Name: a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability
Uploaded: 2022-10-28T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

Este estudo foi apoiado pelo programa de bolsas de estudo do governo provincial de Jiangsu e pelo Programa Acadêmico Prioritário de Desenvolvimento das Instituições de Ensino Superior de Jiangsu (PAPD).

Todos os estudos em animais foram realizados de acordo com as Diretrizes para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Soochow.
1. Procedimentos cirúrgicos
<ol><li>Divida 21 camundongos machos C57BL/6 com 6 semanas de idade em três grupos: o grupo do ligamento cervical transverso e ligamento talofibular anterior, o grupo do ligamento cervical transverso e do ligamento deltoide e o g...

<ol>
	<li>Waterman, B. R., Belmont, P. J., Cameron, K. L., Deberardino, T. M., Owens, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprain+at+the+United+States+Military+Academy.">Epidemiology of ankle sprain at the United States Military Academy.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 797-803 (2010).</li><li>Fong, D. T., Chan, Y. Y., Mok, K. M., Yung, P. S., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+acute+ankle+ligamentous+sprain+injury+in+sports.">Understanding acute ankle ligamentous sprain injury in sports.</a> Sports Medicine Arthroscopy Rehabilitation Therapy &amp; Technology. 1 (1), 14 (2009).</li><li>Herzog, M. M., Kerr, Z. Y., Marshall, S. W., Wikstrom, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprains+and+chronic+ankle+instability.">Epidemiology of ankle sprains and chronic ankle instability.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 603-610 (2019).</li><li>Medina McKeon, J. M., Hoch, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ankle-joint+complex:+A+kinesiologic+approach+to+lateral+ankle+sprains.">The ankle-joint complex: A kinesiologic approach to lateral ankle sprains.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 589-602 (2019).</li><li>Jones, M. H., Amendola, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+treatment+of+inversion+ankle+sprains:+immobilization+versus+functional+treatment.">Acute treatment of inversion ankle sprains: immobilization versus functional treatment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 455 (463), 169-172 (2007).</li><li>Anandacoomarasamy, A., Barnsley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+term+outcomes+of+inversion+ankle+injuries.">Long term outcomes of inversion ankle injuries.</a> British Association of Sport and Medicine. 39 (3), 14 (2005).</li><li>Ringleb, S. I., Dhakal, A., Anderson, C. D., Bawab, S., Paranjape, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+lateral+ligament+sectioning+on+the+stability+of+the+ankle+and+subtalar+joint.">Effects of lateral ligament sectioning on the stability of the ankle and subtalar joint.</a> Journal of Orthopaedic Research. 29 (10), 1459-1464 (2011).</li><li>Mittlmeier, T., Wichelhaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+joint+instability.">Subtalar joint instability.</a> European Journal of Trauma and Emergency Surgery. 41 (6), 623-629 (2015).</li><li>Barg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+instability:+Diagnosis+and+treatment.">Subtalar instability: Diagnosis and treatment.</a> Foot &amp; Ankle International. 33 (02), 151-160 (2012).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+ankle-subtalar+joint+complex+instability+induced+post-traumatic+osteoarthritis.">A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 16 (1), 541 (2021).</li><li>Lui, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+arthroscopic+Brostrom+procedure+with+bone+tunnels.">Modified arthroscopic Brostrom procedure with bone tunnels.</a> Arthroscopy Techniques. 5 (4), 775-780 (2016).</li><li>Wang, W., Xu, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allograft+tendon+reconstruction+of+the+anterior+talofibular+ligament+and+calcaneofibular+Ligament+in+the+treatment+of+chronic+ankle+instability.">Allograft tendon reconstruction of the anterior talofibular ligament and calcaneofibular Ligament in the treatment of chronic ankle instability.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 18 (1), 150 (2017).</li><li>Yang, N., Waddington, G., Adams, R., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+proprioception+of+the+ankle+complex+across+the+lifespan.">Age-related changes in proprioception of the ankle complex across the lifespan.</a> Journal of Sport and Health Science. 8 (6), 548-554 (2019).</li><li>Michels, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+consensus+in+the+approach+to+patients+with+chronic+lateral+ankle+instability:+Ask+the+expert.">Searching for consensus in the approach to patients with chronic lateral ankle instability: Ask the expert.</a> Knee Surgery Sports Traumatology Arthroscopy. 26 (7), 2095-2102 (2017).</li><li>Kamada, K., Watanabe, S., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+subtalar+instability+due+to+insufficiency+of+the+calcaneofibular+ligament:+A+case+report.">Chronic subtalar instability due to insufficiency of the calcaneofibular ligament: A case report.</a> Foot &amp; Ankle International. 23 (12), 1135-1137 (2002).</li><li>Kato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diagnosis+and+treatment+of+instability+of+the+subtalar+joint.">The diagnosis and treatment of instability of the subtalar joint.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 77 (3), 400-406 (1995).</li><li>Meyer, J. M., Garcia, J., Hoffmeyer, P., Fritschy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+subtalar+sprain.+A+roentgenographic+study.">The subtalar sprain. A roentgenographic study.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (226), 169-173 (1988).</li><li>Mittlmeier, T., Rammelt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+subtalar+joint+instability.">Update on subtalar joint instability.</a> Foot and Ankle Clinics. 23 (3), 397-413 (2018).</li><li>Chang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mouse+and+human+ankles+and+establishment+of+mouse+ankle+osteoarthritis+models+by+surgically-induced+instability.">Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability.</a> Osteoarthritis &amp; Cartilage. 24 (4), 688-697 (2016).</li><li>Naito, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+glucosamine+on+an+experimental+rat+osteoarthritis+model.">Evaluation of the effect of glucosamine on an experimental rat osteoarthritis model.</a> Life Sciences. 86 (13-14), 538-543 (2010).</li><li>Pritzker, K. P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+cartilage+histopathology:+Grading+and+staging.">Osteoarthritis cartilage histopathology: Grading and staging.</a> Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).</li><li>Glasson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+Recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+mouse.">The OARSI histopathology initiative - Recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 18, 17-23 (2010).</li><li>Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ankle+sprain+in+a+mouse+model.">Acute ankle sprain in a mouse model.</a> Medicine &amp; Science in Sports &amp; Exercise. 45 (8), 1623-1628 (2013).</li><li>Wikstrom, E. A., Hubbard-Turner, T., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+ankle+sprain+in+a+mouse+model:+Lifelong+sensorimotor+dysfunction.">Lateral ankle sprain in a mouse model: Lifelong sensorimotor dysfunction.</a> Journal of Athletic Training. 53 (3), 249-254 (2018).</li><li>Bell-Krotoski, J. A., Fess, E. E., Figarola, J. H., Hiltz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+detection+and+Semmes-Weinstein+monofilaments.">Threshold detection and Semmes-Weinstein monofilaments.</a> Journal of Hand Therapy. 8 (2), 155-162 (1995).</li><li>Wieland, H. A., Michaelis, M., Kirschbaum, B. J., Rudolphi, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+-+An+untreatable+disease.">Osteoarthritis - An untreatable disease.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (4), 331-344 (2005).</li></ol>

Neste estudo, dois modelos murinos de instabilidade da JSCA foram construídos com sucesso por transecção CL + ATFL ou CL + DL. O tempo de passagem dos camundongos pelo feixe de equilíbrio aumentou significativamente em 8 semanas e 12 semanas após a cirurgia, o que é semelhante aos resultados obtidos pela equipe de Hubbard-Turner pelo corte do ligamento lateral da articulação do tornozelo23,24. No teste de deslizamento do pé direito, observamos que os tem...

A entorse de tornozelo é uma das lesões esportivas mais comuns em todo o mundo. Estima-se que 10.000 pessoas sejam feridas diariamente nos Estados Unidos1, das quais as lesões relacionadas ao esporte são responsáveis por 15%-45%2. Os custos médicos associados ao tratamento da entorse de tornozelo nos Estados Unidos são de US$ 4,2 bilhões anuais 3,4,5. A instabilidade crônica do pé é um problema comum após entorses de tornozelo e ocorre em aproximadamente 74% das entorses de tornozelo6, incluindo instabilidade do tornozelo ou subtalar. No entanto, devido aos sintomas e sinais clínicos semelhantes, é difícil para a equipe médica distinguir se a instabilidade crônica do tornozelo também é acompanhada por instabilidade articular subtalar crônica na clínica e, como resultado, a instabilidade subtalar crônica pode ser facilmente perdida. Portanto, a verdadeira incidência de instabilidade crônica da articulação tornozelo-subtalar (ASC) (um tipo específico de instabilidade crônica do pé que inclui tanto a instabilidade crônica do tornozelo quanto a instabilidade subtalar crônica) pode ser maior do que a relatada7,8,9. Se não tratada, a instabilidade articular crônica do complexo tornozelo-subtalar pode causar entorses repetidas do tornozelo, levando a um círculo vicioso de entorses de tornozelo e instabilidade crônica do complexo tornozelo-subtalar. A instabilidade crônica prolongada do complexo tornozelo-subtalar pode levar à degeneração da JSCA e osteoartrite pós-traumática, que pode afetar as articulações adjacentes em casos graves10. Para essas doenças, o tratamento clínico atual é principalmente conservador, além de métodos de tratamento cirúrgico como reparo ligamentar e reconstrução ligamentar11,12.
A JSCA é a estrutura central do pé e mantém o equilíbrio do corpo durante o movimento13. Extensas pesquisas têm sido realizadas sobre a estrutura da articulação do tornozelo e da articulação subtalar separadamente14,15,16,17. No entanto, pesquisas sobre toda a articulação tornozelo-subtalar são raras. Cerca de um quarto dos casos de lesão do tornozelo está associado à lesão da articulaçãosubtalar18. Devido ao complexo mecanismo de lesão da instabilidade da JSCA, não há consenso sobre seu diagnóstico e tratamento no cenário clínico. Considerando a situação atual das lesões do tornozelo na clínica, faz-se necessário um método mais científico para estudar o tornozelo e a articulação subtalar como um todo, proporcionando assim um novo entendimento para o estudo das doenças do pé.
Como a estrutura anatômica do retropé de camundongo em nível musculoesquelético é comparável à do pé humano 19, em vários estudos modelos de camundongos para pesquisa de pé/tornozelo já foram implementados10,19. Chang et al.19 desenvolveram com sucesso três modelos diferentes de osteoartrite de tornozelo em camundongos. Inspirados pelo estabelecimento bem-sucedido da instabilidade do tornozelo no modelo de camundongo, estabelecemos um modelo de instabilidade do complexo tornozelo-subtalar, hipotetizando que a transecção dos ligamentos parciais no retropé de camundongo resultaria em instabilidade mecânica da JSCA, o que levaria à osteoartrite pós-traumática (ATPI) da JSCA. O modelo animal de instabilidade da JSCA poderia ser utilizado tanto para o tratamento da instabilidade do tornozelo quanto da instabilidade subtalar, o que está mais de acordo com a situação clínica real do que o modelo de instabilidade simples do tornozelo atualmente utilizado7,8,9,19. Para testar essa hipótese, dois modelos murinos de instabilidade induzida por transecção ligamentar da JSCA foram projetados. Os resultados da função sensório-motora - teste do feixe de equilíbrio, análise das pegadas e avaliação da nocicepção térmica - foram usados para avaliar a viabilidade do modelo, e a microtomografia computadorizada (TC) e a coloração histológica foram usadas para avaliar o dano e a degeneração da cartilagem articular de camundongos. O estabelecimento bem-sucedido de um modelo de instabilidade da JSCA em camundongos não apenas fornece uma nova compreensão para o estudo das doenças do pé, mas também fornece uma referência valiosa para a pesquisa clínica sobre os mecanismos relacionados à lesão, fornece melhores opções de tratamento para entorses de tornozelo e é útil para estudos futuros sobre a doença.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Surgical Nylon Suture</td>
			<td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd.</td>
			<td>191104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acidic ethanol differentiation solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive slides</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqueous acetic acid (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black cube cassette</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 15ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0476</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 50ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAn software</td>
			<td>Blue scientific</td>
			<td></td>
			<td>micro-CT analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dataview software</td>
			<td>AEMC instruments</td>
			<td></td>
			<td>commercial data analysing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na)</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>E8490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric incubator</td>
			<td>Suzhou Huamei Equipment Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding paraffin</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>39001006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin staining solution (alcohol soluble, 1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R30117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>F7275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gait paper</td>
			<td>Baoding Huarong Paper Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 8.0</td>
			<td>Graphpad software</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor cotton balls</td>
			<td>Qingdao Hainuo Bioengineering Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica 818 blade</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-CT</td>
			<td>Skyscan, Belgium</td>
			<td>SkyScan 1176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulation microscope</td>
			<td>Suzhou Omet Optoelectronics Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mimics software</td>
			<td>Materialise&#160;</td>
			<td></td>
			<td>3D medical image processing software&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified Harris Hematoxylin Stain</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-mouse type II collagen</td>
			<td>American Abcam Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-butanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral formalin fixative (10%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral resin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nrecon reconstrcution software&#160;</td>
			<td>Micro Photonics Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oaks hair clipper</td>
			<td>Oaks Group Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Embedding Machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PH meter</td>
			<td>Shanghai Leitz Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>American Biosharp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological saline (for mammals, sterile)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R22172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O-staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>HT90432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%)</td>
			<td>Shanghai Baxter Medical Drug Co., Ltd.</td>
			<td>309107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker</td>
			<td>Haimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.</td>
			<td>2008779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 23</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tablet machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>Ugo Basile Biological Research Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axiovert, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-shaped plastic channel</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary eye ointment</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YLS-10B Wheel Fatigue Tester</td>
			<td>Jinan Yiyan Technology Development Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability

As entorses de tornozelo são talvez as lesões esportivas mais comuns na vida diária, muitas vezes resultando em instabilidade da articulação do complexo tornozelo-subtalar (ASCS), e podem eventualmente levar à osteoartrite pós-traumática (ATP) a longo prazo. No entanto, devido à complexidade do mecanismo de lesão e às manifestações clínicas, como equimose, hematoma ou sensibilidade na lateral do pé, não há consenso clínico sobre o diagnóstico e tratamento da instabilidade da ASJS. Uma vez que a estrutura musculoesquelética dos ossos e ligamentos do retropé de camundongo é comparável à dos seres humanos, um modelo animal de instabilidade da JSCA em camundongos foi estabelecido pela transecção dos ligamentos ao redor da JSCA. O modelo foi bem validado por meio de uma série de testes comportamentais e análises histológicas, incluindo um teste de feixe de equilíbrio, uma análise de pegadas (uma avaliação do nível de exercício e da capacidade de equilíbrio em camundongos), uma avaliação de nocicepção térmica (uma avaliação da função sensorial do pé em camundongos), microtomografia computadorizada (TC) e coloração de corte da cartilagem articular (uma avaliação de dano e degeneração da cartilagem articular em camundongos). O estabelecimento bem-sucedido de um modelo de instabilidade da ASCA em camundongos fornecerá uma referência valiosa para a pesquisa clínica sobre o mecanismo de lesão e resultará em melhores opções de tratamento para entorse de tornozelo.

A análise estatística dos dados de correlação foi realizada por meio de ferramentas de análise estatística online. Os dados que atenderam aos dois testes de distribuição normal e homogeneidade de variância foram utilizados para posterior análise estatística por análise de variância one-way. Caso os dados não atendessem aos dois testes, o teste de Kruskal-Wallis era utilizado para a análise estatística. Os dados estão expressos como média ± desvio padrão (DP), sendo considerado estatisticamente sig...

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A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability

A articulação do complexo tornozelo-subtalar (JSCA) é o núcleo do pé e desempenha um papel fundamental no controle do equilíbrio nas atividades diárias. Lesões esportivas muitas vezes levam à instabilidade nessa articulação. Aqui, descrevemos um modelo murino de instabilidade induzida por transecção ligamentar da JSCA.

Um Modelo de Instabilidade Articular do Complexo Tornozelo-Subtalar em Camundongos

Ankle sprains are perhaps the most common sports injuries in daily life, often resulting in instability of the ankle-subtalar complex joint (ASCJ), and ...

O estabelecimento bem-sucedido do modelo de camundongo com incapacidade da ASCC estende um modelo animal simples de incapacidade do tornozelo e fornece um novo conceito para o estudo das doenças clínicas do pé. Estabelecemos um modelo animal mais condizente com a situação clínica real, que pode ser utilizado para novas pesquisas sobre o diagnóstico e o tratamento das doenças do pé. Uma semana antes do experimento, submeter os camundongos ao treinamento de equilíbrio e marcha, indo de uma extremidade de uma viga de equilíbrio ou tubo em forma de U para a outra, sem parar.Depois de anestesiar e remover os pelos na articulação do tornozelo dos membros posteriores direitos do rato, desinfete a pele exposta com um cotonete de iodo. Transfira o camundongo para a sala de cirurgia do animal de microcirurgia usando uma almofada cirúrgica estéril. Para os grupos do ligamento transverso cervical e do ligamento talofibular anterior, fazer uma incisão longitudinal oblíqua descendente de sete milímetros com bisturi na pele acima da articulação do tornozelo direito.E sonda com pinça reta microscópica na frente da articulação do tornozelo. Garantindo a exposição do ligamento talofibular anterior na borda inferior do corpo do tálus e da fíbula, corte-o suavemente com um bisturi. Separe os tendões fibulares longo e curto e os tendões extensor longo dos dedos.Exponha o ligamento cervical e corte-o com bisturi. Para o grupo ligamento transverso cervical mais ligamento deltoide, faça uma incisão vertical de oito milímetros na pele medial da articulação do tornozelo direito e separe o DL do maléolo medial para cortá-lo. Em seguida, corte o ligamento cervical como demonstrado anteriormente.Para o grupo simulado, realizar cirurgia simulada na articulação do tornozelo direito. Após lavar a incisão com soro fisiológico estéril, suturá-la com fio de náilon cirúrgico 5-0, seguido de desinfecção da incisão suturada com swab de iodo. Uma vez que o inchaço da articulação angular tenha diminuído em duas semanas após a cirurgia, exercite os ratos na máquina de fadiga rotativa do mouse por uma hora todos os dias.Para o teste do feixe de equilíbrio, prenda uma viga circular de madeira inclinada a 15 graus em uma extremidade com um clipe de tripé de fotografia e coloque a outra extremidade em uma superfície de trabalho conectada a um fechado. Realize o treinamento do feixe de equilíbrio uma semana antes da cirurgia para garantir que os camundongos se movam suavemente de uma extremidade da viga para a outra. Considere que um mouse passou no teste quando ele passa pelo feixe duas vezes em 60 segundos sem pausar.Após cada tentativa, borrife o feixe de equilíbrio com álcool a 75% para apresentar o odor residual do rato anterior de afetar o rato seguinte. Realize o teste do feixe de equilíbrio e registre o tempo médio de cada mouse passando o feixe de equilíbrio duas vezes seguidas. E o número de vezes que o retropé direito escorrega da trave, como variáveis dependentes.Para a análise da pegada ecológica, coloque um canal de plástico em forma de U na mesa experimental e conecte uma extremidade do canal de plástico a um fechado. Coloque um papel pigmentado liso no canal. Em seguida, segure o mouse com as duas mãos e pinte os pés dianteiros e traseiros uniformemente com pigmento vermelho e verde atóxico.Agora, coloque o mouse pintado em uma extremidade do canal e permita que ele se mova para a outra extremidade do. Pegue o papel pigmentado com as pegadas, marque-o e deixe secar em um espaço ventilado e sombreado. Borrife o canal de plástico em forma de U com 75% de álcool após cada rato ter passado, para evitar que o odor residual do rato anterior afecte o rato seguinte.Selecione três pegadas claras consecutivas do mouse em cada papel. Usando uma régua, meça o comprimento do passo da pegada do pé direito do mouse, com a largura do passo entre as pegadas esquerda e direita. Use pinças e tesouras microscópicas para remover o excesso de tecido mole ao redor dos espécimes do tornozelo.Em seguida, colocar os espécimes em um tubo centrífugo contendo uma solução de descalcificação de EDTA a 10% e marcar os diferentes grupos. Em seguida, coloque o tubo centrífugo em uma mesa de agitação para descalcificação. Troque a solução de descalcificação uma vez por dia e determine a descalcificação dos espécimes.Após um mês da descalcificação, desidratar os espécimes com álcool gradiente e, em seguida, usar N-butanol por oito horas para fins de clareamento. Finalmente, imergir os espécimes limpos em parafina em posição coronal para incorporação. Antes de seccionar, transfira os espécimes do refrigerador de quatro graus Celsius para um freezer de 20 graus Celsius negativos por cerca de 10 minutos, para facilitar o corte completo dos planos.Fixar os corpos de prova no micrótomo e seccioná-los numa espessura de seis micrómetros. Ao mesmo tempo, use um microscópio para observar se as amostras foram cortadas no nível esperado para facilitar a penetração de uma agulha de seringa no tecido ósseo. Depois de cortar duas ou três seções completas de parafina seguidas, transfira-as para a máquina de comprimidos, ajustada a 40 graus Celsius, para expansão total.Em seguida, remova as seções de parafina com uma lâmina de vidro. Por fim, marque os slides com grupos e números. Observar a estrutura articular intacta da JASC ao microscópio.Coloque as seções em uma incubadora regulada a 60 graus Celsius por 40 a 50 minutos. Em seguida, desencremar as seções com xileno três vezes, conforme descrito no manuscrito. Colocar as seções desenceradas em etanol 100% duas vezes por três minutos, seguidas de etanol 90% e 80% por cinco minutos cada.Em seguida, lave as seções com água bidestilada por cinco minutos. Após imersão em Hematoxilina por um minuto, lave os cortes com água bidestilada até que fiquem incolores. Mergulhe as seções em solução de diferenciação de etanol ácido a 1% por 30 segundos e lave-as com água bidestilada.Uma vez que os cortes são corados com solução de amônia a 1% e lavados com água bidestilada, corar as amostras com solução corante de eosina por um minuto. E depois colocá-los em 95% e 100% de etanol em sequência por um minuto cada. Finalmente, trate as seções com xileno quatro por um minuto.Seque ao ar as seções e cubra-as com uma lamínula, depois de colar uma gota de resina neutra nos corpos de prova nas lâminas. Em seguida, tire fotos com um microscópio de fluorescência vertical em campo brilhante a cinco e 20X. Deixar os cortes corados pela hematoxilina e amônia em verde 0,05% rápido por dois minutos.Em seguida, as seções foram imersas em solução de ácido acético a 1% por 30 segundos e safranina a 0,1% por cinco minutos. Em seguida, processe as lâminas com etanol e xileno, conforme demonstrado anteriormente. Tire fotos com um microscópio de fluorescência vertical em campo brilhante a 5X e 20X.Após três dias, oito semanas e 12 semanas de cirurgia, os grupos ligamentares cortados levaram significativamente mais tempo para passar pela trave de equilíbrio do que o grupo simulado. Antes da cirurgia, o comprimento do passo do pé posterior direito era comparável entre os três grupos de camundongos. No entanto, 12 semanas após a cirurgia, o comprimento do passo foi menor no grupo corte ligamentar do que no grupo simulado.Antes da cirurgia, o tempo de resposta à nocicepção térmica dos pés dos camundongos durante a atividade é semelhante entre os três grupos de camundongos. Após a cirurgia, os camundongos do grupo corte ligamentar apresentaram tempos de resposta mais longos em comparação com o grupo sham. A JSCA do retropé direito nos grupos ligamentares cortados mostrou superfícies rugosas, acúmulo de osteófitos, alterações degenerativas.E fração de volume ósseo significativamente maior do que o grupo sham. A camada cartilaginosa da JSCA no grupo corte ligamentar apresentou descontinuidade e diminuição do número de condrócitos. Além disso, os escores da Malkin and Osteoarthritis Research Society International dos camundongos com amputação ligamentar foram significativamente maiores do que o grupo sham.O colágeno tipo dois na camada de cartilagem articular da JASC do retropé direito do grupo sham foi mais uniforme e mais alto do que o dos dois grupos de camundongos com ligamentos rompidos. Este estudo pode ser utilizado para o diagnóstico e o tratamento da instabilidade do tornozelo, além de servir de referência experimental para o tratamento clínico desta doença.

Research

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