Name: surgical technique for superior cervical ganglionectomy in a murine model
Uploaded: 2022-12-02T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model at JoVE.com

Q. W.는 NIH T32CA009685의 지원을 받았습니다. RJW는 NIH R01CA219534의 지원을 받았습니다. 메모리얼 슬론 케터링 암 센터 핵심 시설은 NIH P30CA008748의 지원을 받았습니다.

여기에 설명된 동물 절차는 메모리얼 슬론 케터링 암 센터(Memorial Sloan Kettering Cancer Center)의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다. 8주령의 수컷 및 암컷 NSG 마우스를 여기에 사용하였다. 동물들은 상업적 공급원으로부터 입수하였다 ( 재료의 표 참조). 기구는 멸균되고, 수술 작업 표면은 소독되고, 동물의 피부 표면은 소독되며, 외과 ?...

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	<li>Magnon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nerve+development+contributes+to+prostate+cancer+progression.">Autonomic nerve development contributes to prostate cancer progression.</a> Science. 341 (6142), 1236361 (2013).</li><li>Zhao, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Denervation+suppresses+gastric+tumorigenesis.">Denervation suppresses gastric tumorigenesis.</a> Science Translational Medicine. 6 (250), 115 (2014).</li><li>Zahalka, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+nerves+activate+an+angio-metabolic+switch+in+prostate+cancer.">Adrenergic nerves activate an angio-metabolic switch in prostate cancer.</a> Science. 358 (6361), 321-326 (2017).</li><li>Amit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+p53+drives+neuron+reprogramming+in+head+and+neck+cancer.">Loss of p53 drives neuron reprogramming in head and neck cancer.</a> Nature. 578 (7795), 449-454 (2020).</li><li>Renz, B. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+signaling+via+muscarinic+receptors+directly+and+indirectly+suppresses+pancreatic+tumorigenesis+and+cancer+stemness.">Cholinergic signaling via muscarinic receptors directly and indirectly suppresses pancreatic tumorigenesis and cancer stemness.</a> Cancer Discovery. 8 (11), 1458-1473 (2018).</li><li>Lucido, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innervation+of+cervical+carcinoma+is+mediated+by+cancer-derived+exosomes.">Innervation of cervical carcinoma is mediated by cancer-derived exosomes.</a> Gynecologic Oncology. 154 (1), 228-235 (2019).</li><li>Peterson, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basal+cell+carcinoma+preferentially+arises+from+stem+cells+within+hair+follicle+and+mechanosensory+niches.">Basal cell carcinoma preferentially arises from stem cells within hair follicle and mechanosensory niches.</a> Cell Stem Cell. 16 (4), 400-412 (2015).</li><li>Maronde, E., Stehle, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mammalian+pineal+gland:+Known+facts,+unknown+facets.">The mammalian pineal gland: Known facts, unknown facets.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 18 (4), 142-149 (2007).</li><li>Yamazaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+circadian+organization+in+the+rat.">Ontogeny of circadian organization in the rat.</a> Journal of Biological Rhythms. 24 (1), 55-63 (2009).</li><li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100++cells:+A+new+neuro-immune+cross-talkers+in+lymph+organs.">S100+ cells: A new neuro-immune cross-talkers in lymph organs.</a> Scientific Reports. 3 (1), 1114 (2013).</li><li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+protects+the+retina+from+experimental+nonexudative+age-related+macular+degeneration+in+mice.">Melatonin protects the retina from experimental nonexudative age-related macular degeneration in mice.</a> Journal of Pineal Research. 68 (4), 12643 (2020).</li><li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+superior+cervical+ganglionectomy+attenuates+the+progression+of+&#946;-aminopropionitrile-induced+aortic+dissection+in+rats.">Bilateral superior cervical ganglionectomy attenuates the progression of &#946;-aminopropionitrile-induced aortic dissection in rats.</a> Life Sciences. 193, 200-206 (2018).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+superior+cervical+sympathetic+ganglion+in+ischemia+reperfusion-induced+acute+kidney+injury+in+rats.">The role of the superior cervical sympathetic ganglion in ischemia reperfusion-induced acute kidney injury in rats.</a> Frontiers in Medicine. 9, 792000 (2022).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+cervical+ganglionectomy+alters+gut+microbiota+in+rats.">Superior cervical ganglionectomy alters gut microbiota in rats.</a> American Journal of Translational Research. 14 (3), 2037-2050 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Adrenergic+signaling+induces+Notch-mediated+salivary+gland+progenitor+cell+control.">&#946;-Adrenergic signaling induces Notch-mediated salivary gland progenitor cell control.</a> Stem Cell Reports. 16 (11), 2813-2824 (2021).</li><li>Boyd, A., Aragon, I. V., Abou Saleh, L., Southers, D., Richter, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cAMP-phosphodiesterase+4+(PDE4)+controls+&#946;-adrenoceptor-+and+CFTR-dependent+saliva+secretion+in+mice.">The cAMP-phosphodiesterase 4 (PDE4) controls &#946;-adrenoceptor- and CFTR-dependent saliva secretion in mice.</a> Biochemical Journal. 478 (10), 1891-1906 (2021).</li><li>Smith, B., Butler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+long-term+propranolol+on+the+salivary+glands+and+intestinal+serosa+of+the+mouse.">The effects of long-term propranolol on the salivary glands and intestinal serosa of the mouse.</a> The Journal of Pathology. 124 (4), 185-187 (1978).</li><li>Sucharov, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Adrenergic+receptor+antagonism+in+mice:+A+model+for+pediatric+heart+disease.">&#946;-Adrenergic receptor antagonism in mice: A model for pediatric heart disease.</a> Journal of Applied Physiology. 115 (7), 979-987 (2013).</li><li>Ding, C., Walcott, B., Keyser, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+alpha1-+and+beta1-adrenergic+modulation+of+lacrimal+gland+function+in+the+mouse.">The alpha1- and beta1-adrenergic modulation of lacrimal gland function in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (4), 1504-1510 (2007).</li><li>Grisanti, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+&#946;-blocker+treatment+decreases+leukocyte+responsiveness+to+injury.">Prior &#946;-blocker treatment decreases leukocyte responsiveness to injury.</a> JCI Insight. 5 (9), 99485 (2019).</li><li>Alito, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nervous+system+regulation+of+murine+immune+responses+as+assessed+by+local+surgical+sympathetic+and+parasympathetic+denervation.">Autonomic nervous system regulation of murine immune responses as assessed by local surgical sympathetic and parasympathetic denervation.</a> Acta Physiologica, Pharmacologica et Therapeutica Latinoamericana. 37 (3), 305-319 (1987).</li><li>Yun, H., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+central+role+for+sympathetic+nerves+in+herpes+stromal+keratitis+in+mice.">A central role for sympathetic nerves in herpes stromal keratitis in mice.</a> Ophthalmology &amp; Visual Science. 57 (4), 1749-1756 (2016).</li><li>Haug, S. R., Heyeraas, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+sympathectomy+on+experimentally+induced+pulpal+inflammation+and+periapical+lesions+in+rats.">Effects of sympathectomy on experimentally induced pulpal inflammation and periapical lesions in rats.</a> Neuroscience. 120 (3), 827-836 (2003).</li><li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+surgical+technique+for+rat+superior+cervical+ganglionectomy.">A standardized surgical technique for rat superior cervical ganglionectomy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (1), 22-33 (2010).</li><li>Garcia, J. B., Romeo, H. E., Basabe, J. C., Cardinali, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+superior+cervical+ganglionectomy+on+insulin+release+by+murine+pancreas+slices.">Effect of superior cervical ganglionectomy on insulin release by murine pancreas slices.</a> Journal of the Autonomic Nervous System. 22 (2), 159-165 (1988).</li><li>Ziegler, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sympathetic+denervation+attenuates+myocardial+inflammation+and+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction+in+mice.">Local sympathetic denervation attenuates myocardial inflammation and improves cardiac function after myocardial infarction in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (2), 291-299 (2017).</li><li>Getsy, P. M., Coffee, G. A., Hsieh, Y. H., Lewis, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+superior+cervical+ganglia+modulate+ventilatory+responses+to+hypoxia+independently+of+preganglionic+drive+from+the+cervical+sympathetic+chain.">The superior cervical ganglia modulate ventilatory responses to hypoxia independently of preganglionic drive from the cervical sympathetic chain.</a> Journal of Applied Physiology. 131 (2), 836-857 (2021).</li><li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+cervical+gangliectomy+induces+non-exudative+age-related+macular+degeneration+in+mice.">Superior cervical gangliectomy induces non-exudative age-related macular degeneration in mice.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 11 (2), 031641 (2018).</li><li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivation+of+sympathetic+nerves+drives+depletion+of+melanocyte+stem+cells.">Hyperactivation of sympathetic nerves drives depletion of melanocyte stem cells.</a> Nature. 577 (7792), 676-681 (2020).</li><li>Pirzgalska, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sympathetic+neuron-associated+macrophages+contribute+to+obesity+by+importing+and+metabolizing+norepinephrine.">Sympathetic neuron-associated macrophages contribute to obesity by importing and metabolizing norepinephrine.</a> Nature Medicine. 23 (11), 1309-1318 (2017).</li><li>Kajimura, D., Paone, R., Mann, J. J., Karsenty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foxo1+regulates+Dbh+expression+and+the+activity+of+the+sympathetic+nervous+system+in+vivo.">Foxo1 regulates Dbh expression and the activity of the sympathetic nervous system in vivo.</a> Molecular Metabolism. 3 (7), 770-777 (2014).</li></ol>

이 프로토콜은 SCG 입력의 외과적 편측 절제를 위한 마우스 모델을 설명합니다. 이 기술을 사용하면 다양한 환경에서 아드레날린 성 신경 분포의 효과를 연구 할 수 있습니다. 또한, 절제된 교감신경 신경절은 시험관내 실험(in vitro experiments)을 위한 3D 매트리겔 배양(3D matrigel culture)에서도 성장할 수 있다 30.
SCGx와 관련된 연구는 해부학적 구조가 더 커?...

여러 연구에서 종양 미세 환경의 신경이 종양 진행을 지원하는 데 적극적인 역할을 한다고 보고했습니다. 아드레날린성 교감신경의 절제는 생체 내에서 전립선암과 위암의 종양 발달 및 파종을 저해하는 것으로 나타났으며1,2,3, 아드레날린성 수용체의 약리학적 차단은 두경부암의 종양 성장을 억제한다 4. 교감신경 침범은 또한 췌장암, 자궁경부암 및 기저 세포 암종 진행에서 설명되었습니다 5,6,7.
교감 신경계 내에서 상부 경추 신경절(SCG)은 머리를 자극하는 교감신경 줄기의 유일한 신경절입니다. SCG는 타액 분비 및 일주기 리듬과 같은 다양한 생리적 기능을 조절하고 자궁 경부 림프절을 직접 자극합니다 8,9,10. SCG는 또한 황반변성(macular degeneration)11 및 대동맥 박리(aortic dissection)12의 진행과 같은 병리학적 과정과 관련이 있다. 또한, SCG의 절제술은 허혈 재관류로 유발된 급성 신장 손상을 악화시키고13 또한 쥐14의 장내 미생물군을 변화시키는 것으로 보고되었다.
마우스 모델에서 SCG의 완전한 절제는 암 및 자율 신경계 연구를 가능하게 하는 귀중한 실험 기술을 나타냅니다. 많은 연구에서 약리학적 아드레날린 수용체 차단을 아드레날린 절제술로 활용했지만15,16,17,18,19,20, 외과적 절제술은 반복적인 약리학적 개입 및 관련 부작용의 필요성을 피하면서 완전하고 일방적인 아드레날린 절제를 가능하게 한다 21,22,23.
SCG의 외과적 절제술은 쥐24마리에서 설명되었으며, 우수한 경추 신경절 절제술(SCGx)의 효과를 연구하는 대부분의 보고서에서는 쥐 모델을 사용했습니다. 쥐 모델과 비교할 때 SCGx는 SCG의 크기가 작기 때문에 마우스에서 기술적으로 더 까다롭습니다. 그러나 마우스는 비교적 다루기 쉽고 비용 효율적이며 유전자 조작에 더 적합합니다. Garcia et al. 생쥐에서 SCGx를 보고한 최초의 사람 중 하나였으며 인슐린 방출에 영향을 미치는 것으로 밝혀졌습니다25. 보다 최근에, Ziegler et al. 쥐24,26에 대해 기술된 공개된 기술에 기초하여 마우스에서 SCGx를 기술하였다. 이 기사와 다른 기사에서는 총경동맥(CCA)을 먼저 식별하고 해부한 다음 CCA21,22,27,28의 분기점에서 SCG를 제거하는 방법을 설명합니다. 이 기사에서는 CCA의 해부를 피하는 덜 침습적이고 안전한 기술에 대해 설명하여 이 절차의 가장 심각한 합병증인 CCA 손상으로 인한 출혈을 최소화합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase Antibody</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AB152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Tears Lubricant Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-162-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curity 2 x 2 Inch Gauze Sponge 8 Ply, Sterile</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>1806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Derf Needle Holder</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>1177K00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #7b Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11270-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ETHILON Nylon Suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>698H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors - ToughCut</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypoallergenic Surgical Tape</td>
			<td>3M Blenderm</td>
			<td>70200419342</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction Chamber, 2 Liter</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>941444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>1001936060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair</td>
			<td>Church &#38; Dwight Co., Inc</td>
			<td>40002957</td>
			<td>chemical hair removing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NORADRENALINE RESEARCH ELISA</td>
			<td>Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics)</td>
			<td>BA E-5200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG Mouse</td>
			<td>Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:005557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine Swabstick</td>
			<td>PDI</td>
			<td>S41350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcol Alcohol Preps</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>5110</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical technique for superior cervical ganglionectomy in a murine model

교감 신경계가 암 진행에 중요한 역할을 한다는 증거가 늘어나고 있습니다. 아드레날린성 신경 분포는 침샘 분비, 일주기 리듬, 황반 변성, 면역 기능 및 심장 생리학을 조절합니다. 쥐 외과적 교감신경 절제술은 반복적인 약리학적 개입 및 관련 부작용의 필요성을 피하면서 완전하고 일방적인 아드레날린 절제를 허용함으로써 아드레날린 신경 분포의 효과를 연구하는 방법입니다. 그러나 생쥐의 외과적 교감신경 절제술은 상부 경추 신경절의 크기가 작기 때문에 기술적으로 어렵습니다. 본 연구는 상부 경추 신경절을 확실하게 식별하고 절제하여 교감신경계를 절제하는 수술 기법을 기술한다. 신경절의 성공적인 식별 및 제거는 형질전환 마우스를 사용하여 형광 교감신경절을 영상화하고, 절제 후 호너 증후군을 식별하고, 절제된 신경절에서 아드레날린 마커를 염색하고, 교감신경 절제술 후 표적 기관에서 감소된 아드레날린 면역형광을 관찰함으로써 검증됩니다. 이 모델은 암 진행뿐만 아니라 교감 신경계에 의해 조절되는 다른 생리적 과정에 대한 향후 연구를 가능하게 합니다.

이 프로토콜은 마우스 모델에서 SCG의 외과적 제거를 설명합니다. 그림 2 는 CCA, 전경정맥 및 SCG를 포함한 해부학적 랜드마크를 보여줍니다. 해부(그림 2A)를 통해 우측 전방 경정맥이 기관의 측면 경계를 따라 흐르는 것을 볼 수 있습니다. 전경정맥보다 더 깊숙이 위치하기 때문에 왼쪽 CCA와 내경동맥(ICA)과 외경동맥(ECA)으로의 분기점은 정맥 측면에서만...

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Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model

본 프로토콜은 상부 경추 신경절을 식별하고 절제함으로써 아드레날린성 신경 분포를 절제하는 마우스 모델을 설명합니다.

쥐 모델에서 우수한 자궁경부 신경절 절제술을 위한 수술 기법

Growing evidence suggests that the sympathetic nervous system plays an important role in cancer progression. Adrenergic innervation regulates salivary ...

교감 신경계는 암 진행 및 기타 질병에 중요한 역할을 합니다. 외과적 교감신경 절제술은 완전한 일방적인 아드레날린 절제를 유도하여 이러한 과정을 연구하는 귀중한 방법입니다. 이 기술은 교감 신경계의 약리학 적 억제와 관련된 부작용을 피합니다.또한 경동맥의 박리를 피하기 때문에 이전에 설명한 방법보다 덜 침습적입니다. 이 기술을 수행 할 때 신경절이 상주하는 올바른 공간에 들어가 지방과 구별하기가 어려울 수 있습니다. 따라서 랜드마크와 관행을 식별하는 것이 필수적입니다.해부학은 움직일 때와 해부되지 않을 때 약간 다르게 보이므로 시각적 시연은 이 기술의 핵심인 해부학적 랜드마크를 식별하는 방법에 대한 더 나은 가이드를 제공합니다. 안구 손상과 건조를 예방하기 위해 마취된 마우스에 국소 안과 연고를 바르는 것으로 시작합니다. 마우스를 등쪽의 해부 현미경 아래에 놓고 정밀 기화기와 코 콘을 사용하여 흡입 마취를 유지합니다.저자극성 테이프로 양쪽 앞다리를 고정합니다. 면도한 목의 복부 부분을 포비돈 요오드로 닦은 다음 70% 알코올로 닦습니다. 세척 과정을 두 번 더 반복한 후 수술 부위에 멸균 드레이프를 놓습니다.그런 다음 작은 가위를 사용하여 턱 아래 약 2mm에서 흉골 노치 위 2mm까지 목의 복부 부분에 1.5cm 정중선 피부 절개를합니다. 양쪽 피부 아래에 뾰족한 가위를 삽입하고 펴서 밑에 있는 근막에서 피부를 분리합니다. 그런 다음 집게로 피부 가장자리를 옆으로 수축시켜 밑에 있는 근막과 턱밑 침샘을 노출시킵니다.집게로 턱밑샘을 꼬리쪽으로 당겨 밑에 있는 근육을 드러냅니다. 다음으로, digastric muscle과 omohyoid muscle의 후방 배의 교차점을 찾습니다. 전방 경정맥 측면의 이 접합부에 45도 각진 집게의 끝을 삽입하여 위에 놓인 깊은 경추 근막에 구멍을 뚫고 퍼뜨립니다.45도 각도의 집게로 이 창을 열어 두고 다른 한 쌍의 구부러진 집게로 펼치기 동작을 수행하여 이 구멍을 더 넓게 확장합니다. 공개된 공간의 외벽에서 상부 경추 신경절 또는 SCG를 찾습니다. 다른 손으로 집게로 개구부를 유지하면서 집게로 SCG를 부드럽게 잡고 개구부에서 당겨 더 잘 볼 수 있도록 합니다.SCG가 시야에 들어오면 주변 조직에 여전히 부착되어 있는 SCG의 측면 기저부를 잡습니다. 다른 손을 사용하여 SCG를 복부 및 꼬리 방향으로 천천히 부드럽게 여러 번 수축시켜 신경절을 조금씩 점차적으로 파기합니다. 이 기동 중에 신경절을 온전하게 유지하여 잔여 신경절 잔해가 남지 않도록 합니다.신경절의 기저부를 천천히 풀고 혈액 웅덩이를 찾아 출혈을 확인합니다. 완료되면 침샘을 정상적인 해부학적 위치로 되돌립니다. 간단한 중단 된 5-0 나일론 봉합사를 사용하여 피부를 근사화하고 닫습니다.해부하는 동안 오른쪽 전방 경정맥은 기관의 측면 경계를 따라 진행되었습니다. 적색 형광 뉴런을 갖는 P0 tdTomato 형질전환 마우스를 형광 현미경으로 검사하였을 때, 형광 미주 신경이 총경동맥으로 측면으로 이동하는 것이 관찰되었고, 전방 경정맥 측면의 총경동맥의 분기점에서 형광 SCG가 관찰되었다. 형질전환 마우스에서 절제된 SCG는 비형광 SCG 대조군과 비교하여 적색 형광으로 확인되었습니다.면역형광염색을 통해 아드레날린성 신경의 표지자인 티로신 하이드록실라제를 확인할 수 있었다. 상부 경추 신경절 절제술 후 눈꺼풀이 처지는 안검하수가 관찰되었는데, 이는 호너 증후군의 징후입니다. 우측 상부 경추 신경절 절제술 후 우측 턱밑 침샘의 티로신 하이드록실라제에 대한 면역형광 염색은 티로신 하이드록실라제 신경 염색이 없는 상태에서 아드레날린 신호 전달의 성공적인 절제를 확인했습니다.대조적으로, 좌측 대조군 턱밑샘은 아드레날린 입력을 유지하고 티로신 하이드록실라제 신경 염색을 그대로 유지했으며, 이는 또한 정량화에 의해 확인되었습니다. 타액선에서 노르에피네프린의 ELISA 정량화는 대조군 가짜 수술 측과 달리 상부 경추 신경절 절제술 측의 턱밑샘에서 노르에피네프린 발현의 현저한 감소를 확인했습니다. SCG를 제거할 때 인내심을 갖고 부드럽게 하십시오.조금씩 천천히 발산하십시오. 그렇지 않으면 SCG에 연결된 경동맥이 쉽게 손상되어 출혈이 발생할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

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쥐 C1498 세포주와 관련 백혈병 마우스 모델을 특성화에 대한 자세한 프로토콜

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연구

암 연구학

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그만큼<em&gt; 초파리</em&gt; 가상적인 디스크 종양 모델 : 유전 모자이크를 사용하여 유전자 발현 및 종양 침윤의 시각화 및 정량화

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Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

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유방암 센티넬 노드 생검에 있는 단 하나 기술로 1% 메틸렌 청색염의 응용

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