Name: a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability
Uploaded: 2022-10-28T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

Bu çalışma, Jiangsu eyalet hükümeti burs programı ve Jiangsu Yüksek Öğretim Kurumlarının Öncelikli Akademik Program Geliştirme (PAPD) tarafından desteklenmiştir.

Tüm hayvan çalışmaları, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzuna uygun olarak gerçekleştirildi ve Soochow Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.
1. Cerrahi prosedürler
<ol><li>21, 6 haftalık C57BL / 6 erkek fareyi üç gruba ayırın: transvers servikal ligament ve anterior talofibular ligament grubu, transvers servikal ligament ve deltoid ligament grubu ve sahte cerrahi grubu. Tüm farelerin belirli...

<ol>
	<li>Waterman, B. R., Belmont, P. J., Cameron, K. L., Deberardino, T. M., Owens, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprain+at+the+United+States+Military+Academy.">Epidemiology of ankle sprain at the United States Military Academy.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 797-803 (2010).</li><li>Fong, D. T., Chan, Y. Y., Mok, K. M., Yung, P. S., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+acute+ankle+ligamentous+sprain+injury+in+sports.">Understanding acute ankle ligamentous sprain injury in sports.</a> Sports Medicine Arthroscopy Rehabilitation Therapy &amp; Technology. 1 (1), 14 (2009).</li><li>Herzog, M. M., Kerr, Z. Y., Marshall, S. W., Wikstrom, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+ankle+sprains+and+chronic+ankle+instability.">Epidemiology of ankle sprains and chronic ankle instability.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 603-610 (2019).</li><li>Medina McKeon, J. M., Hoch, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ankle-joint+complex:+A+kinesiologic+approach+to+lateral+ankle+sprains.">The ankle-joint complex: A kinesiologic approach to lateral ankle sprains.</a> Journal of Athletic Training. 54 (6), 589-602 (2019).</li><li>Jones, M. H., Amendola, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+treatment+of+inversion+ankle+sprains:+immobilization+versus+functional+treatment.">Acute treatment of inversion ankle sprains: immobilization versus functional treatment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 455 (463), 169-172 (2007).</li><li>Anandacoomarasamy, A., Barnsley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+term+outcomes+of+inversion+ankle+injuries.">Long term outcomes of inversion ankle injuries.</a> British Association of Sport and Medicine. 39 (3), 14 (2005).</li><li>Ringleb, S. I., Dhakal, A., Anderson, C. D., Bawab, S., Paranjape, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+lateral+ligament+sectioning+on+the+stability+of+the+ankle+and+subtalar+joint.">Effects of lateral ligament sectioning on the stability of the ankle and subtalar joint.</a> Journal of Orthopaedic Research. 29 (10), 1459-1464 (2011).</li><li>Mittlmeier, T., Wichelhaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+joint+instability.">Subtalar joint instability.</a> European Journal of Trauma and Emergency Surgery. 41 (6), 623-629 (2015).</li><li>Barg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtalar+instability:+Diagnosis+and+treatment.">Subtalar instability: Diagnosis and treatment.</a> Foot &amp; Ankle International. 33 (02), 151-160 (2012).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+ankle-subtalar+joint+complex+instability+induced+post-traumatic+osteoarthritis.">A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 16 (1), 541 (2021).</li><li>Lui, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+arthroscopic+Brostrom+procedure+with+bone+tunnels.">Modified arthroscopic Brostrom procedure with bone tunnels.</a> Arthroscopy Techniques. 5 (4), 775-780 (2016).</li><li>Wang, W., Xu, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allograft+tendon+reconstruction+of+the+anterior+talofibular+ligament+and+calcaneofibular+Ligament+in+the+treatment+of+chronic+ankle+instability.">Allograft tendon reconstruction of the anterior talofibular ligament and calcaneofibular Ligament in the treatment of chronic ankle instability.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 18 (1), 150 (2017).</li><li>Yang, N., Waddington, G., Adams, R., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+proprioception+of+the+ankle+complex+across+the+lifespan.">Age-related changes in proprioception of the ankle complex across the lifespan.</a> Journal of Sport and Health Science. 8 (6), 548-554 (2019).</li><li>Michels, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+consensus+in+the+approach+to+patients+with+chronic+lateral+ankle+instability:+Ask+the+expert.">Searching for consensus in the approach to patients with chronic lateral ankle instability: Ask the expert.</a> Knee Surgery Sports Traumatology Arthroscopy. 26 (7), 2095-2102 (2017).</li><li>Kamada, K., Watanabe, S., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+subtalar+instability+due+to+insufficiency+of+the+calcaneofibular+ligament:+A+case+report.">Chronic subtalar instability due to insufficiency of the calcaneofibular ligament: A case report.</a> Foot &amp; Ankle International. 23 (12), 1135-1137 (2002).</li><li>Kato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diagnosis+and+treatment+of+instability+of+the+subtalar+joint.">The diagnosis and treatment of instability of the subtalar joint.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 77 (3), 400-406 (1995).</li><li>Meyer, J. M., Garcia, J., Hoffmeyer, P., Fritschy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+subtalar+sprain.+A+roentgenographic+study.">The subtalar sprain. A roentgenographic study.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (226), 169-173 (1988).</li><li>Mittlmeier, T., Rammelt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+subtalar+joint+instability.">Update on subtalar joint instability.</a> Foot and Ankle Clinics. 23 (3), 397-413 (2018).</li><li>Chang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mouse+and+human+ankles+and+establishment+of+mouse+ankle+osteoarthritis+models+by+surgically-induced+instability.">Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability.</a> Osteoarthritis &amp; Cartilage. 24 (4), 688-697 (2016).</li><li>Naito, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+glucosamine+on+an+experimental+rat+osteoarthritis+model.">Evaluation of the effect of glucosamine on an experimental rat osteoarthritis model.</a> Life Sciences. 86 (13-14), 538-543 (2010).</li><li>Pritzker, K. P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+cartilage+histopathology:+Grading+and+staging.">Osteoarthritis cartilage histopathology: Grading and staging.</a> Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).</li><li>Glasson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+Recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+mouse.">The OARSI histopathology initiative - Recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 18, 17-23 (2010).</li><li>Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ankle+sprain+in+a+mouse+model.">Acute ankle sprain in a mouse model.</a> Medicine &amp; Science in Sports &amp; Exercise. 45 (8), 1623-1628 (2013).</li><li>Wikstrom, E. A., Hubbard-Turner, T., Guderian, S., Turner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+ankle+sprain+in+a+mouse+model:+Lifelong+sensorimotor+dysfunction.">Lateral ankle sprain in a mouse model: Lifelong sensorimotor dysfunction.</a> Journal of Athletic Training. 53 (3), 249-254 (2018).</li><li>Bell-Krotoski, J. A., Fess, E. E., Figarola, J. H., Hiltz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+detection+and+Semmes-Weinstein+monofilaments.">Threshold detection and Semmes-Weinstein monofilaments.</a> Journal of Hand Therapy. 8 (2), 155-162 (1995).</li><li>Wieland, H. A., Michaelis, M., Kirschbaum, B. J., Rudolphi, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+-+An+untreatable+disease.">Osteoarthritis - An untreatable disease.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (4), 331-344 (2005).</li></ol>

Bu çalışmada, ASCJ kararsızlığının iki fare modeli, CL + ATFL veya CL + DL transekte edilerek başarılı bir şekilde oluşturulmuştur. Farelerin denge kirişinden geçme süresi, ameliyattan 8 hafta ve 12 hafta sonra önemli ölçüde artmıştır, bu da Hubbard-Turner ekibi tarafından ayak bileği ekleminin yan bağını keserek elde edilen sonuçlara benzer23,24. Sağ ayak kayma testinde, bağları kopmuş iki fare grubunun kayma sürelerinin, sahte...

Ayak bileği burkulmaları dünya çapında en yaygın spor yaralanmalarından biridir. Amerika Birleşik Devletleri'nde günde 10.000 kişinin yaralandığı tahmin edilmektedir1 ve bunların %15-45'ini sporla ilgili yaralanmalar oluşturmaktadır2. Amerika Birleşik Devletleri'nde ayak bileği burkulmalarının tedavisiyle ilgili tıbbi maliyetler yıllık 4,2 milyar dolartutarındadır 3,4,5. Kronik ayak instabilitesi, ayak bileği burkulmalarını takiben yaygın bir sorundur ve ayak bileği veya subtalar instabilite dahil olmak üzere ayak bileği burkulmalarının yaklaşık %74'ündegörülür 6. Bununla birlikte, benzer klinik semptom ve bulgular nedeniyle, sağlık personelinin kronik ayak bileği instabilitesine klinikte kronik subtalar eklem instabilitesinin de eşlik edip etmediğini ayırt etmesi zordur ve sonuç olarak kronik subtalar instabilite kolayca gözden kaçabilir. Bu nedenle, kronik ayak bileği-subtalar kompleks eklem (ASCJ) instabilitesinin (hem kronik ayak bileği instabilitesini hem de kronik subtalar instabiliteyi içeren spesifik bir kronik ayak instabilitesi türü) gerçek insidansı bildirilenden daha yüksek olabilir 7,8,9. Tedavi edilmezse, kronik ayak bileği subtalar kompleks eklem instabilitesi, tekrarlayan ayak bileği burkulmalarına neden olarak ayak bileği burkulmaları ve kronik ayak bileği subtalar kompleks instabilitesi kısır döngüsüne yol açabilir. Uzun süreli kronik ayak bileği-subtalar kompleks instabilitesi, ASCJ'nin dejenerasyonuna ve ciddi vakalarda komşu eklemleri etkileyebilecek travma sonrası osteoartrite yol açabilir10. Bu hastalıklar için mevcut klinik tedavi, bağ onarımı ve bağ rekonstrüksiyonu gibi cerrahi tedavi yöntemlerine ek olarak esas olarak konservatiftir11,12.
ASCJ, ayağın çekirdek yapısıdır ve hareket sırasında vücudun dengesini korur13. Ayak bileği eklemi ve subtalar eklemin yapısı hakkında ayrı ayrı kapsamlı araştırmalar yapılmıştır14,15,16,17. Bununla birlikte, tüm ayak bileği-subtalar eklem üzerine araştırmalar nadirdir. Ayak bileği yaralanması vakalarının yaklaşık dörtte biri subtalar eklem yaralanması ile ilişkilidir18. ASCJ instabilitesinin karmaşık yaralanma mekanizması nedeniyle, klinik ortamda tanı ve tedavisi konusunda fikir birliği yoktur. Klinikte ayak bileği yaralanmalarının mevcut durumu göz önüne alındığında, ayak bileği ve subtalar eklemi bir bütün olarak incelemek için daha bilimsel bir yönteme ihtiyaç duyulmakta ve böylece ayak hastalıklarının incelenmesi için yeni bir anlayış sağlanmaktadır.
Farenin arka ayağının kas-iskelet sistemi seviyesindeki anatomik yapısı insan ayağınınkiyle karşılaştırılabilir olduğundan19, çeşitli çalışmalarda ayak/ayak bileği araştırmaları için fare modelleri zaten uygulanmıştır10,19. Chang ve ark.19, ayak bileği osteoartritinin üç farklı fare modelini başarıyla geliştirdi. Fare modelinde ayak bileği instabilitesinin başarılı bir şekilde kurulmasından esinlenerek, ayak bileği-subtalar kompleks instabilitesi için bir fare modeli oluşturduk ve farenin arka ayağındaki kısmi bağların transeksiyonunun ASCJ'nin mekanik instabilitesine yol açacağını ve bunun da ASCJ'nin travma sonrası osteoartritine (PTOA) yol açacağını varsaydık. ASCJ instabilite hayvan modeli, hem ayak bileği instabilitesinin hem de subtalar instabilitenin tedavisi için kullanılabilir, bu da şu anda kullanılan basit ayak bileği instabilitesimodeli 7,8,9,19'dan daha gerçek klinik durumla daha uyumludur. Bu hipotezi test etmek için, ASCJ'nin bağ transeksiyonuna bağlı instabilitesinin iki fare modeli tasarlandı. Modelin fizibilitesini değerlendirmek için duyusal-motor fonksiyon sonuçları - denge ışını testi, ayak izi analizi ve termal nosisepsiyon değerlendirmesi - kullanıldı ve fare eklem kıkırdağının hasarını ve dejenerasyonunu değerlendirmek için mikro-bilgisayarlı tomografi (BT) ve histolojik boyama kullanıldı. ASCJ instabilitesinin bir fare modelinin başarılı bir şekilde kurulması, sadece ayak hastalıklarının incelenmesi için yeni bir anlayış sağlamakla kalmaz, aynı zamanda yaralanma ile ilgili mekanizmalar üzerine klinik araştırmalar için değerli bir referans sağlar, ayak bileği burkulmaları için daha iyi tedavi seçenekleri sağlar ve hastalıkla ilgili daha ileri çalışmalar için yararlıdır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Surgical Nylon Suture</td>
			<td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd.</td>
			<td>191104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acidic ethanol differentiation solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive slides</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonia solution (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqueous acetic acid (1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black cube cassette</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 15ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0476</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube 50ml</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>YA0472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAn software</td>
			<td>Blue scientific</td>
			<td></td>
			<td>micro-CT analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dataview software</td>
			<td>AEMC instruments</td>
			<td></td>
			<td>commercial data analysing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na)</td>
			<td>Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.</td>
			<td>E8490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric incubator</td>
			<td>Suzhou Huamei Equipment Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding paraffin</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>39001006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin staining solution (alcohol soluble, 1%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R30117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>F7275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gait paper</td>
			<td>Baoding Huarong Paper Factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 8.0</td>
			<td>Graphpad software</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor cotton balls</td>
			<td>Qingdao Hainuo Bioengineering Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica 818 blade</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-CT</td>
			<td>Skyscan, Belgium</td>
			<td>SkyScan 1176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulation microscope</td>
			<td>Suzhou Omet Optoelectronics Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mimics software</td>
			<td>Materialise&#160;</td>
			<td></td>
			<td>3D medical image processing software&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified Harris Hematoxylin Stain</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R20566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-mouse type II collagen</td>
			<td>American Abcam Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-butanol</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral formalin fixative (10%)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral resin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nrecon reconstrcution software&#160;</td>
			<td>Micro Photonics Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oaks hair clipper</td>
			<td>Oaks Group Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Embedding Machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PH meter</td>
			<td>Shanghai Leitz Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>American Biosharp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological saline (for mammals, sterile)</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>R22172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O-staining solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>HT90432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%)</td>
			<td>Shanghai Baxter Medical Drug Co., Ltd.</td>
			<td>309107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker</td>
			<td>Haimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.</td>
			<td>2008779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 23</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td>online statistical analysis tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tablet machine</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>Ugo Basile Biological Research Company</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axiovert, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-shaped plastic channel</td>
			<td>Shanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary eye ointment</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Shanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YLS-10B Wheel Fatigue Tester</td>
			<td>Jinan Yiyan Technology Development Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of ankle-subtalar complex joint instability

Ayak bileği burkulmaları belki de günlük yaşamda en sık görülen spor yaralanmalarıdır, sıklıkla ayak bileği-subtalar kompleks eklemin (ASCJ) instabilitesine neden olur ve sonunda uzun vadede travma sonrası osteoartrite (PTOA) yol açabilir. Bununla birlikte, yaralanma mekanizmasının karmaşıklığı ve ekimoz, hematom veya lateral ayakta hassasiyet gibi klinik belirtiler nedeniyle, ASCJ instabilitesinin tanısı ve tedavisi konusunda klinik bir fikir birliği yoktur. Fare arka ayağının kemiklerinin ve bağlarının kas-iskelet yapısı insanlarınkiyle karşılaştırılabilir olduğundan, ASCJ etrafındaki bağların transeksiyonu ile farelerde ASCJ instabilitesinin bir hayvan modeli oluşturulmuştur. Model, bir denge ışını testi, bir ayak izi analizi (farelerde egzersiz seviyesi ve denge yeteneğinin bir değerlendirmesi), bir termal nosisepsiyon değerlendirmesi (farelerde ayak duyusal fonksiyonunun bir değerlendirmesi), mikro bilgisayarlı tomografi (BT) taraması ve eklem kıkırdağının kesit boyaması (farelerde eklem kıkırdağı hasarı ve dejenerasyonunun değerlendirilmesi) dahil olmak üzere bir dizi davranışsal test ve histolojik analiz yoluyla iyi bir şekilde doğrulandı. ASCJ instabilitesinin bir fare modelinin başarılı bir şekilde oluşturulması, yaralanma mekanizması üzerine klinik araştırmalar için değerli bir referans sağlayacak ve ayak bileği burkulması için daha iyi tedavi seçenekleri ile sonuçlanacaktır.

Korelasyon verilerinin istatistiksel analizi, çevrimiçi istatistiksel analiz araçları kullanılarak yapılmıştır. Normal dağılım ve varyans homojenliği olmak üzere iki testi karşılayan veriler, tek yönlü varyans analizi ile daha ileri istatistiksel analizler için kullanılmıştır. Veriler iki testi karşılamıyorsa, istatistiksel analiz için Kruskal-Wallis testi kullanıldı. Veriler ortalama ± standart sapma (SD) olarak ifade edildi ve p < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.</...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability at JoVE.com

A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability

Ayak bileği-subtalar kompleks eklem (ASCJ) ayağın çekirdeğidir ve günlük aktivitelerde denge kontrolünde önemli bir rol oynar. Spor yaralanmaları genellikle bu eklemde dengesizliğe yol açar. Burada, ASCJ'nin bağ transeksiyonuna bağlı instabilitesinin bir fare modelini açıklıyoruz.

Ayak Bileği Subtalar Kompleks Eklem İnstabilitesinin Bir Fare Modeli

Ankle sprains are perhaps the most common sports injuries in daily life, often resulting in instability of the ankle-subtalar complex joint (ASCJ), and ...

ASCJ yetersizlik fare modelinin başarılı bir şekilde kurulması, basit bir ayak bileği yetersizliği hayvan modelini genişletir ve klinik ayak hastalıklarının incelenmesi için yeni kavramlar sağlar. Ayak hastalıklarının teşhisi ve tedavisi hakkında daha fazla araştırma yapmak için kullanılabilecek gerçek klinik durumla daha uyumlu bir hayvan modeli oluşturduk. Deneyden bir hafta önce, fareleri denge kirişi ve yürüyüş eğitimine tabi tutun, bir denge kirişinin veya U şeklindeki borunun bir ucundan diğerine durmadan gidin.Farenin sağ arka bacaklarının ayak bileği eklemindeki kılları uyuşturduktan ve çıkardıktan sonra, açıkta kalan cildi bir iyot çubuğu ile dezenfekte edin. Steril bir cerrahi ped kullanarak fareyi mikrocerrahi hayvan ameliyathanesine aktarın. Transvers servikal ve anterior talofibular ligament grupları için, sağ ayak bileği ekleminin üzerindeki deride bir neşter ile yedi milimetre eğik aşağı doğru uzunlamasına bir kesi yapın.Ve ayak bileği ekleminin önündeki mikroskobik düz forseps ile sonda. Talus gövdesinin ve fibulanın alt sınırındaki anterior talofibular bağın açığa çıkmasını sağlayarak, bir neşter ile hafifçe kesin. Uzun ve kısa fibula tendonlarını ve ekstansör digitorum longus tendonlarını ayırın.Servikal bağı ortaya çıkarın ve bir neşter ile kesin. Transvers servikal ligament artı deltoid ligament grubu için, sağ ayak bileği ekleminin medial derisinde sekiz milimetrelik dikey bir kesi yapın ve kesmek için DL'yi medial malleolden künt olarak ayırın. Daha sonra servikal bağı daha önce gösterildiği gibi kesin.Sahte grup için, sağ ayak bileği ekleminde sahte ameliyat yapın. Kesi steril normal salinle yıkandıktan sonra 5-0 cerrahi naylon iplikle dikildikten sonra dikişli insizyon iyot sürüntüsüyle dezenfekte edilir. Ameliyattan iki hafta sonra açılı eklem şişmesi azaldığında, fareleri her gün bir saat boyunca fare döner yorgunluk makinesinde çalıştırın.Denge kirişi testi için, bir ucunda 15 derece eğimli dairesel bir ahşap kirişi bir fotoğraf tripod klipsi ile sıkıştırın ve diğer ucunu kapalı bir kasete bağlı bir çalışma yüzeyine yerleştirin. Farelerin ışının bir ucundan diğerine sorunsuz bir şekilde hareket etmesini sağlamak için ameliyattan bir hafta önce denge kirişi eğitimi yapın. Bir farenin, ışından 60 saniyede iki kez duraklamadan geçtiğinde testi geçtiğini düşünün.Her denemeden sonra, önceki farenin kalan kokusunun bir sonraki fareyi etkilemesini önlemek için denge kirişine %75 alkol püskürtün. Denge kirişi testini gerçekleştirin ve her farenin denge kirişini arka arkaya iki kez geçtiği ortalama süreyi kaydedin. Ve sağ arka ayağın kirişten kayma sayısı, bağımlı değişkenler olarak.Ayak izi analizi için, deney masasına U şeklinde bir plastik kanal yerleştirin ve plastik kanalın bir ucunu kapalı bir kasete bağlayın. Kanala düz bir pigment kağıdı yerleştirin. Ardından fareyi iki elinizle tutun ve ön ve arka ayakları toksik olmayan kırmızı ve yeşil pigmentle eşit şekilde boyayın.Şimdi, boyalı fareyi kanalın bir ucuna yerleştirin ve kasetin diğer ucuna hareket etmesine izin verin. Pigmentli kağıdı ayak izleriyle birlikte alın, işaretleyin ve havalandırılan ve gölgeli bir alanda kurumasını bekleyin. Önceki farenin kalan kokusunun bir sonraki fareyi etkilemesini önlemek için, her fare geçtikten sonra U şeklindeki plastik kanala %75 alkol püskürtün.Her kağıtta art arda üç adet net fare ayak izi seçin. Bir cetvel kullanarak, sol ve sağ ayak izleri arasındaki adım genişliği ile farenin sağ ayağının ayak izinin adım uzunluğunu ölçün. Ayak bileği örneklerinin etrafındaki fazla yumuşak dokuyu çıkarmak için mikroskobik cımbız ve makas kullanın.Ardından, numuneleri %10 EDTA dekalsifikasyon solüsyonu içeren bir santrifüj tüpüne yerleştirin ve farklı grupları işaretleyin. Ardından, dekalsifikasyon için santrifüj tüpünü çalkalama masasına yerleştirin. Dekalsifikasyon solüsyonunu günde bir kez değiştirin ve numunelerin dekalsifikasyonunu belirleyin.Bir aylık dekalsifikasyondan sonra, numuneleri gradyan alkolle kurutun ve ardından temizleme amacıyla sekiz saat boyunca N-bütanol kullanın. Son olarak, temizlenmiş numuneleri gömmek için koronal pozisyonda parafine daldırın. Kesitlere ayırmadan önce, tüm düzlemlerin kesilmesini kolaylaştırmak için numuneleri dört santigrat derece buzdolabından eksi 20 santigrat derece dondurucuya yaklaşık 10 dakika aktarın.Numuneleri mikrotom üzerine sabitleyin ve altı mikrometre kalınlığında bölümlere ayırın. Aynı zamanda, bir şırınga iğnesinin kemik dokusuna kolay nüfuz etmesi için numunelerin beklenen seviyede kesilip kesilmediğini gözlemlemek için bir mikroskop kullanın. Arka arkaya iki veya üç tam parafin bölümünü kestikten sonra, tam genişleme için bunları 40 santigrat dereceye ayarlanmış tablet makinesine aktarın.Ardından parafin bölümlerini bir cam sürgü ile çıkarın. Son olarak, slaytları gruplar ve sayılarla işaretleyin. Sağlam ASCJ eklem yapısını mikroskop altında gözlemlemek.Bölümleri 40 ila 50 dakika boyunca 60 santigrat dereceye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin. Ardından, el yazmasında açıklandığı gibi, bölümleri ksilen ile üç kez mumdan arındırın. Mumdan arındırılmış bölümleri üç dakika boyunca iki kez %100 etanole, ardından her biri beş dakika boyunca %90 ve %80 etanole yerleştirin.Ardından bölümleri beş dakika boyunca çift damıtılmış suyla yıkayın. Hematoksilen içinde bir dakika beklettikten sonra, bölümleri renksiz hale gelene kadar çift damıtılmış suyla yıkayın. Bölümleri %1 asit etanol farklılaştırma solüsyonunda 30 saniye bekletin ve çift damıtılmış suyla yıkayın.Bölümler %1 amonyak çözeltisi ile boyandıktan ve çift damıtılmış su ile yıkandıktan sonra, numuneleri bir dakika boyunca eozin boyama çözeltisi ile boyayın. Ve sonra her biri bir dakika boyunca arka arkaya% 95 ve% 100 etanol koyun. Son olarak, bölümlere bir dakika boyunca ksilen dört uygulayın.Slaytlardaki numunelere bir damla nötr reçine yapıştırdıktan sonra bölümleri havayla kurutun ve bir kapak astarı ile örtün. Ardından, beş ve 20X'te parlak alanda dik bir floresan mikroskobu ile görüntü alın. Hematoksilen ve amonyak lekeli bölümleri iki dakika boyunca %0,05 hızlı yeşile batırın.Ardından bölümleri %1 asetik asit çözeltisinde 30 saniye ve %0.1 safranin içinde beş dakika bekletin. Ardından slaytları daha önce gösterildiği gibi etanol ve ksilen ile işleyin. 5X ve 20X'te parlak alanda dik bir floresan mikroskobu ile görüntü alın.Üç gün, sekiz hafta ve 12 haftalık ameliyattan sonra, kopan bağ gruplarının denge kirişinden geçmesi sahte gruba göre önemli ölçüde daha uzun sürdü. Ameliyattan önce, sağ arka ayak adım uzunluğu üç fare grubu arasında karşılaştırılabilirdi. Ancak ameliyattan 12 hafta sonra basam uzunluğu bağ kesisi yapılan grupta sham grubuna göre daha kısaydı.Ameliyattan önce, aktivite sırasında farelerin ayaklarının termal nosisepsiyon tepki süresi, üç fare grubu arasında benzerdir. Ameliyattan sonra, bağ kesim grubundaki fareler, sahte gruba kıyasla daha uzun yanıt süreleri gösterdi. Kopmuş bağ gruplarında sağ arka ayağın ASCJ'sinde pürüzlü yüzeyler, osteofit birikimi, dejeneratif değişiklikler izlendi.Ve sahte gruptan önemli ölçüde daha yüksek kemik hacmi fraksiyonu. Ligament kesi grubundaki ASCJ'nin kıkırdak tabakasında süreksizlik ve kondrosit sayısında azalma görüldü. Ayrıca, ligament amputasyonu olan farelerin Malkin ve Osteoarthritis Research Society International skorları, sham grubundan anlamlı olarak daha yüksekti.Sağ arka ayağın sahte grubunun ASCJ eklem kıkırdak tabakasındaki tip iki kollajen, bağları kopmuş iki fare grubundan daha homojen ve daha yüksekti. Bu çalışma, ayak bileği instabilitesinin tanı ve tedavisinde kullanılabilir ve bu hastalığın klinik tedavileri için deneysel bir referans sağlar.

Research

JoVE Journal

Biology

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

Kanser Borealis Stomatogastric Sinir Sistemi Diseksiyon

The stomatogastric ganglion (STG) is an excellent model for studying cellular and network interactions because it contains a relatively small number of ...

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus

Brüt Diseksiyon Lobster Mide, Homarus americanus</em

The stomach of the American lobster (Homarus americanus) is located in the cephalothorax, between the rostrum and the cervical groove. The anterior end of ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Görüntüleme ve Yumurtalık Kanseri Ortotopik Fare Modeli Tedavi Tedaviler

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Yaşa bağımlı Genomik İstikrarsızlık incelenmesi S. cerevisiae Kronolojik ömrü Modeli

Studies using the Saccharomyces cerevisiae aging model have uncovered life span regulatory pathways that are partially conserved in higher eukaryotes1-2. ...

Sorting of Streptomyces Cell Pellets Using a Complex Object Parametric Analyzer and Sorter

Sorting of Streptomyces Cell Pellets Using a Complex Object Parametric Analyzer and Sorter

Sıralanması<em&gt; Streptomyces</emKarmaşık bir nesne Parametrik Analiz ve Ayırıcı Kullanma&gt; Hücre Peletleri

Streptomycetes are filamentous soil bacteria that are used in industry for the production of enzymes and antibiotics. When grown in bioreactors, these ...

Purifying the Impure: Sequencing Metagenomes and Metatranscriptomes from Complex Animal-associated Samples

Saf olmayan Arındırıcı: Sıralama Metagenomes ve Metatranscriptomes Kompleksi Hayvan ilişkili Örneklerinden

The accessibility of high-throughput sequencing has revolutionized many fields of biology. In order to better understand host-associated viral and ...

High Yield Expression of Recombinant Human Proteins with the Transient Transfection of HEK293 Cells in Suspension

Süspansiyon HEK293 hücrelerinin kısa süreli transfection ile Rekombinant İnsan Proteinlerinin Yüksek Verimli İfadesi

The art of producing recombinant proteins with complex post-translational modifications represents a major challenge for studies of structure and ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Trans-iç hücre embriyonik kök hücrelerin kitle enjeksiyon daha yüksek Chimerism oranları için yol açar.

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...