Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
7:56
Conclusion
Transcript
Dit protocol maakt een nauwkeurige bepaling van de S-faseduur in gesynchroniseerde ontluikende gistcellen mogelijk. Het is een snelle, eenvoudige en reproduceerbare methode. Bovendien is het gevoelig genoeg om milde synthesedefecten te detecteren
Sign in or start your free trial to access this content
We beschrijven twee complementaire protocollen om de S-faseduur in S. cerevisiae nauwkeurig te bepalen met behulp van EdU, een thymidine-analoog, dat in vivo is opgenomen en gedetecteerd met behulp van Click-chemie door microscopie en flowcytometrie. Het zorgt voor de eenvoudige karakterisering van de duur van DNA-replicatie en over het hoofd geziene replicatiedefecten in mutanten.