Name: dynamic continuous blood extraction from rat heart via noninvasive microdialysis technique
Uploaded: 2022-09-13T15:00:00
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Ce travail a été soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (82104533), la Fondation chinoise des sciences postdoctorales (2020M683273), le Département des sciences et de la technologie de la province du Sichuan (2021YJ0175) et le projet de R&D clé du Plan provincial des sciences et technologies du Sichuan (2022YFS0438). En attendant, les auteurs tiennent à remercier M. Yuncheng Hong, ingénieur principal en équipement chez TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (Singapour, Singapour), pour avoir fourni des services techniques pour les techniques de microdialyse.

Le protocole animal a été approuvé par le Comité administratif de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (Numéro d’enregistrement: 2021-11). Des rats Sprague Dawley mâles (SD) exempts d’agents pathogènes spécifiés (8 à 10 semaines, 260 à 300 g) ont été élevés dans des cages de ventilation indépendantes, maintenant l’environnement de laboratoire à 22 °C et à 65 % d’humidité relative, et ont été utilisés pour la présente étude. Les animaux ont été obtenus d’une ...

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	<li>van Rensburg, W. J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-mortem+evidence+of+a+diverse+distribution+pattern+of+atherosclerosis+in+the+South+African+population.">Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population.</a> Scientific Reports. 12 (1), 11366 (2022).</li><li>Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+disease+prevention+and+management+of+pre-existent+cardiovascular+disease+in+a+cohort+of+prostate+cancer+survivors.">Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors.</a> Journal of Cancer Survivorship. , (2022).</li><li>R&#248;devand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+disease+risk+in+people+with+severe+mental+disorders:+an+update+and+call+for+action.">Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action.</a> Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).</li><li>Izumi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+circulating+cathepsin+K+on+the+coronary+calcification+and+the+clinical+outcome+in+chronic+kidney+disease+patients.">Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients.</a> Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).</li><li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whey+protein+hydrolysate+alleviated+atherosclerosis+and+hepatic+steatosis+by+regulating+lipid+metabolism+in+apoE-/-+mice+fed+a+Western+diet.">Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet.</a> Food Research International. 157, 111419 (2022).</li><li>Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nesfatin-1+in+cardiovascular+orchestration:+From+bench+to+bedside.">Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside.</a> Pharmacological Research. 156, 104766 (2020).</li><li>Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+LC-MS/MS+method+for+evaluating+lung+penetration+of+tobramycin+in+rats+by+microdialysis.">Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).</li><li>Anderzhanova, E., Wotjak, C. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdialysis+and+microperfusion+electrodes+in+neurologic+disease+monitoring.">Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring.</a> Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52 (2021).</li><li>Young, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microdialysis.">Cerebral microdialysis.</a> Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).</li><li>O'Connell, M. 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F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microdialysis+as+a+tool+for+assessing+the+delivery+of+chemotherapy+in+brain+tumor+patients.">Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients.</a> World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).</li><li>S&#248;rensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdialysis+in+equine+research:+a+review+of+clinical+and+experimental+findings.">Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings.</a> Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).</li><li>Dmitrieva, N., Rodr&#237;guez-Malaver, A. 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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=School+racial+segregation+and+long-term+cardiovascular+health+among+Black+adults+in+the+US:+A+quasi-experimental+study.">School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study.</a> PLoS Medicine. 19 (6), 1004031 (2022).</li><li>Qin, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+m6A+RNA+methylation+in+cardiovascular+disease+(Review).">Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review).</a> International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).</li><li>Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. 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B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+blood+collection+techniques+in+mice+and+their+effects+on+welfare.">A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).</li><li>Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetic+applications+of+cutaneous+microdialysis:+Continuous+intermittent+vs+continuous-only+sampling.">Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).</li><li>Reyes-Garc&#233;s, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+brain+sampling+using+a+microextraction+probe+reveals+metabolic+changes+in+rodents+after+deep+brain+stimulation.">In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation.</a> Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).</li><li>Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+microdialysis+calibration+methods:+the+theory+and+current+related+efforts.">A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts.</a> Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).</li><li>Zhuang, L. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theory+and+application+of+microdialysis+in+pharmacokinetic+studies.">Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies.</a> Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).</li><li>Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+monitoring+in+traumatic+brain+injury:+microdialysis.">Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis.</a> Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).</li><li>Brunner, M., Langer, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdialysis+versus+other+techniques+for+the+clinical+assessment+of+in+vivo+tissue+drug+distribution.">Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution.</a> The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).</li><li>Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+dermal+microdialysis+for+the+evaluation+of+bioequivalence+of+a+ketoprofen+topical+gel.">Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).</li><li>Dhanani, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+rates+of+combination+antibiotic+therapy+using+in+vitro+microdialysis+simulating+in+vivo+conditions.">Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions.</a> Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).</li></ol>

Les MCV sont une maladie chronique courante dans les cliniques dont l’incidence augmente progressivement en Chine, et l’âge d’apparition a tendance à être plus jeune, provoquant l’inquiétude et la panique de la plupart des patients20,21. Étant la principale cause de décès dans le monde, les MCV peuvent induire un infarctus cérébral et d’autres maladies à forte mortalité, menaçant gravement la vie saine des patients22....

Avec l’accélération du rythme de vie et l’augmentation de la pression psychologique, les maladies cardiovasculaires (MCV) ont tendance à survenir chez les jeunes, les personnes d’âge moyen et les personnes âgées 1,2. La morbidité et la mortalité des MCV sont élevées, avec les caractéristiques d’apparition aiguë, de progression rapide et d’évolution longue de la maladie, qui affectent gravement la sécurité des patients3. L’apparition de MCV peut être étroitement liée aux changements dans certains composants sanguins, tels que le cholestérol, les lipides sériques, la glycémie, les enzymes myocardiques et la protéine kinase K 4,5,6. La situation pertinente du patient peut être gérée plus rapidement en analysant les éléments d’examen sanguin de routine. Par conséquent, la qualité des échantillons de sang détermine la précision des résultats des tests. Cependant, les méthodes conventionnelles de prélèvement sanguin présentent des inconvénients inévitables, qui affectent sérieusement les résultats expérimentaux, tels qu’une grande zone de traumatisme, un petit volume de collecte de sang, des exigences élevées pour les opérateurs, l’incapacité de refléter les changements de médicaments en temps réel, un prétraitement fastidieux des échantillons de sang, une consommation importante d’animaux de laboratoire et le non-respect des exigences éthiques animales 7,8,9 . Avec les progrès continus de la technologie médicale, la qualité de la collecte de sang a également mis en avant des exigences plus élevées. Par conséquent, il est urgent de développer une nouvelle technologie de prélèvement sanguin pour surmonter les lacunes ci-dessus.
La microdialyse est une technique d’échantillonnage in vivo basée sur les principes de dialyse10. Dans des conditions de non-équilibre, les composés à mesurer sont diffusés et perfusés du tissu le long du gradient de concentration dans la sonde de microdialyse intégrée dans le tissu dans le dialysat, qui est continuellement éliminée avec le dialysat, atteignant le but d’échantillonnage du tissu vivant11,12. Par rapport aux méthodes d’échantillonnage traditionnelles, la technique de microdialyse présente de splendides avantages dans les aspects suivants13,14,15: suivi continu en temps réel des changements de divers composés dans le sang; l’échantillonnage ne nécessite aucun prétraitement fastidieux et peut réellement représenter la concentration du composé cible sur le site d’échantillonnage; les sondes peuvent être implantées dans différentes parties du corps pour étudier l’absorption, la distribution, le métabolisme, l’excrétion et la toxicité des composés cibles; l’échantillon acquis ne contient pas de macromolécules biologiques (>20 kD). Par conséquent, les échantillons de sang de meilleure qualité assurent une meilleure interprétation des MCV et du mécanisme traité par la médecine ethnique.
Les systèmes d’échantillonnage de microdialyse se composent généralement de pompes de micro-injection, de tubes de raccordement, de réservoirs de mouvement sans animaux, de sondes de microdialyse et de collecteursd’échantillons 16. En tant que partie la plus critique du dispositif du système de microdialyse, les sondes de microdialyse courantes comprennent des sondes concentriques, des sondes flexibles, des sondes linéaires et des sondes de dérivation17. Parmi celles-ci, les sondes flexibles sont des sondes souples et non métalliques, principalement utilisées pour prélever des échantillons dans les vaisseaux sanguins et les tissus périphériques tels que le cœur, les muscles, la peau et la graisse d’animaux éveillés et en mouvement libre ou anesthésiés13. Lorsqu’elle est en contact avec des vaisseaux sanguins ou des tissus, la sonde peut être pliée de manière flexible, évitant ainsi des dommages irréversibles à la sonde ou au site d’échantillonnage. Avec le développement continu de la technologie des sondes, l’application de la technologie de microdialyse dans divers domaines s’approfondit également. Dans cet article, le sang de cœur de rat a été acquis de manière dynamique et continue par la technologie de microdialyse non invasive grâce à la sonde flexible conçue pour la collecte de sang.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Animal anesthesia system</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>R500IE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal temperature maintainer</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>69020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood microdialysis probe</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>T55347</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catheter</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>T55347</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citrate</td>
			<td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>251275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric shaver</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>CP-5200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fep tubing</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>3409501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Free movement tank for animals</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>CMA120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>F21020-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>Beyotime Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>FS221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdialysis collection tube</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>7431100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdialysis collector</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>CMA4004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdialysis in vitro stand</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>CMA130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdialysis microinjection pump</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>788130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdialysis syringe (1.0 mL)</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>8309020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdialysis tubing adapter</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>3409500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microporous filter membrane</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>R0DB36622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-absorbable surgical sutures</td>
			<td>Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd</td>
			<td>S19004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating table</td>
			<td>Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd</td>
			<td>30153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic forceps</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>F12016-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate</td>
			<td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>1613859</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley&#160; (SD) rats</td>
			<td>Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd</td>
			<td>SYXK(<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64531/64531eq01.jpg" style="margin: auto;" />)2019-049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>S14014-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd</td>
			<td>BY-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe needle</td>
			<td>&#160;CMA Microdialysis AB</td>
			<td>T55347</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd</td>
			<td>KMH1-240W8101</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
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dynamic continuous blood extraction from rat heart via noninvasive microdialysis technique

L’analyse dynamique des composants sanguins est d’une grande importance pour comprendre les maladies cardiovasculaires et leurs maladies connexes, telles que l’infarctus du myocarde, l’arythmie, l’athérosclérose, l’œdème pulmonaire cardiogénique, l’embolie pulmonaire et l’embolie cérébrale. Dans le même temps, il est urgent de percer la technique de prélèvement sanguin cardiaque continu chez les rats vivants afin d’évaluer l’efficacité de la thérapie de médecine ethnique distinctive. Dans cette étude, une sonde de microdialyse sanguine a été implantée dans la veine jugulaire droite de rats lors d’une intervention chirurgicale précise et non invasive. Des échantillons de sang cardiaque ont ensuite été prélevés à un débit de 2,87 nL/min à 2,98 mL/min en se connectant à un système de prélèvement d’échantillons de microdialyse en ligne. Plus important encore, les échantillons de sang acquis peuvent être stockés temporairement dans des récipients de microdialyse à 4 ° C. Le programme de collecte continue de sang en ligne basé sur la microdialyse sur le cœur de rat a grandement garanti la qualité des échantillons de sang, faisant progresser et dynamisant la rationalité scientifique de la recherche sur les maladies cardiovasculaires systémiques et évaluant la thérapie ethnomédicale du point de vue de l’hématologie.

Le protocole actuel a permis d’obtenir le sang cardiaque de rats conscients selon les paramètres d’échantillonnage définis dans l’équipement de microdialyse. Les échantillons de sang normaux doivent être rouge vif, tandis que les animaux atteints d’hypoxie, de caillots sanguins potentiels ou de maladie anémique peuvent avoir un violet foncé ou un rouge foncé. Les échantillons obtenus par la technique de microdialyse sanguine sont incolores, clairs et transparents, ce qui peut être utilisé pour analyse...

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Dynamic Continuous Blood Extraction from Rat Heart via Noninvasive Microdialysis Technique

Le présent protocole décrit une méthode simple et efficace pour la collecte dynamique et en temps réel du sang de cœur de rat à l’aide de la technique de microdialyse.

Extraction dynamique continue de sang du cœur de rat par une technique de microdialyse non invasive

Dynamic analysis of blood components is of great importance in understanding cardiovascular diseases and their related diseases, such as myocardial ...

Notre technique dynamique de collecte continue de sang à partir d’un cœur de rat est très importante pour analyser les composants sanguins, contribuant ainsi à la compréhension des maladies cardiovasculaires et de leurs maladies connexes. Par rapport aux méthodes d’échantillonnage traditionnelles, cette technique présente les avantages d’être in vivo, en temps réel, dynamique et non invasive, sans micromolécules biologiques et sans prétraitement d’échantillon de titre pour un test étranger. Cette technique n’est pas seulement applicable aux maladies cardiovasculaires, mais devrait également fonctionner pour le diagnostic et le traitement des maladies en détectant les biomarqueurs sanguins combinés à la chromatographie liquide en phase élevée et à la spectrométrie de masse.Cette méthode peut être utilisée pour étudier les maladies cardiovasculaires telles que l’infarctus du myocarde, l’apnée et l’athérosclérose. En outre, il s’applique également à l’œdème pulmonaire cardiogénique et à l’embolie pulmonaire et cérébrale. Après avoir effectué la préparation expérimentale, fixez l’entrée de la sonde de l’unité de dialyse avec l’aiguille de la seringue, l’adaptateur de tubulure et la tubulure FEP.Vérifiez la perméabilité du système de tuyauterie de microdialyse en perfusant une solution anticoagulante de citrate de dextrose dans le système de tuyauterie. Faites une incision pour exposer la veine jugulaire droite par dissection contondante des tissus mous et du fascia périvasculaire. À l’aide d’une suture chirurgicale 4-0, faites un nœud glissant détachable dans la veine jugulaire droite à l’extrémité distale du cœur pour bloquer temporairement le flux sanguin.Ensuite, faites une incision dans la veine jugulaire droite près du cœur. Insérez un stylet de cathéter en forme d’aiguille dans la veine jugulaire droite vers l’extrémité proximale du cœur du rat. Insérez la sonde de microdialyse sanguine dans un cathéter et implantez la sonde avec une pince ophtalmique le long de l’incision oblique du stylet du cathéter.Retirez le stylet du cathéter guidé et immergez complètement la membrane semi-perméable de la sonde dans la veine jugulaire droite. Démêlez le nœud glissant détachable à l’extrémité distale du cœur pour rétablir le flux sanguin dans la veine jugulaire droite. Ensuite, utilisez des sutures chirurgicales 4-0 pour ligaturer la sonde avec la veine jugulaire droite.Placez le rat éveillé dans un réservoir en mouvement libre et connectez la sonde au système de microdialyse. Ensuite, irriguer la solution anticoagulante de citrate de dextrose à raison de deux microlitres par minute pendant une heure pour équilibrer la membrane de dialyse de la sonde. Prélever des échantillons de sang de microdialyse et les conserver temporairement dans un contenant fractionné de quatre degrés Celsius.Pour reconfirmer que la sonde est dans la veine jugulaire droite, disséquez le rat. Retirez la sonde de microdialyse de la veine jugulaire droite et mettez-la dans de l’eau ultrapure. Connectez la sonde au pipeline et rincez pendant la nuit à l’eau ultrapure pour éliminer soigneusement le sel résiduel dans le tuyau et la sonde.Les échantillons de sang normaux apparaissaient rouge vif tandis que des caillots sanguins potentiels ont été observés dans des échantillons hypoxiques. Les échantillons obtenus par la technique de microdialyse sanguine étaient incolores, clairs et transparents. Pour éviter la destruction de la membrane et le glissement ou le déplacement de la sonde, nous devons faire attention lorsque nous plaçons et immergeons la sonde dans la veine jugulaire du rat.Les échantillons de sang obtenus grâce à la technique de microdialyse peuvent être utilisés pour analyser les biomarqueurs de différentes maladies et la distribution sanguine de médicaments et de métabolites rares.

Research

JoVE Journal

Medicine

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