Name: tick artificial membrane feeding for ixodes scapularis
Uploaded: 2022-11-30T14:00:00
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1. टिक झिल्ली कक्ष तैयार करना
<ol><li>एक सपाट, गैर-छिद्रपूर्ण सतह तैयार करें जैसे कि कांच का एक विमान या हाथ स्टैंड का सिरेमिक-लेपित धातु आधार इसे 70% इथेनॉल के साथ पोंछकर और फिर इसे प्लास्टिक रैप की एक पर...

<ol>
	<li>Rosenberg, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs:+trends+in+reported+vectorborne+disease+cases+-+United+States+and+territories,+2004-2016.">Vital signs: trends in reported vectorborne disease cases - United States and territories, 2004-2016.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 67 (17), 496-501 (2018).</li><li>Busch, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Widespread+movement+of+invasive+cattle+fever+ticks+(Rhipicephalus+microplus)+in+southern+Texas+leads+to+shared+local+infestations+on+cattle+and+deer.">Widespread movement of invasive cattle fever ticks (Rhipicephalus microplus) in southern Texas leads to shared local infestations on cattle and deer.</a> Parasites &amp; Vectors. 7, 188 (2014).</li><li>S&#252;ss, J., Klaus, C., Gerstengarbe, F. W., Werner, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+makes+ticks+tick?+Climate+change,+ticks,+and+tick-borne+diseases.">What makes ticks tick? Climate change, ticks, and tick-borne diseases.</a> Journal of Travel Medicine. 15 (1), 39-45 (2008).</li><li>Gray, J. S., Dautel, H., Estrada-Pe&#241;a, A., Kahl, O., Lindgren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+climate+change+on+ticks+and+tick-borne+diseases+in+Europe.">Effects of climate change on ticks and tick-borne diseases in Europe.</a> Interdisciplinary Perspectives on Infectious Diseases. 2009, 593232 (2009).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of Ticks. , (1991).</li><li>Schwan, T. G., Piesman, J., Golde, W. T., Dolan, M. C., Rosa, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+an+outer+surface+protein+on+Borrelia+burgdorferi+during+tick+feeding.">Induction of an outer surface protein on Borrelia burgdorferi during tick feeding.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 92 (7), 2909-2913 (1995).</li><li>Massung, R. F., Priestley, R. A., Miller, N. J., Mather, T. N., Levin, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inability+of+a+variant+strain+of+Anaplasma+phagocytophilum+to+infect+mice.">Inability of a variant strain of Anaplasma phagocytophilum to infect mice.</a> The Journal of Infectious Diseases. 188 (11), 1757-1763 (2003).</li><li>Koci, J., Bernard, Q., Yang, X., Pal, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Borrelia+burgdorferi+surface+protein+Lmp1+facilitates+pathogen+dissemination+through+ticks+as+studied+by+an+artificial+membrane+feeding+system.">Borrelia burgdorferi surface protein Lmp1 facilitates pathogen dissemination through ticks as studied by an artificial membrane feeding system.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1910 (2018).</li><li>Levin, M. L., Schumacher, L. B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+for+maintenance+of+multi-host+ixodid+ticks+in+the+laboratory.">Manual for maintenance of multi-host ixodid ticks in the laboratory.</a> Experimental and Applied Acarology. 70 (3), 343-367 (2016).</li><li>Hart, T., Yang, X., Pal, U., Lin, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Lyme+borreliae+proteins+promoting+vertebrate+host+blood-specific+spirochete+survival+in+Ixodes+scapularis+nymphs+using+artificial+feeding+chambers.">Identification of Lyme borreliae proteins promoting vertebrate host blood-specific spirochete survival in Ixodes scapularis nymphs using artificial feeding chambers.</a> Ticks and Tick-Borne Diseases. 9 (5), 1057-1063 (2018).</li><li>Hart, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+tropism+determination+by+convergent+evolution+of+immunological+evasion+in+the+Lyme+disease+system.">Host tropism determination by convergent evolution of immunological evasion in the Lyme disease system.</a> PLoS Pathogens. 17 (7), (2021).</li><li>Bernard, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasticity+in+early+immune+evasion+strategies+of+a+bacterial+pathogen.">Plasticity in early immune evasion strategies of a bacterial pathogen.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 115 (16), 3788-3797 (2018).</li><li>Pierce, A. E., Pierce, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+note+on+the+cultivation+of+Boophilus+microplus+(Canestrini,+1887)+(Ixodidae:+Acarina)+on+the+embyonated+hen+egg.">A note on the cultivation of Boophilus microplus (Canestrini, 1887) (Ixodidae: Acarina) on the embyonated hen egg.</a> Australian Veterinary Journal. 32 (6), 144-146 (1956).</li><li>Doube, B. M., Kemp, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+temperature,+relative+humidity+and+host+factors+on+the+attachment+and+survival+of+Boophilus+microplus+(Canestrini)+larvae+to+skin+slices.">The influence of temperature, relative humidity and host factors on the attachment and survival of Boophilus microplus (Canestrini) larvae to skin slices.</a> International Journal for Parasitology. 9 (5), 449-454 (1979).</li><li>Kr&#246;ber, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vitro+feeding+assay+to+test+acaricides+for+control+of+hard+ticks.">An in vitro feeding assay to test acaricides for control of hard ticks.</a> Pest Management Science. 63 (1), 17-22 (2007).</li><li>Kuhnert, F., Diehl, P. A., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+life-cycle+of+the+bont+tick+Amblyomma+hebraeum+in+vitro.">The life-cycle of the bont tick Amblyomma hebraeum in vitro.</a> International Journal for Parasitology. 25 (8), 887-896 (1995).</li><li>Kr&#246;ber, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Andrade, J. J., Xu, G., Rich, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+silicone+membrane+for+in+vitro+feeding+of+Ixodes+scapularis+(Ixodida:+Ixodidae).">A silicone membrane for in vitro feeding of Ixodes scapularis (Ixodida: Ixodidae).</a> Journal of Medical Entomology. 51 (4), 878-879 (2014).</li><li>Oliver, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+of+immature+Ixodes+scapularis+(Acari:+Ixodidae)+by+membrane+feeding.">Infection of immature Ixodes scapularis (Acari: Ixodidae) by membrane feeding.</a> Journal of Medical Entomology. 53 (2), 409-415 (2016).</li><li>Oliver, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+dynamics+and+antibiotic+elimination+of+symbiotic+Rickettsia+buchneri+in+the+tick+Ixodes+scapularis+(Acari:+Ixodidae).">Growth dynamics and antibiotic elimination of symbiotic Rickettsia buchneri in the tick Ixodes scapularis (Acari: Ixodidae).</a> Applied and Environmental Microbiology. 87 (3), (2021).</li><li>Graham, E. E., Poland, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+Fluon+conditioning+for+capturing+cerambycid+beetles+in+different+trap+designs+and+persistence+on+panel+traps+over+time.">Efficacy of Fluon conditioning for capturing cerambycid beetles in different trap designs and persistence on panel traps over time.</a> Journal of Economic Entomology. 105 (2), 395-401 (2012).</li><li>Munderloh, U. G., Liu, Y., Wang, M., Chen, C., Kurtti, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment,+maintenance+and+description+of+cell+lines+from+the+tick+Ixodes+scapularis.">Establishment, maintenance and description of cell lines from the tick Ixodes scapularis.</a> Journal of Parasitology. 80 (4), 533-543 (1994).</li><li>Lehane, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+single+and+coinfections+of+human+pathogens+in+Ixodes+ticks+from+five+geographical+regions+in+the+United+States,+2013-2019.">Prevalence of single and coinfections of human pathogens in Ixodes ticks from five geographical regions in the United States, 2013-2019.</a> Ticks and Tick-Borne Diseases. 12 (2), (2021).</li><li>Gonz&#225;lez, J., Bickerton, M., Toledo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+artificial+membrane+feeding+for+ixodid+ticks.">Applications of artificial membrane feeding for ixodid ticks.</a> Acta Tropica. 215, (2021).</li><li>Kr&#243;l, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+transmission+paths+for+three+different+Bartonella+spp.+in+Ixodes+ricinus+ticks+using+artificial+feeding.">Evaluating transmission paths for three different Bartonella spp. in Ixodes ricinus ticks using artificial feeding.</a> Microorganisms. 9 (5), 901 (2021).</li><li>Anderson, J. F., Magnarelli, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+of+ticks.">Biology of ticks.</a> Infectious Disease Clinics of North America. 22 (2), 195-215 (2008).</li></ol>

टिक्स का कृत्रिम झिल्ली भोजन विभिन्न प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के लिए एक उपयोगी उपकरण प्रदान करता है, लेकिन सभी अनुप्रयोगों के लिए पशु आहार को प्रतिस्थापित करने की संभावना नहीं है। जानवरों को खिलाने क...

टिक-जनित बीमारियां दुनिया भर में मनुष्यों और जानवरों के स्वास्थ्य को दृढ़ता से प्रभावित करती हैं, जो 2004 से 2016तक संयुक्त राज्य अमेरिका में सभी वेक्टर से जुड़ी बीमारियों के दो-तिहाई से अधिक के लिए जिम्मेदार हैं। इसके अतिरिक्त, हाल के वर्षों में मामलों की संख्या बढ़ रही है, जिसमें अधिक लोग और पशुधन टिक्स और उनकेसंबंधित रोगों से प्रभावित हो रहे हैं। जबकि मामले की संख्या में ऊपर की प्रवृत्ति के कई कारण हैं, बदलती जलवायु एक महत्वपूर्ण कारक 3,4 है। टिक-जनित रोग के मामलों की संख्या में अनुमानित चल रही वृद्धि टिक्स और उनके द्वारा संचारित रोगजनकों के बीच संबंधों की जांच करने के लिए नए उपकरण विकसित करने की आवश्यकता को रेखांकित करती है।
यह ज्ञात है कि टिक्स भोजन के दौरान शरीर विज्ञान और जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन से गुजरते हैं और ये परिवर्तन रोगज़नक़ संचरण 5,6 में भूमिका निभाते हैं। पशु मॉडल का उपयोग करके रोगज़नक़ संचरण और अधिग्रहण पर पूर्ण और आंशिक भोजन के प्रभावों की जांच करने वाले अध्ययन करना मुश्किल हो सकता है, खासकर उन स्थितियों में जहां कृंतक मॉडल किसी विशेष रोगज़नक़ द्वारा संक्रमण के लिए अतिसंवेदनशील नहीं होते हैं। उदाहरण के लिए, एनाप्लाज्मा फागोसाइटोफिलम वेरिएंट -1 स्ट्रेन स्वाभाविक रूप से इक्सोड्स स्कैपुलारिस और हिरण के बीच फैलता है, लेकिन चूहों को संक्रमित करने में असमर्थ है, जिससे प्रयोगशाला7 में टिक संक्रमण जटिल हो जाता है। ट्रांसजेनिक उत्परिवर्ती के उपयोग के माध्यम से बोरेलिया बर्गडोरफेरी जैसे रोगजनकों का अध्ययन करने में मदद करने के लिए कृत्रिम फीडिंग सिस्टम भी लागू किया जा सकता है जिसमें जीन विलोपन होता है जो संचरण या संक्रमण को रोकताहै। कृत्रिम आहार प्रणाली का उपयोग करने से शोधकर्ताओं को संक्रमण या संचरण को केवल टिक के पक्ष में होने की अनुमति देकर जीन की भूमिका को अलग करने में मदद मिलती है, जिससे किसी भी मेजबान प्रतिक्रिया को अलग किया जा सकता है जो इस तरह के अध्ययनों को भ्रमित कर सकता है।
इसी तरह, बीमारी और पशु संचरण में शामिल टिक्स के कुछ जीवन चरणों को सामान्य प्रयोगशाला मॉडल प्रजातियों पर फ़ीड करने के लिए प्रेरित नहीं किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, इक्सोड्स स्कैपुलारिस मादाओं को बड़े जानवरों पर खिलाया जाना चाहिए, आमतौर पर खरगोश9। जबकि अक्सर प्रयोगशाला प्रयोग के लिए सुलभ होता है, खरगोशों का उपयोग करने की प्रशासनिक और पशुपालन आवश्यकताएं छोटे कृन्तकों से अधिक होती हैं और कुछ प्रयोगशालाओं के लिए निषेधात्मक हो सकती हैं। अन्य टिक प्रजातियां, विशेष रूप से पशु चिकित्सा संबंधी चिंता के, मवेशियों या अन्य बड़े जानवरों पर खिलाया जाना चाहिए जो अधिकांश प्रयोगशालाओं में उपयोग करने के लिए व्यावहारिक नहीं हैं। इन विट्रो फीडिंग और संक्रमण के तरीके, जैसे कृत्रिम झिल्ली खिलाना, बड़े या विदेशी मेजबान जानवरों का उपयोग करने के विकल्प प्रदान करते हैं।
इसके अतिरिक्त, एक कृत्रिम भोजन प्रणाली का उपयोग कुछ विश्लेषणों की अनुमति देता है जो पारंपरिक पशु आहार विधियों के साथ संभव नहीं हो सकते हैं। ऐसा ही एक उदाहरण यह है कि, भोजन तंत्र से रक्त स्रोत को अलग करके, बी बर्गडॉर्फरी संचरण में विभिन्न मेजबानों के रक्त की भूमिका कीजांच संभव हो जाती है। मेजबान रक्त की यह परीक्षा और मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की अनुपस्थिति में रक्त स्वयं की भूमिका रोगज़नक़ संचरण चक्रों को समझने में सक्षम होने में एक महत्वपूर्ण कारक है और एक यह कि कृत्रिम भोजन प्रणाली11 का उत्तर देने में मदद करने में सक्षम है। मेजबान 8,12 में संचरण की सफलता और स्थापना की जांच करने के बजाय फ़ीड के दौरान एक रोगज़नक़ की सटीक संचरण संख्या को निर्धारित करना भी संभव हो जाता है।
हार्ड टिक के लिए बने कुछ पहले कृत्रिम भोजन झिल्ली 1950 और 1960 के दशक में जानवरों की खाल या पशु-व्युत्पन्न झिल्ली से बने थे। इन झिल्लियों की जैविक प्रकृति के कारण, नई झिल्ली के उत्पादन और शेल्फ जीवन दोनों के साथ समस्याएं थीं। 1990 के दशक में, पूरी तरह से कृत्रिम झिल्ली विकसित की गई थी जिसमें सिलिकॉन इंप्रेग्नेशन15,16 के साथ जाल, कागज या कपड़े के समर्थन का उपयोग किया गया था। सिलिकॉन आदर्श था क्योंकि इसके भौतिक गुण इसकी जैव-अंतर्निहित प्रकृति के साथ-साथ त्वचा की खिंचाव और मामूली कठोरता की नकल करते हैं। इस पर निर्माण करते हुए, क्रोबर और गुएरिन, जिनके काम पर यह तकनीक आधारित थी, ने आई रिसिनस17 के कृत्रिम भोजन के लिए एक सिलिकॉन-इंप्रेग्नेटेड रेयान मेम्ब्रेन फीडिंग तकनीक का वर्णन किया।
स्कैपुलारिस, एक निकट से संबंधित प्रजाति के लिए विधियों के शोधन ने झिल्ली के संकुचन में उपयोग किए जाने वाले सिलिकॉन की कठोरता, झिल्ली उत्पादन के नुस्खा, कक्ष के आयाम और अनुलग्नक उत्तेजक में उल्लेखनीय अंतर पैदा किया है। जबकि इस अध्ययन में बताए गए परिशोधनों के परिणामस्वरूप एंड्रेड एट अल द्वारा रिपोर्ट की गई झिल्ली विशेषताओं के समान झिल्ली विशेषताएं हैं, जिन्होंने आई स्कैपुलारिस में उपयोग के लिए क्रोबर और गुएरिन पर आधारित सिलिकॉन-आधारित झिल्ली भी विकसित की है, सिलिकॉन इम्प्रेग्नेशन चरणों में अंतर है, जो आई स्कैपुलारिस15 के अपरिपक्व जीवन चरणों के लिए इस प्रोटोकॉल का उपयोग करने के लचीलेपन की अनुमति देता है। 18. यह अध्ययन इस पद्धति के बार-बार उपयोग के आधार पर परिवर्धन और तकनीकी परिवर्तनों का भी वर्णन करता है, सर्वोत्तम प्रथाएं जिनके परिणामस्वरूप एक सफल फ़ीड होता है, और उत्पन्न होने वाली समस्याओं का निवारण होता है। इस विधि का उपयोग सभी सक्रिय जीवन चरणों को खिलाने, रोगजनक बैक्टीरिया के साथ टिक्स को संक्रमित करने और टिक्स को एंटीबायोटिक दवाओं 19,20 की कई खुराकके लिए उजागर करने के लिए किया गया है। जबकि दिखाया गया कृत्रिम झिल्ली भोजन विधि आई स्कैपुलारिस के लिए है, यह विधि झिल्ली मोटाई में मामूली संशोधनों के साथ टिक्स की अन्य प्रजातियों के लिए आसानी से अनुकूलनीय है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>00-10 Hardness Silicone</td>
			<td>Smooth-On</td>
			<td>Ecoflex 00-10</td>
			<td>Trial size from Smooth-On Store</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>00-50 Hardness Silicone</td>
			<td>Smooth-On</td>
			<td>Ecoflex 00-50</td>
			<td>Trial size from Smooth-On Store</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 Hardness Silicone</td>
			<td>Smooth-On</td>
			<td>Mold Star 30</td>
			<td>Trial size from Smooth-On Store</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well cell culture plates</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>3516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine triphosphate (ATP)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A1852-1VL</td>
			<td>Used to make an aqueous solution of 3 mM ATP that has been filter sterlized via 0.2 micometer filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine blood</td>
			<td>HemoStat</td>
			<td>DBB500</td>
			<td>Mechanically defibrinated; 500 mL is usually sufficient for one experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clingwrap</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>22-305654&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter Paper</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>09-790-2C</td>
			<td>Autoclave and let cool before using. Can use Fine quality instead of medium too</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluon (aqueous polytetrafluoroethylene)</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2871</td>
			<td>Available from other sources such as https://canada-ant-colony.com/products/fluon-ptfe-10ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>G8270-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexane</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>139386-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lens paper</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>11-995</td>
			<td>100% rayon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin &#160;</td>
			<td>Gold Biotechnology</td>
			<td>N-750-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>S37440&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin/fungizone</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240-096</td>
			<td>Or equivalent generic with concentration as follows (10,000 units/mL of penicillin, 10,000 &#181;g/mL of streptomycin, and 25 &#181;g/mL of Amphotericin B)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phagostimulant</td>
			<td>Made in House</td>
			<td></td>
			<td>Collected from prior tick feeds</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate Pipe</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>8585K204&#160;</td>
			<td>Cut to 45 mm length, 1.25 inch outer diameter, 1 inch inner diameter. Cutting requires a chop saw grinding wheel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber O-rings</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>9452K38&#160;</td>
			<td>5 mm thick, 1.25 inch inner diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft touch forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470315-238&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super glue</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>cyanoacrylate glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Unryu paper&#160;</td>
			<td>Art supply stores</td>
			<td></td>
			<td>mulberry fiber 10 g/m2. Purchased at Wet Paint art supply store, St. Paul, MN, USA</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tick artificial membrane feeding for ixodes scapularis

टिक्स और उनसे संबंधित बीमारियां उनके सार्वजनिक स्वास्थ्य और पशु चिकित्सा बोझ के कारण अध्ययन का एक महत्वपूर्ण विषय हैं। हालांकि, अध्ययन और पालन दोनों के दौरान टिक्स की भोजन की आवश्यकताएं प्रयोगात्मक प्रश्नों या टिक्स और उनके संबंधित रोगजनकों पर शोध करने के लिए प्रयोगशालाओं की क्षमता को सीमित कर सकती हैं। एक कृत्रिम झिल्ली आहार प्रणाली इन समस्याओं को कम कर सकती है और अनुसंधान के नए रास्ते खोल सकती है जो पारंपरिक पशु आहार प्रणालियों के साथ संभव नहीं हो सकती है। यह अध्ययन एक कृत्रिम झिल्ली भोजन प्रणाली का वर्णन करता है जिसे सभी इक्सोड्स स्कैपुलारिस जीवन चरणों के लिए भोजन और संवर्धन की सफलता के लिए परिष्कृत किया गया है। इसके अलावा, इस अध्ययन में वर्णित कृत्रिम झिल्ली भोजन प्रणाली को वांछित झिल्ली मोटाई के सरल शोधन के माध्यम से अन्य टिक प्रजातियों के साथ उपयोग के लिए संशोधित किया जा सकता है। कृत्रिम झिल्ली भोजन प्रणाली के लाभों को सिस्टम की श्रम गहनता, अतिरिक्त पर्यावरणीय कारकों से संतुलित किया जाता है जो भोजन की सफलता को प्रभावित कर सकते हैं, और प्रत्येक नई प्रजाति और टिक्स के जीवन चरण के लिए तकनीक को परिष्कृत करने की आवश्यकता होती है।

एक सफल भोजन इस बात पर निर्भर करता है कि आंशिक या पूर्ण गर्भाधान वांछित है या नहीं। स्कैपुलारिस वयस्कों के लिए गनमेटल ग्रे की छाया को बदल देता है और झिल्ली से अपने आप अलग हो जाता है। हालांकि, यदि वे कम ?...

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Tick Artificial Membrane Feeding for Ixodes scapularis

यहां प्रस्तुत एक कृत्रिम झिल्ली प्रणाली के माध्यम से विट्रो में टिक्स को रक्त फ़ीड करने की एक विधि है ताकि विभिन्न प्रकार के टिक जीवन चरणों के आंशिक या पूर्ण संयोजन की अनुमति मिल सके।

इक्सोड्स स्कैपुलारिस के लिए कृत्रिम झिल्ली फीडिंग पर टिक करें

Ticks and their associated diseases are an important topic of study due to their public health and veterinary burden. However, the feeding requirements of ...

जबकि कृत्रिम झिल्ली फीडिंग पहले की गई है, हमारा प्रोटोकॉल कुछ संशोधनों के साथ अन्य टिक प्रजातियों को स्थापित करने और अनुकूलनीय बनाने के लिए सरल है। कृत्रिम झिल्ली खिलाने का मुख्य लाभ यह है कि यह रोगजनकों और उपचारों के संपर्क में आने की अनुमति देता है जो पशु आहार के माध्यम से संभव नहीं हो सकते हैं। इस कृत्रिम झिल्ली भोजन प्रणाली को आदर्श फागोस्टिमुलेंट और आदर्श झिल्ली मोटाई पर संशोधनों के लिए कुछ परीक्षण के साथ अन्य आर्थ्रोपोड प्रजातियों पर लागू किया जा सकता है।सही झिल्ली मोटाई का उत्पादन करने के लिए कुछ अभ्यास की आवश्यकता होती है। झिल्ली पर कई स्थानों पर मोटाई को मापने के लिए एक माइक्रोमीटर का उपयोग करना सुनिश्चित करें। बेंजामिन कुल, हमारी प्रयोगशाला में एक पोस्टडॉक मुझे प्रक्रिया का प्रदर्शन करने में मदद करेगा।शुरू करने के लिए, एक सपाट, गैर-छिद्रपूर्ण सतह को पोंछें जैसे कांच का फलक या सिरेमिक लेपित धातु आधार 70% इथेनॉल के साथ एक हाथ स्टैंड के साथ और फिर इसे प्लास्टिक रैप की एक परत के साथ कवर करें। सुनिश्चित करें कि प्लास्टिक रैप सपाट है और बुलबुले या झुर्रियों के बिना है। तैयार सतह पर 100% रेयान लेंस सफाई कागज को टेप करें।सुनिश्चित करें कि यह कागज के सभी चार किनारों पर टेप के साथ सपाट और थोड़ा तना हुआ है। सिलिकॉन किट के प्रत्येक भाग के पांच मिलीलीटर को एक डिस्पोजेबल कंटेनर में मापकर 0010 कठोरता सिलिकॉन मिश्रण तैयार करें। हल्के से दो तरल पदार्थों को मिलाएं और हेक्सेन के 1.5 मिलीलीटर जोड़ें।मिश्रण को तब तक जारी रखें जब तक कि मिश्रण समरूप और अच्छी तरह से मिश्रित न हो जाए। लेंस पेपर पर सिलिकॉन मिश्रण वितरित करने के लिए एक छोटी स्क्वीजी का उपयोग करें और यह सुनिश्चित करने के लिए इसे एक मिनट तक खड़े होने दें कि सिलिकॉन लेंस पेपर में भिगो गया है। धीरे-धीरे, नीचे की ओर दबाव की एक छोटी मात्रा का उपयोग करके स्क्वीजी के साथ अतिरिक्त सिलिकॉन को साइड में खुरचें।सिलिकॉन की किसी भी रेखा को हटाने और एक चिकनी परत का उत्पादन करने के लिए नीचे की ओर दबाव डाले बिना स्क्वीजी के साथ एक दूसरा पास करें। केवल लार्वा के लिए, फीडिंग चैंबर के शीर्ष को कई बार फ्लुओन फ्लोरोपॉलीमर राल में डुबोएं, जिससे यह एक सुसंगत परत का उत्पादन करने के लिए अनुप्रयोगों के बीच सूख जाए। झिल्ली को धूल मुक्त वातावरण में कम से कम 24 घंटे तक ठीक करने के लिए छोड़ दें जैसे कि एक बंद रसायन या जैव सुरक्षा कैबिनेट।इसके बाद, कक्षों को झिल्ली से जोड़ने के लिए 30 कठोरता सिलिकॉन मिश्रण तैयार करने के लिए सिलिकॉन मिश्रण ए और बी के बराबर भागों को मिलाएं। पॉली कार्बोनेट कक्षों को सिलिकॉन मिश्रण में लगभग एक चौथाई इंच डुबोएं और फिर उन्हें झिल्ली शीट पर रखें, इस बात का ध्यान रखते हुए कि किसी भी टेप को ओवरलैप न किया जाए। संलग्न सिलिकॉन को कम से कम 24 घंटे तक ठीक करने दें।एक स्केलपेल का उपयोग करके, प्रत्येक संलग्न कक्ष के चारों ओर झिल्ली को सावधानीपूर्वक काटें, किनारों को ट्रिम करें ताकि यह किनारों पर ज्यादा स्क्रैपिंग के बिना छह वेल प्लेट के कुएं में आसानी से फिट हो सके। झिल्ली के अतिरिक्त को अधिकतम करने के लिए कक्ष के बाहर पर्याप्त सामग्री की अनुमति दें। प्रत्येक कोने और झिल्ली शीट के केंद्र से बचे हुए झिल्ली का एक छोटा टुकड़ा काटें।प्रत्येक टुकड़े से प्लास्टिक की चादर को हटा दें और औसत झिल्ली मोटाई निर्धारित करने के लिए माइक्रोमीटर के साथ टुकड़ों को मापें। प्रति कक्ष एक ओ-रिंग के साथ फीडिंग चैंबर को कांच के बीकर में रखें ताकि नसबंदी करने के लिए कम से कम 20 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव किया जा सके। उनका उपयोग करने से पहले कक्षों को ठंडा होने दें।पूर्व-तैयार, आटोक्लेव झिल्ली कक्षों को बाहर निकालने और उनके चारों ओर ओ-रिंग रखने के बाद, झिल्ली को कवर करने के लिए प्रत्येक कक्ष को पर्याप्त 70% इथेनॉल से भरें। इसे पांच मिनट के लिए छह वेल प्लेट में बैठने दें और फिर कक्ष और झिल्ली के बीच और झिल्ली में ही किसी भी रिसाव की तलाश करें। कक्षों से इथेनॉल को खाली करें और फिर इसे जैव सुरक्षा कैबिनेट या लैमिनार प्रवाह हुड के अंदर हवा में सूखने दें।रक्त में पूरक को गर्म करने और सक्रिय करने के लिए, इसे 40 मिनट के लिए 56 डिग्री सेल्सियस पर गर्म करें और दो ग्राम प्रति लीटर ग्लूकोज के साथ यांत्रिक रूप से डिफिब्रिलेटेड गोजातीय रक्त को पूरक करें। एक बार झिल्ली सूख जाने के बाद, कक्ष के अंदर लगभग 20 माइक्रोलीटर फागोस्टिमुलेंट लागू करें और इसे सतह के चारों ओर फैलाने के लिए कक्ष को झुकाएं। जब फागोस्टिमुलेंट सूख जाता है, तो जल्दी से टिक्स को ब्रश या फोर्सप्स के साथ कक्ष में जोड़ें।पैराफिल्म के साथ शीर्ष को सील करें क्योंकि पानी के स्नान से गर्मी इसे चीर सकती है। फिर एक शंक्वाकार ट्यूब में पांच मिलीलीटर गर्मी और सक्रिय रक्त प्रति कुएं या कक्ष जोड़ें और इसे 36 डिग्री सेल्सियस पर निर्धारित पानी के स्नान में रखें। ट्यूब में प्रति पांच मिलीलीटर रक्त में पेनिसिलिन स्ट्रेप्टोमाइसिन फंगीज़ोन के तीन मिलीमोलर एटीपी के पांच माइक्रोलीटर और पेनिसिलिन स्ट्रेप्टोमाइसिन फंगीज़ोन के 100 एक्स स्टॉक के 50 माइक्रोलीटर जोड़ें और 4.5 मिलीलीटर रक्त को छह अच्छी प्लेट के कुएं में स्थानांतरित करें।धीरे से कक्ष को कुएं में रखें, कक्ष पर ओ-रिंग ऊंचाई को समायोजित करें ताकि झिल्ली रक्त में बैठ जाए, लेकिन साइड के चारों ओर रक्त का स्तर कुएं से ऊपर न हो। फिर रक्त और झिल्ली के बीच हवा के बुलबुले के गठन से बचने के लिए कुएं को रक्त में एक कोण पर रखें। फीडिंग कक्षों के शीर्ष पर छह वेल प्लेट का ढक्कन रखें।कक्षों के साथ छह वेल प्लेट को तैयार 34 डिग्री सेल्सियस पानी के स्नान और ढक्कन में रखें। रक्त ट्यूब में पेनिसिलिन स्ट्रेप्टोमाइसिन फंगीज़ोन के तीन मिलीमोलर एटीपी के पांच माइक्रोलीटर और पेनिसिलिन स्ट्रेप्टोमाइसिन फंगीज़ोन के 100 एक्स स्टॉक के 50 माइक्रोलीटर जोड़ें और 4.5 मिलीलीटर रक्त को एक ताजा छह वेल प्लेट के कुएं में स्थानांतरित करें जैसा कि पहले दिखाया गया है। पानी के स्नान से टिक चैंबर के साथ छह वेल प्लेट को निकालें और कक्ष को कुएं से हटा दें।रक्त को हटाने के लिए 10 मिलीलीटर निष्फल 1 एक्स पीबीएस के साथ कक्ष और झिल्ली के बाहर कुल्ला करें। आटोक्लेव फिल्टर पेपर का उपयोग करके, अतिरिक्त पीबीएस को हटाने के लिए झिल्ली और कक्ष को धीरे से सुखाएं। यदि कक्ष के अंदर बहुत अधिक संक्षेपण है, तो ताजा पैराफिल्म के साथ सील करने से पहले गीले स्थानों को आटोक्लेव फिल्टर पेपर से सुखाएं।फिर कक्ष के शीर्ष पर पैराफिल्म को बदलें। यदि आवश्यक हो तो ओ-रिंग ऊंचाई को समायोजित करते हुए, ताजा रक्त के साथ नए सिक्स वेल प्लेट में टिक चैंबर रखें। प्लेट पर प्रत्येक कक्ष के लिए इन चरणों को दोहराएं।अंत में, कक्षों के शीर्ष पर छह वेल प्लेट का ढक्कन रखें और नई छह वेल प्लेट को 34 डिग्री सेल्सियस पानी के स्नान में वापस ले जाएं। आंशिक रूप से एनगोर्ड इक्सोड्स स्कैपुलारिस अप्सराओं के साथ एक चल रही फ़ीड यहां दिखाया गया है। अनुलग्नक स्थलों के आसपास काले या भूरे रंग के बिंदु ठंढ हैं जिन्हें फागोस्टिमुलेंट बनाने के लिए फ़ीड के दौरान और बाद में एकत्र किया जा सकता है।आंशिक रूप से संलग्न इक्सोड्स स्कैपुलारिस अप्सराओं को झिल्ली से जुड़ा हुआ देखा जाता है। यहां रेंगने वाले लार्वा मोल्ड की भूसी भी देखी जा सकती है। टिक एन्जॉर्जेमेंट नंबर और अंडे द्रव्यमान वजन इस तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं।लार्वा और निम्फ्रा एन्फ़ार्जमेंट प्रयोगात्मक स्थितियों में इस तकनीक में उपयोग किए जाने वाले पूरक के अलावा रक्त में हिरण अंग होमोजेनेट जोड़ा गया था। यहां, सफल एनगोर्जमेंट को या तो एनगोर्गेड टिक्स के रूप में परिभाषित किया गया था जो सफलतापूर्वक अगले लाइव स्टेज में घुल गए या सफलतापूर्वक अंडे देने वाली मादाओं को आकर्षित किया। लेंस पेपर पर सिलिकॉन लागू करते समय स्वीकार्य मोटाई प्राप्त करने के लिए अभ्यास करना पड़ता है, इसलिए उपयोग से पहले झिल्ली की मोटाई को मापना हमेशा महत्वपूर्ण होता है।मेम्ब्रेन फीडिंग टिक्स को रोगजनकों या एंटीबायोटिक दवाओं के लिए उजागर कर सकती है। टिक जीव विज्ञान के पहलुओं जैसे मोलिंग सफलता, अंडे देने और जीवित रहने पर इनके प्रभावों का आकलन फीड के बाद किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Biology

Tick Artificial Membrane Feeding for Ixodes scapularis

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

परीक्षण aphids में निकोटीन सहिष्णुता एक कृत्रिम आहार प्रयोग का उपयोग

Plants may upregulate the production of many different seconday metabolites in response to insect feeding. One of these metabolites, nicotine, is well ...

Preparation of Artificial Bilayers for Electrophysiology Experiments

कृत्रिम bilayers इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी प्रयोगों के लिए तैयार

Planar lipid bilayers, also called artificial lipid bilayers, allow you to study ion-conducting channels in a well-defined environment. These bilayers can ...

Crystallizing Membrane Proteins for Structure Determination using Lipidic Mesophases

संरचना lipídic Mesophases का उपयोग कर निर्धारण के लिए झिल्ली प्रोटीन crystallizing

A detailed protocol for crystallizing membrane proteins by using lipidic mesophases is described. This method has variously been referred to as the ...

Use of a Robot for High-throughput Crystallization of Membrane Proteins in Lipidic Mesophases

Lipidic Mesophases में उच्च throughput झिल्ली प्रोटीन का Crystallization के लिए एक रोबोट का प्रयोग

Structure-function studies of membrane proteins greatly benefit from having available high-resolution 3-D structures of the type provided through ...

Harvesting and Cryo-cooling Crystals of Membrane Proteins Grown in Lipidic Mesophases for Structure Determination by Macromolecular Crystallography

झिल्ली macromolecular क्रिस्टलोग्राफी द्वारा संरचना निर्धारण के लिए lipidic Mesophases में बढ़ी प्रोटीन की कटाई और क्रायो ठंडा कण

An important route to understanding how proteins function at a mechanistic level is to have the structure of the target protein available, ideally at ...

Microperfusion Technique to Investigate Regulation of Microvessel Permeability in Rat Mesentery

Microperfusion तकनीक चूहा अन्त्रपेशी में microvessel पारगम्यता के नियमन जांच

Experiments to measure the permeability properties of individually perfused microvessels provide a bridge between investigation of molecular and cellular ...

High-fat Feeding Paradigm for Larval Zebrafish: Feeding, Live Imaging, and Quantification of Food Intake

उच्च वसा वाले दूध पिलाने लार्वा zebrafish के लिए प्रतिमान: दूध पिलाने की, लाइव इमेजिंग, और भोजन का सेवन की मात्रा

Zebrafish are emerging as a model of dietary lipid processing and metabolic disease. This protocol describes how to feed larval zebrafish a lipid-rich ...

Ground State Depletion Super-resolution Imaging in Mammalian Cells

स्तनधारी कोशिकाओं में जमीन राज्य घट सुपर संकल्प इमेजिंग

Advances in fluorescent microscopy and cell biology are intimately correlated, with the enhanced ability to visualize cellular events often leading to ...