Name: a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability
Uploaded: 2022-10-28T14:40:00
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Questo studio è stato sostenuto dal programma di borse di studio del governo provinciale di Jiangsu e dal programma accademico prioritario di sviluppo degli istituti di istruzione superiore di Jiangsu (PAPD).

Tutti gli studi sugli animali sono stati condotti in conformità con le Linee guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio e sono stati approvati dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali della Soochow University.
1. Procedure chirurgiche
<ol><li>Dividere 21 topi maschi C57BL/6 di 6 settimane in tre gruppi: il gruppo del legamento cervicale trasverso e del legamento peroneo-astragalico anteriore, il gruppo del legamento cervicale trasverso e del ...

<ol>
	<li>Waterman, B. R., Belmont, P. J., Cameron, K. L., Deberardino, T. M., Owens, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprain+at+the+United+States+Military+Academy.">Epidemiology of ankle sprain at the United States Military Academy.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 797-803 (2010).</li><li>Fong, D. T., Chan, Y. Y., Mok, K. M., Yung, P. S., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+acute+ankle+ligamentous+sprain+injury+in+sports.">Understanding acute ankle ligamentous sprain injury in sports.</a> Sports Medicine Arthroscopy Rehabilitation Therapy &amp; Technology. 1 (1), 14 (2009).</li><li>Herzog, M. M., Kerr, Z. Y., Marshall, S. W., Wikstrom, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprains+and+chronic+ankle+instability.">Epidemiology of ankle sprains and chronic ankle instability.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 603-610 (2019).</li><li>Medina McKeon, J. M., Hoch, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ankle-joint+complex:+A+kinesiologic+approach+to+lateral+ankle+sprains.">The ankle-joint complex: A kinesiologic approach to lateral ankle sprains.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 589-602 (2019).</li><li>Jones, M. H., Amendola, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+treatment+of+inversion+ankle+sprains:+immobilization+versus+functional+treatment.">Acute treatment of inversion ankle sprains: immobilization versus functional treatment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 455 (463), 169-172 (2007).</li><li>Anandacoomarasamy, A., Barnsley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+term+outcomes+of+inversion+ankle+injuries.">Long term outcomes of inversion ankle injuries.</a> British Association of Sport and Medicine. 39 (3), 14 (2005).</li><li>Ringleb, S. I., Dhakal, A., Anderson, C. D., Bawab, S., Paranjape, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+lateral+ligament+sectioning+on+the+stability+of+the+ankle+and+subtalar+joint.">Effects of lateral ligament sectioning on the stability of the ankle and subtalar joint.</a> Journal of Orthopaedic Research. 29 (10), 1459-1464 (2011).</li><li>Mittlmeier, T., Wichelhaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+joint+instability.">Subtalar joint instability.</a> European Journal of Trauma and Emergency Surgery. 41 (6), 623-629 (2015).</li><li>Barg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+instability:+Diagnosis+and+treatment.">Subtalar instability: Diagnosis and treatment.</a> Foot &amp; Ankle International. 33 (02), 151-160 (2012).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+ankle-subtalar+joint+complex+instability+induced+post-traumatic+osteoarthritis.">A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 16 (1), 541 (2021).</li><li>Lui, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+arthroscopic+Brostrom+procedure+with+bone+tunnels.">Modified arthroscopic Brostrom procedure with bone tunnels.</a> Arthroscopy Techniques. 5 (4), 775-780 (2016).</li><li>Wang, W., Xu, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allograft+tendon+reconstruction+of+the+anterior+talofibular+ligament+and+calcaneofibular+Ligament+in+the+treatment+of+chronic+ankle+instability.">Allograft tendon reconstruction of the anterior talofibular ligament and calcaneofibular Ligament in the treatment of chronic ankle instability.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 18 (1), 150 (2017).</li><li>Yang, N., Waddington, G., Adams, R., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+proprioception+of+the+ankle+complex+across+the+lifespan.">Age-related changes in proprioception of the ankle complex across the lifespan.</a> Journal of Sport and Health Science. 8 (6), 548-554 (2019).</li><li>Michels, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+consensus+in+the+approach+to+patients+with+chronic+lateral+ankle+instability:+Ask+the+expert.">Searching for consensus in the approach to patients with chronic lateral ankle instability: Ask the expert.</a> Knee Surgery Sports Traumatology Arthroscopy. 26 (7), 2095-2102 (2017).</li><li>Kamada, K., Watanabe, S., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+subtalar+instability+due+to+insufficiency+of+the+calcaneofibular+ligament:+A+case+report.">Chronic subtalar instability due to insufficiency of the calcaneofibular ligament: A case report.</a> Foot &amp; Ankle International. 23 (12), 1135-1137 (2002).</li><li>Kato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diagnosis+and+treatment+of+instability+of+the+subtalar+joint.">The diagnosis and treatment of instability of the subtalar joint.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 77 (3), 400-406 (1995).</li><li>Meyer, J. M., Garcia, J., Hoffmeyer, P., Fritschy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+subtalar+sprain.+A+roentgenographic+study.">The subtalar sprain. A roentgenographic study.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (226), 169-173 (1988).</li><li>Mittlmeier, T., Rammelt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+subtalar+joint+instability.">Update on subtalar joint instability.</a> Foot and Ankle Clinics. 23 (3), 397-413 (2018).</li><li>Chang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mouse+and+human+ankles+and+establishment+of+mouse+ankle+osteoarthritis+models+by+surgically-induced+instability.">Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability.</a> Osteoarthritis &amp; Cartilage. 24 (4), 688-697 (2016).</li><li>Naito, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+glucosamine+on+an+experimental+rat+osteoarthritis+model.">Evaluation of the effect of glucosamine on an experimental rat osteoarthritis model.</a> Life Sciences. 86 (13-14), 538-543 (2010).</li><li>Pritzker, K. P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+cartilage+histopathology:+Grading+and+staging.">Osteoarthritis cartilage histopathology: Grading and staging.</a> Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).</li><li>Glasson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+Recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+mouse.">The OARSI histopathology initiative - Recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 18, 17-23 (2010).</li><li>Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ankle+sprain+in+a+mouse+model.">Acute ankle sprain in a mouse model.</a> Medicine &amp; Science in Sports &amp; Exercise. 45 (8), 1623-1628 (2013).</li><li>Wikstrom, E. A., Hubbard-Turner, T., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+ankle+sprain+in+a+mouse+model:+Lifelong+sensorimotor+dysfunction.">Lateral ankle sprain in a mouse model: Lifelong sensorimotor dysfunction.</a> Journal of Athletic Training. 53 (3), 249-254 (2018).</li><li>Bell-Krotoski, J. A., Fess, E. E., Figarola, J. H., Hiltz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+detection+and+Semmes-Weinstein+monofilaments.">Threshold detection and Semmes-Weinstein monofilaments.</a> Journal of Hand Therapy. 8 (2), 155-162 (1995).</li><li>Wieland, H. A., Michaelis, M., Kirschbaum, B. J., Rudolphi, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+-+An+untreatable+disease.">Osteoarthritis - An untreatable disease.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (4), 331-344 (2005).</li></ol>

In questo studio, due modelli murini di instabilità ASCJ sono stati costruiti con successo sezionando CL + ATFL o CL + DL. Il tempo impiegato dai topi per passare attraverso il fascio di equilibrio è aumentato significativamente a 8 settimane e 12 settimane dopo l'intervento chirurgico, il che è simile ai risultati ottenuti dal team Hubbard-Turner tagliando il legamento laterale dell'articolazione della caviglia23,24. Nel test di scorrimento del piede destro, ...

Le distorsioni della caviglia sono uno degli infortuni sportivi più comuni in tutto il mondo. Si stima che 10.000 persone si infortunano ogni giorno negli Stati Uniti1, di cui gli infortuni legati allo sport rappresentano il 15%-45%2. I costi medici associati al trattamento delle distorsioni della caviglia negli Stati Uniti ammontano a 4,2 miliardi di dollari all'anno 3,4,5. L'instabilità cronica del piede è un problema comune dopo le distorsioni della caviglia e si verifica in circa il 74% delle distorsioni della caviglia6, compresa l'instabilità della caviglia o sottoastragalica. Tuttavia, a causa dei sintomi e dei segni clinici simili, è difficile per il personale medico distinguere se l'instabilità cronica della caviglia è accompagnata anche da un'instabilità cronica dell'articolazione sottoastragalica in clinica e, di conseguenza, l'instabilità cronica del sottoastragalo può essere facilmente ignorata. Pertanto, la vera incidenza dell'instabilità cronica dell'articolazione complessa caviglia-sottoastragalica (ASCJ) (un tipo specifico di instabilità cronica del piede che include sia l'instabilità cronica della caviglia che l'instabilità cronica sottoastragalica) può essere superiore a quella riportata 7,8,9. Se non trattata, l'instabilità cronica dell'articolazione del complesso caviglia-sottoastragalico può causare ripetute distorsioni della caviglia, portando a un circolo vizioso di distorsioni della caviglia e instabilità cronica del complesso caviglia-sottoastragalico. L'instabilità cronica a lungo termine del complesso caviglia-sottoastragalico può portare alla degenerazione dell'ASCJ e all'artrosi post-traumatica, che può interessare le articolazioni adiacenti nei casi più gravi10. Per queste malattie, l'attuale trattamento clinico è principalmente conservativo, oltre ai metodi di trattamento chirurgico come la riparazione dei legamenti e la ricostruzione dei legamenti11,12.
L'ASCJ è la struttura centrale del piede e mantiene l'equilibrio del corpo durante il movimento13. Sono state condotte ricerche approfondite sulla struttura dell'articolazione della caviglia e dell'articolazione sottoastragalica separatamente14,15,16,17. Tuttavia, la ricerca sull'intera articolazione caviglia-sottoastragalica è rara. Circa un quarto dei casi di lesione alla caviglia è associato a lesione dell'articolazione sottoastragalica18. A causa del complesso meccanismo di lesione dell'instabilità dell'ASCJ, non c'è consenso sulla diagnosi e sul trattamento in ambito clinico. Considerando l'attuale situazione delle lesioni alla caviglia in clinica, è necessario un metodo più scientifico per studiare la caviglia e l'articolazione sottoastragalica nel suo complesso, fornendo così una nuova comprensione per lo studio delle malattie del piede.
Poiché la struttura anatomica del retropiede del topo a livello muscolo-scheletrico è paragonabile a quella del piede umano 19, in diversi studi sono già stati implementati modelli murini per la ricerca piede/caviglia10,19. Chang et al.19 hanno sviluppato con successo tre diversi modelli murini di osteoartrosi della caviglia. Ispirati dall'instaurazione dell'instabilità della caviglia nel modello murino, abbiamo stabilito un modello murino per l'instabilità del complesso caviglia-sottoastragalico, ipotizzando che la transezione dei legamenti parziali nel retropiede del topo avrebbe provocato un'instabilità meccanica dell'ASCJ, che avrebbe portato all'osteoartrite post-traumatica (PTOA) dell'ASCJ. Il modello animale di instabilità ASCJ potrebbe essere utilizzato per il trattamento sia dell'instabilità della caviglia che dell'instabilità sottoastragalica, che è più in linea con la situazione clinica reale rispetto al modello di instabilità della caviglia semplice 7,8,9,19 attualmente utilizzato. Per testare questa ipotesi, sono stati progettati due modelli murini di instabilità indotta da transezione legamentosa dell'ASCJ. I risultati per la funzione senso-motoria - il test del fascio di equilibrio, l'analisi dell'impronta e la valutazione della nocicezione termica - sono stati utilizzati per valutare la fattibilità del modello, mentre la micro-tomografia computerizzata (TC) e la colorazione istologica sono state utilizzate per valutare il danno e la degenerazione della cartilagine articolare del topo. Il successo della creazione di un modello murino di instabilità ASCJ non solo fornisce una nuova comprensione per lo studio delle malattie del piede, ma fornisce anche un prezioso riferimento per la ricerca clinica sui meccanismi correlati alla lesione, fornisce migliori opzioni di trattamento per le distorsioni della caviglia ed è utile per ulteriori studi sulla malattia.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Surgical Nylon Suture</td>
			<td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd.</td>
			<td>191104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acidic ethanol differentiation solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive slides</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqueous acetic acid (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black cube cassette</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 15ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0476</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 50ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAn software</td>
			<td>Blue scientific</td>
			<td></td>
			<td>micro-CT analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dataview software</td>
			<td>AEMC instruments</td>
			<td></td>
			<td>commercial data analysing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na)</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>E8490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric incubator</td>
			<td>Suzhou Huamei Equipment Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding paraffin</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>39001006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin staining solution (alcohol soluble, 1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R30117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>F7275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gait paper</td>
			<td>Baoding Huarong Paper Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 8.0</td>
			<td>Graphpad software</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor cotton balls</td>
			<td>Qingdao Hainuo Bioengineering Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica 818 blade</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-CT</td>
			<td>Skyscan, Belgium</td>
			<td>SkyScan 1176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulation microscope</td>
			<td>Suzhou Omet Optoelectronics Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mimics software</td>
			<td>Materialise&#160;</td>
			<td></td>
			<td>3D medical image processing software&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified Harris Hematoxylin Stain</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-mouse type II collagen</td>
			<td>American Abcam Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-butanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral formalin fixative (10%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral resin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nrecon reconstrcution software&#160;</td>
			<td>Micro Photonics Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oaks hair clipper</td>
			<td>Oaks Group Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Embedding Machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PH meter</td>
			<td>Shanghai Leitz Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>American Biosharp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological saline (for mammals, sterile)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R22172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O-staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>HT90432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%)</td>
			<td>Shanghai Baxter Medical Drug Co., Ltd.</td>
			<td>309107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker</td>
			<td>Haimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.</td>
			<td>2008779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 23</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tablet machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>Ugo Basile Biological Research Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axiovert, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-shaped plastic channel</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary eye ointment</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YLS-10B Wheel Fatigue Tester</td>
			<td>Jinan Yiyan Technology Development Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability

Le distorsioni della caviglia sono forse gli infortuni sportivi più comuni nella vita quotidiana, spesso con conseguente instabilità dell'articolazione del complesso caviglia-sottoastragalico (ASCJ) e possono eventualmente portare all'artrosi post-traumatica (PTOA) a lungo termine. Tuttavia, a causa della complessità del meccanismo della lesione e delle manifestazioni cliniche, come ecchimosi, ematoma o dolorabilità nel piede laterale, non esiste un consenso clinico sulla diagnosi e sul trattamento dell'instabilità dell'ASCJ. Poiché la struttura muscolo-scheletrica delle ossa e dei legamenti del retropiede del topo è paragonabile a quella degli esseri umani, un modello animale di instabilità dell'ASCJ nei topi è stato stabilito dalla transezione dei legamenti attorno all'ASCJ. Il modello è stato ben convalidato attraverso una serie di test comportamentali e analisi istologiche, tra cui un test del fascio di equilibrio, un'analisi dell'impronta (una valutazione del livello di esercizio e della capacità di equilibrio nei topi), una valutazione della nocicezione termica (una valutazione della funzione sensoriale del piede nei topi), una scansione con tomografia microcomputerizzata (TC) e la colorazione della sezione della cartilagine articolare (una valutazione del danno e della degenerazione della cartilagine articolare nei topi). Il successo della creazione di un modello murino di instabilità ASCJ fornirà un prezioso riferimento per la ricerca clinica sul meccanismo della lesione e si tradurrà in migliori opzioni di trattamento per la distorsione della caviglia.

L'analisi statistica dei dati di correlazione è stata effettuata utilizzando strumenti di analisi statistica online. I dati che hanno soddisfatto i due test di distribuzione normale e omogeneità della varianza sono stati utilizzati per un'ulteriore analisi statistica mediante analisi unidirezionale della varianza. Se i dati non soddisfacevano i due test, per l'analisi statistica è stato utilizzato il test di Kruskal-Wallis. I dati sono espressi come media ± deviazione standard (SD) e p < 0,05 è stato consid...

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A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability

L'articolazione complessa caviglia-sottoastragalica (ASCJ) è il nucleo del piede e svolge un ruolo chiave nel controllo dell'equilibrio nelle attività quotidiane. Gli infortuni sportivi spesso portano all'instabilità di questa articolazione. Qui, descriviamo un modello murino di instabilità indotta dalla transezione legamentosa dell'ASCJ.

Un modello murino di instabilità articolare del complesso caviglia-sottoastragalico

Ankle sprains are perhaps the most common sports injuries in daily life, often resulting in instability of the ankle-subtalar complex joint (ASCJ), and ...

Il successo dell'istituzione del modello murino di incapacità ASCJ estende un semplice modello animale di incapacità della caviglia e fornisce nuovi concetti per lo studio delle malattie cliniche del piede. Abbiamo creato un modello animale più in linea con la situazione clinica reale, che può essere utilizzato per ulteriori ricerche sulla diagnosi e il trattamento delle malattie del piede. Una settimana prima dell'esperimento, sottoponi i topi a un allenamento di equilibrio e andatura, passando da un'estremità all'altra di una trave di equilibrio o di un tubo a forma di U, senza fermarsi.Dopo aver anestetizzato e rimosso i peli sull'articolazione della caviglia degli arti posteriori destri del topo, disinfettare la pelle esposta con un tampone di iodio. Trasferire il topo nella sala operatoria dell'animale di microchirurgia utilizzando un tampone chirurgico sterile. Per i gruppi trasversali del legamento cervicale e del legamento peroneo-astragalico anteriore, praticare un'incisione longitudinale obliqua verso il basso di sette millimetri con un bisturi sulla pelle sopra l'articolazione della caviglia destra.E sonda con microscopiche pinze diritte nella parte anteriore dell'articolazione della caviglia. Assicurandosi l'esposizione del legamento peroneo-astragalico anteriore al bordo inferiore del corpo astragalico e del perone, tagliarlo delicatamente con un bisturi. Separare i tendini peroneali lunghi e corti e i tendini estensori lunghi delle dita.Esporre il legamento cervicale e tagliarlo con un bisturi. Per il gruppo legamento cervicale trasverso più legamento deltoide, praticare un'incisione verticale di otto millimetri sulla pelle mediale dell'articolazione della caviglia destra e separare bruscamente il DL dal malleolo mediale per tagliarlo. Quindi tagliare il legamento cervicale come dimostrato in precedenza.Per il gruppo fittizio, eseguire un intervento chirurgico fittizio sull'articolazione della caviglia destra. Dopo aver lavato l'incisione con soluzione fisiologica normale sterile, suturarla con filo di nylon chirurgico 5-0, seguita dalla disinfezione dell'incisione suturata con un tampone di iodio. Una volta che il gonfiore dell'articolazione angolare si è ridotto a due settimane dall'intervento chirurgico, esercitare i topi nella macchina per la fatica rotante del mouse per un'ora al giorno.Per il test della trave di equilibrio, clamp una trave di legno circolare inclinata di 15 gradi a un'estremità con una clip per treppiede fotografico e posizionare l'altra estremità su una superficie di lavoro collegata a una cassetta chiusa. Eseguire l'allenamento del fascio di equilibrio una settimana prima dell'intervento chirurgico per assicurarsi che i topi si muovano agevolmente da un'estremità all'altra del fascio. Si consideri che un topo ha superato il test quando passa attraverso il raggio due volte in 60 secondi senza fermarsi.Dopo ogni prova, spruzzare il bilanciere con alcol al 75% per presentare l'odore residuo del topo precedente che influisce sul topo successivo. Eseguire il test della trave di bilanciamento e registrare il tempo medio di passaggio di ciascun mouse sulla trave di equilibrio due volte di seguito. E il numero di volte in cui il piede posteriore destro scivola fuori dalla trave, come variabili dipendenti.Per l'analisi dell'impronta, posizionare un canale di plastica a forma di U sul tavolo sperimentale e collegare un'estremità del canale di plastica a una cassetta chiusa. Posiziona una carta pigmentata semplice nel canale. Quindi tieni il mouse con entrambe le mani e dipingi i piedi anteriori e posteriori in modo uniforme con pigmento rosso e verde non tossico.Ora, posiziona il mouse dipinto a un'estremità del canale e lascialo spostare all'altra estremità della cassetta. Prendete la carta pigmentata con le impronte, segnatela e lasciatela asciugare in uno spazio ventilato e ombreggiato. Spruzzare il canale di plastica a forma di U con alcol al 75% dopo che ogni topo è passato, per evitare che l'odore residuo del topo precedente influisca sul topo successivo.Selezionare tre impronte di topo chiare consecutive su ciascun foglio. Usando un righello, misura la lunghezza del passo dell'impronta del piede destro del mouse, con la larghezza del passo tra le impronte sinistra e destra. Usa pinzette e forbici microscopiche per rimuovere i tessuti molli in eccesso intorno ai campioni di caviglia.Quindi, posizionare i campioni in una provetta da centrifuga contenente una soluzione di decalcificazione EDTA al 10% e contrassegnare i diversi gruppi. Quindi, posizionare la provetta da centrifuga su un tavolo vibrante per la decalcificazione. Cambiare la soluzione di decalcificazione una volta al giorno e determinare la decalcificazione dei campioni.Dopo un mese di decalcificazione, disidratare i campioni con alcool a gradiente, quindi utilizzare l'N-butanolo per otto ore a scopo di pulizia. Infine, immergere i campioni eliminati in paraffina in posizione coronale per l'inclusione. Prima del sezionamento, trasferire i campioni dal frigorifero a quattro gradi Celsius a un congelatore a meno 20 gradi Celsius per circa 10 minuti, per facilitare il taglio completo dei piani.Fissare i campioni sul microtomo e sezionarli in uno spessore di sei micrometri. Allo stesso tempo, utilizzare un microscopio per osservare se i campioni sono stati tagliati al livello previsto per una facile penetrazione dell'ago di una siringa nel tessuto osseo. Dopo aver tagliato due o tre sezioni complete di paraffina in fila, trasferirle nella macchina per compresse, impostata a 40 gradi Celsius, per un'espansione completa.Quindi rimuovere le sezioni di paraffina con un vetrino. Infine, contrassegna le diapositive con gruppi e numeri. Osservare al microscopio la struttura intatta dell'articolazione ASCJ.Mettere le sezioni in un'incubatrice a 60 gradi Celsius per 40-50 minuti. Quindi decerare le sezioni con xilene tre volte, come descritto nel manoscritto. Mettere le sezioni decerate in etanolo al 100% due volte per tre minuti, seguite da etanolo al 90% e all'80% per cinque minuti ciascuna.Quindi lavare le sezioni con acqua bidistillata per cinque minuti. Dopo l'ammollo in ematossilina per un minuto, lavare le sezioni con acqua bidistillata fino a quando non diventano incolori. Immergere le sezioni in una soluzione di differenziazione dell'etanolo acido all'1% per 30 secondi e lavarle con acqua bidistillata.Una volta che le sezioni sono state colorate con una soluzione di ammoniaca all'1% e lavate con acqua bidistillata, colorare i campioni con una soluzione colorante di eosina per un minuto. E poi metterli in 95% e 100% di etanolo in successione per un minuto ciascuno. Infine, trattare le sezioni con xilene quattro per un minuto.Asciugare le sezioni all'aria e coprirle con un vetrino coprioggetto, dopo aver incollato una goccia di resina neutra sui campioni sui vetrini. Quindi scatta immagini con un microscopio a fluorescenza verticale in campo chiaro a cinque e 20X. Immergere le sezioni macchiate di ematossilina e ammoniaca in verde rapido allo 0,05% per due minuti.Successivamente immergere le sezioni in una soluzione di acido acetico all'1% per 30 secondi e in safranina allo 0,1% per cinque minuti. Quindi trattare i vetrini con etanolo e xilene come dimostrato in precedenza. Scatta immagini con un microscopio a fluorescenza verticale in campo chiaro a 5X e 20X.Dopo tre giorni, otto settimane e 12 settimane di intervento chirurgico, i gruppi legamentosi recisi hanno impiegato molto più tempo a passare attraverso la trave di equilibrio rispetto al gruppo fittizio. Prima dell'intervento chirurgico, la lunghezza del passo del piede posteriore destro era paragonabile tra i tre gruppi di topi. Tuttavia, 12 settimane dopo l'intervento chirurgico, la lunghezza del passo era più breve nel gruppo con taglio dei legamenti rispetto al gruppo fittizio.Prima dell'intervento chirurgico, il tempo di risposta alla nocicezione termica dei piedi dei topi durante l'attività è simile tra i tre gruppi di topi. Dopo l'intervento chirurgico, i topi nel gruppo con taglio dei legamenti hanno mostrato tempi di risposta più lunghi rispetto al gruppo fittizio. L'ASCJ del piede posteriore destro nei gruppi legamentosi recisi ha mostrato superfici ruvide, accumulo di osteofiti, alterazioni degenerative.E una frazione di volume osseo significativamente più alta rispetto al gruppo fittizio. Lo strato di cartilagine dell'ASCJ nel gruppo di taglio dei legamenti ha mostrato discontinuità e diminuzione del numero di condrociti. Inoltre, i punteggi di Malkin e Osteoarthritis Research Society International dei topi con amputazione dei legamenti erano significativamente più alti rispetto al gruppo fittizio.Il collagene di tipo due nello strato di cartilagine articolare ASCJ del gruppo fittizio del piede posteriore destro era più uniforme e superiore a quello dei due gruppi di topi con legamenti recisi. Questo studio può essere utilizzato per la diagnosi e i trattamenti per l'instabilità della caviglia, e fornire un riferimento sperimentale per i trattamenti clinici di questa malattia.

Research

JoVE Journal

Biology

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