankle+instability:+Ask+the+expert.">Searching for consensus in the approach to patients with chronic lateral ankle instability: Ask the expert.</a> Knee Surgery Sports Traumatology Arthroscopy. 26 (7), 2095-2102 (2017).</li><li>Kamada, K., Watanabe, S., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+subtalar+instability+due+to+insufficiency+of+the+calcaneofibular+ligament:+A+case+report.">Chronic subtalar instability due to insufficiency of the calcaneofibular ligament: A case report.</a> Foot &amp; Ankle International. 23 (12), 1135-1137 (2002).</li><li>Kato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diagnosis+and+treatment+of+instability+of+the+subtalar+joint.">The diagnosis and treatment of instability of the subtalar joint.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 77 (3), 400-406 (1995).</li><li>Meyer, J. M., Garcia, J., Hoffmeyer, P., Fritschy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+subtalar+sprain.+A+roentgenographic+study.">The subtalar sprain. A roentgenographic study.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (226), 169-173 (1988).</li><li>Mittlmeier, T., Rammelt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+subtalar+joint+instability.">Update on subtalar joint instability.</a> Foot and Ankle Clinics. 23 (3), 397-413 (2018).</li><li>Chang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mouse+and+human+ankles+and+establishment+of+mouse+ankle+osteoarthritis+models+by+surgically-induced+instability.">Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability.</a> Osteoarthritis &amp; Cartilage. 24 (4), 688-697 (2016).</li><li>Naito, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+glucosamine+on+an+experimental+rat+osteoarthritis+model.">Evaluation of the effect of glucosamine on an experimental rat osteoarthritis model.</a> Life Sciences. 86 (13-14), 538-543 (2010).</li><li>Pritzker, K. P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+cartilage+histopathology:+Grading+and+staging.">Osteoarthritis cartilage histopathology: Grading and staging.</a> Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).</li><li>Glasson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+Recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+mouse.">The OARSI histopathology initiative - Recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 18, 17-23 (2010).</li><li>Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ankle+sprain+in+a+mouse+model.">Acute ankle sprain in a mouse model.</a> Medicine &amp; Science in Sports &amp; Exercise. 45 (8), 1623-1628 (2013).</li><li>Wikstrom, E. A., Hubbard-Turner, T., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+ankle+sprain+in+a+mouse+model:+Lifelong+sensorimotor+dysfunction.">Lateral ankle sprain in a mouse model: Lifelong sensorimotor dysfunction.</a> Journal of Athletic Training. 53 (3), 249-254 (2018).</li><li>Bell-Krotoski, J. A., Fess, E. E., Figarola, J. H., Hiltz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+detection+and+Semmes-Weinstein+monofilaments.">Threshold detection and Semmes-Weinstein monofilaments.</a> Journal of Hand Therapy. 8 (2), 155-162 (1995).</li><li>Wieland, H. A., Michaelis, M., Kirschbaum, B. J., Rudolphi, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+-+An+untreatable+disease.">Osteoarthritis - An untreatable disease.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (4), 331-344 (2005).</li></ol>

في هذه الدراسة ، تم بناء نموذجين للفأر لعدم استقرار ASCJ بنجاح عن طريق عبور CL + ATFL أو CL + DL. زاد وقت مرور الفئران عبر عارضة التوازن بشكل ملحوظ في 8 أسابيع و 12 أسبوعا بعد الجراحة ، وهو ما يشبه النتائج التي حصل عليها فريق Hubbard-Turner عن طريق قطع الرباط الجانبي لمفصل الكاحل23,24<sup class="xre...

التواء الكاحل هي واحدة من أكثر الإصابات الرياضية شيوعا في جميع أنحاء العالم. تشير التقديرات إلى أن 10000 شخص يصابون يوميا في الولايات المتحدة1 ، منهم إصابات مرتبطة بالرياضة تمثل 15٪ -45٪2. التكاليف الطبية المرتبطة بعلاج التواء الكاحل في الولايات المتحدة تصل إلى 4.2 مليار دولار سنويا3،4،5. يعد عدم استقرار القدم المزمن مشكلة شائعة بعد التواء الكاحل ويحدث في حوالي 74٪ من التواء الكاحل6 ، بما في ذلك عدم استقرار الكاحل أو تحت الكاحل. ومع ذلك ، نظرا للأعراض والعلامات السريرية المماثلة ، يصعب على الطاقم الطبي التمييز بين ما إذا كان عدم استقرار الكاحل المزمن مصحوبا أيضا بعدم استقرار المفصل تحت الكاحل المزمن في العيادة ، ونتيجة لذلك ، يمكن بسهولة تفويت عدم الاستقرار المزمن تحت الكاحل. لذلك ، قد يكون معدل الإصابة الحقيقي لعدم استقرار المفصل المعقد المزمن في الكاحل (ASCJ) (نوع معين من عدم استقرار القدم المزمن الذي يشمل كلا من عدم استقرار الكاحل المزمن وعدم الاستقرار المزمن تحت الكاحل) أعلى منالمبلغ عنه 7،8،9. إذا تركت دون علاج ، يمكن أن يسبب عدم استقرار المفصل المعقد المزمن في الكاحل تحت الكاحل التواء متكرر في الكاحل ، مما يؤدي إلى حلقة مفرغة من التواء الكاحل وعدم الاستقرار المزمن المعقد الكاحل تحت الكاحل. يمكن أن يؤدي عدم الاستقرار المزمن المعقد في الكاحل والكاحل على المدى الطويل إلى تنكس ASCJ وهشاشة العظام بعد الصدمة ، والتي يمكن أن تؤثر على المفاصل المجاورة في الحالات الشديدة10. بالنسبة لهذه الأمراض ، فإن العلاج السريري الحالي محافظ بشكل أساسي ، بالإضافة إلى طرق العلاج الجراحي مثل إصلاح الأربطة وإعادة بناء الأربطة11,12.
ASCJ هو الهيكل الأساسي للقدم ويحافظ على توازن الجسم أثناء الحركة13. تم إجراء بحث مكثف حول بنية مفصل الكاحل والمفصل تحت الكاحل بشكل منفصل14،15،16،17. ومع ذلك ، فإن البحث عن مفصل الكاحل تحت الكاحل بأكمله أمر نادر الحدوث. يرتبط حوالي ربع حالات إصابة الكاحل بإصابة المفصل تحت الكاحل18. نظرا لآلية الإصابة المعقدة لعدم استقرار ASCJ ، لا يوجد إجماع على تشخيصها وعلاجها في الإعداد السريري. بالنظر إلى الوضع الحالي لإصابات الكاحل في العيادة ، هناك حاجة إلى طريقة أكثر علمية لدراسة الكاحل والمفصل تحت الكاحل ككل ، وبالتالي توفير فهم جديد لدراسة أمراض القدم.
نظرا لأن التركيب التشريحي للفأر الخلفي على المستوى العضلي الهيكلي يمكن مقارنته بالقدم البشرية 19 ، في العديد من الدراسات ، تم بالفعل تنفيذ نماذج الفئران لأبحاث القدم / الكاحل10,19. نجح Chang et al.19 في تطوير ثلاثة نماذج مختلفة من الفئران من هشاشة العظام في الكاحل. مستوحاة من التأسيس الناجح لعدم استقرار الكاحل في نموذج الفأر ، أنشأنا نموذجا للفأر لعدم الاستقرار المعقد في الكاحل تحت الكاحل ، وافترضنا أن قطع الأربطة الجزئية في مؤخرة القدم للفأر سيؤدي إلى عدم الاستقرار الميكانيكي ل ASCJ ، مما قد يؤدي إلى هشاشة العظام بعد الصدمة (PTOA) من ASCJ. يمكن استخدام النموذج الحيواني لعدم الاستقرار ASCJ لعلاج كل من عدم استقرار الكاحل وعدم الاستقرار تحت الكاحل ، وهو أكثر انسجاما مع الوضع السريري الفعلي من نموذج عدم استقرار الكاحل البسيط المستخدم حاليا7،8،9،19. لاختبار هذه الفرضية ، تم تصميم نموذجين للفأر لعدم الاستقرار الناجم عن استئصال الرباط في ASCJ. تم استخدام نتائج الوظيفة الحسية الحركية - اختبار شعاع التوازن ، وتحليل البصمة ، وتقييم nociception الحراري - لتقييم جدوى النموذج ، وتم استخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (CT) والتلوين النسيجي لتقييم تلف وانحطاط الغضروف المفصلي للفأر. إن الإنشاء الناجح لنموذج الفئران لعدم استقرار ASCJ لا يوفر فهما جديدا لدراسة أمراض القدم فحسب ، بل يوفر أيضا مرجعا قيما للبحث السريري حول الآليات المرتبطة بالإصابة ، ويوفر خيارات علاجية أفضل لالتواء الكاحل ، ومفيد لمزيد من الدراسات حول المرض.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Surgical Nylon Suture</td>
			<td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd.</td>
			<td>191104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acidic ethanol differentiation solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive slides</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqueous acetic acid (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black cube cassette</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 15ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0476</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 50ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAn software</td>
			<td>Blue scientific</td>
			<td></td>
			<td>micro-CT analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dataview software</td>
			<td>AEMC instruments</td>
			<td></td>
			<td>commercial data analysing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na)</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>E8490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric incubator</td>
			<td>Suzhou Huamei Equipment Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding paraffin</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>39001006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin staining solution (alcohol soluble, 1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R30117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>F7275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gait paper</td>
			<td>Baoding Huarong Paper Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 8.0</td>
			<td>Graphpad software</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor cotton balls</td>
			<td>Qingdao Hainuo Bioengineering Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica 818 blade</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-CT</td>
			<td>Skyscan, Belgium</td>
			<td>SkyScan 1176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulation microscope</td>
			<td>Suzhou Omet Optoelectronics Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mimics software</td>
			<td>Materialise&#160;</td>
			<td></td>
			<td>3D medical image processing software&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified Harris Hematoxylin Stain</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-mouse type II collagen</td>
			<td>American Abcam Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-butanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral formalin fixative (10%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral resin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nrecon reconstrcution software&#160;</td>
			<td>Micro Photonics Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oaks hair clipper</td>
			<td>Oaks Group Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Embedding Machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PH meter</td>
			<td>Shanghai Leitz Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>American Biosharp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological saline (for mammals, sterile)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R22172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O-staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>HT90432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%)</td>
			<td>Shanghai Baxter Medical Drug Co., Ltd.</td>
			<td>309107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker</td>
			<td>Haimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.</td>
			<td>2008779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 23</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tablet machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>Ugo Basile Biological Research Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axiovert, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-shaped plastic channel</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary eye ointment</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YLS-10B Wheel Fatigue Tester</td>
			<td>Jinan Yiyan Technology Development Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability

ربما تكون التواءات الكاحل أكثر الإصابات الرياضية شيوعا في الحياة اليومية ، وغالبا ما تؤدي إلى عدم استقرار المفصل المعقد تحت الكاحل (ASCJ) ، ويمكن أن تؤدي في النهاية إلى هشاشة العظام بعد الصدمة (PTOA) على المدى الطويل. ومع ذلك ، نظرا لتعقيد آلية الإصابة والمظاهر السريرية ، مثل الكدمات أو الورم الدموي أو الرقة في القدم الجانبية ، لا يوجد إجماع سريري على تشخيص وعلاج عدم استقرار ASCJ. نظرا لأن البنية العضلية الهيكلية لعظام وأربطة مؤخرة الفأر يمكن مقارنتها بتلك الموجودة في البشر ، فقد تم إنشاء نموذج حيواني لعدم استقرار ASCJ في الفئران عن طريق قطع الأربطة حول ASCJ. تم التحقق من صحة النموذج بشكل جيد من خلال سلسلة من الاختبارات السلوكية والتحليلات النسيجية ، بما في ذلك اختبار شعاع التوازن ، وتحليل البصمة (تقييم مستوى التمرين والقدرة على التوازن في الفئران) ، وتقييم استشعار الألم الحراري (تقييم الوظيفة الحسية للقدم في الفئران) ، والتصوير المقطعي المحوسب الدقيق (CT) ، وتلطيخ مقطع الغضروف المفصلي (تقييم تلف الغضروف المفصلي وانحطاطه في الفئران). سيوفر الإنشاء الناجح لنموذج فأر لعدم استقرار ASCJ مرجعا قيما للبحث السريري حول آلية الإصابة ويؤدي إلى خيارات علاج أفضل لالتواء الكاحل.

تم إجراء التحليل الإحصائي لبيانات الارتباط باستخدام أدوات التحليل الإحصائي عبر الإنترنت. واستخدمت البيانات التي استوفت اختباري التوزيع الطبيعي وتجانس التباين لإجراء مزيد من التحليل الإحصائي عن طريق تحليل التباين في اتجاه واحد. إذا لم تستوف البيانات الاختبارين ، تم استخدام اختبار Kruskal-Wa...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability

المفصل المعقد الكاحل تحت الكاحل (ASCJ) هو جوهر القدم ويلعب دورا رئيسيا في التحكم في التوازن في الأنشطة اليومية. غالبا ما تؤدي الإصابات الرياضية إلى عدم الاستقرار في هذا المفصل. هنا ، نصف نموذج فأر لعدم الاستقرار الناجم عن قطع الرباط في ASCJ.

نموذج فأر لعدم استقرار المفصل المعقد في الكاحل تحت الكاحل

Ankle sprains are perhaps the most common sports injuries in daily life, often resulting in instability of the ankle-subtalar complex joint (ASCJ), and ...

إن الإنشاء الناجح لنموذج الفأر غير القادر ASCJ يمتد إلى نموذج حيواني بسيط لعدم قدرة الكاحل ، ويوفر مفاهيم جديدة لدراسة أمراض القدم السريرية. لقد أنشأنا نموذجا حيوانيا أكثر انسجاما مع الوضع السريري الفعلي ، والذي يمكن استخدامه لمزيد من البحث حول تشخيص وعلاج أمراض القدم. قبل أسبوع واحد من التجربة ، قم بإخضاع الفئران لموازنة شعاع وتدريب المشي ، والانتقال من أحد طرفي عارضة التوازن أو الأنبوب على شكل حرف U إلى الطرف الآخر ، دون توقف.بعد تخدير وإزالة الشعر على مفصل الكاحل للأطراف الخلفية اليمنى للفأر ، قم بتطهير الجلد المكشوف بمسحة اليود. انقل الفأر إلى غرفة عمليات المجهرية باستخدام وسادة جراحية معقمة. بالنسبة لمجموعات الرباط العنقي العرضي والرباط الأمامي ، قم بعمل شق طولي مائل لأسفل بطول سبعة ملليمترات مع مشرط على الجلد فوق مفصل الكاحل الأيمن.والتحقيق مع ملقط مستقيم المجهرية في الجزء الأمامي من مفصل الكاحل. ضمان تعرض الرباط الأمامي للفكي عند الحد السفلي لجسم الكاحل والشظية ، قم بقصه برفق بمشرط. افصل بين الأوتار الشظوية الطويلة والقصيرة ، والأوتار الطويلة الباسطة.فضح الرباط العنقي ، وقطعه بمشرط. بالنسبة للرباط العنقي المستعرض بالإضافة إلى مجموعة الرباط الدالي ، قم بعمل شق عمودي بطول ثمانية ملليمترات على الجلد الإنسي لمفصل الكاحل الأيمن ، وافصل DL بصراحة عن المليولوس الإنسي لقطعه. ثم قطع الرباط العنقي كما هو موضح سابقا.بالنسبة للمجموعة الوهمية ، قم بإجراء جراحة وهمية على مفصل الكاحل الأيمن. بعد شطف الشق بمحلول ملحي طبيعي معقم ، قم بخياطته بخيط نايلون جراحي 5-0 ، متبوعا بتطهير الشق المخيط بمسحة اليود. بمجرد انخفاض تورم مفصل الزاوية بعد أسبوعين من الجراحة ، قم بتمرين الفئران في آلة التعب الدوار للفأر لمدة ساعة واحدة كل يوم.لاختبار عارضة التوازن، قم بتثبيت شعاع خشبي دائري يميل عند 15 درجة في أحد طرفيه باستخدام مشبك ترايبود للتصوير الفوتوغرافي، وضع الطرف الآخر على سطح عمل متصل بشريط كاسيت مغلق. قم بإجراء تدريب شعاع التوازن قبل أسبوع واحد من الجراحة للتأكد من أن الفئران تتحرك بسلاسة من أحد طرفي الحزمة إلى الطرف الآخر. ضع في اعتبارك أن الفأر قد اجتاز الاختبار عندما يمر عبر الحزمة مرتين في 60 ثانية دون توقف.بعد كل تجربة ، قم برش عارضة التوازن بنسبة 75٪ كحول لتقديم الرائحة المتبقية للفأر السابق من التأثير على الماوس التالي. قم بإجراء اختبار عارضة التوازن وسجل متوسط الوقت لكل ماوس يمر بعارضة التوازن مرتين على التوالي. وعدد المرات التي تنزلق فيها القدم الخلفية اليمنى من الحزمة ، كمتغيرات تابعة.لتحليل البصمة ، ضع قناة بلاستيكية على شكل حرف U على الطاولة التجريبية ، وقم بتوصيل أحد طرفي القناة البلاستيكية بشريط كاسيت مغلق. ضع ورقة صبغية عادية مسطحة في القناة. ثم أمسك الماوس بكلتا يديه ، وقم بطلاء القدمين الأمامية والخلفية بالتساوي باستخدام صبغة حمراء وخضراء غير سامة.الآن ، ضع الماوس المطلي في أحد طرفي القناة ، واتركه ينتقل إلى الطرف الآخر من الكاسيت. خذ الورق المصطبغ مع آثار الأقدام ، وقم بتمييزه ، واتركه يجف في مكان جيد التهوية ومظلل. رش القناة البلاستيكية على شكل حرف U بنسبة 75٪ كحول بعد مرور كل فأر ، لمنع الرائحة المتبقية للفأر السابق من التأثير على الماوس التالي.حدد ثلاث آثار ماوس واضحة متتالية على كل ورقة. باستخدام المسطرة ، قم بقياس طول خطوة بصمة القدم اليمنى للماوس ، مع عرض الخطوة بين آثار الأقدام اليمنى واليسرى. استخدم ملاقط ومقص مجهري لإزالة الأنسجة الرخوة الزائدة حول عينات الكاحل.وبعد ذلك ، ضع العينات في أنبوب طرد مركزي يحتوي على محلول إزالة الكلس EDTA بنسبة 10٪ ، وقم بتمييز المجموعات المختلفة. بعد ذلك ، ضع أنبوب الطرد المركزي على طاولة اهتزاز لإزالة الكلس. قم بتغيير محلول إزالة الكلس مرة واحدة يوميا ، وحدد إزالة الكلس من العينات.بعد شهر واحد من إزالة الكلس ، قم بتجفيف العينات بالكحول المتدرج ، ثم استخدم N-butanol لمدة ثماني ساعات لأغراض التطهير. أخيرا ، اغمر العينات التي تم تطهيرها في البارافين في وضع إكليلي للتضمين. قبل التقسيم ، انقل العينات من الثلاجة ذات الأربع درجات مئوية إلى مجمد بدرجة حرارة 20 درجة مئوية تحت الصفر لمدة 10 دقائق تقريبا ، لتسهيل قطع الطائرات بالكامل.إصلاح العينات على microtome وتقسيمها بسمك ستة ميكرومتر. في الوقت نفسه ، استخدم المجهر لمراقبة ما إذا كانت العينات قد تم قطعها بالمستوى المتوقع لسهولة اختراق إبرة حقنة في الأنسجة العظمية. بعد قطع قسمين أو ثلاثة أقسام كاملة من البارافين على التوالي ، قم بنقلها إلى الجهاز اللوحي ، على 40 درجة مئوية ، للتوسع الكامل.ثم قم بإزالة أقسام البارافين بشريحة زجاجية. أخيرا ، قم بتمييز الشرائح بالمجموعات والأرقام. لمراقبة هيكل مفصل ASCJ السليم تحت المجهر.ضع الأقسام في حاضنة على 60 درجة مئوية لمدة 40 إلى 50 دقيقة. ثم قم بإزالة الشمع من المقاطع باستخدام الزيلين ثلاث مرات ، كما هو موضح في المخطوطة. ضع المقاطع منزوعة الشمع في 100٪ إيثانول مرتين لمدة ثلاث دقائق ، تليها 90٪ و 80٪ إيثانول لمدة خمس دقائق لكل منهما.ثم اغسل الأقسام بالماء المقطر المزدوج لمدة خمس دقائق. بعد النقع في الهيماتوكسيلين لمدة دقيقة واحدة ، اغسل الأقسام بالماء المقطر المزدوج حتى تصبح عديمة اللون. انقع الأقسام في محلول تمايز الإيثانول الحمضي بنسبة 1٪ لمدة 30 ثانية ، واغسلها بالماء المقطر المزدوج.بمجرد تلطيخ الأقسام بمحلول الأمونيا بنسبة 1٪ ، وغسلها بالماء المقطر المزدوج ، قم بتلطيخ العينات بمحلول تلطيخ eosin لمدة دقيقة واحدة. ثم ضعهم في 95٪ و 100٪ إيثانول على التوالي لمدة دقيقة واحدة لكل منهما. أخيرا ، عالج الأقسام بالزيلين أربعة لمدة دقيقة واحدة.جفف الأقسام بالهواء وقم بتغطيتها بزلة غطاء ، بعد لصق قطرة من الراتنج المحايد على العينات الموجودة على الشرائح. ثم التقط صورا باستخدام مجهر مضان مستقيم في مجال ساطع عند خمسة و 20X. انقع الهيماتوكسيلين والأقسام الملطخة بالأمونيا في 0.05٪ أخضر سريع لمدة دقيقتين.يليه نقع الأقسام في محلول حمض الخليك 1٪ لمدة 30 ثانية ، و 0.1٪ سافرانين لمدة خمس دقائق. ثم قم بمعالجة الشرائح بالإيثانول والزيلين كما هو موضح سابقا. التقط صورا باستخدام مجهر مضان عمودي في مجال ساطع بمعدل 5X و 20X.بعد ثلاثة أيام وثمانية أسابيع و 12 أسبوعا من الجراحة ، استغرقت مجموعات الأربطة المقطوعة وقتا أطول بكثير للمرور عبر عارضة التوازن مقارنة بالمجموعة الوهمية. قبل الجراحة ، كان طول خطوة القدم الخلفية اليمنى قابلا للمقارنة بين مجموعات الفئران الثلاث. ومع ذلك ، بعد 12 أسبوعا من الجراحة ، كان طول الخطوة أقصر في مجموعة قطع الأربطة منه في المجموعة الوهمية.قبل الجراحة ، يكون وقت استجابة الإحساس الحراري لأقدام الفئران أثناء النشاط مشابها بين المجموعات الثلاث من الفئران. بعد الجراحة ، أظهرت الفئران في مجموعة قطع الأربطة أوقات استجابة أطول مقارنة بالمجموعة الوهمية. أظهر ASCJ للقدم الخلفية اليمنى في مجموعات الأربطة المقطوعة أسطح خشنة ، وتراكم العظم ، والتغيرات التنكسية.وجزء حجم عظم أعلى بكثير من المجموعة الوهمية. أظهرت طبقة الغضروف من ASCJ في مجموعة قطع الرباط انقطاع ، وانخفاض عدد الخلايا الغضروفية. أيضا ، كانت الدرجات الدولية لجمعية مالكين وهشاشة العظام الدولية للفئران المصابة ببتر الأربطة أعلى بكثير من المجموعة الوهمية.كان الكولاجين من النوع الثاني في طبقة الغضروف المفصلي ASCJ للمجموعة الوهمية للقدم الخلفية اليمنى أكثر اتساقا وأعلى من مجموعتي الفئران ذات الأربطة المقطوعة. يمكن استخدام هذه الدراسة لتشخيص وعلاج عدم استقرار الكاحل ، وتوفير مرجع تجريبي للعلاجات السريرية لهذا المرض.

Research

JoVE Journal

Biology

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

سرطان بورياليس فموي معدي تشريح الجهاز العصبي

The stomatogastric ganglion (STG) is an excellent model for studying cellular and network interactions because it contains a relatively small number of ...

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

إجمالي تشريح المعدة من جراد البحر ، Homarus Americanus</em

The stomach of the American lobster (Homarus americanus) is located in the cephalothorax, between the rostrum and the cervical groove. The anterior end of ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

في الجسم الحي التصوير والعلاجات العلاجية في الفأر نموذج مثلي من سرطان المبيض

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

دراسة السن التي تعتمد على عدم الاستقرار الجيني باستخدام س. خميرة يفسبن الزمني النموذجي

Studies using the Saccharomyces cerevisiae aging model have uncovered life span regulatory pathways that are partially conserved in higher eukaryotes1-2. ...

Sorting of Streptomyces Cell Pellets Using a Complex Object Parametric Analyzer and Sorter

Sorting of Streptomyces Cell Pellets Using a Complex Object Parametric Analyzer and Sorter

فرز<em&gt; المتسلسلة</em&gt; الكريات الخلية باستخدام كائن مجمع حدودي محلل وفارز

Streptomycetes are filamentous soil bacteria that are used in industry for the production of enzymes and antibiotics. When grown in bioreactors, these ...

Purifying the Impure: Sequencing Metagenomes and Metatranscriptomes from Complex Animal-associated Samples

تنقية انجاس: تسلسل Metagenomes وMetatranscriptomes من مجمع عينات المرتبط الحيوانية

The accessibility of high-throughput sequencing has revolutionized many fields of biology. In order to better understand host-associated viral and ...

High Yield Expression of Recombinant Human Proteins with the Transient Transfection of HEK293 Cells in Suspension

ارتفاع العائد التعبير عن البروتينات المؤتلف الإنسان مع عابر ترنسفكأيشن من خلايا HEK293 في تعليق

The art of producing recombinant proteins with complex post-translational modifications represents a major challenge for studies of structure and ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

حقن الخلية الداخلية عبر كتلة من الخلايا الجذعية الجنينية يؤدي إلى ارتفاع في أسعار تشيميريسم

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

نموذج الفأر من انسداد الأمعاء الجزئي

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...