Name: surgical technique for superior cervical ganglionectomy in a murine model
Uploaded: 2022-12-02T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model at JoVE.com

Q. W. был поддержан NIH T32CA009685. R. J. W. был поддержан NIH R01CA219534. Основные объекты Мемориального онкологического центра имени Слоуна-Кеттеринга были поддержаны Национальным институтом здравоохранения P30CA008748.

Описанные здесь процедуры для животных были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию в Мемориальном онкологическом центре им. Слоуна-Кеттеринга. Здесь использовали восьминедельных самцов и самок мышей NSG. Животные были получены из коммерческого источника (см. Т?...

<ol>
	<li>Magnon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nerve+development+contributes+to+prostate+cancer+progression.">Autonomic nerve development contributes to prostate cancer progression.</a> Science. 341 (6142), 1236361 (2013).</li><li>Zhao, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Denervation+suppresses+gastric+tumorigenesis.">Denervation suppresses gastric tumorigenesis.</a> Science Translational Medicine. 6 (250), 115 (2014).</li><li>Zahalka, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+nerves+activate+an+angio-metabolic+switch+in+prostate+cancer.">Adrenergic nerves activate an angio-metabolic switch in prostate cancer.</a> Science. 358 (6361), 321-326 (2017).</li><li>Amit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+p53+drives+neuron+reprogramming+in+head+and+neck+cancer.">Loss of p53 drives neuron reprogramming in head and neck cancer.</a> Nature. 578 (7795), 449-454 (2020).</li><li>Renz, B. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+signaling+via+muscarinic+receptors+directly+and+indirectly+suppresses+pancreatic+tumorigenesis+and+cancer+stemness.">Cholinergic signaling via muscarinic receptors directly and indirectly suppresses pancreatic tumorigenesis and cancer stemness.</a> Cancer Discovery. 8 (11), 1458-1473 (2018).</li><li>Lucido, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innervation+of+cervical+carcinoma+is+mediated+by+cancer-derived+exosomes.">Innervation of cervical carcinoma is mediated by cancer-derived exosomes.</a> Gynecologic Oncology. 154 (1), 228-235 (2019).</li><li>Peterson, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basal+cell+carcinoma+preferentially+arises+from+stem+cells+within+hair+follicle+and+mechanosensory+niches.">Basal cell carcinoma preferentially arises from stem cells within hair follicle and mechanosensory niches.</a> Cell Stem Cell. 16 (4), 400-412 (2015).</li><li>Maronde, E., Stehle, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mammalian+pineal+gland:+Known+facts,+unknown+facets.">The mammalian pineal gland: Known facts, unknown facets.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 18 (4), 142-149 (2007).</li><li>Yamazaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+circadian+organization+in+the+rat.">Ontogeny of circadian organization in the rat.</a> Journal of Biological Rhythms. 24 (1), 55-63 (2009).</li><li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100++cells:+A+new+neuro-immune+cross-talkers+in+lymph+organs.">S100+ cells: A new neuro-immune cross-talkers in lymph organs.</a> Scientific Reports. 3 (1), 1114 (2013).</li><li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+protects+the+retina+from+experimental+nonexudative+age-related+macular+degeneration+in+mice.">Melatonin protects the retina from experimental nonexudative age-related macular degeneration in mice.</a> Journal of Pineal Research. 68 (4), 12643 (2020).</li><li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+superior+cervical+ganglionectomy+attenuates+the+progression+of+&#946;-aminopropionitrile-induced+aortic+dissection+in+rats.">Bilateral superior cervical ganglionectomy attenuates the progression of &#946;-aminopropionitrile-induced aortic dissection in rats.</a> Life Sciences. 193, 200-206 (2018).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+superior+cervical+sympathetic+ganglion+in+ischemia+reperfusion-induced+acute+kidney+injury+in+rats.">The role of the superior cervical sympathetic ganglion in ischemia reperfusion-induced acute kidney injury in rats.</a> Frontiers in Medicine. 9, 792000 (2022).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+cervical+ganglionectomy+alters+gut+microbiota+in+rats.">Superior cervical ganglionectomy alters gut microbiota in rats.</a> American Journal of Translational Research. 14 (3), 2037-2050 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Adrenergic+signaling+induces+Notch-mediated+salivary+gland+progenitor+cell+control.">&#946;-Adrenergic signaling induces Notch-mediated salivary gland progenitor cell control.</a> Stem Cell Reports. 16 (11), 2813-2824 (2021).</li><li>Boyd, A., Aragon, I. V., Abou Saleh, L., Southers, D., Richter, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cAMP-phosphodiesterase+4+(PDE4)+controls+&#946;-adrenoceptor-+and+CFTR-dependent+saliva+secretion+in+mice.">The cAMP-phosphodiesterase 4 (PDE4) controls &#946;-adrenoceptor- and CFTR-dependent saliva secretion in mice.</a> Biochemical Journal. 478 (10), 1891-1906 (2021).</li><li>Smith, B., Butler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+long-term+propranolol+on+the+salivary+glands+and+intestinal+serosa+of+the+mouse.">The effects of long-term propranolol on the salivary glands and intestinal serosa of the mouse.</a> The Journal of Pathology. 124 (4), 185-187 (1978).</li><li>Sucharov, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Adrenergic+receptor+antagonism+in+mice:+A+model+for+pediatric+heart+disease.">&#946;-Adrenergic receptor antagonism in mice: A model for pediatric heart disease.</a> Journal of Applied Physiology. 115 (7), 979-987 (2013).</li><li>Ding, C., Walcott, B., Keyser, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+alpha1-+and+beta1-adrenergic+modulation+of+lacrimal+gland+function+in+the+mouse.">The alpha1- and beta1-adrenergic modulation of lacrimal gland function in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (4), 1504-1510 (2007).</li><li>Grisanti, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+&#946;-blocker+treatment+decreases+leukocyte+responsiveness+to+injury.">Prior &#946;-blocker treatment decreases leukocyte responsiveness to injury.</a> JCI Insight. 5 (9), 99485 (2019).</li><li>Alito, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nervous+system+regulation+of+murine+immune+responses+as+assessed+by+local+surgical+sympathetic+and+parasympathetic+denervation.">Autonomic nervous system regulation of murine immune responses as assessed by local surgical sympathetic and parasympathetic denervation.</a> Acta Physiologica, Pharmacologica et Therapeutica Latinoamericana. 37 (3), 305-319 (1987).</li><li>Yun, H., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+central+role+for+sympathetic+nerves+in+herpes+stromal+keratitis+in+mice.">A central role for sympathetic nerves in herpes stromal keratitis in mice.</a> Ophthalmology &amp; Visual Science. 57 (4), 1749-1756 (2016).</li><li>Haug, S. R., Heyeraas, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+sympathectomy+on+experimentally+induced+pulpal+inflammation+and+periapical+lesions+in+rats.">Effects of sympathectomy on experimentally induced pulpal inflammation and periapical lesions in rats.</a> Neuroscience. 120 (3), 827-836 (2003).</li><li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+surgical+technique+for+rat+superior+cervical+ganglionectomy.">A standardized surgical technique for rat superior cervical ganglionectomy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (1), 22-33 (2010).</li><li>Garcia, J. B., Romeo, H. E., Basabe, J. C., Cardinali, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+superior+cervical+ganglionectomy+on+insulin+release+by+murine+pancreas+slices.">Effect of superior cervical ganglionectomy on insulin release by murine pancreas slices.</a> Journal of the Autonomic Nervous System. 22 (2), 159-165 (1988).</li><li>Ziegler, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sympathetic+denervation+attenuates+myocardial+inflammation+and+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction+in+mice.">Local sympathetic denervation attenuates myocardial inflammation and improves cardiac function after myocardial infarction in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (2), 291-299 (2017).</li><li>Getsy, P. M., Coffee, G. A., Hsieh, Y. H., Lewis, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+superior+cervical+ganglia+modulate+ventilatory+responses+to+hypoxia+independently+of+preganglionic+drive+from+the+cervical+sympathetic+chain.">The superior cervical ganglia modulate ventilatory responses to hypoxia independently of preganglionic drive from the cervical sympathetic chain.</a> Journal of Applied Physiology. 131 (2), 836-857 (2021).</li><li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+cervical+gangliectomy+induces+non-exudative+age-related+macular+degeneration+in+mice.">Superior cervical gangliectomy induces non-exudative age-related macular degeneration in mice.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 11 (2), 031641 (2018).</li><li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivation+of+sympathetic+nerves+drives+depletion+of+melanocyte+stem+cells.">Hyperactivation of sympathetic nerves drives depletion of melanocyte stem cells.</a> Nature. 577 (7792), 676-681 (2020).</li><li>Pirzgalska, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sympathetic+neuron-associated+macrophages+contribute+to+obesity+by+importing+and+metabolizing+norepinephrine.">Sympathetic neuron-associated macrophages contribute to obesity by importing and metabolizing norepinephrine.</a> Nature Medicine. 23 (11), 1309-1318 (2017).</li><li>Kajimura, D., Paone, R., Mann, J. J., Karsenty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foxo1+regulates+Dbh+expression+and+the+activity+of+the+sympathetic+nervous+system+in+vivo.">Foxo1 regulates Dbh expression and the activity of the sympathetic nervous system in vivo.</a> Molecular Metabolism. 3 (7), 770-777 (2014).</li></ol>

Этот протокол описывает мышиную модель для хирургической односторонней абляции входа SCG. Эта методика позволяет изучать эффекты адренергической иннервации в различных условиях. Кроме того, резецированный симпатический ганглий также может быть выращен в 3D-культуре матригеля для эксп?...

Многочисленные исследования показали, что нервы в микроокружении опухоли играют активную роль в поддержке прогрессирования опухоли. Было показано, что абляция адренергических симпатических нервов нарушает развитие и диссеминацию опухоли при раке предстательной железы и желудка in vivo 1,2,3, в то время как фармакологическая блокада адренергических рецепторов ингибирует рост опухоли при раке головы и шеи4. Вовлечение симпатической нервной системы также было описано при прогрессировании карциномы поджелудочной, шейной и базальноклеточной карциномы 5,6,7.
В симпатической нервной системе верхний шейный ганглий (SCG) является единственным ганглием симпатического ствола, который иннервирует голову. SCG регулирует различные физиологические функции, такие как секреция слюны и циркадный ритм, и непосредственно иннервирует шейные лимфатические узлы 8,9,10. SCG также участвует в патологических процессах, таких как дегенерация желтого пятна11 и прогрессирование расслоения аорты12. Кроме того, сообщалось, что резекция SCG усугубляет острое повреждение почек, вызванное ишемической реперфузией13, а также изменяет микробиоту кишечника у крыс14.
Полная абляция SCG на мышиной модели представляет собой ценный экспериментальный метод для исследования рака и вегетативной нервной системы. В то время как во многих исследованиях использовалась фармакологическая блокада адренергических рецепторовв качестве адренергической абляции 15,16,17,18,19,20, хирургическая резекция позволяет провести полную, одностороннюю адренергическую абляцию, избегая при этом необходимости повторного фармакологического вмешательства и связанных с ним побочных эффектов 21,22,23.
Хирургическая резекция SCG была описана у крыс24, и в большинстве отчетов, изучающих эффект верхней шейной ганглионэктомии (SCGx), использовалась модель крыс. По сравнению с моделью на крысах, SCGx технически более сложен для мышей из-за небольшого размера SCG. Тем не менее, с мышами сравнительно легче обращаться, они более экономичны и более поддаются генетическим манипуляциям. Garcia et al. были одними из первых, кто сообщил о SCGx у мышей, и было обнаружено, что он влияет на высвобождение инсулина25. Совсем недавно Ziegler et al. описали SCGx у мышей на основе опубликованной методики, описанной на крысах24,26. В этой и других статьях описывается метод, при котором сначала идентифицируется и рассекается общая сонная артерия (КЦА), а затем удаляется СКГ из бифуркации ССА 21,22,27,28. В данной статье описана менее инвазивная и более безопасная методика на мышах, которая позволяет избежать рассечения КЦА, тем самым минимизируя самое серьезное осложнение этой процедуры – кровотечение из травмы КЦА.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase Antibody</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AB152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Tears Lubricant Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-162-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curity 2 x 2 Inch Gauze Sponge 8 Ply, Sterile</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>1806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Derf Needle Holder</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>1177K00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #7b Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11270-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ETHILON Nylon Suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>698H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors - ToughCut</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypoallergenic Surgical Tape</td>
			<td>3M Blenderm</td>
			<td>70200419342</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction Chamber, 2 Liter</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>941444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>1001936060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair</td>
			<td>Church &#38; Dwight Co., Inc</td>
			<td>40002957</td>
			<td>chemical hair removing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NORADRENALINE RESEARCH ELISA</td>
			<td>Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics)</td>
			<td>BA E-5200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG Mouse</td>
			<td>Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:005557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine Swabstick</td>
			<td>PDI</td>
			<td>S41350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcol Alcohol Preps</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>5110</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical technique for superior cervical ganglionectomy in a murine model

Все больше данных свидетельствуют о том, что симпатическая нервная система играет важную роль в прогрессировании рака. Адренергическая иннервация регулирует секрецию слюнных желез, циркадный ритм, дегенерацию желтого пятна, иммунную функцию и физиологию сердца. Мышиная хирургическая симпатэктомия – это метод изучения эффектов адренергической иннервации, позволяющий проводить полную, одностороннюю адренергическую абляцию, избегая при этом необходимости повторного фармакологического вмешательства и связанных с ним побочных эффектов. Тем не менее, хирургическая симпатэктомия у мышей технически сложна из-за небольшого размера верхнего шейного ганглия. В этом исследовании описывается хирургическая техника для надежной идентификации и резекции верхнего шейного ганглия для абляции симпатической нервной системы. Успешная идентификация и удаление ганглия подтверждаются визуализацией флуоресцентных симпатических ганглиев с использованием трансгенной мыши, выявлением пострезекционного синдрома Горнера, окрашиванием на адренергические маркеры в резецированных ганглиях и наблюдением сниженной адренергической иммунофлюоресценции в органах-мишенях после симпатэктомии. Эта модель позволяет в будущем изучать прогрессирование рака, а также другие физиологические процессы, регулируемые симпатической нервной системой.

Этот протокол описывает хирургическое удаление SCG на мышиной модели. На рисунке 2 показаны анатомические ориентиры, включая CCA, переднюю яремную вену и SCG. При рассечении (рис. 2А) видна правая передняя яремная вена, проходящая вдоль латеральной границы тра...

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model at JoVE.com

Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model

Настоящий протокол описывает мышиную модель абляции адренергической иннервации путем идентификации и резекции верхнего шейного ганглия.

Хирургическая техника ганглионэктомии верхнего шейного отдела позвоночника на мышиной модели

Growing evidence suggests that the sympathetic nervous system plays an important role in cancer progression. Adrenergic innervation regulates salivary ...

Симпатическая нервная система играет важную роль в прогрессировании рака и других заболеваний. Хирургическая симпатэктомия является ценным методом изучения этих процессов путем индуцирования полной односторонней адренергической абляции. Эта методика позволяет избежать побочных эффектов, связанных с фармакологическим торможением симпатической нервной системы.Кроме того, он является менее инвазивным, чем ранее описанные методы, поскольку позволяет избежать рассечения сонной артерии. При выполнении этой техники может быть трудно войти в нужное пространство, где находится ганглий, и дифференцировать его от жира. Поэтому очень важно определить ориентир и практику.Анатомия выглядит немного иначе, когда она находится в движении и не расчленена, поэтому визуальная демонстрация дает лучшее руководство о том, как определить анатомический ориентир, который является ключевым для этой техники. Начните с нанесения местной офтальмологической мази на мышь под наркозом, чтобы предотвратить травмы и сухость глаз. Поместите мышь под препарирующий микроскоп с тыльной стороны и поддерживайте ингаляционную анестезию с помощью прецизионного испарителя и носового конуса.Закрепите обе передние конечности гипоаллергенной лентой. Выбритую вентральную часть шеи очистить повидон-йодом, а затем протереть 70%-ным спиртом. Повторив процесс очистки еще два раза, наложите стерильную простыню на место операции.Затем с помощью маленьких ножниц сделайте 1,5-сантиметровый разрез кожи по средней линии на вентральной стороне шеи примерно на два миллиметра ниже подбородка до двух миллиметров выше грудинной выемки. Отделите кожу от нижележащей фасции, вставив заостренные ножницы под кожу с каждой стороны и распределив. Затем втяните края кожи латерально щипцами, чтобы обнажить подлежащую фасцию и подчелюстные слюнные железы.Потяните подчелюстные железы каудально щипцами, чтобы выявить нижележащие мышцы. Затем найдите место соединения задней части живота двугубой мышцы и подъязычной мышцы. Введите кончик щипцов под углом 45 градусов в это соединение латерально к передней яремной вене, чтобы проколоть и расширить отверстие в вышележащей глубокой шейной фасции.Держите это окно открытым с помощью щипцов, расположенных под углом 45 градусов, и расширяйте это отверстие шире, выполняя маневры разбрасывания с парой изогнутых щипцов в другой руке. Локализуют верхний шейный ганглий или СКГ на боковой стенке выявленного пространства. Удерживая отверстие щипцами другой рукой, осторожно возьмитесь щипцами за SCG и вытащите его из отверстия, чтобы он был лучше виден.Как только SCG окажется в поле зрения, возьмитесь за боковое основание SCG, где он все еще прикреплен к окружающим тканям. Используя другую руку, медленно и осторожно втяните SCG в вентральном и каудальном направлении несколько раз, чтобы постепенно удалить ганглий. Сохраняйте ганглий нетронутым во время этого маневра, чтобы убедиться, что не осталось остаточных остатков ганглия.Медленно освободите основание ганглия и проверьте наличие кровотечения, обратив внимание на скопление крови. После этого переместите слюнные железы обратно в их нормальное анатомическое положение. Приблизите и закройте кожу с помощью простых прерывистых нейлоновых швов 5-0.Во время рассечения правая передняя яремная вена проходила вдоль латеральной границы трахеи. При исследовании трансгенной мыши P0 tdTomato с красными флуоресцентными нейронами под флуоресцентным микроскопом наблюдался флуоресцентный блуждающий нерв, идущий латерально к общей сонной артерии, а флуоресцентный SCG наблюдался на бифуркации общей сонной артерии латеральнее передней яремной вены. Резецированный SCG у трансгенной мыши был подтвержден его красной флуоресценцией по сравнению с нефлуоресцентным контролем SCG.Иммунофлуоресцентное окрашивание подтвердило наличие тирозингидроксилазы, маркера адренергических нервов. После ганглионэктомии верхнего шейного отдела позвоночника наблюдался птоз, то есть опущение века, что является признаком синдрома Горнера. Иммунофлуоресцентное окрашивание тирозингидроксилазы на правой подчелюстной слюнной железе после правой верхней шейной ганглионэктомии подтвердило успешную абляцию адренергической сигнализации при отсутствии окрашивания нервов тирозингидроксилазой.Напротив, левая контрольная подчелюстная железа сохранила свой адренергический вход и не повреждала окрашивание нервов тирозингидроксилазой, что также было подтверждено количественным определением. Количественное определение норадреналина в слюнной железе методом ИФА подтвердило достоверное снижение экспрессии норадреналина в подчелюстной железе на стороне верхнего шейного ганглионэктомии по сравнению с контрольной стороной симуляции хирургического вмешательства. Будьте терпеливы и аккуратны при удалении SCG.Удаляйте его медленно, по частям. В противном случае сонная артерия, соединенная с SCG, может быть легко повреждена, что приведет к кровотечению.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Detailed Protocol for Characterizing the Murine C1498 Cell Line and its Associated Leukemia Mouse Model

Подробный протокол Характеризуя клеточной линии мышиной C1498 и его модель Associated Лейкоз Mouse

The intravenous injection of C1498 cells into syngeneic or congenic mice has been performed since 1941. These injections result in the development of ...

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

<em&gt; Drosophila</em&gt; Имаджинальное Disc Опухоль Модель: Визуализация и Количественная экспрессии генов и опухолевой инвазии с использованием генетических Мозаики

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Хирургические процедуры и методология для модели доклинической мужи<em&gt; Де Ново</em&gt; Метастазы рака молочной железы

A rate-limiting aspect of transgenic mouse models of mammary adenocarcinoma is that primary tumor burden in mammary tissue typically defines study ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

Опухоль Модель и опухолевой мышиной цистопластики Система обнаружения

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Мышь Модель усталости, индуцированный Peripheral Облучение

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

В естественных условиях мышиных седалищного нерва модель рассасывании вторжения

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve ...

The Application of 1% Methylene Blue Dye As a Single Technique in Breast Cancer Sentinel Node Biopsy

Применение 1% Метиленовый голубой краситель как единый метод в рак молочной железы Sentinel Узел биопсии

In this study, we injected 1% methylene blue dye (MBD) into the subareolar or peritumoral space of the breast. In the case of breast conserving surgery ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

Биолюминесцентных и флуоресцентный ортотопическая сингенных мышиных модель андроген зависимых и кастрация стойкие рака простаты

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

An Orthotopic Resectional Mouse Model of Pancreatic Cancer

Ортотопическая резекционная мышиная модель рака поджелудочной железы

There is a lack of satisfactory animal models to study adjuvant and/or neoadjuvant therapy in patients being considered for surgery of pancreatic cancer ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

Модель ксенотрансплантата мышиной оммая для изучения прямой таргетной терапии лептоменингеальной болезни

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...