Name: a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability
Uploaded: 2022-10-28T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

Denna studie stöddes av Jiangsu-provinsens regerings stipendieprogram och Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions (PAPD).

Alla djurstudier utfördes i enlighet med riktlinjerna för vård och användning av försöksdjur och godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee vid Soochow University.
1. Kirurgiska ingrepp
<ol><li>Dela upp 21, 6 veckor gamla C57BL/6 hanmöss i tre grupper: det tvärgående cervikala ligamentet och den främre talofibulära ligamentgruppen, det tvärgående cervikala ligamentet och deltaideusligamentgruppen och skenkirurgigruppen. Se till att alla möss har ...

<ol>
	<li>Waterman, B. R., Belmont, P. J., Cameron, K. L., Deberardino, T. M., Owens, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprain+at+the+United+States+Military+Academy.">Epidemiology of ankle sprain at the United States Military Academy.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 797-803 (2010).</li><li>Fong, D. T., Chan, Y. Y., Mok, K. M., Yung, P. S., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+acute+ankle+ligamentous+sprain+injury+in+sports.">Understanding acute ankle ligamentous sprain injury in sports.</a> Sports Medicine Arthroscopy Rehabilitation Therapy &amp; Technology. 1 (1), 14 (2009).</li><li>Herzog, M. M., Kerr, Z. Y., Marshall, S. W., Wikstrom, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprains+and+chronic+ankle+instability.">Epidemiology of ankle sprains and chronic ankle instability.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 603-610 (2019).</li><li>Medina McKeon, J. M., Hoch, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ankle-joint+complex:+A+kinesiologic+approach+to+lateral+ankle+sprains.">The ankle-joint complex: A kinesiologic approach to lateral ankle sprains.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 589-602 (2019).</li><li>Jones, M. H., Amendola, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+treatment+of+inversion+ankle+sprains:+immobilization+versus+functional+treatment.">Acute treatment of inversion ankle sprains: immobilization versus functional treatment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 455 (463), 169-172 (2007).</li><li>Anandacoomarasamy, A., Barnsley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+term+outcomes+of+inversion+ankle+injuries.">Long term outcomes of inversion ankle injuries.</a> British Association of Sport and Medicine. 39 (3), 14 (2005).</li><li>Ringleb, S. I., Dhakal, A., Anderson, C. D., Bawab, S., Paranjape, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+lateral+ligament+sectioning+on+the+stability+of+the+ankle+and+subtalar+joint.">Effects of lateral ligament sectioning on the stability of the ankle and subtalar joint.</a> Journal of Orthopaedic Research. 29 (10), 1459-1464 (2011).</li><li>Mittlmeier, T., Wichelhaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+joint+instability.">Subtalar joint instability.</a> European Journal of Trauma and Emergency Surgery. 41 (6), 623-629 (2015).</li><li>Barg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+instability:+Diagnosis+and+treatment.">Subtalar instability: Diagnosis and treatment.</a> Foot &amp; Ankle International. 33 (02), 151-160 (2012).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+ankle-subtalar+joint+complex+instability+induced+post-traumatic+osteoarthritis.">A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 16 (1), 541 (2021).</li><li>Lui, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+arthroscopic+Brostrom+procedure+with+bone+tunnels.">Modified arthroscopic Brostrom procedure with bone tunnels.</a> Arthroscopy Techniques. 5 (4), 775-780 (2016).</li><li>Wang, W., Xu, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allograft+tendon+reconstruction+of+the+anterior+talofibular+ligament+and+calcaneofibular+Ligament+in+the+treatment+of+chronic+ankle+instability.">Allograft tendon reconstruction of the anterior talofibular ligament and calcaneofibular Ligament in the treatment of chronic ankle instability.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 18 (1), 150 (2017).</li><li>Yang, N., Waddington, G., Adams, R., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+proprioception+of+the+ankle+complex+across+the+lifespan.">Age-related changes in proprioception of the ankle complex across the lifespan.</a> Journal of Sport and Health Science. 8 (6), 548-554 (2019).</li><li>Michels, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+consensus+in+the+approach+to+patients+with+chronic+lateral+ankle+instability:+Ask+the+expert.">Searching for consensus in the approach to patients with chronic lateral ankle instability: Ask the expert.</a> Knee Surgery Sports Traumatology Arthroscopy. 26 (7), 2095-2102 (2017).</li><li>Kamada, K., Watanabe, S., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+subtalar+instability+due+to+insufficiency+of+the+calcaneofibular+ligament:+A+case+report.">Chronic subtalar instability due to insufficiency of the calcaneofibular ligament: A case report.</a> Foot &amp; Ankle International. 23 (12), 1135-1137 (2002).</li><li>Kato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diagnosis+and+treatment+of+instability+of+the+subtalar+joint.">The diagnosis and treatment of instability of the subtalar joint.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 77 (3), 400-406 (1995).</li><li>Meyer, J. M., Garcia, J., Hoffmeyer, P., Fritschy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+subtalar+sprain.+A+roentgenographic+study.">The subtalar sprain. A roentgenographic study.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (226), 169-173 (1988).</li><li>Mittlmeier, T., Rammelt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+subtalar+joint+instability.">Update on subtalar joint instability.</a> Foot and Ankle Clinics. 23 (3), 397-413 (2018).</li><li>Chang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mouse+and+human+ankles+and+establishment+of+mouse+ankle+osteoarthritis+models+by+surgically-induced+instability.">Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability.</a> Osteoarthritis &amp; Cartilage. 24 (4), 688-697 (2016).</li><li>Naito, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+glucosamine+on+an+experimental+rat+osteoarthritis+model.">Evaluation of the effect of glucosamine on an experimental rat osteoarthritis model.</a> Life Sciences. 86 (13-14), 538-543 (2010).</li><li>Pritzker, K. P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+cartilage+histopathology:+Grading+and+staging.">Osteoarthritis cartilage histopathology: Grading and staging.</a> Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).</li><li>Glasson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+Recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+mouse.">The OARSI histopathology initiative - Recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 18, 17-23 (2010).</li><li>Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ankle+sprain+in+a+mouse+model.">Acute ankle sprain in a mouse model.</a> Medicine &amp; Science in Sports &amp; Exercise. 45 (8), 1623-1628 (2013).</li><li>Wikstrom, E. A., Hubbard-Turner, T., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+ankle+sprain+in+a+mouse+model:+Lifelong+sensorimotor+dysfunction.">Lateral ankle sprain in a mouse model: Lifelong sensorimotor dysfunction.</a> Journal of Athletic Training. 53 (3), 249-254 (2018).</li><li>Bell-Krotoski, J. A., Fess, E. E., Figarola, J. H., Hiltz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+detection+and+Semmes-Weinstein+monofilaments.">Threshold detection and Semmes-Weinstein monofilaments.</a> Journal of Hand Therapy. 8 (2), 155-162 (1995).</li><li>Wieland, H. A., Michaelis, M., Kirschbaum, B. J., Rudolphi, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+-+An+untreatable+disease.">Osteoarthritis - An untreatable disease.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (4), 331-344 (2005).</li></ol>

I denna studie konstruerades två musmodeller av ASCJ-instabilitet framgångsrikt genom att transektera CL + ATFL eller CL + DL. Tiden för mössen att passera genom balansstrålen ökade signifikant vid 8 veckor och 12 veckor efter operationen, vilket liknar de resultat som erhölls av Hubbard-Turner-teamet genom att skära av det laterala ligamentet i fotleden23,24. I glidtestet för höger fot observerade vi att glidtiderna för de två grupperna av möss med ...

Fotledsstukningar är en av de vanligaste idrottsskadorna i världen. Det uppskattas att 10 000 personer skadas dagligen i USA1, varav idrottsrelaterade skador står för 15–45 %2. De medicinska kostnaderna för behandling av fotledsstukningar i USA uppgår till 4,2 miljarder dollar årligen 3,4,5. Kronisk fotinstabilitet är ett vanligt problem efter fotledsstukningar och förekommer i cirka 74 % av fotledsstukningarna6, inklusive fotleds- eller subtalarinstabilitet. Men på grund av liknande kliniska symtom och tecken är det svårt för medicinsk personal att avgöra om kronisk fotledsinstabilitet också åtföljs av kronisk subtalarledsinstabilitet på kliniken, och som ett resultat kan kronisk subtalarinstabilitet lätt missas. Därför kan den verkliga incidensen av kronisk instabilitet i fotleden-subtalarkomplexet (ASCJ) (en specifik typ av kronisk fotinstabilitet som inkluderar både kronisk fotledsinstabilitet och kronisk subtalarinstabilitet) vara högre än vad som rapporterats 7,8,9. Om den lämnas obehandlad kan kronisk ledinstabilitet i fotledssubtalarkomplexet orsaka upprepade fotledsstukningar, vilket leder till en ond cirkel av fotledsstukningar och kronisk instabilitet i fotledssubtalarkomplexet. Långvarig kronisk instabilitet i fotledssubtalarkomplexet kan leda till degeneration av ASCJ och posttraumatisk artros, vilket kan påverka de intilliggande lederna iallvarliga fall. För dessa sjukdomar är den nuvarande kliniska behandlingen huvudsakligen konservativ, förutom kirurgiska behandlingsmetoder som ligamentreparation och ligamentrekonstruktion11,12.
ASCJ är fotens kärnstruktur och upprätthåller balansen i kroppen under rörelse13. Omfattande forskning har bedrivits på fotledens och subtalarledens struktur var för sig14,15,16,17. Forskning på hela fotleden är dock sällsynt. Ungefär en fjärdedel av fallen av fotledsskada är förknippade med subtalarledskada18. På grund av den komplexa skademekanismen för ASCJ-instabilitet finns det ingen konsensus om att diagnostisera och behandla den i den kliniska miljön. Med tanke på den nuvarande situationen med fotledsskador i kliniken behövs en mer vetenskaplig metod för att studera fotleden och subtalarleden som helhet och därmed ge en ny förståelse för att studera fotsjukdomar.
Eftersom den anatomiska strukturen hos musens bakfot på muskuloskeletal nivå är jämförbar med den hos den mänskliga foten 19, har i flera studier musmodeller för fot-/fotledsforskning redan implementerats10,19. Chang et al.19 utvecklade framgångsrikt tre olika musmodeller av fotledsartros. Inspirerade av den framgångsrika etableringen av fotledsinstabilitet i musmodellen, etablerade vi en musmodell för ankel-subtalarkomplex instabilitet, med hypotesen att transsektionen av de partiella ligamenten i musens bakfot skulle resultera i mekanisk instabilitet i ASCJ, vilket skulle leda till posttraumatisk artros (PTOA) i ASCJ. ASCJ-instabilitetsdjurmodellen skulle kunna användas för behandling av både fotledsinstabilitet och subtalarinstabilitet, vilket är mer i linje med den faktiska kliniska situationen än den för närvarande använda enkla fotledsinstabilitetsmodellen 7,8,9,19. För att testa denna hypotes designades två musmodeller av ligamenttranssektionsinducerad instabilitet hos ASCJ. Resultaten för den sensorisk-motoriska funktionen - balansstråletestet, fotavtrycksanalysen och bedömningen av termisk nociception - användes för att utvärdera modellens genomförbarhet, och mikrodatortomografi (CT) och histologisk färgning användes för att utvärdera skador och degeneration av musens ledbrosk. Den framgångsrika etableringen av en musmodell av ASCJ-instabilitet ger inte bara en ny förståelse för att studera fotsjukdomar utan ger också en värdefull referens för klinisk forskning om de skaderelaterade mekanismerna, ger bättre behandlingsalternativ för fotledsstukningar och är till hjälp för ytterligare studier av sjukdomen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Surgical Nylon Suture</td>
			<td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd.</td>
			<td>191104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acidic ethanol differentiation solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive slides</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqueous acetic acid (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black cube cassette</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 15ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0476</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 50ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAn software</td>
			<td>Blue scientific</td>
			<td></td>
			<td>micro-CT analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dataview software</td>
			<td>AEMC instruments</td>
			<td></td>
			<td>commercial data analysing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na)</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>E8490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric incubator</td>
			<td>Suzhou Huamei Equipment Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding paraffin</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>39001006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin staining solution (alcohol soluble, 1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R30117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>F7275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gait paper</td>
			<td>Baoding Huarong Paper Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 8.0</td>
			<td>Graphpad software</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor cotton balls</td>
			<td>Qingdao Hainuo Bioengineering Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica 818 blade</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-CT</td>
			<td>Skyscan, Belgium</td>
			<td>SkyScan 1176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulation microscope</td>
			<td>Suzhou Omet Optoelectronics Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mimics software</td>
			<td>Materialise&#160;</td>
			<td></td>
			<td>3D medical image processing software&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified Harris Hematoxylin Stain</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-mouse type II collagen</td>
			<td>American Abcam Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-butanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral formalin fixative (10%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral resin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nrecon reconstrcution software&#160;</td>
			<td>Micro Photonics Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oaks hair clipper</td>
			<td>Oaks Group Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Embedding Machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PH meter</td>
			<td>Shanghai Leitz Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>American Biosharp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological saline (for mammals, sterile)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R22172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O-staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>HT90432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%)</td>
			<td>Shanghai Baxter Medical Drug Co., Ltd.</td>
			<td>309107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker</td>
			<td>Haimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.</td>
			<td>2008779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 23</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tablet machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>Ugo Basile Biological Research Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axiovert, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-shaped plastic channel</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary eye ointment</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YLS-10B Wheel Fatigue Tester</td>
			<td>Jinan Yiyan Technology Development Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability

Fotledsstukningar är kanske de vanligaste idrottsskadorna i det dagliga livet, vilket ofta resulterar i instabilitet i fotleden-subtalarkomplexet (ASCJ), och kan så småningom leda till posttraumatisk artros (PTOA) på lång sikt. Men på grund av skademekanismens komplexitet och de kliniska manifestationerna, såsom ekkymos, hematom eller ömhet i den laterala foten, finns det ingen klinisk konsensus om diagnos och behandling av ASCJ-instabilitet. Eftersom den muskuloskeletala strukturen hos ben och ligament i musens bakfot är jämförbar med den hos människor, etablerades en djurmodell av ASCJ-instabilitet hos möss genom transsektion av ligament runt ASCJ. Modellen validerades väl genom en serie beteendetester och histologiska analyser, inklusive ett balansstråletest, en fotavtrycksanalys (en bedömning av träningsnivå och balansförmåga hos möss), en termisk nociceptionsbedömning (en bedömning av fotens sensoriska funktion hos möss), mikrodatortomografi (CT) skanning och snittfärgning av ledbrosket (en bedömning av ledbroskskador och degeneration hos möss). Den framgångsrika etableringen av en musmodell av ASCJ-instabilitet kommer att ge en värdefull referens för klinisk forskning om skademekanismen och resultera i bättre behandlingsalternativ för fotledsstukning.

Den statistiska analysen av korrelationsdata utfördes med hjälp av statistiska analysverktyg online. De data som uppfyllde de två testerna av normalfördelning och varianshomogenitet användes för vidare statistisk analys genom envägsanalys av varians. Om data inte uppfyllde de två testerna användes Kruskal-Wallis-testet för den statistiska analysen. Data uttrycks som medelvärdet ± standardavvikelse (SD) och p < 0,05 ansågs vara statistiskt signifikant.
Provning av ...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability

Fotleden-subtalarkomplexet (ASCJ) är fotens kärna och spelar en nyckelroll för balanskontroll i dagliga aktiviteter. Idrottsskador leder ofta till instabilitet i denna led. Här beskriver vi en musmodell av ligamenttranssektionsinducerad instabilitet hos ASCJ.

En musmodell av ankel-subtalarkomplex ledinstabilitet

Ankle sprains are perhaps the most common sports injuries in daily life, often resulting in instability of the ankle-subtalar complex joint (ASCJ), and ...

Den framgångsrika etableringen av ASCJ-musmodellen för oförmåga utökar en enkel djurmodell för fotledsoförmåga och ger ett nytt koncept för studier av de kliniska fotsjukdomarna. Vi har etablerat en djurmodell som är mer i linje med den faktiska kliniska situationen, som kan användas för vidare forskning om diagnos och behandling av fotens sjukdomar. En vecka före experimentet utsätter du mössen för balansbom- och gångträning, från ena änden av en balansbom eller ett U-format rör till den andra, utan att stanna.Efter att ha bedövningsmedel och tagit bort håret på fotleden på musens högra bakben, desinficera den exponerade huden med en jodpinne. Överför musen till den mikrokirurgiska djuroperationssalen med hjälp av en steril kirurgisk dyna. För de tvärgående cervikala och främre talofibulära ligamentgrupperna, gör ett sju millimeter snett nedåtgående längsgående snitt med en skalpell på huden ovanför höger fotled.Och sond med mikroskopisk rak pincett på framsidan av fotleden. Se till att det främre talofibulära ligamentet exponeras vid den nedre kanten av taluskroppen och vadbenet, skär det försiktigt med en skalpell. Separera de långa och korta vadbenssenorna och extensor digitorum longus-senorna.Exponera livmoderhalsligamentet och skär av det med en skalpell. För det tvärgående cervikala ligamentet plus deltoideusligamentgruppen, gör ett åtta millimeter vertikalt snitt på den mediala huden i höger fotled och separera trubbig DL från den mediala malleolen för att skära av den. Skär sedan av livmoderhalsligamentet som visats tidigare.För skengruppen, utför skenkirurgi på höger fotled. Efter att ha spolat snittet med steril normal koksaltlösning, suturera det med 5-0 kirurgisk nylontråd, följt av desinficering av det suturerade snittet med en jodpinne. När svullnaden i vinkelleden har minskat två veckor efter operationen, träna mössen i musens roterande utmattningsmaskin i en timme varje dag.För balansstråletestet, clamp en cirkulär träbalk lutad i 15 grader i ena änden med en fotograferingsstativklämma och placera den andra änden på en arbetsyta ansluten till en sluten kassett. Utför balansbomträning en vecka före operationen för att säkerställa att mössen smidigt rör sig från ena änden av strålen till den andra. Tänk dig att en mus har klarat testet när den passerar genom strålen två gånger på 60 sekunder utan att pausa.Efter varje försök, spraya balansstrålen med 75 % alkohol för att presentera den kvarvarande lukten från den föregående musen från att påverka nästa mus. Utför balansbommens provning och registrera den genomsnittliga tiden för varje mus som passerar balansbommen två gånger i rad. Och antalet gånger som höger bakfot glider av balken, som beroende variabler.För fotavtrycksanalys, placera en U-formad plastkanal på experimentbordet och anslut ena änden av plastkanalen till en sluten kassett. Lägg ett vanligt pigmentpapper plant i kanalen. Håll sedan musen med båda händerna och måla fram- och bakfötterna jämnt med giftfritt rött och grönt pigment.Placera nu den målade musen i ena änden av kanalen och låt den flytta till den andra änden av kassetten. Ta det pigmenterade pappret med fotavtrycken, markera det och låt det torka i ett ventilerat och skuggigt utrymme. Spraya den U-formade plastkanalen med 75 % alkohol efter att varje mus har passerat, för att förhindra att den föregående musens kvarvarande lukt påverkar nästa mus.Välj tre på varandra följande tydliga musfotavtryck på varje papper. Använd en linjal och mät steglängden på fotavtrycket på musens högra fot, med stegbredden mellan vänster och höger fotavtryck. Använd mikroskopisk pincett och sax för att ta bort överflödig mjukvävnad runt fotledsproverna.Placera sedan proverna i ett centrifugrör som innehåller en 10% EDTA-avkalkningslösning och markera de olika grupperna. Placera sedan centrifugröret på ett skakbord för avkalkning. Byt avkalkningslösningen en gång per dag och bestäm avkalkningen av proverna.Efter en månads avkalkning, torka proverna med gradientalkohol och använd sedan N-butanol i åtta timmar för rensningsändamål. Sänk slutligen ner de rensade proverna i paraffin i en koronal position för inbäddning. Före sektionering, överför proverna från kylskåpet med fyra grader Celsius till en frys med minus 20 grader Celsius i cirka 10 minuter, för att underlätta hela planskärningen.Fäst proverna på mikrotomen och snitta dem i en tjocklek av sex mikrometer. Använd samtidigt ett mikroskop för att observera om proverna har skurits på den förväntade nivån för att enkelt kunna tränga in en sprutnål i benvävnaden. Efter att ha skurit två eller tre kompletta paraffinsektioner i rad, överför dem till tablettmaskinen, inställd på 40 grader Celsius, för full expansion.Ta sedan bort paraffinsektionerna med en glasskiva. Markera slutligen bilderna med grupper och siffror. Att observera den intakta ASCJ-ledstrukturen under ett mikroskop.Placera sektionerna i en inkubator inställd på 60 grader Celsius i 40 till 50 minuter. Avvaxa sedan sektionerna med xylen tre gånger, enligt beskrivningen i manuskriptet. Placera de avvaxade sektionerna i 100 % etanol två gånger i tre minuter, följt av 90 % och 80 % etanol i fem minuter vardera.Tvätta sedan sektionerna med dubbelt destillerat vatten i fem minuter. Efter blötläggning i hematoxylin i en minut, tvätta sektionerna med dubbelt destillerat vatten tills de blir färglösa. Blötlägg sektionerna i 1% sur etanoldifferentieringslösning i 30 sekunder och tvätta dem med dubbeldestillerat vatten.När sektionerna har färgats med 1% ammoniaklösning och tvättats med dubbeldestillerat vatten, färga proverna med eosinfärgningslösning i en minut. Och lägg dem sedan i 95% och 100% etanol i följd i en minut vardera. Behandla slutligen sektionerna med xylen fyra i en minut.Lufttorka sektionerna och täck dem med ett täckglas, efter att ha klistrat en droppe neutralt harts på proverna på objektglasen. Ta sedan bilder med ett upprätt fluorescensmikroskop i ljusfält vid fem och 20X. Blötlägg de hematoxylin- och ammoniakfärgade sektionerna i 0,05 % snabbt grönt i två minuter.Därefter blötläggs sektionerna i 1 % ättiksyralösning i 30 sekunder och 0,1 % safranin i fem minuter. Bearbeta sedan objektglasen med etanol och xylen som visats tidigare. Ta bilder med ett upprätt fluorescensmikroskop i ljusfält vid 5X och 20X.Efter tre dagar, åtta veckor och 12 veckors operation tog det betydligt längre tid för de avskurna ligamentgrupperna att passera genom balansbommen än skengruppen. Före operationen var steglängden för höger bakfot jämförbar mellan de tre musgrupperna. Men 12 veckor efter operationen var steglängden kortare i ligamentgruppen än i skengruppen.Före operationen är den termiska nociceptionssvarstiden för mössens fötter under aktivitet likartad bland de tre grupperna av möss. Efter operationen uppvisade mössen i ligamentgruppen längre svarstider jämfört med skengruppen. ASCJ för höger bakfot i avskurna ligamentgrupper visade grova ytor, osteofytansamling, degenerativa förändringar.Och betydligt högre benvolymfraktion än skengruppen. Broskskiktet i ASCJ i ligamentgruppen uppvisade diskontinuitet och minskat antal kondrocyter. Malkin and Osteoarthritis Research Society Internationals poäng för mössen med ligamentamputation var också signifikant högre än skengruppen.Kollagenet av typ två i den falska gruppens ASCJ-ledbroskskikt i höger bakfot var mer enhetligt och högre än hos de två grupperna av möss med avskurna ligament. Denna studie kan användas för diagnos och behandlingar för fotledsinstabilitet och ge en experimentell referens för de kliniska behandlingarna av denna sjukdom.

Research

JoVE Journal

Biology

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

Cancer Borealis Stomatogastric nervsystemet Dissection

The stomatogastric ganglion (STG) is an excellent model for studying cellular and network interactions because it contains a relatively small number of ...

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection i magen av Hummer, Homarus americanus</em

The stomach of the American lobster (Homarus americanus) is located in the cephalothorax, between the rostrum and the cervical groove. The anterior end of ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging och terapeutiska behandlingar i en Orthotopic musmodell av äggstockscancer

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Studera age-dependent genomisk instabilitet med S. cerevisiae Kronologisk Livslängd Modell

Studies using the Saccharomyces cerevisiae aging model have uncovered life span regulatory pathways that are partially conserved in higher eukaryotes1-2. ...

Sorting of Streptomyces Cell Pellets Using a Complex Object Parametric Analyzer and Sorter

Sorting of Streptomyces Cell Pellets Using a Complex Object Parametric Analyzer and Sorter

Sortering av<em&gt; Streptomyces</em&gt; Cell Pellets Använda en komplex Object parametrisk Analyzer och Sorter

Streptomycetes are filamentous soil bacteria that are used in industry for the production of enzymes and antibiotics. When grown in bioreactors, these ...

Purifying the Impure: Sequencing Metagenomes and Metatranscriptomes from Complex Animal-associated Samples

Rena Oren: sekvense Metagenomes och Metatranscriptomes från Komplexa Animal-associerade Prover

The accessibility of high-throughput sequencing has revolutionized many fields of biology. In order to better understand host-associated viral and ...

High Yield Expression of Recombinant Human Proteins with the Transient Transfection of HEK293 Cells in Suspension

Hög Utbyte Expression av rekombinanta humana proteiner med transient transfektion av HEK293 celler i suspension

The art of producing recombinant proteins with complex post-translational modifications represents a major challenge for studies of structure and ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Trans-inner Cell Mass injektion av embryonala stamceller leder till högre chimärism

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

En musmodell av partiell tarmobstruktion

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...