Design and Construction of the sgRNA/crRNA Expression Cassette
1:47
dCas12a and Ant‐CRISPR Protein Engineering and Plasmid Construction
2:38
Immunofluorescence to Detect Cas Proteins
4:04
Data Acquisition: FACS and Data Analysis
7:19
Results: Efficiency of Both dCas9 and dCas12a‐Based Repressors and Activators in Yeast
10:20
Conclusion
Transcript
Unser Protokoll erklärt, wie digitale Schaltkreise von Hefegenen entworfen, aufgebaut und analysiert werden, die CRISPR-dCas-Systeme vom Typ zwei und fünf und die entsprechenden Anti-CRISPR-Proteine verwenden. Es ist ein Assemblierungsaufenthalt,
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CRISPR-Cas-Systeme und Anti-CRISPR-Proteine wurden in das Schema der Booleschen Gates in Saccharomyces cerevisiae integriert. Die neuen kleinen Logikschaltkreise zeigten eine gute Leistung und vertieften das Verständnis sowohl von dCas9/dCas12a-basierten Transkriptionsfaktoren als auch von den Eigenschaften von Anti-CRISPR-Proteinen.