Name: spontaneous murine model of anaplastic thyroid cancer
Uploaded: 2023-02-03T13:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spontaneous Murine Model of Anaplastic Thyroid Cancer at JoVE.com

Эта работа была поддержана Национальной программой развития ключевых исследований Китая (2021YFA1301203); Национальный фонд естественных наук Китая (82103031, 82103918, 81973408, 82272933); Инкубационный проект клинических исследований, Западно-Китайская больница, Сычуаньский университет (22HXFH019); Проект международного сотрудничества Муниципального научно-технического бюро Чэнду (2020-GH02-00017-HZ); Фонд естественных наук провинции Сычуань, 2022NSFSC1314; «Проект 1.3.5 по дисциплинам передового опыта, Западно-Китайская больница, Сычуаньский университет» (ZYJC18035, ZYJC18025, ZYYC20003, ZYJC18003); и Сычуаньская научно-техническая программа (2023YFS0098).

Описанные здесь процедуры на животных были выполнены с одобрения Комитета по этике животных Западно-Китайской больницы, Сычуаньского университета, Чэнду, Сычуань, Китай.
1. Индукция мышей TBP
<ol><li>Определите генотип мышей<ol><li>Примерно через 3 недели отделите само...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2019.">Cancer statistics, 2019.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 69 (1), 7-34 (2019).</li><li>Parenti, R., Salvatorelli, L., Magro, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaplastic+thyroid+carcinoma:+Current+treatments+and+potential+new+therapeutic+options+with+emphasis+on+TfR1/CD71.">Anaplastic thyroid carcinoma: Current treatments and potential new therapeutic options with emphasis on TfR1/CD71.</a> International Journal of Endocrinology. 2014, 685396 (2014).</li><li>Baldini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+effects+of+the+urokinase+plasminogen+activator+inhibitor+WX-340+on+anaplastic+thyroid+cancer+cell+lines.">In vitro and in vivo effects of the urokinase plasminogen activator inhibitor WX-340 on anaplastic thyroid cancer cell lines.</a> International Journal of Molecular Sciences. 23 (7), 3724 (2022).</li><li>Haugen, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=American+Thyroid+Association+Management+guidelines+for+adult+patients+with+thyroid+nodules+and+differentiated+thyroid+cancer:+what+is+new+and+what+has+changed.">American Thyroid Association Management guidelines for adult patients with thyroid nodules and differentiated thyroid cancer: what is new and what has changed.</a> Cancer. 123 (3), 372-381 (2015).</li><li>O'Neill, J. P., Shaha, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaplastic+thyroid+cancer.">Anaplastic thyroid cancer.</a> Oral Oncology. 49 (7), 702-706 (2013).</li><li>Simoes-Pereira, J., Capitao, R., Limbert, E., Leite, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaplastic+thyroid+cancer:+Clinical+picture+of+the+last+two+decades+at+a+single+oncology+referral+centre+and+novel+therapeutic+options.">Anaplastic thyroid cancer: Clinical picture of the last two decades at a single oncology referral centre and novel therapeutic options.</a> Cancers. 11 (8), 1188 (2019).</li><li>Fagin, J. A., Wells, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biologic+and+clinical+perspectives+on+thyroid+cancer.">Biologic and clinical perspectives on thyroid cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 375 (11), 1054-1067 (2016).</li><li>Neff, R. L., Farrar, W. B., Kloos, R. T., Burman, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaplastic+thyroid+cancer.">Anaplastic thyroid cancer.</a> Endocrinology and Metabolism Clinics of North America. 37 (2), 525-538 (2008).</li><li>Lareau, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Droplet-based+combinatorial+indexing+for+massive-scale+single-cell+chromatin+accessibility.">Droplet-based combinatorial indexing for massive-scale single-cell chromatin accessibility.</a> Nature Biotechnology. 37 (8), 916-924 (2019).</li><li>Guo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+methylome+landscapes+of+mouse+embryonic+stem+cells+and+early+embryos+analyzed+using+reduced+representation+bisulfite+sequencing.">Single-cell methylome landscapes of mouse embryonic stem cells and early embryos analyzed using reduced representation bisulfite sequencing.</a> Genome Research. 23 (12), 2126-2135 (2013).</li><li>Mooijman, D., Dey, S. S., Boisset, J. -. C., Crosetto, N., van Oudenaarden, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+5hmC+sequencing+reveals+chromosome-wide+cell-to-cell+variability+and+enables+lineage+reconstruction.">Single-cell 5hmC sequencing reveals chromosome-wide cell-to-cell variability and enables lineage reconstruction.</a> Nature Biotechnology. 34 (8), 852-856 (2016).</li><li>Smallridge, R. C., Marlow, L. A., Copland, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaplastic+thyroid+cancer:+molecular+pathogenesis+and+emerging+therapies.">Anaplastic thyroid cancer: molecular pathogenesis and emerging therapies.</a> Endocrine-Related Cancer. 16 (1), 17-44 (2009).</li><li>Charles, R. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+genetically+engineered+mouse+models+of+papillary+and+anaplastic+thyroid+cancers:+enabling+translational+biology+for+patient+care+improvement.">Overview of genetically engineered mouse models of papillary and anaplastic thyroid cancers: enabling translational biology for patient care improvement.</a> Current Protocols in Pharmacology. 69, 1-14 (2015).</li><li>Tuttle, R. M., Haugen, B., Perrier, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Updated+American+joint+committee+on+cancer/tumor-nodemetastasis+staging+system+for+differentiated+and+anaplastic+thyroid+cancer+(8th+Edition):+What+changed+and+why.">Updated American joint committee on cancer/tumor-nodemetastasis staging system for differentiated and anaplastic thyroid cancer (8th Edition): What changed and why.</a> Thyroid. 27 (6), 751-756 (2017).</li><li>McFadden, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p53+constrains+progression+to+anaplastic+thyroid+carcinoma+in+a+Braf-mutant+mouse+model+of+papillary+thyroid+cancer.">p53 constrains progression to anaplastic thyroid carcinoma in a Braf-mutant mouse model of papillary thyroid cancer.</a> Protocols of the National Academy of Sciences. 111 (16), 1600-1609 (2014).</li><li>Gunda, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinations+of+BRAF+inhibitor+and+anti-PD-1/PD-L1+antibody+improve+survival+and+tumour+immunity+in+an+immunocompetent+model+of+orthotopic+murine+anaplastic+thyroid+cancer.">Combinations of BRAF inhibitor and anti-PD-1/PD-L1 antibody improve survival and tumour immunity in an immunocompetent model of orthotopic murine anaplastic thyroid cancer.</a> British Journal of Cancer. 119 (10), 1223-1232 (2018).</li><li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+ultrasonography+for+the+analysis+of+orthotopic+ATC+tumors+in+a+genetically+engineered+mouse+model.">High-resolution ultrasonography for the analysis of orthotopic ATC tumors in a genetically engineered mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (188), e64615 (2022).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+recurrent+altered+genes+in+Chinese+patients+with+anaplastic+thyroid+cancer.">Novel recurrent altered genes in Chinese patients with anaplastic thyroid cancer.</a> The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 106 (4), 988-998 (2021).</li><li>Luo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pan-cancer+single-cell+analysis+reveals+the+heterogeneity+and+plasticity+of+cancer-associated+fibroblasts+in+the+tumor+microenvironment.">Pan-cancer single-cell analysis reveals the heterogeneity and plasticity of cancer-associated fibroblasts in the tumor microenvironment.</a> Nature Communications. 13 (1), 6619 (2022).</li><li>Luo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+dedifferentiation+of+thyroid+cancer+by+integrated+analysis.">Characterizing dedifferentiation of thyroid cancer by integrated analysis.</a> Science Advances. 7 (31), (2021).</li><li>Knostman, K. A. B., Jhiang, S. M., Capen, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+alterations+in+thyroid+cancer:+the+role+of+mouse+models.">Genetic alterations in thyroid cancer: the role of mouse models.</a> Veterinary Pathology. 44 (1), 1-14 (2007).</li><li>Kim, C. S., Zhu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+from+mouse+models+of+thyroid+cancer.">Lessons from mouse models of thyroid cancer.</a> Thyroid. 19 (12), 1317-1331 (2009).</li><li>Champa, D., Di Cristofano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+anaplastic+thyroid+carcinoma+in+the+mouse.">Modeling anaplastic thyroid carcinoma in the mouse.</a> Hormones and Cancer. 6 (1), 37-44 (2015).</li><li>Cabanillas, M. E., Ryder, M., Jimenez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+therapy+for+advanced+thyroid+cancer:+kinase+inhibitors+and+beyond.">Targeted therapy for advanced thyroid cancer: kinase inhibitors and beyond.</a> Endocrine Reviews. 40 (6), 1573-1604 (2019).</li><li>Ljubas, J., Ovesen, T., Rusan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+of+phase+II+targeted+therapy+clinical+trials+in+anaplastic+thyroid+cancer.">A systematic review of phase II targeted therapy clinical trials in anaplastic thyroid cancer.</a> Cancers. 11 (7), 943 (2019).</li><li>Huang, N. -. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+of+the+appropriate+treatment+strategies+in+anaplastic+thyroid+cancer:+a+population-based+study+of+735+patients.">An update of the appropriate treatment strategies in anaplastic thyroid cancer: a population-based study of 735 patients.</a> International Journal of Endocrinology. 2019, 8428547 (2019).</li><li>Subbiah, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dabrafenib+and+trametinib+treatment+in+patients+with+locally+advanced+or+metastatic+BRAF+V600-mutant+anaplastic+thyroid+cancer.">Dabrafenib and trametinib treatment in patients with locally advanced or metastatic BRAF V600-mutant anaplastic thyroid cancer.</a> Journal of Clinical Oncology. 36 (1), 7-13 (2018).</li><li>Baldini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+selective+inhibitors+of+Aurora+kinases+on+anaplastic+thyroid+carcinoma+cell+lines.">Effects of selective inhibitors of Aurora kinases on anaplastic thyroid carcinoma cell lines.</a> Endocrine-Related Cancer. 21 (5), 797-811 (2014).</li></ol>

Критические шаги в протоколе вскрытия опухоли щитовидной железы Во время рассечения нужно правильно понимать анатомическое расположение щитовидной железы. Щитовидная железа представляет собой железу в форме бабочки, расположенную на дорсальной стороне подчелюстной желе?...

Рак щитовидной железы является одним из наиболее распространенных эндокринных злокачественных новообразований1, происходящих из эпителия щитовидной железы. В последние годы заболеваемость раком щитовидной железы быстро возросла во всем мире2. Рак щитовидной железы можно разделить на отдельные типы в зависимости от степени дифференцировки опухолевых клеток. На основании клинического поведения и гистологии карциномы щитовидной железы делятся на хорошо дифференцированные карциномы, включая папиллярную карциному щитовидной железы (ПТК) и фолликулярную карциному щитовидной железы (ФТК), низкодифференцированную карциному (ПДТК) и недифференцированную или анапластическую карциному щитовидной железы (АТХ)3. В отличие от ПТК, который является распространенным типом с легким поведением и лучшим прогнозом4, АТХ является редким и очень агрессивным злокачественным новообразованием, на долю которого приходится от 2% до 3% всех опухолей щитовидной железы5. Хотя АТХ встречается редко, он является причиной примерно 50% смертей, связанных с раком щитовидной железы, с удручающей выживаемостью (6-8 месяцев)6,7. Более 50% случаев АТХ диагностируются как метастазы в легкие8. Помимо агрессивного характера АТХ, в клинике разработано ограниченное эффективное лечение. Таким образом, пациенты с АТХ имеют мрачный прогноз 9,10,11. Это говорит о том, что срочно необходимы дальнейшие углубленные исследования молекулярных механизмов, лежащих в основе разработки АТХ и лечения.
Онкогенез АТХ является динамическим дедифференцированным процессом. Сложность сбора образцов опухолей человека на каждом этапе клинических исследований препятствовала пониманию механизма развития от хорошо дифференцированных до недифференцированных карцином. Напротив, использование мышиных моделей АТХ (mATC) благоприятствует сбору образцов mATC во всем курсе онкогенеза. Таким образом, мы можем лучше понять механизмы образования опухоли, проанализировав динамический дедифференцированный процесс. Кроме того, гетерогенность клинических образцов АТХ также способствовала трудностям в понимании молекулярного механизма. Тем не менее, мыши имели одинаковый генетический фон и содержались в одинаковой среде обитания, обеспечивая консистенцию каждой опухоли. Это облегчает изучение обобщенной роли развития УВД12,13,14. Кроме того, mATC представляет собой модель опухоли in situ, которая может восстанавливать влияние анатомического расположения и тканеспецифического микроокружения. Таким образом, по сравнению с широко используемыми иммунодефицитными мышами, mATC представляет собой спонтанную мышиную модель с интактной иммунной системой и иммунным микроокружением.
Поэтому мы построили условно-индуцированный mATC со штаммом C57BL/6, который представляет собой мышиную модель, способную воспроизводить патологические особенности дедифференцированной карциномы щитовидной железы. Основываясь на этой модели, мы дали краткий обзор молекулярной основы, идей построения, патологических особенностей и приложений mATC. Кроме того, мы наблюдали и сообщали о росте опухоли, времени выживания, метастазировании и патологических особенностях mATC. Мы считаем, что это будет информационный обзор, который поможет другим исследователям легче использовать эту модель.
Мы построили условную индуцируемую модель mATC, о которой впервые сообщил McFadden15; Первоначально мы сконструировали мышей: TPO-cre/ERT2, Braf flox/wt и Trp53flox/wt. В частности, мыши TPO-cre / ERT2 включали промотор пероксидазы щитовидной железы человека (TPO) (специфический для щитовидной железы промотор), стимулирующий экспрессию гена слияния cre-ERT2 (рекомбиназа cre, слитая с лиганд-связывающим доменом рецептора эстрогена человека). Cre-ERT2 обычно ограничивается цитоплазмой и попадает в ядро только при воздействии тамоксифена, который побуждает cre проявлять активность рекомбинантного фермента. Когда мышей скрещивают с мышами, несущими loxP-фланкированные последовательности, после индукции тамоксифена кре-опосредованная рекомбинация удаляет флоксированные последовательности в клетках щитовидной железы для достижения цели нокаута или выбивания определенных генов.
Кроме того, мыши Braf flox / wt являются аллелем человеческого Braf, основанного на системе cre-loxP. Мышиный транскрипт Brafflox/wt кодируется эндогенными экзонами 1-14 и локсP-фланговыми человеческими экзонами 15-18. После кре-опосредованного иссечения флоксированных областей мутантный экзон 15 (модифицированный аминокислотной заменой V600E, связанной с конститутивно активным BrafV600E при раке человека) и эндогенные экзоны 16-18 используются для генерации транскриптов. Кроме того, мыши Trp53 flox / wt являются нокаутными аллелями человеческого Trp53 и имеют сайты loxP, фланкирующие экзоны 2-10 Trp53. При скрещивании с мышами с кре-рекомбиназой кре-опосредованная рекомбинация удаляет флоксированную последовательность, чтобы нокаутировать Trp53. Затем мышей TPO-cre/ERT2, Braf flox/w и Trp53flox/wt скрещивали для получения туберкулеза (TPO-cre/ERT2; Brafflox/wt) мыши и TBP (TPO-cre/ERT2; Браф-флокс/вес; Trp53flox/вес) мышей, которые можно было бы использовать для генерации PTC и ATC. Примерно через 8 недель мышей индуцировали внутрибрюшинным (в/) введением 150 мг/кг тамоксифена, растворенного в кукурузном масле, в течение двух введений. Рост опухоли можно было контролировать с помощью высокочастотного ультразвукового исследования (первый момент времени УЗИ был зарегистрирован как день 0). Первичное УЗИ проводилось через 40 дней после введения тамоксифена.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100x&#160;Citrate antigen retrieval solution (PH 6.0)</td>
			<td>MXB</td>
			<td>Cat# MVS-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50x EDTA antigen retrieval solution(pH 9.5)</td>
			<td>ZSGB-GIO</td>
			<td>Cat# ZLI-9071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brafflox/wt mice</td>
			<td>Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caspase-3</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>Cat# AC033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD8</td>
			<td>Cell Signaling Technology</td>
			<td>Cat# 98941; RRID:AB_2756376</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD206</td>
			<td>Cell Signaling Technology</td>
			<td>Cat# 24595; RRID:AB_2892682</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber for anesthesia induction</td>
			<td>RWDlifescience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enhanced DAB chromogenic kit</td>
			<td>MXB</td>
			<td>Cat# DAB-2031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin staining solution</td>
			<td>ZSGB-GIO</td>
			<td>Cat# ZLI-9613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F4/80</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# 100790; RRID:AB_10675322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foxp3</td>
			<td>Cell Signaling Technology</td>
			<td>Cat# 12653; RRID:AB_2797979</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fully enclosed tissue dehydrator</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>ASP300S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin staining solution</td>
			<td>ZSGB-GIO</td>
			<td>Cat# ZLI-9610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HistoCore Arcadia fully automatic tissue embedding machine</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ki67</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>Cat# AF1738</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Slicer</td>
			<td>RWDlifescience</td>
			<td>&#160;Minux S700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPlink detection kits (Biotin-Streptavidin HRP Detection Systems)</td>
			<td>ZSGB-GIO</td>
			<td>Cat# SP-9001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TPO-cre/ERT2 mice</td>
			<td>Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trp53flox/wt mice</td>
			<td>Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cell crusher</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasound Equipment Co., Ltd</td>
			<td>JY92-IIN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>Keppler</td>
			<td>KL-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound system</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo 3100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spontaneous murine model of anaplastic thyroid cancer

Анапластический рак щитовидной железы (АТХ) является редким, но смертельным злокачественным новообразованием с мрачным прогнозом. Существует острая необходимость в более глубоких исследованиях канцерогенеза и развития АТХ, а также терапевтических методов, поскольку стандартные методы лечения у пациентов с АТХ практически исчерпаны. Однако низкая распространенность препятствовала тщательным клиническим исследованиям и сбору образцов тканей, поэтому в создании эффективных методов лечения был достигнут незначительный прогресс. Мы использовали генную инженерию для создания условно-индуцируемой мышиной модели ATC (mATC) на фоне C57BL/6. Мышиная модель ATC была генотипирована с помощью TPO-cre/ERT2; БрафCA/вес; Trp53 ex2-10/ex2-10 и индуцируется внутрибрюшинным введением тамоксифена. С помощью мышиной модели мы исследовали динамику опухоли (размер опухоли варьировал от 12,4 мм 2 до 32,5 мм2 после 4 месяцев индукции), выживаемость (средний период выживания составил 130 дней) и метастазирование (метастазы в легкие произошли у 91,6% мышей) кривые и патологические особенности (характеризуются иммуногистохимическим окрашиванием Cd8, Foxp3, F4/80, Cd206, Ki67 и Caspase-3). Результаты показали, что спонтанная mATC обладает очень похожей на опухолевую динамику и иммунологическое микроокружение с опухолями ATC человека. В заключение, при высоком сходстве патофизиологических признаков и унифицированных генотипов, модель mATC в некоторой степени устранила нехватку клинической ткани ATC и гетерогенность образца. Таким образом, это облегчило бы механизм и трансляционные исследования АТХ и обеспечило бы подход к изучению лечебного потенциала низкомолекулярных препаратов и иммунотерапевтических агентов для АТХ.

Мы индуцировали mATC для исследования роста опухоли, времени выживания мышей и патологических характеристик. После индукции мышей немедленно приносили в жертву, а образцы (щитовидная железа, легкие и печень) собирали после обнаружения одного из следующих состояний: 1) респираторный дист?...

Watch this Scientific Journal Video about Spontaneous Murine Model of Anaplastic Thyroid Cancer at JoVE.com

Spontaneous Murine Model of Anaplastic Thyroid Cancer

Здесь мы представляем стандартный конвейер для получения опухолей ATC у мышей с помощью спонтанных генетически модифицированных моделей мышей. Далее мы представляем опухолевую динамику и патологическую информацию о первичных и метастазирующих поражениях. Эта модель поможет исследователям понять онкогенез и облегчит открытие лекарств.

Спонтанная мышиная модель анапластического рака щитовидной железы

Anaplastic thyroid cancer (ATC) is a rare but lethal malignancy with a dismal prognosis. There is an urgent need for more in-depth research on the ...

Мы представляем стандартный конвейер для получения опухолей MATC и представляем динамику опухоли и патологическую информацию. Этот модуль поможет исследователям понять онкогенез опухоли и облегчит открытие лекарств. MATC облегчает сбор образцов MATC во всем ходе онкогенеза опухоли, и каждый из них представляет собой спонтанную зеркальную модель с полной иммунной системой и иммунным микроокружением.MATC может быть использован для изучения влияния определенных функций генов на ATC, понимания механизмов прогрессирования опухоли щитовидной железы и, в конечном итоге, улучшения прогноза пациентов с ATC. Для начала взвесьте тамоксифен и растворите его в 15 миллилитрах кукурузного масла с помощью ультразвука в концентрации 20 миллиграмм на миллилитр. Затем храните его в коричневом контейнере при температуре четыре градуса Цельсия.Примерно через восемь недель взвесьте мышей с помощью электронных весов, а затем дважды введите тамоксифен внутрибрюшинно с интервалом в одну неделю. После приготовления инструментов для вскрытия и фиксирующего раствора мышиной ткани наполните чистую 10-сантиметровую посуду примерно 10 миллилитрами стерильного PBS для временного хранения тканей и для смывания крови с поверхности ткани. Для извлечения щитовидной железы поместите усыпленную мышь на доску для препарирования.После дезинфекции области шеи используйте стерильные ножницы и щипцы. Сделайте небольшой разрез над центром ключицы и продолжайте по средней линии до рта. Найдите подчелюстную железу и удалите ее, чтобы обнажить анатомическое расположение щитовидной железы, которая находится рядом со щитовидным хрящом и трахеей.После того, как щитовидная железа будет обнаружена, аккуратно рассекают остальную область шеи с помощью стерильных ножниц и помещают ее в заранее подготовленную посуду, содержащую стерильный PBS. Удалите кровь с поверхности ткани щитовидной железы, а стерильными ножницами аккуратно отрежьте трахею. Затем положите ткань щитовидной железы на стерильную ткань и измерьте размер левой и правой долей щитовидной железы с помощью штангенциркуля.С помощью стерильного лезвия разделите левую и правую доли щитовидной железы на две части. Поместите одну часть в два миллилитра 4%-ного раствора параформальдегида для фиксации, а другую - в жидкий азот для консервации. Для извлечения легких и печени ущипните чуть выше пениса мыши после дезинфекции области.Затем делают небольшой надрез и разрезают по средней линии живота до подключичной кости. Обнажить брюшную полость. Найдя печень в верхней части живота, осторожно извлеките ее и поместите в новую посуду, содержащую стерильный PBS.Грубо наблюдают и подсчитывают метастазы в легких и печени с последующим получением снимка. Стерильным лезвием разделите ткани легких и печени на две части. Как было показано ранее, зафиксируйте одну часть, а другую оставьте в жидком азоте.Кривая роста опухоли была построена для наблюдения за динамическим изменением размера опухоли. Опухоли росли медленно на ранней стадии и стали значительно быстрее на поздней стадии. С другой стороны, кривая выживаемости была построена на основе зарегистрированного времени выживания.Медиана выживаемости MATC составила 130 дней. Кроме того, примерно 92% метастазов в легких было обнаружено в большинстве MATC. При ПЭ-окрашивании первичных опухолей и метастатических тканей легких MATC индуцируемые ткани в течение одного месяца показали неполные затвердевшие черты и сосуществование фолликулярных структур и злокачественных клеток, тогда как фолликулярные структуры щитовидной железы исчезли, и опухоль полностью затвердела после двухмесячной индукции.Первичная опухоль показала, что опухолевые клетки были морфологически разнообразными, с плеоморфными гигантскими клетками и веретенообразными клетками. Кроме того, ОФ-окрашивание метастатических тканей легких показало, что нормальная легочная ткань представляет собой ретикулярную структуру с четкими альвеолярными структурами и воздушными пространствами. Тем не менее, метастазы в легких показали потерю нормальной ретикулярной структуры, утолщение воздушной полости и паренхиму легких.Между тем, иммуногистохимическое окрашивание опухоли MATC различными антителами показало высокую пролиферацию опухолевых клеток, инфильтрацию лимфоцитов, обширную инфильтрацию миелоидных клеток, что соответствовало клиническим образцам. Во время рассечения нужно правильно понимать анатомическое расположение щитовидной железы. Щитовидная железа расположена рядом с щитовидным хрящом и трахеей.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Мышиные Экспериментальная модель самобытного развития опухолевого и перитонеальный метастаз<em&gt; с помощью</em&gt; Ортотопическая Заражение клеток карциномы яичников

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Хирургические процедуры и методология для модели доклинической мужи<em&gt; Де Ново</em&gt; Метастазы рака молочной железы

A rate-limiting aspect of transgenic mouse models of mammary adenocarcinoma is that primary tumor burden in mammary tissue typically defines study ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

Опухоль Модель и опухолевой мышиной цистопластики Система обнаружения

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Мышь Модель усталости, индуцированный Peripheral Облучение

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

В естественных условиях мышиных седалищного нерва модель рассасывании вторжения

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

Биолюминесцентных и флуоресцентный ортотопическая сингенных мышиных модель андроген зависимых и кастрация стойкие рака простаты

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

Пациент полученных ортотопические ксенотрансплантат Модели для человека Уротелиальной карциномы клеток и колоректального рака опухоли роста и спонтанного метастаза

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Performing Data Mining And Integrative Analysis Of Biomarker in Breast Cancer Using Multiple Publicly Accessible Databases

Выполнение интеллектуального анализа данных и интегративный анализ биомаркеров в раке молочной железы с использованием нескольких публично доступных баз данных

In recent years, emerging databases were designed to lower the barriers for approaching the intricate cancer genomic datasets, thereby, facilitating ...

Murine Model of Metastatic Liver Tumors in the Setting of Ischemia Reperfusion Injury

Murine Модель метастатических опухолей печени в настройке Ишемия Реперфузия Травмы

Liver ischemia and reperfusion (I/R) injury, a common clinical challenge, remains an inevitable pathophysiological process that has been shown to induce ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

Модель ксенотрансплантата мышиной оммая для изучения прямой таргетной терапии лептоменингеальной болезни

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...