Research
Education
Sign In
EN
EN - English
CN - 中文
DE - Deutsch
ES - Español
KR - 한국어
IT - Italiano
FR - Français
PT - Português
TR - Turkish
JA - Japanese
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
1.4K Views
•
10:46 min
October 18th, 2022
DOI :
10.3791/64539-v
Chapters
0:05
Introduction
0:35
Design and Construction of the sgRNA/crRNA Expression Cassette
1:47
dCas12a and Ant‐CRISPR Protein Engineering and Plasmid Construction
2:38
Immunofluorescence to Detect Cas Proteins
4:04
Data Acquisition: FACS and Data Analysis
7:19
Results: Efficiency of Both dCas9 and dCas12a‐Based Repressors and Activators in Yeast
10:20
Conclusion
Transcript
私たちのプロトコルは、タイプ2およびタイプ5のCRISPR dCasシステムと対応する抗CRISPRタンパク質を利用する酵母遺伝子デジタル回路を設計、構築、および分析する方法を説明しています。サービスで合成転写ネットワークを組み立ててテストするための標準的な手順がゼロであるため、アセンブリステイです。まず、20〜40ナノグラムのDNAテンプレート、1マイクロリットルのフォワードプライマー、1マイクロリットルのリバースプライマー、5マイクロリットルのDNTPミックス、0.5マイクロリットルの
Sign in or start your free trial to access this content
Summary
CRISPR-Cas系および抗CRISPRタンパク質は、 出芽酵母のブールゲートのスキームに統合されました。新しい小型論理回路は良好な性能を示し、dCas9/dCas12aベースの転写因子と抗CRISPRタンパク質の特性の両方の理解を深めました。
Explore More Videos
Privacy
Terms of Use
Policies
Contact Us
Recommend to library
JoVE NEWSLETTERS
JoVE Journal
Methods Collections
JoVE Encyclopedia of Experiments
Archive
JoVE Core
JoVE Business
JoVE Science Education
JoVE Lab Manual
Faculty Resource Center
Authors
Librarians
Access
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved