Name: enrichment of adult mouse dorsal root ganglia neuron cultures by immunopanning
Uploaded: 2023-02-24T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning at JoVE.com

Эта работа была поддержана проектным грантом Канадского института исследований в области здравоохранения (FRN-162434) и грантом на открытие от Канадского общества рассеянного склероза (EGID-3761). Авторы выражают благодарность доктору Сану и Институту рака Кросса за обучение и использование системы ImageXpress.

Все эксперименты на животных проводились с одобрения Комитета по уходу за животными и их использованию Университета Альберты (протокол 0000274).
1. Приготовление реагентов
<ol><li>На 1-й день приготовьте следующие реагенты: воду для клеточных культур; поли-D-лизин - при?...

<ol>
	<li>Haberberger, R. V., Barry, C., Dominguez, N., Matusica, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dorsal+root+ganglia.">Human dorsal root ganglia.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 13, 271 (2019).</li><li>Perner, C., Sokol, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+dissection+and+culture+of+murine+dorsal+root+ganglia+neurons+to+study+neuropeptide+release.">Protocol for dissection and culture of murine dorsal root ganglia neurons to study neuropeptide release.</a> STAR Protocols. 2 (1), 100333 (2021).</li><li>Lin, Y. T., Chen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal+root+ganglia+isolation+and+primary+culture+to+study+neurotransmitter+release.">Dorsal root ganglia isolation and primary culture to study neurotransmitter release.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (140), e57569 (2018).</li><li>Foo, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+method+for+the+purification+and+culture+of+rodent+astrocytes.">Development of a method for the purification and culture of rodent astrocytes.</a> Neuron. 71 (5), 799-811 (2011).</li><li>Nolle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enrichment+of+Glial+Cells+From+Human+Post-mortem+Tissue+for+Transcriptome+and+Proteome+Analysis+Using+Immunopanning.">Enrichment of Glial Cells From Human Post-mortem Tissue for Transcriptome and Proteome Analysis Using Immunopanning.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 15, 772011 (2021).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designing+and+troubleshooting+immunopanning+protocols+for+purifying+neural+cells.">Designing and troubleshooting immunopanning protocols for purifying neural cells.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (12), 1342-1347 (2014).</li><li>Zuchero, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+dorsal+root+ganglion+neurons+from+rat+by+immunopanning.">Purification of dorsal root ganglion neurons from rat by immunopanning.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (8), 826-838 (2014).</li><li>Sommer, I., Schachner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+(O1+to+O4)+to+oligodendrocyte+cell+surfaces:+an+immunocytological+study+in+the+central+nervous+system.">Monoclonal antibodies (O1 to O4) to oligodendrocyte cell surfaces: an immunocytological study in the central nervous system.</a> Developmental Biology. 83 (2), 311-327 (1981).</li><li>Sommer, I., Schachner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+that+are+O4+antigen-positive+and+O1+antigen-negative+differentiate+into+O1+antigen-positive+oligodendrocytes.">Cell that are O4 antigen-positive and O1 antigen-negative differentiate into O1 antigen-positive oligodendrocytes.</a> Neuroscience Letters. 29 (2), 183-188 (1982).</li><li>Hanani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Satellite+glial+cells+in+sensory+ganglia:+from+form+to+function.">Satellite glial cells in sensory ganglia: from form to function.</a> Brain Research. Brain Research Reviews. 48 (3), 457-476 (2005).</li><li>Viveiros, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-cell+labeling+coupled+to+direct+analysis+of+extracellular+vesicles+in+the+conditioned+medium+to+study+extracellular+vesicles+secretion+with+minimum+sample+processing+and+particle+loss.">In-cell labeling coupled to direct analysis of extracellular vesicles in the conditioned medium to study extracellular vesicles secretion with minimum sample processing and particle loss.</a> Cells. 11 (3), 351 (2022).</li></ol>

Этот протокол иммунопанирования увеличивает долю нейрональных клеток в первичных культурах DRG. Для достижения наилучшего результата следует своевременно проводить вскрытия, а ДРГ очищать от лишних нервов. Стадия диссоциации должна тщательно контролироваться и не должна превышать 1 ч...

Ганглии дорсальных корешков (DRG) содержат клеточные тела сенсорных нейронов, которые иннервируют периферические ткани. Изучение этих нейронов позволяет нам понять механистические основы боли и сенсорных состояний. Однако DRG состоят не только из нейронов, но также содержат фибробласты, шванновские клетки, макрофаги и другие иммунные клетки1. Несмотря на наличие этих различных типов клеток, целые культуры DRG часто упоминаются в литературе как нейрональные 2,3. Эти культуры по-прежнему полезны для исследования нейронов с помощью визуализации или проточной цитометрии, что позволило бы идентифицировать нейроны путем окрашивания, размера клеток и / или морфологии. Однако для таких анализов, как полимеразная цепная реакция (ПЦР) или вестерн-блоттинг, где культуры гомогенизируются для сбора РНК или белка, присутствие ненейрональных типов клеток может повлиять на результаты. Следовательно, необходимо увеличить долю нейрональных клеток в культурах DRG.
Иммунопаннирование — это метод, используемый для очистки различных типов клеток, включая корковые нейроны, астроциты, клетки-предшественники олигодендроцитов и микроглию. Проще говоря, он включает в себя прилипание антитела против маркера клеточной поверхности к чашке Петри, предназначенного для связывания определенных клеток (рис. 1), и его можно использовать для выбора либо за, либо против интересующих типов клеток 4,5,6. Иммунопанирование эмбриональных DRG крыс для отбора против ненейрональных клеток было описано ранее Zuchero7. Тем не менее, нам не удалось найти протокол иммунопанирования, специфичный для DRG мышей. В этом протоколе мы опираемся на основные арендаторы протокола Zuchero, но вместо этого адаптировали последовательность иммунопаннирования для обогащения культур DRG взрослых мышей (рис. 2). Это мощный инструмент для изучения установленных сенсорных нейронов в культуре. Это выгодно, поскольку позволяет использовать взрослых мышей из генетических моделей, моделей болезней и травм, так что их сенсорные нейроны могут быть изучены с большей специфичностью.
Этот протокол полезен для читателей, желающих увеличить долю нейронов в культурах DRG взрослых мышей. Тем не менее, этапы иммунопанирования также могут быть опущены, и этот протокол также может быть использован для целых культур DRG.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 um Syringe filters</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>723-2520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm petri dishes</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well black glass-bottom plates</td>
			<td>Cellvis</td>
			<td>P24-1.5H-N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 um cell strainer</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>15-1070-1(BI)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27+ supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A3582801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td>for 15% BSA cushion, and ICC (heat shock fraction &#8805;98%)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A4161</td>
			<td>for 4% BSA for immunopanning, and SATO for media (essentially globulin free, suitable for cell culture, &#8805;99%)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45 antibody</td>
			<td>BD Pharmigen</td>
			<td>550539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11960069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>LS002007</td>
			<td>for stemxyme solution and panning buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EBSS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E6267</td>
			<td>for DNAse solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper P8 grade</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>09-795K</td>
			<td>for 8% PFA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>35050061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-mouse IgG</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-005-020</td>
			<td>for O4 dish&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-rabbit 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-rabbit IgG</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-005-003</td>
			<td>for PDGFRB dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat-anti-rat IgG</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>115-005-044</td>
			<td>for CD45 dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS -/-</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>14175145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I2643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laminin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>23017-015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetyl cysteine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A8199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Donkey Serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O4 antibody</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Hybridoma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ovomucoid trypsin inhibitor</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>LS003086</td>
			<td>for low ovo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde prills</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>441244</td>
			<td>for 8% PFA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDGFRB antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>AB32570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/ streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-Lysine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8783</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescine dihydrochrloride&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5780</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S374-1</td>
			<td>for 0.2 M PB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate monobasic dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>04269</td>
			<td>for 0.2 M PB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Selenite</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5261</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stemxyme I</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>LS004107</td>
			<td>for tissue dissociation; combination collagenase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transferrin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1147</td>
			<td>for SATO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>T5941</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>trypan blue</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15250-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;3-Tubulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T2200</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

enrichment of adult mouse dorsal root ganglia neuron cultures by immunopanning

Ганглии дорсальных корешков (DRG) представляют собой периферические структуры, прилегающие к дорсальному рогу спинного мозга, в которых находятся клеточные тела сенсорных нейронов, а также различных других типов клеток. Опубликованные протоколы культивирования часто ссылаются на целые диссоциированные культуры DRG как на нейроны, несмотря на наличие фибробластов, шванновских клеток, макрофагов и лимфоцитов. В то время как эти целые культуры DRG достаточны для приложений визуализации, где нейроны могут быть различимы на основе морфологии или окрашивания, гомогенаты белка или РНК, собранные из этих культур, не являются в первую очередь нейрональными по происхождению. Здесь мы описываем последовательность иммунопанирования для культивируемых DRG мышей. Целью этого метода является обогащение культур DRG для нейронов путем удаления других типов клеток. Иммунопаннирование относится к методу удаления типов клеток путем прилипания антител к чашкам для клеточных культур. Используя эти чашки, мы можем отрицательно отбирать и уменьшать количество фибробластов, иммунных клеток и шванновских клеток в культуре. Этот метод позволяет увеличить процент нейронов в культурах.

Фиксированные клетки, окрашенные DAPI и β3-тубулином, затем визуализировали с помощью конфокальной скрининговой системы с высоким содержанием. Изображения были проанализированы с использованием подходящего коммерческого программного обеспечения для определения процента DAPI-положител...

Watch this Scientific Journal Video about Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning at JoVE.com

Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning

В данной статье описывается протокол иммунопанирования для ганглиев дорсальных корешков взрослых мышей. Прикрепляя антитела к культуральным пластинам, мы можем отрицательно отбирать и удалять ненейрональные клетки. Мы показываем, что культуры обогащены для нейронов с использованием этого протокола, что позволяет углубленно изучить нейронные реакции на манипуляции.

Обогащение культур нейронов ганглиев дорсальных корешков взрослых мышей методом иммунопаннирования

Dorsal root ganglia (DRGs) are peripheral structures adjacent to the dorsal horn of the spinal cord, which house the cell bodies of sensory neurons as ...

Этот протокол позволяет увеличить количество нейронов в культурах ганглиев дорсальных корешков взрослых мышей. Это может помочь определить вклад нейронных клеток в данный ответ. Мы добавили этап иммунопанирования к базовому протоколу культивирования DRG.Основным преимуществом является отбор против ненейрональных клеток. Если вы новичок в первичных культурах DRG, лучше всего практиковать вскрытие, чтобы получить как можно больше DRG и обрезать как можно больше нервов. Для начала аспирируйте поли-D-лизин, используемый для покрытия культуральной пластины, и трижды промойте пластину водой для культивирования тканей.Откройте крышку и дайте поверхности полностью высохнуть. Нанесите достаточное количество ламинина на тарелку, чтобы покрыть дно каждой лунки, и поместите ее в инкубатор при температуре 37 градусов по Цельсию. Предварительно подготовленную посуду для промывки от CD45, PDGFR-бета и O4 вымойте D-PBS.Для чашки CD45 добавьте 5 миллилитров 0,2% BSA и 20 микролитров первичного антитела CD45. Для чашки PDGFR-бета добавьте 15,2 микролитра PDGFR-бета в 5 миллилитров 0,2%-содержащей BSA пластины. Для чашки O4 добавьте 2 миллилитра гибридомы O4 к 3 миллилитрам 0,2% BSA и еще 100 микролитров 4% BSA, чтобы убедиться, что конечная концентрация BSA остается на уровне 0,2%Затем перфузируйте усыпленную мышь 30 миллилитрами 0,9% ледяного физиологического раствора.Наблюдайте за изменением цвета печени, чтобы обеспечить перфузию. Прижмите переднюю и заднюю лапы к стадии пенополистирола и используйте чистое лезвие бритвы, чтобы обнажить позвоночник сзади. Выполните ламинэктомию, сделав разрезы примерно на полпути по обе стороны от дорсального позвоночника, удалив дорсальную половину столба, чтобы обнажить спинной мозг.Либо аккуратно перережьте нервы и удалите спинной мозг, либо аккуратно отодвиньте спинной мозг в сторону, сохраняя целостность нерва. Под микроскопом для вскрытия используйте корешки спинномозговых нервов, чтобы найти и удалить все ганглии дорсальных корешков, или DRG, с обеих сторон позвоночника. Обрезайте нервный мусор из каждого DRG по мере его удаления, так как большее количество нервного мусора в культуре может привести к плохой выживаемости.Соберите DRG в 15 миллилитров HBSS в коническую трубку на льду и дайте им осесть на дно. С помощью пипетки аспирируйте большую часть HBSS из DRG и оставьте примерно 100 микролитров жидкости в пробирке, чтобы избежать потери ткани. Трижды промыть 1 миллилитром HBSS и добавить в салфетку 5 миллилитров предварительно размороженного рабочего раствора STEMxyme.Накройте крышку прозрачной пленкой и положите трубку на бок на водяной бане при температуре 37 градусов Цельсия в течение одного часа. После инкубации с ферментом добавьте в пробирку 1 миллилитр раствора ингибитора с низким содержанием овомукоидов. Аккуратно тритуируйте клетки пипеткой P1000 от 10 до 15 раз и дайте кусочкам ткани осесть.Затем переведите верхние 2-3 миллилитра раствора, содержащего диссоциированные клетки, в свежий низкоовомукоидный раствор и повторяйте до тех пор, пока ткань полностью не диссоциирует и не останется видимых кусков. Центрифугируйте пробирку в течение 10 минут при 300 x g при комнатной температуре. После удаления надосадочной жидкости с помощью пипетки, как показано ранее, ресуспендируйте гранулу клетки в 1 миллилитре буфера для промывки и аккуратно перемешайте пипеткой.Предварительно смочите 70-микрометровый сетчатый фильтр с 1 миллилитром буфера для промывки над конической трубкой объемом 50 миллилитров, а затем отфильтруйте раствор ячейки через сетчатое фильтро. Промойте тюбик 1 миллилитром буфера для промывки и пропустите его через ситечко. Для наслоения ячеек добавьте 2 миллилитра 15% BSA и аккуратно покройте стенки закрытой пробирки.Чтобы удалить обломки миелина, аккуратно наложите клеточную суспензию по одному миллилитру за раз, пипеткой прижимая к стенке трубки поверх подушки BSA. Центрифугируйте пробирку при 300 x g в течение 10 минут при комнатной температуре, с медленным ускорением и замедлением. Средний миелиновый слой показывает чешуйки белого материала.Используя пипетку P1000, удалите прозрачную жидкость сверху, миелиновую фазу между ними и BSA, по одному миллилитру за раз, оставив примерно 100 микролитров, чтобы не нарушить гранулу. Для извлечения антигена добавьте 5 миллилитров буфера для промывки и инкубируйте пробирку в инкубаторе при температуре 37 градусов Цельсия и 10% углекислого газа в течение 30-45 минут. Затем трижды вымойте инкубированную посуду CD45 с помощью D-PBS и слейте последнее полоскание.Затем вылейте клеточную суспензию в чашку CD45. Инкубируйте чашку в течение 20 минут при комнатной температуре, осторожно помешивая с 10-минутными интервалами, чтобы клетки получили равный доступ к антителам. Осторожно встряхните тарелку CD45 и подперите ее под углом.Осторожно пипеткой нанесите 1 миллилитр клеточной суспензии на блюдо, чтобы собрать несвязанные клетки. Затем переложите его в чашку PDGFR-beta, предварительно трижды промытую D-PBS, и инкубируйте. Перенесите несвязанные клетки из чашки PDGFR-бета в чашку O4, как показано ранее, и инкубируйте тарелку.После инкубации переложите клеточную суспензию в коническую пробирку объемом 15 миллилитров и центрифугу при 300 x g в течение 10 минут. Ресуспендируйте клетки в желаемом объеме и разбавьте до соотношения 1:1 трипановым синим для жизнеспособности клеток. С помощью гемоцитометра подсчитайте средние и крупные клетки.Удалите ламинин и сразу же нанесите ячейки на нужную плотность, не давая им высохнуть перед инкубацией пластины. Фиксированные, цельные и иммунопанированные культуры DRG окрашивали бета3-тубулином для нейронов и DAPI для всех ядер. Было установлено, что целые культуры DRG имеют приблизительно 42,36% окрашивания бета3-тубулина, а иммунопанированные культуры DRG имеют приблизительно 71,44% окрашивание бета3-тубулина, что свидетельствует о значительном увеличении обогащения нейронов иммунопаннингом.Очень важно бережно относиться к ткани. Очень важно помнить о бережном обращении с DRG, обрезке лишних нервов и заботе о том, чтобы не взволноваться и не потерять ткань и культуру.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Хроматин Иммунопреципитация из ткани спинного Ganglia Корневая следующие аксональное повреждение

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

Живая съемка Спинной Аксоны Корневая после ризотомия

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

Генетическое изучение регенерации аксонов с искусственного взрослых нейронов ганглиев

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Измерение спинного пресинаптического торможения у мышей, спинных потенциального записи<em&gt; В Vivo</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Спинных нейронов и дифференцированных жировой стволовых клеток, полученных:<em&gt; In Vitro</em&gt; Co-культура моделью для изучения периферических нервов Регенерация

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the ...

Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents

Гидравлический экструзионный спинного мозга и выделение спинальных ганглиях в Грызуны

Traditionally, the spinal cord is isolated by laminectomy, i.e. by breaking open the spinal vertebrae one at a time. This is both time consuming and may ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

Спинальный ганглий Injection и дорсальных корешков размозжение как модель для регенерации Сенсорное Axon

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

Dorsal Root Ganglia Isolation and Primary Culture to Study Neurotransmitter Release

Спинной корень ганглиев изоляции и основной культуры для изучения нейромедиатора релиз

Dorsal root ganglia (DRG) contain cell bodies of sensory neurons. This type of neuron is pseudo-unipolar, with two axons that innervate peripheral ...

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion

Следственный млекопитающих Axon регенерации: В Vivo электропорации взрослых мыши Спинной корень ганглия

Electroporation is an essential non-viral gene transfection approach to introduce DNA plasmids or small RNA molecules into cells. A sensory neuron in the ...

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

Быстрая изоляция дорсал Корень Ganglion Макрофаги

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...