Name: enrichment of adult mouse dorsal root ganglia neuron cultures by immunopanning
Uploaded: 2023-02-24T14:15:00
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この研究は、カナダ健康研究所からのプロジェクト助成金(FRN-162434)とカナダMS協会からのディスカバリー助成金(EGID-3761)によってサポートされました。著者らは、ImageXpressシステムのトレーニングと使用について、Sun博士とCross Cancer Instituteに感謝したい。

すべての動物実験は、アルバータ大学健康科学動物管理および使用委員会(プロトコル0000274)の承認を得て実施されました。
1. 試薬調製
<ol><li>1日目には、次の試薬を準備します:細胞培養グレードの水;ポリ-D-リジン-ボトル全体を50 mLの培養グレードの水で100 μg/mLのストック濃度に再構成し、4°Cで保存し、ストックを培養グレードの水で1:10に希釈して最終濃?...

<ol>
	<li>Haberberger, R. V., Barry, C., Dominguez, N., Matusica, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dorsal+root+ganglia.">Human dorsal root ganglia.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 13, 271 (2019).</li><li>Perner, C., Sokol, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+dissection+and+culture+of+murine+dorsal+root+ganglia+neurons+to+study+neuropeptide+release.">Protocol for dissection and culture of murine dorsal root ganglia neurons to study neuropeptide release.</a> STAR Protocols. 2 (1), 100333 (2021).</li><li>Lin, Y. T., Chen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal+root+ganglia+isolation+and+primary+culture+to+study+neurotransmitter+release.">Dorsal root ganglia isolation and primary culture to study neurotransmitter release.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (140), e57569 (2018).</li><li>Foo, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+method+for+the+purification+and+culture+of+rodent+astrocytes.">Development of a method for the purification and culture of rodent astrocytes.</a> Neuron. 71 (5), 799-811 (2011).</li><li>Nolle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enrichment+of+Glial+Cells+From+Human+Post-mortem+Tissue+for+Transcriptome+and+Proteome+Analysis+Using+Immunopanning.">Enrichment of Glial Cells From Human Post-mortem Tissue for Transcriptome and Proteome Analysis Using Immunopanning.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 15, 772011 (2021).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designing+and+troubleshooting+immunopanning+protocols+for+purifying+neural+cells.">Designing and troubleshooting immunopanning protocols for purifying neural cells.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (12), 1342-1347 (2014).</li><li>Zuchero, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+dorsal+root+ganglion+neurons+from+rat+by+immunopanning.">Purification of dorsal root ganglion neurons from rat by immunopanning.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (8), 826-838 (2014).</li><li>Sommer, I., Schachner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+(O1+to+O4)+to+oligodendrocyte+cell+surfaces:+an+immunocytological+study+in+the+central+nervous+system.">Monoclonal antibodies (O1 to O4) to oligodendrocyte cell surfaces: an immunocytological study in the central nervous system.</a> Developmental Biology. 83 (2), 311-327 (1981).</li><li>Sommer, I., Schachner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+that+are+O4+antigen-positive+and+O1+antigen-negative+differentiate+into+O1+antigen-positive+oligodendrocytes.">Cell that are O4 antigen-positive and O1 antigen-negative differentiate into O1 antigen-positive oligodendrocytes.</a> Neuroscience Letters. 29 (2), 183-188 (1982).</li><li>Hanani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Satellite+glial+cells+in+sensory+ganglia:+from+form+to+function.">Satellite glial cells in sensory ganglia: from form to function.</a> Brain Research. Brain Research Reviews. 48 (3), 457-476 (2005).</li><li>Viveiros, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-cell+labeling+coupled+to+direct+analysis+of+extracellular+vesicles+in+the+conditioned+medium+to+study+extracellular+vesicles+secretion+with+minimum+sample+processing+and+particle+loss.">In-cell labeling coupled to direct analysis of extracellular vesicles in the conditioned medium to study extracellular vesicles secretion with minimum sample processing and particle loss.</a> Cells. 11 (3), 351 (2022).</li></ol>

このイムノパニングプロトコルは、DRG初代培養における神経細胞の割合を増加させます。最良の結果を得るには、解剖を適時に行い、DRGから余分な神経を取り除く必要があります。解離ステップは注意深く監視されるべきであり、細胞が不必要なストレスから生じるのを防ぐために1時間を超えてはならない。特にイムノパンニングに関しては、細胞がコーティングされた抗体にアクセスでき...

背側根神経節(DRG)は、末梢組織を神経支配する感覚ニューロンの細胞体を収容します。これらのニューロンを研究することで、痛みや感覚状態の機構的基盤を理解することができます。しかし、DRGはニューロンのみから構成されるのではなく、線維芽細胞、シュワン細胞、マクロファージなどの免疫細胞も含んでいます1。これらの様々な細胞型が存在するにもかかわらず、DRG培養物全体は、文献ではニューロン2,3と呼ばれることが多い。これらの培養は、イメージングまたはフローサイトメトリーによるニューロンの調査に依然として有用であり、染色、細胞サイズ、および/または形態によるニューロンの同定を可能にします。ただし、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)やウェスタンブロッティングなどのアッセイでは、RNAまたはタンパク質収集のために培養物をホモジナイズするため、非神経細胞型の存在が結果を妨げる可能性があります。したがって、DRG培養における神経細胞の割合を増やす必要があります。
イムノパニングは、皮質ニューロン、星状細胞、希突起膠細胞前駆細胞、ミクログリアなど、さまざまな種類の細胞を精製するために使用される技術です。簡単に言えば、特定の細胞に結合することを目的としたペトリ皿に細胞表面マーカーに対する抗体を接着することを含み(図1)、目的の細胞タイプに対してまたは反対のいずれかを選択するために使用できます4、5、6。非神経細胞に対して選択するイムノパニングラット胚性DRGsは、Zuchero7によって以前に記載されている。しかし、マウスDRGに特異的なイムノパンニングプロトコルは見つかっていませんでした。このプロトコルでは、Zucheroプロトコルの基本的なテナントに基づいて構築しますが、代わりにイムノパンニングシーケンスを適応させて成体マウスDRG培養を濃縮します(図2)。これは、培養において確立された感覚ニューロンを研究するための強力なツールです。遺伝的、疾患、および損傷モデルからの成体マウスの使用を可能にするので、それらの感覚ニューロンをより特異に研究することができるので有利である。
このプロトコルは、成体マウスDRG培養におけるニューロンの割合を増加させようとしている読者にとって有利です。ただし、イムノパニングステップを省略することもでき、このプロトコルはDRG培養全体にも使用できます。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 um Syringe filters</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>723-2520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm petri dishes</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well black glass-bottom plates</td>
			<td>Cellvis</td>
			<td>P24-1.5H-N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 um cell strainer</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>15-1070-1(BI)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27+ supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A3582801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td>for 15% BSA cushion, and ICC (heat shock fraction &#8805;98%)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A4161</td>
			<td>for 4% BSA for immunopanning, and SATO for media (essentially globulin free, suitable for cell culture, &#8805;99%)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45 antibody</td>
			<td>BD Pharmigen</td>
			<td>550539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11960069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>LS002007</td>
			<td>for stemxyme solution and panning buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EBSS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E6267</td>
			<td>for DNAse solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper P8 grade</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>09-795K</td>
			<td>for 8% PFA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>35050061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-mouse IgG</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-005-020</td>
			<td>for O4 dish&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-rabbit 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-rabbit IgG</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-005-003</td>
			<td>for PDGFRB dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-rat IgG</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-005-044</td>
			<td>for CD45 dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS -/-</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>14175145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I2643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laminin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>23017-015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetyl cysteine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A8199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Donkey Serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O4 antibody</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Hybridoma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ovomucoid trypsin inhibitor</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>LS003086</td>
			<td>for low ovo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde prills</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>441244</td>
			<td>for 8% PFA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDGFRB antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>AB32570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/ streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-Lysine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8783</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescine dihydrochrloride&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5780</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S374-1</td>
			<td>for 0.2 M PB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate monobasic dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>04269</td>
			<td>for 0.2 M PB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Selenite</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5261</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stemxyme I</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>LS004107</td>
			<td>for tissue dissociation; combination collagenase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transferrin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1147</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>T5941</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>trypan blue</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15250-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;3-Tubulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T2200</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

enrichment of adult mouse dorsal root ganglia neuron cultures by immunopanning

後根神経節(DRG)は、脊髄の背角に隣接する末梢構造であり、感覚ニューロンの細胞体やその他のさまざまな種類の細胞を収容しています。公表されている培養プロトコルでは、線維芽細胞、シュワン細胞、マクロファージ、リンパ球が存在するにもかかわらず、解離したDRG培養全体がニューロンであると言及されることがよくあります。これらのDRG培養物全体は、形態または染色に基づいてニューロンを識別できるイメージングアプリケーションには十分ですが、これらの培養物から収集されたタンパク質またはRNAホモジネートは、主にニューロン起源ではありません。ここでは、培養マウスDRGのイムノパンニング配列について述べる。この方法の目標は、他の細胞タイプを除去することによってニューロンのDRG培養を濃縮することです。イムノパニングとは、細胞培養皿に抗体を接着させて細胞型を除去する方法を指します。これらのディッシュを使用すると、培養中の線維芽細胞、免疫細胞、およびシュワン細胞に対してネガティブに選択し、数を減らすことができます。この方法では、培養中のニューロンの割合を増やすことができます。

次に、DAPIおよびβ3-チューブリンで染色した固定細胞を共焦点ハイコンテントスクリーニングシステムでイメージングしました。適切な市販のソフトウェアを用いて画像を解析し、β3-チューブリンと共標識したDAPI陽性細胞の割合を決定した(図3)。DRG培養物全体は42.36%±6.4%のβ3-チューブリン染色を有すると決定され、イムノパンされたDRG培養物は71.44%±7.43%β3-チューブリ...

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Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning

この論文では、成体マウス後根神経節に対する免疫パンニングプロトコルについて説明します。培養プレートに抗体を接着させることで、非神経細胞をネガティブに選択して除去することができます。このプロトコルを使用して、培養がニューロンに濃縮されていることを示し、操作に対するニューロン応答の詳細な研究を可能にします。

イムノパンニングによる成体マウス背根神経節培養の濃縮

Dorsal root ganglia (DRGs) are peripheral structures adjacent to the dorsal horn of the spinal cord, which house the cell bodies of sensory neurons as ...

このプロトコルにより、成体マウス後根神経節培養におけるニューロンの数を増やすことができます。これは、特定の応答に対する神経細胞の寄与を決定するのに役立つ可能性があります。基本的なDRG培養プロトコルにイムノパンニングステップを追加しました。主な利点は、非神経細胞に対して選択することです。主要なDRG培養に不慣れな場合は、解剖を練習してできるだけ多くのDRGを取得し、できるだけ多くの神経を整えるのが最善です。まず、培養プレートのコーティングに使用したポリD-リジンを吸引し、組織培養水でプレートを3回洗浄します。蓋を傾けて開き、表面を完全に乾かします。各ウェルの底をコーティングするのに十分なラミニンをプレートに塗布し、摂氏37度のインキュベーターに入れます。CD45、PDGFR-β、およびO4の事前に準備したパンニング皿をD-PBSで洗浄します。CD45ディッシュには、5ミリリットルの0.2%BSAと20マイクロリットルのCD45一次抗体を加えます。PDGFR-βディッシュの場合、5ミリリットルの0.2%BSA含有プレートに15.2マイクロリットルのPDGFR-βを加える。O4ディッシュの場合、2ミリリットルのO4ハイブリドーマを3ミリリットルの0.2%BSAに加え、さらに100マイクロリットルの4%BSAを加えて、最終的なBSA濃度が0.2%のままになるようにします次に、安楽死させたマウスに30ミリリットルの0.9%氷冷生理食塩水を灌流します。灌流を確実にするために肝臓の色の変化を観察してください。前足と後足を発泡スチロールのステージに固定し、きれいなかみそりの刃を使用して脊柱を後ろから露出させます。背側脊柱の両側を約半分の深さまで切り込み、柱の背側半分を切除して脊髄を露出させることにより、椎弓切除術を行います。神経をそっと切って脊髄を取り除くか、神経の完全性を維持しながらコードをそっと横に押します。解剖顕微鏡下で、脊髄神経根を使用して、脊柱の両側からすべての後根神経節(DRG)を見つけて除去します。培養液中の神経破片が増えると生存率が低下する可能性があるため、各DRGから神経破片を除去します。氷上の円錐形のチューブに15ミリリットルのHBSSでDRGを集め、それらが底に落ち着くのを待ちます。ピペットを使用して、DRGからHBSSの大部分を吸引し、組織の損失を防ぐために、チューブ内に約100マイクロリットルの液体を残します。1ミリリットルのHBSSで3回洗浄し、5ミリリットルの以前に解凍した作業用STEMxyme溶液を組織に加えます。蓋を透明なフィルムで覆い、チューブを横向きに37°Cの水浴に1時間浮かべます。酵素とのインキュベーション後、1ミリリットルの低オボムコイド阻害剤溶液をチューブに加える。P1000ピペットで細胞を10〜15回穏やかに粉砕し、組織の塊を落ち着かせます。次に、解離した細胞を含む溶液の上部2〜3ミリリットルを新鮮な低オボムコイド溶液に移し、組織が完全に解離し、目に見える塊がなくなるまで繰り返します。チューブを室温で300 x gで10分間遠心分離します。ピペットを用いて上清を除去した後、先に実証したように、細胞ペレットを1ミリリットルのパンニングバッファーに再懸濁し、穏やかにピペットで混合する。70マイクロメートルのセルストレーナーを1ミリリットルのパンニングバッファーで50ミリリットルのコニカルチューブで事前に濡らし、セルストレーナーを通して細胞溶液をろ過します。チューブを1ミリリットルのパンニングバッファーで洗浄し、ストレーナーに通します。セルの層状化のために、2ミリリットルの15%BSAを加え、閉じたチューブの側面を穏やかにコーティングします。ミエリンの破片を除去するには、BSAクッションの上にあるチューブの側面にピペッティングして、細胞懸濁液を一度に1ミリリットルずつ慎重に重ねます。チューブを300 x gで室温で10分間遠心分離し、ゆっくりと加速および減速します。中央のミエリン層は白色物質のフレークを示す。P1000ピペットを使用して、上部の透明な液体、その間のミエリン相、およびBSAを一度に1ミリリットルずつ除去し、ペレットを乱さないように約100マイクロリットルを残します。抗原賦活化のために、5ミリリットルのパンニングバッファーを加え、摂氏37度および10%二酸化炭素インキュベーターでチューブを30〜45分間インキュベートします。次に、インキュベートしたCD45皿をD-PBSで3回洗浄し、最後のすすぎを注ぎます。次に、細胞懸濁液をCD45皿に注ぎます。ディッシュを室温で20分間インキュベートし、細胞が抗体に均等にアクセスできるように10分間隔で穏やかに旋回させます。CD45皿をそっと振って、斜めに支えます。1ミリリットルの細胞懸濁液をディッシュ上で注意深くピペットで入れ、未結合の細胞を回収した。次に、それをD-PBSで3回洗浄したPDGFR-ベータ皿に移し、インキュベートします。前に示したように、結合していない細胞をPDGFR-βディッシュからO4ディッシュに移し、プレートをインキュベートします。インキュベーション後、細胞懸濁液を15ミリリットルのコニカルチューブに移し、300 x gで10分間遠心分離します。細胞を所望の容量に再懸濁し、細胞生存率のためにトリパンブルーで1:1の比率に希釈します。血球計算盤を使用して、中型から大型の細胞を数えます。ラミニンを除去し、プレートをインキュベートする前に細胞を乾燥させることなく、直ちに所望の密度で細胞をプレートします。固定、全体、およびイムノパンされたDRG培養物を、ニューロンについてはβ3-チューブリン、すべての核についてはDAPIで染色しました。DRG培養全体では約42.36%β3-チューブリン染色、イムノパンしたDRG培養物は約71.44%β3-チューブリン染色と判定され、イムノパンニングによる神経細胞の濃縮が有意に増加したことが明らかになりました。組織を慎重に扱うことは非常に重要です。DRGを優しく扱い、余分な神経を整え、組織や培養物を興奮させたり失ったりしないように注意することはすべて、注意することが重要です。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

軸索損傷後の脊髄後根神経節の組織からのクロマチン免疫沈降

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

根切断術後の後根の軸索のライブイメージング

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

培養大人の背根神経節ニューロンの軸索再生の遺伝学的研究

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

後根潜在的記録によりマウスにおける脊髄シナプス前抑制を測定する<em&gt;インビボ</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

根神経節ニューロンと差別化された脂肪由来幹細胞を背：<em&gt;インビトロ</em末梢神経再生を研究するために&gt;共培養モデル

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the ...

Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents

げっ歯類での後根神経節の脊髄および単離の油圧押出

Traditionally, the spinal cord is isolated by laminectomy, i.e. by breaking open the spinal vertebrae one at a time. This is both time consuming and may ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

後根神経節インジェクションおよび後根感覚軸索再生のためのモデルとして傷害をつぶします

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

Dorsal Root Ganglia Isolation and Primary Culture to Study Neurotransmitter Release

伝達物質の放出を勉強する後根神経節細胞の分離と培養

Dorsal root ganglia (DRG) contain cell bodies of sensory neurons. This type of neuron is pseudo-unipolar, with two axons that innervate peripheral ...

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

成体マウス後根神経節の調査の哺乳類の軸索の再生: In Vivoエレクトロポレーション

Electroporation is an essential non-viral gene transfection approach to introduce DNA plasmids or small RNA molecules into cells. A sensory neuron in the ...

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

ドーサルルート神経節マクロファージの迅速な分離

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...