Name: establishing 3-dimensional spheroids from patient-derived tumor samples and evaluating their sensitivity to drugs
Uploaded: 2022-12-16T13:40:00
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La raccolta di campioni di tumore umano utilizzati per le colture di cellule tumorali primarie è stata eseguita secondo i protocolli approvati dal comitato di revisione istituzionale (IRB) presso il Rabin Medical Center con il consenso informato scritto dei pazienti. I pazienti eleggibili per la partecipazione allo studio includevano pazienti con cancro adulto e pediatrico di sesso maschile e femminile con cancro al seno, al colon, al fegato, ai polmoni, neuroendocrino, ovarico o pancreatico non metastatico, qualsiasi c...

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	<li>Katt, M. E., Placone, A. L., Wong, A. D., Xu, Z. S., Searson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+tumor+models:+Advantages,+disadvantages,+variables,+and+selecting+the+right+platform.">In vitro tumor models: Advantages, disadvantages, variables, and selecting the right platform.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 4, 12 (2016).</li><li>Yoshida, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+patient-derived+tumor+xenograft+models+and+tumor+organoids.">Applications of patient-derived tumor xenograft models and tumor organoids.</a> Journal of Hematology &amp; Oncology. 13 (1), 4 (2020).</li><li>Ledur, P. F., Onzi, G. 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J., Cloos, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+sensitivity+assays:+The+MTT+assay.">Cell sensitivity assays: The MTT assay.</a> Methods in Molecular Biology. 731, 237-245 (2011).</li><li>Walzl, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+resazurin+reduction+assay+can+distinguish+cytotoxic+from+cytostatic+compounds+in+spheroid+screening+assays.">The resazurin reduction assay can distinguish cytotoxic from cytostatic compounds in spheroid screening assays.</a> Journal of Biomolecular Screening. 19 (7), 1047-1059 (2014).</li></ol>

Il presente protocollo descrive un metodo semplice per generare colture cellulari primarie 3D (sferoidi) derivate da campioni tumorali umani. Questi sferoidi possono essere utilizzati per varie analisi, tra cui la valutazione di potenziali candidati farmaci e combinazioni di farmaci, l'identificazione di potenziali biomarcatori o bersagli terapeutici e lo studio dei meccanismi di risposta e resistenza. Il protocollo utilizza cellule tumorali primarie derivate direttamente da campioni di pazienti o cellule tumorali da mod...

Gli studi in vitro e in vivo rappresentano approcci complementari per lo sviluppo di trattamenti contro il cancro. I modelli in vitro consentono il controllo della maggior parte delle variabili sperimentali e facilitano le analisi quantitative. Spesso fungono da piattaforme di screening a basso costo e possono essere utilizzati anche per studi meccanicistici1. Tuttavia, la loro rilevanza biologica è intrinsecamente limitata, in quanto tali modelli riflettono solo parzialmente il microambiente tumorale1. Al contrario, i modelli in vivo, come gli xenotrapianti derivati dal paziente (PDX), catturano la complessità del microambiente tumorale e sono più adatti per studi traslazionali e trattamenti individualizzanti nei pazienti (cioè, studiando la risposta ai farmaci in un modello derivato da un singolo paziente)1. Tuttavia, i modelli in vivo non favoriscono approcci ad alto rendimento per lo screening dei farmaci, poiché i parametri sperimentali non possono essere controllati strettamente come nei modelli in vitro e perché il loro sviluppo richiede tempo, manodopera e costoso 1,2.
I modelli in vitro sono disponibili da oltre 100 anni e le linee cellulari sono disponibili da oltre 70 anni3. Negli ultimi decenni, tuttavia, la complessità dei modelli in vitro disponibili di tumori solidi è aumentata drammaticamente. Questa complessità varia da modelli di coltura 2-dimensionali (2D) (strutture monostrato) che sono linee cellulari stabilite derivate dal tumore o linee cellulari primarie agli approcci più recenti che coinvolgono modelli tridimensionali (3D)1. All'interno dei modelli 2D, una distinzione chiave è tra le linee cellulari stabilite e primarie4. Le linee cellulari stabilite sono immortalate; Pertanto, la stessa linea cellulare può essere utilizzata globalmente per molti anni, il che da una prospettiva storica, facilita la collaborazione, l'accumulo di dati e lo sviluppo di molte strategie di trattamento. Tuttavia, le aberrazioni genetiche in queste linee cellulari si accumulano ad ogni passaggio, compromettendo così la loro rilevanza biologica. Inoltre, il numero limitato di linee cellulari disponibili non riflette l'eterogeneità dei tumori nei pazienti 4,5. Le linee cellulari tumorali primarie derivano direttamente da campioni tumorali resecati ottenuti tramite biopsie, versamenti pleurici o resezioni. Pertanto, le linee cellulari tumorali primarie sono biologicamente più rilevanti in quanto conservano elementi del microambiente tumorale e le caratteristiche tumorali, come i comportamenti intercellulari (ad esempio, cross-talk tra cellule sane e cancerose) e i fenotipi staminali delle cellule tumorali. Tuttavia, la capacità replicativa delle linee cellulari primarie è limitata, il che porta a un tempo di coltura ristretto e limita il numero di cellule tumorali che possono essere utilizzate per le analisi 4,5.
I modelli che utilizzano colture 3D sono biologicamente più rilevanti dei modelli di coltura 2D poiché le condizioni in vivo vengono mantenute. Pertanto, i modelli di coltura 3D preservano la forma e la crescita naturale delle cellule e replicano elementi dell'ambiente tumorale, come ipossia, necrosi e adesione cellulare. I modelli 3D più comunemente usati nella ricerca sul cancro includono sferoidi multicellulari, strutture basate su scaffold e colture incorporate nella matrice 4,6,7.
Il presente protocollo genera modelli di coltura tumorale 3D (sferoidi multicellulari) da cellule tumorali primarie e valuta la loro sensibilità ai farmaci utilizzando due approcci complementari: un saggio di vitalità cellulare (MTT) ed esami microscopici. I risultati rappresentativi qui presentati provengono dal cancro al seno e al colon; Tuttavia, questo protocollo è ampiamente applicabile ad altri tipi di tumore solido (ad esempio, colangiocarcinoma, cancro gastrico, polmonare e pancreatico) ed è anche conveniente, in quanto può essere eseguito nella sua interezza in un tipico laboratorio di ricerca sul cancro / biologia cellulare senza fare affidamento su attrezzature specializzate. Gli sferoidi multicellulari generati utilizzando questo approccio possono essere utilizzati per valutare potenziali candidati farmacologici, identificare potenziali biomarcatori o bersagli terapeutici e studiare i meccanismi di risposta e resistenza.
Questo protocollo è diviso in tre sezioni: (1) la generazione, la raccolta e il conteggio degli sferoidi in preparazione al loro uso come modello per testare l'efficacia dei farmaci; (2) Saggio MTT per valutare l'efficacia del farmaco sugli sferoidi; e (3) la valutazione microscopica dei cambiamenti morfologici a seguito del trattamento degli sferoidi con farmaci come un altro approccio per valutare l'efficacia del farmaco (Figura 1).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5 Fluorouracil</td>
			<td>TEVA Israel</td>
			<td>lot 16c22NA</td>
			<td>Fluorouracil, Adrucil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A1110501</td>
			<td>StemPro Accutase Cell Dissociation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cisplatin</td>
			<td>TEVA Israel</td>
			<td>20B06LA</td>
			<td>Abiplatin,&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cultrex&#160;</td>
			<td>Trevigen</td>
			<td>3632-010-02</td>
			<td>Basement membrane matrix, type 3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO (dimethyl sulfoxide)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D2650-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>2391595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flurometer&#160;ELISA reader</td>
			<td>Biotek</td>
			<td>Synergy H1</td>
			<td>Gen5 3.11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid (HCl)&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>320331</td>
			<td>for stop solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA</td>
			<td>&#160;Version 1.52a</td>
			<td>Open-source software ImageJ</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Gadot</td>
			<td>P180008215</td>
			<td>for stop solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>1843977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M5655-1G</td>
			<td>3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-essential amino acids&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Palbociclib&#160;&#160;</td>
			<td>Med Chem Express</td>
			<td>CAS # 571190-30-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190094</td>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline (DPBS)*Without Calcium and Magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin&#8211;streptomycin&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>2119399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol-free RPMI 1640</td>
			<td>Biological industries, Israel</td>
			<td>01-103-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pippeting reservoir</td>
			<td>Alexred</td>
			<td>RED LTT012025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 culture medium&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11530586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sunitinib</td>
			<td>Med Chem Express</td>
			<td>CAS # 341031-54-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trastuzumab</td>
			<td>F. Hoffmann - La Roche Ltd, Basel, Switherland</td>
			<td>10172154 IL</td>
			<td>Herceptin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.5% solution</td>
			<td>Biological industries, Israel</td>
			<td>03-102-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-low attachment 96 well plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>650970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vinorelbine</td>
			<td>Ebewe</td>
			<td>11733027-03</td>
			<td>Navelbine</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishing 3-dimensional spheroids from patient-derived tumor samples and evaluating their sensitivity to drugs

Nonostante i notevoli progressi nella comprensione della biologia tumorale, la stragrande maggioranza dei candidati farmaci oncologici che entrano negli studi clinici falliscono, spesso a causa della mancanza di efficacia clinica. Questo alto tasso di fallimento illumina l'incapacità degli attuali modelli preclinici di prevedere l'efficacia clinica, principalmente a causa della loro inadeguatezza nel riflettere l'eterogeneità del tumore e il microambiente tumorale. Queste limitazioni possono essere affrontate con modelli di coltura tridimensionali (3D) (sferoidi) stabiliti da campioni di tumore umano derivati da singoli pazienti. Queste colture 3D rappresentano la biologia del mondo reale meglio delle linee cellulari stabilite che non riflettono l'eterogeneità del tumore. Inoltre, le colture 3D sono migliori dei modelli di coltura bidimensionale (2D) (strutture monostrato) poiché replicano elementi dell'ambiente tumorale, come ipossia, necrosi e adesione cellulare, e preservano la forma e la crescita naturale delle cellule. Nel presente studio, è stato sviluppato un metodo per preparare colture primarie di cellule tumorali da singoli pazienti che sono 3D e crescono in sferoidi multicellulari. Le cellule possono essere derivate direttamente da tumori del paziente o xenotrapianti derivati dal paziente. Il metodo è ampiamente applicabile ai tumori solidi (ad esempio, colon, seno e polmone) ed è anche conveniente, in quanto può essere eseguito nella sua interezza in un tipico laboratorio di ricerca sul cancro / biologia cellulare senza fare affidamento su attrezzature specializzate. Qui viene presentato un protocollo per generare modelli di coltura tumorale 3D (sferoidi multicellulari) da cellule tumorali primarie e valutare la loro sensibilità ai farmaci utilizzando due approcci complementari: un saggio di vitalità cellulare (MTT) e esami microscopici. Questi sferoidi multicellulari possono essere utilizzati per valutare potenziali candidati farmacologici, identificare potenziali biomarcatori o bersagli terapeutici e studiare i meccanismi di risposta e resistenza.

Questo protocollo presenta procedure per generare una coltura omogenea di sferoidi da cellule tumorali primarie, valutando quantitativamente l'efficacia del farmaco sulla coltura sferoidale (saggio MTT) e determinando l'effetto dei farmaci in studio sulla morfologia sferoide. Vengono presentati i dati degli esperimenti rappresentativi in sferoidi generati da colture cellulari di cancro al colon e al seno. Esperimenti simili sono stati eseguiti utilizzando altri tipi di tumore, tra cui colangiocarcinoma, gastrico, polmona...

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Establishing 3-Dimensional Spheroids from Patient-Derived Tumor Samples and Evaluating their Sensitivity to Drugs

Il presente protocollo descrive la generazione di modelli di coltura tumorale 3D da cellule tumorali primarie e la valutazione della loro sensibilità ai farmaci utilizzando saggi di vitalità cellulare ed esami microscopici.

Stabilire sferoidi 3-dimensionali da campioni tumorali derivati dal paziente e valutare la loro sensibilità ai farmaci

Despite remarkable advances in understanding tumor biology, the vast majority of oncology drug candidates entering clinical trials fail, often due to a ...

Il nostro protocollo è significativo perché descrive una generazione di modelli di coltura tumorale 3D da cellule tumorali primarie e questo modello rappresenta la biologia tumorale del mondo reale meglio delle linee cellulari. Questo approccio è applicabile a una varietà di tumori solidi. È anche conveniente in quanto può essere eseguito dall'inizio alla fine in un tipico laboratorio di biologia cellulare.I modelli tumorali 3D generati utilizzando questo approccio supportano la ricerca sulla sensibilità e la resistenza dei tumori alle terapie anti-cancro o una combinazione di terapie. Questo approccio genera modelli 3D da cellule tumorali primarie. Pertanto, potrebbe identificare quale terapia è probabile che sia efficace per un determinato paziente e quindi aiutare a personalizzare il suo trattamento.A dimostrare la procedura sarà Ella Itzhaki, una dottoranda del mio laboratorio. Per iniziare, prendere un piccolo pallone T25 con una coltura cellulare primaria aderente a singola cellula e rimuovere il terreno di coltura cellulare. Lavare le cellule con PBS e aggiungere un millilitro di 1x Accutase per tre minuti a 37 gradi Celsius per preparare una sospensione unicellulare di colture di cellule tumorali primarie aderenti dal 75 al 100% di confluenza.Neutralizzare la soluzione di Accutase aggiungendo cinque millilitri di terreno di coltura cellulare. Aspirare le cellule con una pipetta sierologica da 10 millilitri e depositarle in un tubo conico da 15 millilitri. Centrifugare il tubo a 800g per cinque minuti a temperatura ambiente.Rimuovere il terreno di coltura cellulare e aggiungere otto millilitri di terreno di coltura cellulare fresco sopra il pellet cellulare, quindi mescolare delicatamente. Per contare le cellule vitali con un emocitometro, prendere un'aliquota di 50 microlitri della sospensione cellulare e mescolarla con 50 microlitri di tripano blu. Quindi contare le celle vive e calcolare il numero totale di cellule vive nella sospensione.Quindi, preparare il mezzo di coltura 3D. E dopo aver calcolato il numero di cellule necessarie per il test e il volume totale richiesto, preparare la sospensione cellulare con il numero desiderato di cellule in 200 microlitri del terreno di coltura 3D. Mescolare delicatamente con la pipetta per garantire una distribuzione omogenea.Trasferire la sospensione in un serbatoio di pipettaggio e aggiungere 200 microlitri della sospensione della cella a ciascun pozzetto di una piastra ultra-bassa da 96 pozzetti con una pipetta multicanale. Centrifugare la piastra a 300 g per 10 minuti a temperatura ambiente per rafforzare il raggruppamento delle cellule, migliorando così l'aggregazione cellulare, e incubare la piastra a 37 gradi Celsius in un incubatore umidificato al 5% di anidride carbonica. Dopo aver centrifugato nuovamente a 300 g per 10 minuti a temperatura ambiente, rimuovere delicatamente e scartare il 50% del terreno e aggiungere 100 microlitri di terreno di coltura 3D fresco per sostituire la soluzione esistente.Ripetere questo passaggio e riposizionare la piastra nell'incubatore umidificato a 37 gradi Celsius e al 5% di anidride carbonica. Ispezionare le cellule al microscopio ogni uno o due giorni per monitorare la formazione di sferoidi. Misurare il diametro degli sferoidi formati utilizzando lo strumento di scala nel software di imaging.E una volta che il diametro sferoidale raggiunge i 100-200 micrometri, eseguire gli esperimenti di efficacia del farmaco. Per la raccolta degli sferoidi, utilizzare una pipetta da 1.000 microlitri per raccogliere gli sferoidi da ciascun pozzetto e depositarli in un tubo conico da 15 millilitri. Centrifugare il tubo conico a 300 g per cinque minuti a temperatura ambiente, aspirare ed eliminare accuratamente il surnatante con una pipetta.Aggiungere 0,5 millilitri di terreno di coltura cellulare e risospendere il pellet bene ma delicatamente. Per eseguire il conteggio degli sferoidi, utilizzare una piastra a 96 pozzetti e disegnare un segno più sul lato inferiore di un pozzo per dividere il pozzo in quadranti. Aggiungere 50 microlitri della sospensione al pozzetto.E con un obiettivo 10x, conta manualmente gli sferoidi al microscopio. Conta gli sferoidi in ogni quadrante e calcola il numero totale di sferoidi nel pozzo. Quindi calcolare la concentrazione di sferoidi raddoppiando il conteggio degli sferoidi contando il volume e calcolare il numero totale di sferoidi nella sospensione.In una nuova provetta, preparare la sospensione sferoidale ad una concentrazione di 200 sferoidi per 200 microlitri di terreno di coltura cellulare. Per ogni trattamento farmacologico, preparare lo stock di sferoidi in un tubo diverso. Calcolare la quantità totale necessaria per ciascun farmaco in base al numero di pozzetti necessari per le ripetizioni e aggiungere il farmaco al tubo alla concentrazione finale necessaria.Trasferire 200 microlitri della sospensione sferoidale nei pozzetti di una piastra ultra-bassa di attacco a 96 pozzetti e incubare la piastra a 37 gradi Celsius in un incubatore umidificato al 5% di anidride carbonica. Dopo aver incubato gli sferoidi con il farmaco in studio per 24-72 ore, centrifugare la piastra a 300 g per cinque minuti a temperatura ambiente e rimuovere delicatamente 170 microlitri del terreno di coltura cellulare, lasciando 30 microlitri sul fondo del pozzetto. Preparare la soluzione MTT e aggiungere 70 microlitri della soluzione a ciascun pozzetto per un volume finale di 100 microlitri per pozzetto.La concentrazione finale di MTT nel pozzo sarà di 0,05 milligrammi per 100 microlitri. Inoltre, preparare pozzetti vuoti con soluzione MTT senza celle. Incubare la piastra a 37 gradi Celsius in un incubatore umidificato al 5% di anidride carbonica per tre o quattro ore fino a quando non si osserva un cambiamento nel colore della soluzione nei pozzetti.Quando si osserva un cambiamento, aggiungere 100 microlitri di soluzione Stop a ciascun pozzetto e mescolare delicatamente il contenuto dei pozzetti senza creare bolle. Leggere l'assorbanza della piastra in un lettore ELISA parametrico a una lunghezza d'onda di 570 nanometri e una lunghezza d'onda di fondo da 630 a 690 nanometri. Per calcolare la vitalità della cella, calcolare il segnale specifico per ciascun pozzetto.Quindi calcolare il valore medio dei pozzetti vuoti e sottrarre questo valore da ciascun pozzetto. Calcolare la media dei segnali specifici nei pozzetti di controllo che contengono cellule che non sono state trattate con il farmaco in studio. Infine, calcola la vitalità delle cellule in ciascun pozzetto rispetto ai pozzetti con cellule non trattate.La formazione di sferoidi da una coltura primaria di cellule tumorali del colon nel tempo dal numero di cellule inizialmente seminate è mostrata qui. Da questa figura, si può vedere che il numero di sferoidi generati dipende dal numero di cellule inizialmente seminate in ciascun pozzetto. Qui sono mostrati gli sferoidi delle cellule tumorali primarie del colon dopo 10 giorni di coltura con semina iniziale delle cellule di 2.000 per pozzetto.Dopo una coltura prolungata degli sferoidi del cancro del colon, hanno iniziato ad attaccarsi l'un l'altro e hanno formato gruppi di sferoidi e strutture simili all'uva che hanno impedito una coltura omogenea e quindi proibito l'uso degli sferoidi nei saggi MTT. Gli effetti di palbociclib, sunitinib e la loro combinazione su sferoidi da cellule tumorali primarie, incluso il cancro del colon e della mammella, sono mostrati qui. Un test MTT è stato condotto su sferoidi derivati da cellule di cancro al colon e al seno.I segnali MTT sono stati normalizzati ai valori delle cellule trattate con DMSO. I valori rappresentano le medie da quattro a otto repliche. Gli effetti dei vari trattamenti sulla crescita cellulare sono stati valutati anche microscopicamente al giorno zero e dopo tre giorni di trattamento degli sferoidi derivati dal cancro del colon e dalle cellule del cancro al seno.Gli effetti di trastuzumab più vinorelbina e 5 fluorouracile più cisplatino sugli sferoidi derivati dal cancro al seno nel tempo sono presentati in questa figura. La variazione del diametro degli sferoidi rispetto al giorno zero per la durata del trattamento è mostrata qui. Ogni gruppo di trattamento comprendeva da quattro a sei pozzetti con uno sferoide in ciascun pozzetto.La variazione media è presentata qui. Gli sferoidi sono strumenti importanti per molti studi oltre la risposta al trattamento anti-cancro. Questi studi affrontano, ad esempio, la somministrazione di farmaci e persino questioni di biologia di base come le interazioni cellula-cellula.È fondamentale avviare un processo di generazione di sferoidi con una sospensione a cellula singola. È inoltre fondamentale utilizzare piastre di fissaggio ultra-basse con un mezzo contenente una metrica di membrana di base del 5%.

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Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Physiologic Patient Derived 3D Spheroids for Anti-neoplastic Drug Screening to Target Cancer Stem Cells

Paziente fisiologico Derivato da spheroid 3D per lo screening farmacologico anti-neoplastico per colpire le cellule staminali tumorali

In this protocol, we outline the procedure for generation of tumor spheroids within 384-well hanging droplets to allow for high-throughput screening of ...

Establishment and Characterization of Small Bowel Neuroendocrine Tumor Spheroids

Istituzione e caratterizzazione degli spheroeroidi del tumore intestinale piccolo intestinale

Small bowel neuroendocrine tumors (SBNETs) are rare cancers originating from enterochromaffin cells of the gut. Research in this field has been limited ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolamento di cellule simili a stelo dalle colture speroidi a 3 dimensioni

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Drug Screening of Primary Patient Derived Tumor Xenografts in Zebrafish

Screening farmacologico del paziente primario - Tumore derivato Xenotrapianto nel pesce zebra

Patient derived xenograft models are critical in defining how different cancers respond to drug treatment in an in vivo system. Mouse models are the ...

High-Throughput In Vitro Assay using Patient-Derived Tumor Organoids

High-Throughput In Vitro Assay using Patient-Derived Tumor Organoids

Test in vitro ad alto rendimento utilizzando organoidi tumorali derivati dal paziente

Patient-derived tumor organoids (PDOs) are expected to be a preclinical cancer model with better reproducibility of disease than traditional cell culture ...